Geum.ru

Программа фундаментальных исследований Президиума ран

Вид материалаПрограмма

Содержание


Противоопухолевая активность
Создание нового поколения антивирусных пептидных препаратов на основе глипролинов
Подобный материал:
1   ...   37   38   39   40   41   42   43   44   ...   72

3.3. Лекарства




^ ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ АКТИВНОСТЬ IN VIVO И IN VITRO НИТРОЗИЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ ЖЕЛЕЗА С АЗАГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИМИ ТИОЛИЛАМИ




С.М. Алдошин 1), Н.А. Санина 1), С.В. Васильева 2), О.С. Жукова 3), З.С. Смирнова 3)

1)Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка, Россия
2)Институт биохимической физики им. Н.М. Эммануэля РАН, Москва, Россия
3) ГУ Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва, Россия


NO выступает в качестве сигнальной молекулы в различных биологических процессах, среди которых фундаментальный и практический интерес представляет участие этого радикала в процессе индукции и роста злокачественных новообразований. К настоящему времени молекулярно-генетические механизмы противоопухолевой активности новейших синтетических NO-доноров практически не изучены, однако на модельных системах нами установлено, что их канцеролитическая активность может проявляться как при индивидуальном применении, так и при комплексной терапии (в качестве адьювантов) с известными цитостатиками. Полученные результаты явились основанием для изучения противоопухолевой активности новых нитрозильных комплексов железа с лигандами - азагетероциклическими тиолилами. Установление корреляции "структура-функция” позволили приступить к изучению антинеопластических свойств этого нового класса доноров NO. В доклинических испытаниях выявлены их антиметастатическая активность и хемосенсибилизирующий эффект. В ИБХФ РАН при изучении молекулярно-генетической активности и спектра сигнальных функций новых доноров NO впервые доказана взаимосвязь между индукцией двунитевых разрывов в ДНК (ДР ДНК) лимфоцитов крови человека и апоптотической (канцеролитической) активностью. На примере нитрозильного комплекса железа с тетразол-2-илом и тиосульфатного комплекса железа показана прямая количественная корреляция между NO-донирующей активностью указанных доноров в аэробных условиях и объемом ДР ДНК в лейкоцитах крови человека. В ГУ РОНЦ им. Блохина РАМН на опухолевых клетках человека различного генеза (карцинома яичника SKOV3, миелолейкоз К562, карцинома молочной железы MCF7, немелкоклеточный рак легкого А549) зарегистрирован антипролиферативный эффект 12 сера-нитрозильных комплексов железа. Процент торможения роста опухолевых (ТРО) клеток для них составил 36-92%, в зависимости от природы лиганда и типа структуры (для цисплатина, в тех же условиях эта величина составляет 74%). По показаниям антипролиферативной активности в 2006 г. для испытаний in vivo были выбраны следующие нитрозильные комплексы железа: сульфидный (92% ТРО), комплекс с имидазол-2-илом (87% ТРО) и комплекс с бензтиазол-2-илом (88% ТРО). Соединения проявили статистически значимый противоопухолевый эффект (70-90% ТРО) на перевиваемых опухолях мышей – гибридов первого поколения BDF1 (C57Bl/6 x DBA/2) и DBA/2 (массой 18-25 гр.), входящих в число обязательных моделей опухолей животных, которые используются при отборе новых противоопухолевых веществ. Проведенные исследования - абсолютно приоритетны и не имеют аналогов в мире. Способы синтеза и противоопухолевые свойства отобранных соединений запатентованы. Планируется проведение следующего этапа предклинических испытаний как уже запатентованных, так и новых NO- соединений с целью получения и регистрации на их основе противоопухолевых препаратов нового поколения для российских и мировых фармацевтических компаний и клиник.


Работа выполнена при финансовой поддержке Программы Президиума РАН “Фундаментальные науки – медицине”.


^ СОЗДАНИЕ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ АНТИВИРУСНЫХ ПЕПТИДНЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ГЛИПРОЛИНОВ




Н.Ф. Мясоедов1), Ф.И. Ершов2), М.В. Мезенцева2), И.М.Сургучева2), Л.А. Андреева1),
В.Э. Щербенко2).

1)Институт молекулярной генетики РАН, Москва
2)ГУ научно-исследовательский институт эпидемиологии и
микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва



Изучение иммунотропных свойств новых отечественных лекарственных препаратов – глипролинов, синтезированных в Институте молекулярной генетики РАН, является крайне перспективным. Ранее, исследования, проведенные в рамках данного проекта, выявили наличие интерферон-индуцирующих, противовирусных и цитокин-модулирующих свойств у препарата Селанк и 10 пептидов семейства глипролинов и их фрагментов, которые обладают психо-, нейро- и иммунотропной активностями, а также проявляют выраженные антивирусные свойства в отношении возбудителей наиболее распространенных и плохо контролируемых вирусных инфекций: вируса гриппа типа А человека (штамм Н3N2) и птиц (штамм Н5N1), вируса простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2), цитомегаловируса, энцефаломиокардита (ЭМС) мышей.

Главной целью исследования являлось изучение механизмов, определяющих иммунотропные свойства 15 пептидов глипролинов и расширение их клинических показаний к применению. В исследованиях in vitro показано, что практически все изученные пептиды обладают выраженной противовирусной активностью.

Использование в работе широкого спектра клеточных линий и клеток крови, позволило определить механизмы действия пептидов на основные эффекторные клетки иммунной системы. В результате исследования выявлена способность препаратов коррегировать функциональный статус иммунокомпетентных клеток.

Сравнение эффективности пептидов с используемыми в медицинской практике антивирусными и иммуномодулирующими препаратами проведено в системах in vivo и in vitro. В отличие от большинства известных иммуномодулирующих и антивирусных средств, изучаемые пептиды не токсичны и обладают высокой эффективностью в малых дозах.
Иммунотропные свойства глипролинов оценены в экспериментах in vitro по их способности модулировать иммунный ответ в норме и при вирусных заболеваниях. Изучены изменения в экспрессии генов 11 цитокинов (ИФН-α, ИФН-γ, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-18 ФНО-α) в клеточных культурах человека и животных и субпопуляций иммуноцитов клеток крови человека методом ОТ-ПЦР и ИФА. Введение изучаемых пептидов в клетки крови человека способствовало подавлению экспрессии генов ИФН-α, ИЛ-1β, ИЛ-4, ИЛ-6, ФНО-α, и в то же время увеличению продукции мРНК ИФН-γ, ИЛ-2, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12. Исследование изменений экспрессии генов цитокинов под действием 15 пептидов глипролинов при энцефаломиокардите мышей показало, что 4 из них способствуют восстановлению цитокинового профиля клеток до нормальных значений. Именно эти препараты проявляли высокие антивирусные свойства, защищая 80-100% животных от вируса.

Выявленное действие изучаемых пептидов позволило оценить их иммунокоррегирующий и противовирусный эффект в отношении широкого спектра вирусных инфекций и предположить их иммуномодулирующие свойства при иммунодефицитах.