Влияние перекисных условий на показатели функциональной активности нейтрофилов перифирической крови человека
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
?пна в различной процентной концентрации, однако в медицинских целях используется в основном 3%. [25]
Различны пути введения перекиси водорода в организм: от наружного до интраназального, перорального, ректального, ингаляционного, внутривенного и даже внутриартериального.
Перекись водорода используется как антисептическое, гемостатическое, дезинфицирующее, дезодорирующее средство. [22]
Применяют главным образом наружно в форме 1 - 3%-ного водного раствора перекиси водорода для обработки гнойных ран, язв, свищей и полостей, при воспалениях слизистых оболочек рта, глаз, глотки и среднего уха. Растворы перекиси водорода, нанесенные на слизистые оболочки или на поверхность ран, действуют вяжуще и кровоостанавливающе.
Давно и прочно зарекомендовало себя использование перекиси водорода при заболеваниях полости рта и десен.
Для полоскания полости рта применяется 3-процентный раствор перекиси водорода или (как вариант) прикладывание к больным местам тампонов, смоченных в перекиси.[40]
При заболеваниях десен, а также при пародонтозе рекомендуется втирать в больные десны смесь из пищевой соды с 3-процентной перекисью водорода, смешанных до консистенции пасты.
Перекись также помогает при отбеливании зубов и устранении неприятного запаха изо рта.
При ангинах 3% перекись водорода используется для полоскания горла. Сочетание перекиси с раствором марганца хорошо помогает при ринитах и гайморите - но в данном случае необходимо использовать 1-процентный раствор. Вводить растворы в полость носа рекомендуется при помощи небольшого шприца либо маленькой спринцовкой.
При воспалении среднего уха применяется 0,5-3-процентная перекись для удаления гноя и обогащения тканей кислородом. При острых отитах закапывание не рекомендуется - препарат лучше вводить при помощи марлевых тампонов. [29]
При незначительных капиллярных кровотечениях в случае порезов или ссадин на коже также используется перекись. За iет пенообразования растворы перекиси водорода оказывают местное кровоостанавливающее действие при капиллярных кровотечениях, обусловленное тем, что пена ускоряет переход фибриногена в фибрин, что и приводит к свертыванию крови на раневых поверхностях, т.е. как бы цементируя их, тем самым останавливая кровотечение.
При грибковом поражении или бородавках используется 6 - 15-процентный раствор перекиси водорода. В компрессах такая концентрация недопустима - могут появиться ожоги; применяют 0,5-1-процентный раствор. Компрессы с перекисью водорода применяются при артритах и травматических болях в суставах. Накладывается на область больного сустава.
При опухолях, находящихся близко к поверхности кожи, даже с признаками изъязвления применяется перекись водорода более высокой (до 15%) концентрации. Помещенные на опухоль компрессы как бы выжигают ее за iет выделения атомарного кислорода. [33, 42]
Используется перекись водорода в гинекологии для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний.
2. Материалы и методы исследования
.1 Использованные материалы
В работе были использованы следующие реактивы: хлорид натрия NaCl (Пять океанов, г. Минск, хч), хлорид калия KCl (Пять океанов, г.Минск, хч), гидрофосфат натрия NaH2PO4 (Пять океанов, г.Минск, хч), глюкоза, перекись водорода Н2О2 (Пять океанов, г.Минск, хч), фиколл-верографин (Sigma, Германия, хч), краситель Романовского-Гимзы (МиниМед, г.Брянск), нитросиний тетразолий, уксусная кислота (Лаверна, г. Москва, хч), диметилсульфоксид (НеваРеактив, г. Санкт-Питербург, хч), среда Хенкса с феноловым красным. В качестве основного буферного раствора использовали 10мМ калий-натрий фосфатный буфер, содержащий 140мМ NaCl, 10мМ KCl, 10мМ NaH2PO4, 5мМ глюкозы, рН 7,3.
Непосредственно перед экспериментами готовили необходимые растворы Н2О2 в концентрациях: 0,005М; 0,01М; 0,05М. В экспериментах использовалась суспензии клеток Staphylococcus aureus, предварительно опсонированных компонентами объединенной донорской сыворотки.
.2 Получение полиморфноядерных гранулоцитов из периферической крови
В экспериментах была использована кровь двадцати здоровых доноров.
Для получения нейтрофилов к цельной венозной крови добавляли равный объем рабочего буфера, а затем наслаивали на градиент фиколл-верографина (?=1,085/1,18 ) в соотношении объемов 2:1, центрифугировали 30 минут при 2000 об/мин, после чего отбирали образовавшийся слой лейкоцитов. К выделенной клеточной суспензии добавляли 10мМ К,Na-фосфатный буфер. Концентрацию лейкоцитов определяли путем подiета в камере Горяева. Количество жизнеспособных клеток с использованием витального красителя.
.3 Инкубация полиморфноядерных гранулоцитов с Н2О2
Непосредственно перед экспериментом готовили разведения Н2О2 таким образом, чтобы конечные концентрации в экспериментальных пробах составляли: 0,005М, 0,01М, 0,05М. Выделенные нейтрофилы подвергались инкубации с соответствующими концентрациями Н2О2 в конечном объеме 200 мкл в течение 20 минут при 37?С. Клетки осаждали центрифугированием в течение 20 минут при 2000 об/мин, надосадочную жидкость удаляли. Затем клетки промывали дважды 10мМ К,Na-фосфатным буфером для удаления перекиси из среды инкубации.
.4 Определение фагоцитарной активности полиморфноядерных гранулоцитов
Суспензию интактных или обработанных различными концентрациями Н2О2 нейтрофилов смешивали в равных соотношениях с суспензией предварительно опс