Повышение биоресурсного потенциала цыплят-бройлеров на основе усовершенствованной престартовой и стартовой системы выращивания
Автореферат докторской диссертации по биологии
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | |
В результате гистологического изучения мышечного волокна грудной и ножной мышцы цыплят было выявлено жировое перерождение амышечной ткани при использовании существующих схем кормления (рис. 9-10) мышечные волокна грудной мышцы цыплят-бройлеров опытной группы, получающей пробиотический препарат Моноспорин, были равномерно окрашены при равномерном распределении ядер мышечной ткани. Между тяжами мышечных волокон в месте расположения кровеносных сосудов были видны жировыеа прослойки, толщина которых не превышает объёма толщину 2-х мышечных волокон.а В межуточной соединительной ткани жировые прослойки были более значительны и превышали объем четырех мышечных волокон. В поле зрения встречались ааединичные гипертрофированные волокна. На гистологических срезах грудной мышцы цыплят-бройлеров контрольной группыа были видны четко выраженные, но не равномерно окрашенные волокна из-за их разной толщины. Отмечалось отложение жировой ткани между мышечными волокнами, были зафиксированыа тромбы в сосудах. Некоторые волокна были арыхлые,а также в мышечных волокнах наблюдались явления атрофии и некроза. В поле зрения попадались водянистые мышцы и прослойки межуточной ткани. В грудной мышце было отмечено отложение жира между отдельными мышечными пучками волокон иа гипертрофированные мышечные волокна. На продольном разрезеа грудной мышцы чаще, чем в опытной группе встречалисьа гипертрофированные мышечные волокна, ядра клеток которых имели круглую форму. При изучении гистологических срезов ножных мышц цыплят-бройлеров опытной группы, получавших пробиотический препарат Моноспорин, было установлено, чтоа в мышцах конечностей в отличие от грудных мышц был четко выражен рисунок мышечных тяжей, в поле зрения встречались единичные гипертрофированные мышечные волокна. В межуточной соединительной ткани жировые вакуоли были единичны, их количество было незначительно.а На гистологических срезаха мышечное волокно ножных мышц цыплят-бройлеров контрольной группы было четко выражено. Соединительнотканные прослойки были толще, чем мышечное волокно. Встречалась полиморфно клеточная инфильтрация между мышечными волокнами - так называемый воспалительный очажок. В поле зрения часто попадались пучки волокон соединительной ткани,а большое количество гипертрофированных волокон.а Были зафиксированыа гипертрофированные мышечные волокна среди жировых клеток. И хотя мышечные пучки были четко выражены, в мышечной ткани отмечалось первоскулярное отложение жировых вакуолей и отложение жира между мышечными пучками иа волокнами.а Наблюдалось формирование тромбов в сосудах.
|
|
Рисунока 9 - Ножные мышцы цыплят-бройлеров контрольной группыа в возрасте 40 дней. Перерождение мышечного волокна в жировую ткань. |
Рисунока 10 -а Ножные мышцы цыплят-бройлеров опытной группы ав возрасте 40 дней. Мышечное волокно и жировая ткань в пределах нормы. |
Морфологическим аисследованиям крови цыплят в конце выращиванияа аустановлено достоверное снижение уровня лейкоцитов при использовании препарата Моноспорин, что подтверждается данными по отсутствию патологии органов пищеварительной и иммунной системы (табл. 12).
Таблица 12 - Гематологические показатели крови цыплят-бройлеров (xSx)
Показатели |
Контрольная группа |
Опытная группа |
ейкоциты,10е9/л |
3,300,40 |
2,06 0,16** |
Гемоглобин, г/л |
84,673,18 |
91,0017,62 |
Гематокрит, % |
21,830,07 |
20,171,62 |
Эритроциты, 10е12\л |
2,240,05 |
2,020,12 |
Средний объем эритроцита, ф/л |
97,832,40 |
99,272,13 |
Ср. содерж. гемоглобинаа в одном эритроците, Пг |
37,771,08 |
44,335,90 |
Распределение эритроцитов по объему, % |
21,931,20 |
21,570,12 |
Тромбоциты, 10е9/л |
27,6712,72 |
18,337,43 |
Ср. объем тромбоцитов, ф/л |
33,803,24 |
26,272,77 |
СОЭ, Мм/час |
4,001,16 |
3,001,00 |
Примечание ** р<а 0,01
Биохимические исследования крови показали, что достоверные изменения отмечены по электролитам крови цыплят опытной группы по сравнению с контрольной группой (табл. 13).
Таблиц 13 а- Биохимический анализ крови цыплят-бройлеров (xSx)
Показатели |
Контрольная группа |
Опытная группа |
Общий белок, г/л |
27,674,17 |
25,670,34 |
Альбумины, г/л |
4,670,66 |
5,670,34 |
Глобулины, г/л |
23,003,51 |
20,000,58 |
Кальций, ммоль/л |
2,450,20 |
2,650,04 |
Фосфор, ммоль/л |
2,990,66 |
2,640,19 |
Калий, ммоль/л |
10,000,00 |
7,570,43*** |
Натрий, ммоль/л |
117,009,82 |
152,002,08** |
Хлор, ммоль/л |
93,677,69 |
115,332,40* |
Примечание ***р<0.001, **р<0.01, *р<0.05
Таким образом, в крови цыплят-бройлеров при использовании пробиотического препарата Моноспорин отмечен достоверно более низкий ауровень лейкоцитов. Учитывая состояние внутренних органов цыплят опытной группы можно отметить, что при использовании пробиотика Моноспорин происходит нормализация кислотно-основного равновесия.
3.7. Эффект воздействия метаболитов B. Subtilis на синтез ДНК, РНК и белка на эмбриональной культуре клеток (ЭКК).
Для изучения эффектов жизнедеятельности B. Subtilis было проведено культивирование B. Subtilis и эмбриональных клеток из яиц кур родительского стада бройлеров. Для оценки влияния продуктов, синтезируемых B. Subtilis во время роста, ЭКК инкубировали в стандартной среде с добавлением стерилизованного супернатанта культуры роста B. Subtilis в соотношении 1/99, 10/90, 20/80, 30/70 (первая цифра - объем супернатанта культуры роста B. Subtilis, вторая - объем культуры ЭКК) .
Антибиотика Энроколи добавляли в среду инкубации ЭКК в количестве 0,1, 0,25, 2,5 и 25 мкг/мл среды.
Совместное влияние изучаемых препаратов исследовали посредством внесения в культуральнуюа среду ЭККа обоих препаратов аи проводили сравнение с показателями контрольной культуры (без добавления данных веществ).
Внесение в культуру ЭКК среды, содержащей продукты жизнедеятельности B. Subtilis, сопровождалось статистически достоверным изменением активности клеток в отношении синтеза ДНК (табл.14), причем в интервале соотношения объемов культур 1/99 - 20/80 наблюдается стимуляция синтеза ДНК (до 38,89%). Дальнейшее увеличение концентрации продуктов жизнедеятельности бактерий вызывает достоверное угнетение синтеза ДНК (на 11%) .
Таблицаа 14а - аВлияние продуктов жизнедеятельности B. Subtilis и антибиотика Энроколи на включение 214С-тимидина в ДНК эмбриональных клеток ав условиях культуры. (xSx)
Включение 214С-тимидина в ДНК (Бк/106 кл) |
Концентрация антибиотика мкг/мл |
|||||
Соотношение объемов сред инкубации (v/v) |
0 |
0,1 |
0,25 |
2,5 |
25 |
|
0 |
5,40,09 |
4.360.07* |
4.730.08* |
1.250.04* |
0.330.02* |
|
1/99 |
6.70.11* |
4.810.04*# |
4.290.12* |
1.480.11* |
0.470.03*# |
|
10/90 |
7.90.11* |
5.620.13# |
4.640.07* |
1.640.05*# |
0.320.06* |
|
20/80 |
7.50.12* |
4.310.07* |
4.120.05*# |
1.160.05* |
0.330.07* |
|
30/70 |
4.80.04* |
4.270.27* |
4.530.08* |
1.130.10* |
0.280.04* |
Примечание * - достоверное отличие от контроля (без добавления среды роста B. Subtilis и антибиотика. # - достоверное отличие включения 214С-тимидина в ДНК в культуре с добавлением среды роста B. Subtilisа и антибиотика от культуры только с добавлением антибиотика в соответствующей концентрации.
Здесь и далее достоверным считали отличие при р< 0,05
Установлено, что это связано с образованием B. Subtilis веществ, обладающих способностью угнетать пролиферацию не только микроорганизмов, но и ЭКК. Однако данный эффект проявляется лишь при замещении среды инкубации ЭКК средой кондиционированной B. Subtilisа на треть по объему.
Выявлено, что внесение в культуру ЭКК антибиотика Энроколи в диапазоне концентраций 0,1-25 мкг/мл вызывает стойкое угнетение включения селективной метки в ДНК (на 20% уже при концентрации 0,1 мкг/мл и на 93,89% - в максимальной концентрации). Последнее можно объяснить присутствием в составе Энроколи энфрофлоксицина - препарата фторхинолинового ряда, механизм действия которого заключается в ингибировании синтеза ДНК. Привнесение в среду продуктов роста бактерий, обладающих стимулирующим эффектом в отношении синтеза ДНК, несколько улучшает ситуацию. Так, при концентрации антибиотика 0,1 мкг/мл применение кондиционированной среды B. Subtilis в соотношении 10/90 угнетения синтеза ДНК не наблюдалось (данные не отличались от контроля). Однако при остальных концентрациях угнетающий эффект антибиотика сохранялся, хотя и был выражен в меньшей степени. Определено, что синтезируемые бактериями вещества способныа реактивировать топоизомеразы, блокируемые фторхинолинами, а также синтезировать вещества, способные расплетать двойную цепочку ДНК, оказывая топоизомеразоподобный эффект. Это многостадийный процесс, проявляющийся в снижение поступления антибиотика внутрь клетки и его ускоренную внутриклеточную деградацию.
Установлено, что включение радиоактивно меченого предшественника синтеза РНК 14С-уридина продемонстрировал в целом сходную картину с той лишь разницей, что выявленные на примере синтеза клетками ДНК эффекты были более выраженными. Так, продукты жизнедеятельности бактерий вызывали увеличение синтеза РНК на 50-80%, а в максимальной концентрации не оказывали ингибирующего эффекта (табл. 15).
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | |