Е. С. Воронин и др.; Под ред. А. А. Сидорчука. М.: КолосС, 2007. 671 с, [18] л ил.: ил. Учебники
| Вид материала | Учебники |
- Государственное учреждение культуры, 135.1kb.
- Блохин Геннадий Иванович, Александров Владимир Александрович. М. КолосС, 2006. 512, 557.07kb.
- Антипова Людмила Васильевна, Слободяник Валентина Сергеевна. М. КолосС, 2005. 384, 367.06kb.
- Мировая экономика и международные экономические отношения : [в 2 ч.] Ч. 1 : учебник, 148.75kb.
- Календарно-тематическое планирование по литературе 7 «Б» класс, 535.67kb.
- Сборник статей / Под ред к. ф н. В. В. Пазынина. М., 2007, 2680.76kb.
- Вракин Василий Филаретович, М. В. Сидорова; Под общ ред. М. В. Сидоровой. 2-е изд.,, 288.29kb.
- Клинические рекомендации. Кардиология. Под ред. Чазова Е. И., Беленкова Ю. Н., Оганова, 24.87kb.
- Курс экономической теории: учебник / Под ред. М. Н. Чепурина, Е. А. Киселевой. Киров:, 204.91kb.
- Учебники: год издания 1998-2008, 187.93kb.
Молодые взрослые насекомые заражаются при очистке ячеек сотов от погибших личинок. Заражение последних происходит через слюну взрослых пчел, в организме которых возбудитель сохраняется в течение зимы.
Клещ варроа способен переносить вирус от инфицированных куколок к здоровым и способствует распространению возбудителя внутри сильно пораженной мешотчатым расплодом семьи пчел, ускоряя ее гибель. Куколки и появившиеся из них взрослые пчелы могут приобретать также инаппарантную инфекцию, если личинки получали инфицированный вирусом корм от имаго.
Заболевание пчел чаще регистрируется весной и в первой половине лета (май—июнь) после продолжительной холодной погоды, при недостатке перги и меда в семьях. Сильные семьи поражаются в меньшей степени, чем слабые и средние. С наступлением медосбора признаки заболевания исчезают. Однако они вновь могут появиться осенью или весной следующего года. Внутри пасеки передача возбудителя заболевания происходит при перелетах рабочих пчел и трутней из больных семей в здоровые, перестановке сотов для выравнивания силы семей. Часть погибших личинок и куколок удаляют из сотов взрослые пчелы.
637Патогенез. Вирус обнаруживают через 18..,48 ч после заражения в клетках жирового тела, эпителия трахей и средней кишки, мышц и нервной ткани предкуколки; поражение приводит к сильному разрушению клеток. Развитие возбудителя также происходит в организме молодых взрослых пчел.
^ Течение и клиническое проявление. Инкубационный период при скармливании минимальной дозы личинкам длится 7 дней, при инокуляции куколке — 5 дней.
В пораженных семьях расплод на соте расположен неравномерно, имеет пестрый вид; крышечки на многих ячейках с печатным расплодом удалены или слегка запавшие с одним-двумя отверстиями; внутри таких ячеек находят вытянутых мертвых личинок, лежащих на спине вдоль ячейки. У недавно погибших предкуколок под кутикулой видны трахеи, головной конец слегка отходит от края ячейки. При осторожном выделении тело выглядит в виде мешка, заполненного зернистой мутно-белого цвета жидкостью. В последующем головной конец темнеет, сегментация сглаживается, объем жидкости увеличивается, она становится коричневого цвета. Затем упругость утрачивается, но сохраняется форма тела; кутикула твердая, заполнена коричневой зернистой массой. В дальнейшем тело становится бесформенным, а содержимое — клейким, предкуколки приобретают темно-коричневый или черный цвет, высыхают и выглядят как легко выделяющиеся полулунные корочки, лежащие выпуклой (спинной) стороной на стенке ячейки. Гибель расплода постепенно нарастает, гибнет до 10 % личинок маток. У инфицированных молодых взрослых пчел изменяется поведение, они не приближаются к личинкам, прекращают их кормление, начинают раньше участвовать в медосборе, но плохо собирают пыльцу. Часть семей может погибнуть, в других признаки поражения исчезают, когда пчелы начинают приносить в улей нектар. Приблизительно в 10 % случаев заболевание может протекать бессимптомно.
Мешотчатый расплод в семьях пчел часто протекает в ассоциации с европейским гнильцом. Характер течения смешанного заболевания обычно более тяжелый; признаки, специфические для первичной болезни, нечеткие.
^ Патологоаиатомические признаки. Образование большого пространства под кутикулой и накопление жидкости вызваны распадом жировых клеток. У пораженных личинок изменяется окраска тела, появляются волоски и шипики, наступает преждевременная склеротизация, т. е. возникает промежуточная форма с признаками доимагинального и взрослого насекомого.
При электронной микроскопии в инфицированных вирусом клетках гипофаренгиальных желез, эпителия кишечника куколок отмечены ци-топлазматические включения трех типов. Везикулярные структуры состоят из электронно-плотного аморфного материала, окруженного скоплениями мембранозных пузырьков диаметром Ю0...800нм. В пузырьках видны тонкие переплетенные волокна, заполнены пузырьки целыми и пустыми вирусными частицами, последние также аккумулируются в ядрах инфицированных клеток.
Вирусные тела-включения окружены двухслойной мембраной диаметром от 200 нм до 1 мкм и более, внутри содержат тонко гранулированный электронно-плотный материал, окружены вирусными частицами; разбросанные вирионы встречаются внутри тела-включения. Предполагается, что оба типа цитоплазматических включений связаны со сборкой вирионов.
638Третий тип включений представлен группами скрученных двойных миелиноподобных мембран.
^ Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагноз заболевания устанавливают на основании характерных признаков и последующего лабораторного исследования патологического материала (кусок сота с 20 или более пораженными личинками и куколками или такое же количество выделенных измененных личинок, помещенных в 50%-ный раствор глицерина).
Из методов лабораторной диагностики используют РИД и прямую и непрямую РИФ, а также реакцию коагтлютинации (РКоА) в соответствии с утвержденной нормативной документацией.
Мешотчатый расплод необходимо дифференцировать от других болезней расплода.
^ Иммунитет, специфическая профилактика. Иммунитет изучен недостаточно. Попытки иммунизировать пчел, скармливая им инактивирован-ный вирус, результатов не дали. Определенный эффект отмечен при применении гипериммунной сыворотки, полученной от кроликов или лошадей.
Лечение. Используют эндонуклеазу бактериальную (эндоглюкин) или рибонуклеазу. В экспериментальных условиях получены положительные результаты при скармливании 0,5%-ного раствора перманганата калия в сахарном сиропе; при смешанной форме мешотчатого расплода и европейского гнильца дважды через 4 дня дают антибиотики (400 000 ЕД/л сиропа). Эффективно двукратное применение риванола (250 мг/л сиропа).
^ Профилактика и меры борьбы. Больные семьи сокращают и утепляют, обеспечивают достаточным количеством белкового и углеводного корма; меняют маток или прерывают яйцекладку матки, заключив ее на 5... 7 дней в клеточку. Удаляют соты с пораженным расплодом.
При сильном поражении делают перегон в чистый продезинфицированный улей на вощину. Пчел подкармливают жидким сахарным сиропом. Использовать для подкормки пчел мед и пергу от больных семей нельзя. На пасеку накладывают ограничения. В качестве лечебных и профилактических средств могут быть эффективны эндоглюкин (эндонукле-аза бактериальная) и рибонуклеаза.
В экспериментальных условиях скармливание пораженным семьям с сахарным сиропом 0,5%-ного раствора перманганата калия обеспечивало их выздоровление.
Соты дезинфицируют раствором пероксида водорода; пчеловодный инвентарь после тщательной механической очистки прожигают или обрабатывают перексидом водорода и муравьиной (уксусной) кислотой, промывают водой и сушат; халаты, холстики, полотенца кипятят в растворе карбоната натрия, прополаскивают в воде и сушат. Воск дезинфицируют, перетапливая на водяной бане при 70 "С в течение 70 мин или автоклави-руя в течение 30 мин. Возможна дезинфекция газом бромидом метила под пленкой при экспозиции 10 сут. Пересадка инфицированного гнезда пчел в продезинфицированный улей на чистые соты без подавления развития возбудителя в организме насекомых неэффективна.
Ограничения снимают после ликвидации болезни.
Контрольные вопросы и задания. 1. Как передается возбудитель внутри семьи пчел?
2. Перечислите признаки заболевания, обнаруживаемые в неблагополучной семье пчел.
3. Как отличить мешотчатый расплод от гнильцов, аскосфероза, застуженного расплода?
4. Как переслать' патологический материал для вирусологических исследований?
639^ 10.4. ВИРУСНЫЕ ПАРАЛИЧИ
Вирусные параличи (лат. — Paralysis apium; англ. — Honey bee paralysis) — группа болезней (хронический, острый и медленный паралич) взрослых медоносных пчел, сопровождающихся параличами конечностей насекомого.
^ Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. Описания некоторых признаков поражения взрослых пчел параличом встречаются еще в работах античных авторов (Аристотель, Варрон, Колумелла). Название болезни «паралич» и ее краткая характеристика впервые даны Барнсайдом (1933).
Установлено, что заболевание пчел в естественных условиях вызывает вирус хронического паралича, позднее (1974) были выделены самостоятельные возбудители острого и медленного паралича.
На территории бывшего СССР хронический паралич впервые зарегистрирован в Приморском крае и Украине в 1965—1967 гг.
До 60—70-х годов XX в. из трех указанных вирусов только повсеместно распространенный вирус хронического паралича периодически вызывал явные признаки поражения в отдельных странах у 1...2% семей пчел, остальные вирозы протекали, как правило, в виде инаппарантных инфекций. Однако эпизоотическая ситуация резко изменилась с появлением и распространением клеща варроа, выступившего в роли активатора репликации вирусов и переносчика, результатом чего явилась повсеместная гибель тысяч семей пчел.
^ 10.4.1. ХРОНИЧЕСКИЙ ВИРУСНЫЙ ПАРАЛИЧ
Хронический паралич (лат. — Paralysis chronic apium; англ. — Chronic paralysis; паралич, вирусный паралич, ползучка) — вирусное заболевание куколок, взрослых медоносных пчел и доимагинальных форм пчел-листорезов.
Распространение. Заболевание пчел хроническим параличом отмечено на всех континентах, кроме Южной Америки и, возможно, стран Карибского бассейна. Широкое распространение болезни отмечено в Китае, она выявлена в ряде областей России, а также в Украине, Республике Молдова и Казахстане.
^ Возбудитель болезни. РНК-содержащий вирус эллипсовидной формы, размером 30...75 х 20...22 нм, культивируется в первичной культуре клеток медоносной пчелы. ЦПД вируса на культуре ткани отмечается через 48 ч после заражения.
Вирус размножается в цитоплазме клеток нервной ткани, тонкой кишки в месте впадения мальпигиевых сосудов, в мандибулярных и гипофа-ренгиальных железах взрослых медоносных пчел. В пораженных клетках образует скопления частиц различных размера и формы; цитоплазмати-ческие включения в виде базофильной грануляции в эпителиальных клетках тонкой кишки получили название телец-включений Морисона.
Вирус хронического паралича часто встречается в пчелах, пораженных вирусом острого паралича. При 30 "С размножение вируса хронического паралича подавляется вирусом острого паралича, при 35 "С отмечается обратная зависимость.
По устойчивости вируса к внешним воздействиям данные противоречивые. При температуре —70 °С сохраняется в трупах пчел более полугода, при температуре —15 °С — более 1 мес, при температуре 4 °С — 3...4 дня. Инактивируется при нагревании до 60 °С в течение 30...60 мин, при 75 °С — в течение 10 мин. Однако имеется сообщение, что при 95 °С вирус погибает через 30 мин. При 35 "С вирус сохраняется 7 дней, в 0,2%-ном растворе формалина при температуре 35 "С — 3 сут; под действием ультрафиолетовых лучей погибает за 1 ч.
640Эпизоотология. Гибель пчел может происходить в любое время года. Однако вспышки острого течения болезни чаще всего регистрируются летом. Хронический паралич наблюдают в некоторых семьях пчел или во всех семьях пчел пасеки.
Вирусоносительство широко распространено. Активизацию размножения вируса хронического паралича в организме пчел могут вызывать некачественные корма.
Внутри семьи вирус передается от больных пчел к здоровым при их соприкосновениях на сотах, удалении пораженных особей, а также кормовых контактах через слюну.
Вместе со слюной вирус поступает в заготовленную пергу. Распространению возбудителя между семьями пасек способствуют перелеты пчел и трутней, а также перестановка пчеловодом сотов с кормом.
Патогенез. Патогенез вирусных параличей, вероятно, имеет много общего: передача патогенеза происходит по ходу метаморфоза. Большая часть вирионов, поступивших с кормом личинки, погибает при ее преобразовании в куколку. Оставшиеся частицы встраиваются в клетки хозяина и могут оставаться в них в неактивном состоянии в куколке и вышедшей из нее взрослой пчеле. При различных нарушениях (стрессах) в результате изменившегося метаболизма происходит репликация вируса, выход вирионов в гемолимфу (вирусемия) и последующее заражение клеток.
Возбудитель хронического паралича при летальном и остром течение обнаружен в нервных клетках, клетках мандибулярных и гипофарингиальных желез, медового зобика. В околоядерной области клеток тонкой кишки формирует округлые, диаметром 0,5...5 мкм тельца-включения (тельца Морисона).
Насекомое погибает в результате полной дисфункции при высокой вирусемии.
^ Течение и клиническое проявление. При искусственном заражении признаки болезни отмечают у пчел на 4... 10-й день. Инкубационный период при введении минимальной дозы вируса в гемолимфу взрослых рабочих пчел составляет 7 дней, куколок — 5 дней. При размещении больных пчел с внешне здоровыми насекомыми гибель последних происходит на 5... 18-й день.
Болезнь характеризуется появлением на предлетковых площадках и летках ульев ползающих, не способных к полету пчел. Некоторые насекомые возбуждены, беспорядочно двигаются, прерывисто дрожат крыльями, взбираются по стеблям травы, но срываются, падают на землю, начинают быстро вертеться на боку, издавая характерное жужжание. Другие пчелы пассивны, часто собираются на почве или на растениях группами по 2...5 особей и более, плохо и неестественно медленно передвигаются, нередко волочат одну из конечностей, брюшко увеличено. Эти признаки чаще отмечают в начале весны и в конце осени.
В период повышенных температур летом более характерно появление черных, безволосых, блестящих пчел с уменьшенным брюшком, похожих на муравьев. У отдельных особей неровные, оборванные концы крыльев. Здоровые пчелы изгоняют больных из улья.
Проявившие внешние признаки болезни насекомые после паралича конечностей обычно погибают, что в конце концов приводит к сильному ослаблению или плохому развитию семей пчел. Выжившие после острого переболевания семьи пчелы могут в дальнейшем развиваться и давать продукцию, однако вирус в них сохраняется и вызывает постоянную небольшую гибель пчел.
^ Патологоанатомические признаки. Поверхность тела лишена волосков, концы крыльев обтрепаны, иногда увеличено брюшко. В цитоплазме клеток тонкой кишки на гистосрезах обнаруживают тельца Морисона.
41-7753
641^ Диагностика и дифференциальная диагностика. Диагностика основана на клинических проявлениях болезни, результатах лабораторных исследований и обнаружении телец-включений Морисона в протоплазме клеток тонкой кишки при окраске гистосрезов или мазков-отпечатков по Романовскому—Гимзе в соответствии с наставлением по гистологической диагностике вирусного паралича. Выявление телец-включений проводят также при помощи РИФ.
Наиболее четкие результаты при диагностике дает использование РДП иРН.
Хронический вирусный паралич необходимо дифференцировать от других вирозов взрослых пчел, спироплазмоза, фитотоксикозов и отравлений пчел, вызванных пестицидами.
^ Иммунитет, специфическая профилактика. Попытки создания иммунитета у насекомых путем скармливания инактивированного вируса результатов не дали.
Профилактика. Профилактика болезни складывается из охраны благополучия пасек от заноса возбудителя, создания нормальных условий содержания и кормления пчел, устранения перегрева гнезд. Не допускают зимовки пчел на меду, содержащем падь. Семьи пчел размещают в местности, богатой медоносами. Предупреждают пчелиное воровство на пасеках, не объединяют слабые семьи без выявления причин их ослабления. Вывод маток проводят в устойчивых к заболеванию семьях пчел, эти семьи используют для создания отводков. Поддерживают санитарное состояние пасеки и ульев, ведут систематическую борьбу с клещом варроа. С целью профилактики применяют эндоглюкин (эндонуклеаза) или виран (рибонуклеаза) согласно наставлениям по их использованию.
Лечение. В больных семьях меняют маток. Пчел обрабатывают указанными выше ферментными препаратами. Определенный лечебный эффект также получен при скармливании семьям раствора сульфата меди, метро-нидазола, препарата ТДА.
^ Меры борьбы. При установлении заболевания на пасеку накладывают ограничения: оповещают ветеринарных специалистов и владельцев пасек о выявленном неблагополучии; прекращают реализацию пчел, маток, продуктов пчеловодства и предметов ухода за пчелами, проводят ветери-нарно-санитарные мероприятия (старые непригодные соты перетапливают на воск; подвергают дезинфекции соты, бывшие в эксплуатации не более 2...3 лет, а также ульи, рамки, инвентарь, спецодежду); применяют противороевые меры, запрещают перестановку сотов с расплодом и кормом из больных семей, обезличенную обсушку сотов после откачки меда, не допускают содержание слабых и безматочных семей. Ограничения снимают после ликвидации заболевания.
^ 10.4.2. ОСТРЫЙ ВИРУСНЫЙ ПАРАЛИЧ
Острый вирусный паралич (лат. — Paralysis acute apium; англ. — Acute paralysis) — заболевание куколок и взрослых медоносных пчел в семьях, пораженных клещом варроа, и шмелей.
Возбудитель болезни. Возбудитель острого паралича — РНК-содержа-щий вирус сферической формы, размером 30 нм. Репликация вируса происходит в нервной ткани, клетках глоточных желез и жирового тела взрослых пчел. Он образует однообразные цитоплазматические ацидофильные включения в клетках слизистой оболочки средней кишки. Куль-
642тивирование в лабораторных условиях осуществляют парентеральным введением пчелам и их куколкам или в первичных культурах клеток эмбрионов медоносной пчелы.
Штаммы вируса имеют незначительные серологические различия, но идентичны по протеиновым профилям.
Нагревание до 90 °С в течение 1 ч полностью инактивирует возбудитель, при 55 "С титр его значительно снижается, прогревание при 50 °С изменений не вызывает.
Эпизоотология. Вирус обнаруживают у внешне здоровых пчел с апреля по ноябрь.
Передача возбудителя внутри семьи осуществляется взрослыми пчелами, которые со слюной передают его друг другу и личинкам и заносят в формируемые обножки пыльцы и в пергу. Удаление из ячеек сотов отдельных погибших куколок усиливает инфицирование взрослых пчел. Однако внешние признаки ослабления или гибели семей в естественных условиях обычно отсутствуют, острый паралич протекает как инаппарант-ная (скрытая) инфекция, не имеющая экономического значения. Распространению вируса способствуют перелеты, роение пчел, практикуемые пчеловодные приемы (подсиливание слабых семей, перестановка сотов с пергой, размножение семей-носителей).
Вирус острого паралича не размножается в присутствии возбудителей черных маточников и мешотчатого расплода. Помимо медоносных пчел возбудитель обнаружен у отловленных в природе шмелей и в обножках пыльцы клевера, собранных этими насекомыми.
Острый паралич неоднократно отмечался при лабораторных работах с медоносной пчелой и специальных исследованиях ее на присутствие вирусов и в виде инаппарантной инфекции. С появлением и широким распространением клеща варроа инфекция стала явной во многих странах континентальной Европы, включая Россию, и в США.
Выделяемая при питании на куколках и взрослых пчелах самками варроа слюна активизирует репликацию вируса, возможно, повышает его вирулентность. Обнаружение вируса и проявление паралича в семьях пчел, пораженных варроа, находятся в прямой зависимости от численности этого паразита.
Вместе с тем естественное сокращение расплода, нарастание численности пчел, инфицированных самками варроа к осени, и высокая скорость развития острого паралича по сравнению с другими вирозами приводят к тому, что острый паралич становится основной причиной гибели пчел.
Патогенез. Сходен с таковым при хроническом параличе. Репликация вируса происходит в клетках нервной ткани, глоточных желез, жировом теле, в клетках слизистой оболочки средней кишки. Устанавливают однообразные цитоплазматические ацидофильные включения (Жиоффере, 1968).
^ Течение и клиническое проявление. Признаки болезни неспецифичны, их наблюдают при многих других заболеваниях пчел. В основном поражаются молодые взрослые пчелы, которые теряют способность к полету, ползают или подпрыгивают около летка и вблизи улья, иногда скапливаются на прилетной доске. Некоторые пчелы медленно вращаются, трясутся, у них увеличенное брюшко, неправильно расположенные крылья. Черных пчел при этом не находят. Пораженных насекомых чаще наблюдают в утренние часы. В это же время обнаруживают погибших пчел на дне улья и прилетной доске. Поражение сопровождается изменениями
41*
643содержания в ткани пчел аминокислот и нуклеиновых кислот, увеличением содержания общего белка гемолимфы, снижением ее объема, разрушением, агломерацией гемоцитов.
Среди взрослых пчел заболевание длится от 7.„18 дней до 3 мес. В некоторых случаях пораженные семьи выздоравливают без вмешательства человека, но обычно отстают в росте по сравнению со здоровыми. В течение сезона возможны рецидивы заболевания, повторные вспышки болезни проходят более тяжело. Отмечают осеннее резкое ослабление и гибель семей, сопровождающиеся большим отходом взрослых пчел, появлением признаков гнильца в открытом и печатном расплоде из-за развития се-кундарной микрофлоры.
Урон, наносимый острым параличом в семьях, различен и колеблется от гибели нескольких сотен пчел, снижения медопродуктивности и прироста семей пчел на пасеках до полной гибели семей, отдельных пасек и ряда пасек местности.