Geum.ru

Программа фундаментальных исследований Президиума ран

Вид материалаПрограмма

Содержание


М.К. Пулатова, В.Л. Шарыгин, А. Е. Сипягина, Т.Г. Шлякова
А.В. Рубанович
Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва ФГУ НИИ трансплантологии и искусственных органов Росмедтехнологий, Москва
Подобный материал:
1   ...   46   47   48   49   50   51   52   53   ...   72

РАДИОПРОТЕКТОР ДЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ ИНДОМЕТОФЕН: МЕХАНИЗМЫ ПОВЫШЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА К ПРОЛОНГИРОВАННОМУ ОБЛУЧЕНИЮ С НИЗКОЙ МОЩНОСТЬЮ ДОЗЫ, СОЗДАНИЕ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ И ПОДГОТОВКА К КЛИНИЧЕСКИМ ИСПЫТАНИЯМ ПРЕПАРАТА




^

М.К. Пулатова1), В.Л. Шарыгин1), А. Е. Сипягина2), Т.Г. Шлякова3)




1) Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН, Москва ; 2) НИИ педиатрии и детской хирургии МЗ РФ, Москва; 3) ГНЦ-Институт биофизики ФМБА России, Москва

Потребностью сегодняшнего дня является создание радиопротектора, эффективного в условиях пролонгированного облучения с низкой мощностью дозы. Таким радиопротекто-ром является индометофен (ИМ), созданный усилиями сотрудников ряда Институтов МЗ РФ и РАН. ИМ повышает общую неспецифическую резистентность организма. В 2007 г было продолжено доклиническое изучение ИМ. Установлена роль радиопротектор-индуцирован-ной активации синтезов дезоксирибонуклеотидов (дНТФ), ДНК и белков в органах живот-ных в механизме формирования радиорезистентности, которая оценивалась по тесту выжи-ваемости животных (собаки, мыши, крысы). Скорость-лимитирующей стадией в синтезе ДНК является синтез дНТФ, катализируемый рибонуклеотидредуктазой (РР). В связи с этим было изучено влияние природных и синтетических антиоксидантов (АО) на РР активность в радиочувствительных органах. Показано, что АО стимулируют синтезы дНТФ, ДНК и белков при их применении в строго определенных дозах. Однако, характер ответов этих систем синтезов на действие АО оказался дозовозависимым: большие дозы АО при однора-зовом или многоразовых приемах подавляли синтезы дНТФ, ДНК и белков. Показано также, что ИМ и АО влияют на пулы белков крови Fe3+- трансферрина и Cu2+- церулоплазмина, контролирующих синтез железосодержащей РР в кроветворных органах. Для лекарственных препаратов, содержащих молекулы с амино-, нитро- и нитрозогруппами (потенциальных доноров оксида азота NO) было установлено ингибирующее действие NO на синтез дНТФ, которое является результатом инактивации РР при связывании NO с ионами железа субъединицы М2 РР. Для обеспечения клинических испытаний были проведены две серии синтеза и наработки новых партий субстанции и лекарственных форм ИМ ( капсулы, таблетки), а также препараты «плацебо». Проводили контрольный анализ препаратов на микробиологическую чистоту и соответствие их физико-химических свойств паспортным данным. Для всех партий ИМ проводили оценку радиозащитной эффективности в опытах на собаках по тесту выживаемости облученных животных. Партии препаратов, прошедшие контроль и проверку на активность, чистоту и радиозащитную эффективность, будут использованы при проведении клинического изучения ИМ, целью которого является обоснование дозы, оптимально повышающей резистентность организма и не токсичных для человека. Показано, что при создании противолучевых средств, эффективных при пролонги-рованном облучении в несмертельных дозах, важнейшим фактором является исходная инди-видуальная радиочувствительность, определяющая способность организма к восстановле-нию нарушений и компенсации клеточного состава и функций органов. Зависимость радиозащитной эффективности ИМ от исходного состояния животного была четко выявлена в опытах на собаках. Установлены маркеры периферической крови, позволяющие в экспери-менте и клинике с помощью высокочувствительного метода ЭПР на образцах цельной крови контролировать повышение резистентности организма, устанавливать сроки достижения оптимального ее повышения после применения радиопротекторов, что важно для опреде-ления времени облучения, дозы препарата и режимов его применения.

КОМПЛЕКСНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ТРАНСГЕНЕРАЦИОННЫХ ГЕНОМНО-ИММУННЫХ НАРУШЕНИЙ В СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТКАХ ДЕТЕЙ ОБЛУЧЕННЫХ РОДИТЕЛЕЙ. СВЯЗЬ РАДИОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ С ГЕНОТИПИЧЕСКИМ СТАТУСОМ ОРГАНИЗМА.



^ А.В. Рубанович1, А.В. Агаджанян1, Э.А. Акаева1, Т.В. Елисова1, Э.Л. Иофа1, Л.Н. Костина1, Г.И. Кузнецова1, Н.С. Кузьмина1, Н.Ш. Лаптева1, И.Н. Нилова1, Л.Е. Сальникова1, И.И. Сусков1, В.С. Сускова2, Д.К.Фомин3.




^
1) Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва
2)ФГУ НИИ трансплантологии и искусственных органов Росмедтехнологий, Москва
3)ФГУ «Российский научный центр рентгенорадиологии Росмедтехнологий», Москва


Проведено комплексное изучение по цитогенетическим и иммуногенетическим критериям состояния генома лимфоцитов у отцов-ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС и их необлученных детей. В обоих поколениях выявлены повышенные частоты аберраций хромосом, генных мутаций (TCR – мутации) и предикторов апоптоза (клетки с иммунофенотипом СD95+). В результате анализа сопряженности между изученными показателями выявлены отличительные особенности, характерные для индукции геномной нестабильности в организме необлученных детей, по сравнению с отцами-ликвидаторами, перенесшими непосредственное радиационное воздействие.

Проведено исследование зависимости уровня нестабильных хромосомных аберраций и неонкологической заболеваемости от генотипов у 57 ликвидаторов аварии на ЧАЭС. В качестве генов-кандидатов, предположительно влияющих на радиочувствительность, были выбраны высокополиморфные локусы генов детоксикации ксенобиотиков глутатион-S трансфераз (GSTM1, GSTT1, GSTP1) и 5,10-метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR) – гена, участвующего в метилировании и синтезе ДНК. В выборке ликвидаторов в 2006-2007 годах сохраняется повышенная частота нестабильных хромосомных аберраций, которая составляет 0,0140,001, в том числе, радиационно-специфических дицентриков и центрических колец - 0,00150,0002 на клетку. Не обнаружено ассоциаций полиморфизма по каждому из отдельно изученных генов с цитогенетическими показателями. Выявлены более высокие частоты хромосомных аберраций у гомозиготных носителей делеции по локусу GSTM1 в сочетании с гомозиготностью по минорным аллелям в локусах MTHFR и GSTP1 (P=0,00002 и P=0,0233, соответственно). Среди больных с хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ) и в группе ликвидаторов, перенесших острые нарушения кровообращения (ОНК), увеличено число гомозиготных носителей минорного аллеля GSTP1 (P=0,014 и P=0,04, соответственно). Двойные гомозиготы по делециям GSTM1 и GSTT1 достоверно чаще встречались среди лиц с доброкачественными новообразованиями (кисты, полипы, P=0,015) и с доброкачественными изменениями щитовидной железы (P=0,017). Этот же генотип оказался протективным для пациентов с наиболее тяжелыми болезнями сердечно-сосудистой системы (острые нарушения кровообращения, P=0,027).