Дослiдження антагонiстичних властивостей сучасних пробiотикiв
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
стi описуСФться рiвняннями:
(2.4.13)
(2.4.14)
РЖз збiльшенням кiлькостi дослiдiв, точнiсть результатiв зростаСФ. Коли вiдоме iстинне значення, вiдносна похибка середнього результату (у %) з надiйнiстю знаходять як вiдношення:
(: а)100% (2.4.15)
Вiдносна похибка середнього результату (у %) може бути виражена i за середньоарифметичним значенням з цiСФю ж надiйнiстю :
( )100% (2.4.16)
Виявлення систематичних похибок проводять шляхом порiвняння рiзницi мiж середнiм значенням величини i СЧСЧ iстинним значенням а з точнiстю метода . Якщо -а , то маСФ мiiе систематична похибка.
Роздiл 3. Експериментальна частина
3.1 Культурально-бiохiмiчнi властивостi штамiв продуцентiв
3.1.1 Штам E.coli M 17
Виробничий штам E.coli M17(О2: К1: Н6) вiдноситься до виду Escherichia coli, роду Escherichia, трибу Eschericiеaе, родини Enterobacteriaceae. Штам E.coli M17 являСФ собою рухомi грамнегативнi короткi палички з закругленням на кiнцях, довжиною вiд 1,5мкм до 4,0 мкм.
Штам E.coli M17- факультативний аероб, на МПА через (153) год утворюСФ круглi випуклi S-колонiСЧ 0,3-0,5 см в дiаметрi з рiвними краями, або сухi плоскi R-колонiСЧ з нерiвними краями. На середовищi Ендо утворюСФ червонi колонiСЧ з металевим блиском. На МПБ через (31) год вiдбуваСФться рiвномiрне помутнiння середовища i утворення осаду, або плiвки чи пристiночного кiльця. На кровяному агарi може давати повний гемолiз.
Штам розщеплюСФ з утворенням кислоти i газу глюкозу, лактозу, маннiт, мальтозу, сахарозу; желатин не розжируСФ; утворюСФ iндол.
Оптимальна температура росту штаму E.coli M 17 (371)С.
Штам E.coli M17 проявляв антагонiстичну дiю по вiдношеню до патогенних та УПМ, якi використовуються при контролi пробiотикiв.
Показник антагонiстичноСЧ активностi виробничого штаму E.coli M17 по вiдношенню до тест-штамiв шигел Флекснера повинен бути не нижче 60%, а по вiдношенню до тест-штамiв шигел Зонне не нижче 30%
3.1.2 Штам B.cereus IP 5832
Виробничий штам B.cereus IP 5832 вiдноситься до виду Bacillus cereus, роду Bacillus, родини Bacillaceae. Штам являСФ собою рухому грампозитивну паличку iз закругленими кiнцями, довжиною 5-10 мкм i товщиною 1-2 мкм. Клiтина- спорангiй утворюСФ одну ендоспору. Хемогетеротроф.
Штам B.cereus РЖР 5832 аероб, на МПА утворюСФ бiлi, твердi, круглi або жовтуватого кольору тАЬрозплющенiтАЭ колонiСЧ з нерiвними краями; на кровяному агарi колонiСЧ зернистi, iз широкою зоною гемолiза; на яСФчному агарi утворюСФ широку зону преципiтацiСЧ бiлого кольору (ефект бактерiальноСЧ лецитiнази), зона швидко росте i через декiлька дiб iнкубацiСЧ охоплюСФ всю поверхню чашки. КолонiСЧ, якi виросли на агарi, мають характерний восковидний вид. В рiдкому поживному середовищi бацила утворюСФ бiлий хлоп`СФвидний осад, нiжну плiвку на поверхнi i визиваСФ помутнiння бульйона.
Штам володiСФ високою протеолiтичною активнiстю розрiджуСФ желатин протягом 1-4 дiб; утворюСФ лецитиназу i ацетилметилкарбiнол, розщеплюСФ до кислоти глюкозу i мальтозу, глiцерин, лактозу, галактозу iнсулiн, дiльцит i декстрин.
Температурний оптимум росту 30С, оптимум рН 7 9,5
Виробничий штам повинен володiти антагонiстичною активнiстю по вiдношеню до патогенних та УПМ, якi використовуються при контролi пробiотикiв.
3.2 Дослiдження антагонiстичноСЧ активностi пробiотичних штамiв по вiдношенню до стандартних тест-штамiв та клiнiчних iзолятiв
Пробiотики вiдiграють позитивну роль у пiдвищеннi загальноСЧ резистентностi органiзму, а також пригнiчують УПМ. Антагонiстична дiя бактерiй обумовлена СЧх високою конкурентною здатнiстю в процесi розмноження, що пояснюСФться широкою пристосованiстю до умов культивування (рН, температурою). Здатнiсть змiнювати рН середовища, продукувати лiзоцим i лiтичнi ферменти являСФться частиною сумарного показника антагонiстичноСЧ дiСЧ, яка властива бацилам, а для ентеробактерiй характерне продукування мiкроцинiв.
Для бiльш повноСЧ характеристики при дослiдженнi штамiв продуцентiв, особлива увага була придiлена СЧх взаСФмодiСЧ на види УПМ, збудникiв гострих кишкових iнфекцiй.
Для дослiдження антагонiстичноСЧ дiСЧ було використано промисловi штами B.cereus IP 5832 та E.coli M17. Антагонiстичну активнiсть визначали у вiдношенi 50 клiнiчних iзолятiв представникiв родин Enterobacteriaceae, Pseudomonadaceae, Micrococcaceae та музейних тест-культур. Дослiдження проводились разом iз спiвробiтниками лабораторiСЧ загальноСЧ мiкробiологiСЧ КНДРЖЕРЖХ (зав. лабораторiСЧ д.м.н. Полiщук О.РЖ.).
В таблицi 3.1 представлено результати дослiджень антагонiстичноСЧ дiСЧ пробiотичних штамiв до стандартних тест-штамiв.
Таблиця 3.1. Характеристика антагонiстичноСЧ активностi штамiв E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по вiдношеню до музейних тест-культур
Назва
музейних
тест-культурКiль-
кiсть штамiв Зона затримки росту тест-культур, мм
E.coli M17
С.30202E.coli M17
С.51000E.coli M17
С.10900E.coli M17
С.31000B.cereus IP5832Escherichia coli115.22.016.72.517.53.0102.0153.0Staphylococcus aureus1251.0221.5232.0201.0212.0Candida albicans12.80.12.90.22.70.12.80.130.2P.vulgaris 112.02.114.01.014.02.515.02.013.02.0 P.mirabilis210.01.011.02.09.01.510.02.58.02.1Shigella flexneri215.01.517.02.020.01.018.02.019.01.5Shigella sonnei217.03.018.02.520.01.518.02.018.02.0
В таблицях 3.2 3.8 представлено результати дослiджень з наведенням тiльки тих клiнiчних штамiв, якi виявляли активнiсть по вiдношенню до певних тест-культур.
Таблиця 3.2. Характеристика антагонiстичноСЧ активностi штамiв E.coli M17 та B.cereus IP 5832 по вiдношеню до клiнiчних тест-культур Escherichia coli
Культура - антагонiст Зона затримки росту тест-культур, мм Клiнiчнi штамиEscherichia coli 227/1 Escherichia coli 1705Escherichia coli 3394E