Влияние низкочастотных акустических колебаний на остеорепарацию длинных трубчатых костей при комбинированных радиационно-механических поражениях
Курсовой проект - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие курсовые по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
.
На второй день после операции на опытные группы животных осуществляли курсовое воздействие низкочастотными акустическими колебаниями с различными диапазонами частот (таблица 1).
Было сформировано 6 групп животных по 6 крыс в каждой группе с остеотомией бедренной кости и подверженных общему гамма-облучению в дозе 3,0 Гр. Начиная со второго дня после операции, ежедневно в течение 30 сут. на опытные группы животных воздействовали низкочастотными акустическими колебаниями: Группа 1 - частотой 5 Гц, Группа 2 - частотой 50 Гц, Группа 3 - частотой 1 Гц (рис.4), Группа 4 - модуированной частотой - несущая частота 5 Гц с частотой наложения 200 Гц, (рис.5).
Группа 5 (контрольная) - на животных не воздействовали низкочастотными акустическими колебаниями. Время наблюдения до выведения из опыта составило 30 сут.
Группа 6 (контрольная) - на животных не воздействовали низкочастотными акустическими колебаниями. Время наблюдения до выведения из опыта составило 45 сут.
Таблица 1
Воздействие низкочастотными акустическими колебаниями
Частота НАК, ГцВремя воздействия НАК, мин. Время наблюдения за животными, сут.Уровень шумового давления, ДбГруппа 15253095Группа 250253095Группа 31253095Группа 45 Гц + 200 Гц253095Группа 5 (контроль)_ _30_Группа 6 (контроль)__45_
Рис.4. Схема воздействия НАК в 1, 2 и 3 группе животных с частотой колебаний 5, 50 и 1 Гц (соответственно).
Рис.5. Схема воздействия НАК. Модулированная частота - несущая частота 5 Гц с частотой наложения 200 Гц.
После выведения животных из опыта оценка динамики репаративного остеогенеза производилась путем изучения выделенного материала посредством рентгенографии. Далее осуществили морфологическую оценку регенерата.
На полученных рентгенограммах оценили оптическую плотность зоны регенерата методом цитоморфометрии с помощью программного обеспечения PhotoM версия 1.21 (freeware) A. Chernigovskii (2000 - 2001 г.).
Для гистологического исследования экспериментального материала костная ткань фиксировалась в 10 % нейтральном формалине и декальцинировалась в 25 % растворе трилона Б. По стандартной методике приготавливались парафиновые блоки с последующим изготовлением срезов толщиной 15-20 мкм. Обзорное морфологическое и морфометрическое исследование проводилось на препаратах, окрашенных гематокислином и эозином, пикрофусином по Ван Гизону.
Производился морфометрический подсчет площади тканевых структур (соединительная ткань, зрелые костные балки, незрелые костные балки, кроветворная мозговая ткань, сосуды кортикальной пластинки) в зоне межотломковой щели с помощью морфометрической окулярной стенки Автандилова. В 5 полях зрения при увеличении 200 по 100 точкам осуществлялось определение относительной площади, занимаемой изучаемыми структурами в единице поля зрения, при этом артифициальные изменения не учитывались.
Данные обрабатывали методами вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента.
Глава 3. Результаты экспериментального исследования
В послеоперационном периоде отдельные группы животных содержались в индивидуальных клетках. Клиническое наблюдение за животными показало, что в течение первых трех суток животные были адинамичны, плохо поедали корм, щадили конечность, при этом определялся отек мягких тканей в месте операции. На пятые сутки отек спадал, кожная рана заживала; затем возникало полное восстановление функции конечности.
На рис. 6, 7, 9, 11 представлены типичные рентгенограммы бедренной кости крыс через 30 сут. после остеотомии, общего равномерного гамма-облучения 3,0 Гр и воздействия низкочастотными акустическими колебаниями разного диапазона. На рис. 13, 15 представлены рентгенограммы бедренной кости крысы через 30 и 45 сут., соответственно, после остеотомии, общего равномерного гамма - облучения 3,0 Гр, без стимуляции остеорепарации низкочастотными акустическими колебаниями.
Группа 1
Рентгенологически на 30 сут. эксперимента определяется относительно массивная периостальная фиброзная мозоль с выраженной резорбцией отломков кости. В трех случаях прослеживается кортикальный слой в области остеотомии с частичным восстановлением костномозговой полости (рис.6).
Рис.6. Типичная рентгенограмма бедренной кости крысы группы 1 через 30 сут. после остеотомии и общего равномерного гамма - облучения 3,0 Гр. Воздействие НАК - частота 5 Гц.
Оптическая плотность зоны регенерата-0,358 0,024, р < 0,05.
Морфологически на 30 сут. эксперимента обнаруживается сформированная первичная мозоль с образованием рыхлой волокнистой соединительной ткани с частично минерализованными примитивными и зрелыми костными балками. Выраженная пролиферация остеогенных клеток, большое количество сосудов мелкого калибра как эндо- так и периостально.
Группа 2
Рентгенологически на 30 сут. эксперимента отчетливо прослеживается линия остеотомии. Со стороны периоста и эндоста новообразованная ткань костной плотности соединяла отломки. В 5 случаях отмечается неполное восстановление целостности кортикальной пластинки (рис.7).
Рис. 7. Типичная рентгенограмма бедренной кости крысы группы 2 через 30 сут. после остеотомии и общего равномерного гамма-облучения 3,0 Гр. Воздействие НАК - частота 50 Гц.
Оптическая плотность зоны регенерата- 0,131 0,017, р<0,05.
Морфологически на 30 сут. эксперимента в зоне дефекта обнаруживается первичное костное сращение с образованием соединительнотканной мозоли с участками хондроидно