Десятая Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей

Вид материалаДокументы

Содержание


Получение мутаций, нарушающих регуляторную зону нейрогена leg-arista-wing complex у Drosophila melanogaster
Реакции ауторегуляции как форма стабилизации функционального состояния
Влияние бета-эндорфина и бета-эндорфинподобного пептида пентарфина на раннее развитие эмбрионов мыши
Возрастная динамика экспрессии серотонина
СЗО РАМН. Санкт-Петербург, Россия
Иммунитет при тяжелой сочетанной травме
Институт экспериментальной медицины РАМН, лаборатория иммуномодуляции отдела общей патологии и патофизиологии.
Китайская народная медицина – сокровищница мировой культуры
Алгоритм диагностики токсических аденом щитовидной железы
ФГУ СЗОМЦ Росздрава РФ. Санкт-Петербург, Россия
Применение бактериофагов для лечения сальмонеллеза голубей с целью снижения заболеваемости сальмонеллезом человека
Материалы и методы
Результаты исследования
Показатели состояния сосудистой стенки у мужчин в возрасте до 55 лет
Подобный материал:
1   ...   37   38   39   40   41   42   43   44   45

Получение мутаций, нарушающих регуляторную зону нейрогена leg-arista-wing complex у Drosophila melanogaster

Р.О. Черезов, студ., Е.А. Модестова, н.с., О.Б. Симонова, с.н.с.

Московский педагогический государственный университет,

Биолого-химический факультет, Кафедра сельского хозяйства. Институт биологии гена РАН, Лаборатория нейрогенетики и генетики развития. Институт биологии развития им. Кольцова РАН, Лаборатория молекулярной биологии развития. Москва, Россия


Нейроген lawc является транс-регуляторным. Мутации в нем обладают широким плейотропным эффектом, включающим гомеозисную трансформацию дистальных сегментов аристы (органа обоняния) в соответствующие элементы тарзуса (лапки).

Установлено, что lawc участвует в нейрогенезе, органогенезе и эмбриогенезе дрозофилы. Анализа компьютерной базы данных, содержащей сиквенс генома дрозофилы, показал, что часть клонированной последовательности гена lawc лежит на расстоянии примерно 10 т.п.н. от открытой рамки считывания фактора базовой транскрипции TBP related factor 2 (trf2), принадлежащему семейству генов TATA-box Binding Protein (TBP) и гомологичного гену человека.

Регуляторная зона гена lawc занимает около 10 т.п.н и также представляет собой уникальную модель для исследования функционирования подобных зон. На данный момент эта зона гена lawc изучена мало. В частности не известны ее точные границы и механизмы функциональные свойства. Для исследования роли отдельных зон гена часто применяются делеции. В лаборатории нейрогенетики и генетики развития ИБГ РАН были разработаны две схемы скрещиваний для получения делеций в регуляторной зоне гена lawc. Делеции образуются вследствие способности фермента транспозазы вызывать хромосомные перестройки между двумя инсерциями P-элементов, находящимися в гомологичных хромосомах. В работе мы использовали 3 линии, содержащие различные инсерции в регуляторной зоне гена. Согласно разработанным схемам, делеции должны были образовываться между двумя соседними инсерциями в различных районах регуляторной зоны.

В результате проведения скрещиваний, соответствующих разработанным схемам, были получены 336 летальных линий, в 111 из которых произошла эксцизия одного из исходных P-элементов (маркированного w+) и произошли хромосомные перестройки в необходимом районе. Полученные результаты были подтверждены после дупликационного картирования и анализирующих скрещиваний.

Полученные линии анализируются с помощью блот-гибридизации по Саузерну.


Реакции ауторегуляции как форма стабилизации функционального состояния

при достижении цели

А.Н. Чернов, асп., Т.Г. Кузнецова, с.н.с.

Институт физиологии им. И.П.Павлова РАН,

Лаборатория физиологии ВНД. Санкт-Петербург, Россия


Влияние ауторегуляции на функциональное состояние организма при достижении цели, её значение в поведенческой активности и механизмы формирования изучены мало. На основе анализа поведенческих реакций, времени латентного периода и коэффициента продуктивности инструментальных реакций при использовании методики приближающейся с различной скоростью (250, 125, 50 и 15 мм/сек) цели проведено исследование реакции избегания у двух самок шимпанзе. Цель-приманка (лакомство) предъявлялась в убывающей последовательности в чередовании со скоростью 250 мм/с.

У одной самки величина латентного периода инструментальной реакции не превышала двух секунд с невыраженной тенденцией к нарастанию по мере снижения скорости приближения цели, продуктивность инструментальных реакций оставалась стабильной, хотя имелось незначительные повышение его величины к концу работы. Коэффициент корреляции между латентным периодом и продуктивностью деятельности был отрицателен и составил 0,39.

У другой самки снижение скорости вело к увеличению латентного периода. Так при движении цели со скоростями 250 мм/с и 125 мм/с его величина составляла 1,7 с, на скорости 50 мм/с - до 2,5 с и на скорости 15 мм/с - 4,7 с, при этом величина латентного периода отрицательно коррелировала продуктивностью деятельности (r = 0,8).

У детей дошкольного возраста (выборка 20 человек) были обнаружены сходные тенденции зависимости избегания (отвлечения внимания), носящего ауторегуляторной характер, от скорости приближения цели – по мере увеличения времени достижения цели количество отвлечений внимания увеличивалось.

Таким образом, установлено, что характер ауторегуляции определяется индивидуальными особенностями испытуемых и зависит от скорости и времени достижения цели. Ее интенсивность нарастает по мере снижения скорости приближения и увеличения времени достижения цели. Ауторегуляция функционального состояния происходит путём увеличения продолжительности отсрочки начала инструментальной деятельности при увеличении временного интервала, в который происходит удовлетворение базисной потребности в достижении цели, причём необходимость в ауторегуляции тем выше, чем меньше продуктивность такой деятельности.


ВЛИЯНИЕ БЕТА-ЭНДОРФИНА И БЕТА-ЭНДОРФИНПОДОБНОГО ПЕПТИДА ПЕНТАРФИНА НА РАННЕЕ РАЗВИТИЕ ЭМБРИОНОВ МЫШИ IN VITRO

А.С. Чернов, н.с., Ю.А. Ковалицкая1, м.н.с. А.А. Смирнов, м.н.с.

Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, лаборатория роста тканей. Пущино.

1Филиал института биоорганической химии им. академиков

М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, лаборатория пептидных биорегуляторов. Пущино, Россия


Известно, что фолликулярные клетки, окружающие ооцит, секретируют бета-эндорфин, во время имплантации гормон секретируется клетками эндометрия. Показано, что на поверхности развивающихся зародышей мыши присутствуют опиоидные рецепторы, с которыми связывается бета-эндорфин. Однако данных о действии бета-эндорфина на ранее развитие эмбрионов пока недостаточно. В лаборатории пептидных биорегуляторов ФИБХ РАН были синтезированы бета-эндорфинподобные пептиды - иммунорфин (SLTCLVKGFY), который представляет собой фрагмент 364-373 тяжелой цепи IgG человека и его фрагмент 6-10 - пентарфин (VKGFY). Показано, что они являются селективными агонистами неопиоидного (не чувствительного к налоксону) рецептора бета-эндорфина, обнаруженного на клетках иммунной системы. Ранее было установлено, что иммунорфин (10-7М) стимулирует раннее развитие зародышей мышей in vitro.

В настоящей работе было изучено влияние бета-эндорфина, пентарфина, и налоксона (10-7М) на развитие 2-х и 8-ми клеточных зародышей мыши in vitro. Также параллельно было исследовано действие пептидов в присутствии налоксона (блокатора опиоидных рецепторов), чтобы установить механизм действия пептидов. Было показано, что бета-эндорфин и пентарфин не оказывают отрицательного действия на ранее развитие зародышей мыши на всех протестированных стадиях, в отличие от налоксона. В присутствие налоксона наблюдалось большое количество аномалий, и меньший процент зародышей достигал стадии бластоцисты. Пентарфин и бета-эндорфин увеличивали жизнеспособность 2-х и 8-ми клеточных эмбрионов, стимулировали деление бластомеров, образование и выклевывание бластоцист, по сравнению с контролем. При культивировании зародышей с пептидами и налоксоном, действие пептидов не ингибировалось. Это позволяет предположить, что бета-эндорфин и бета-эндорфинподобный пептид пентарфин стимулируют развитие 2-х и 8-ми клеточных зародышей мыши, связываясь с неопиоидным рецептором бета-эндорфина на их поверхности. Работа выполнена при поддержке Программ: «Молекулярная и клеточная биология», РФФИ № 05-04-48060.


ВОЗРАСТНАЯ ДИНАМИКА ЭКСПРЕССИИ СЕРОТОНИНА

В ТИМУСЕ ЧЕЛОВЕКА

Е.В. Чернышова, лаб.-иссл.

Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии

СЗО РАМН. Санкт-Петербург, Россия


Тимус вызывает большой интерес не только как центральный орган иммунной системы, но и как нейроэндокринный орган, продуцирующий широкий спектр биологически активных веществ. Целью нашей работы явилась верификация экспрессии серотонина в тимусе человека, и сопоставление уровней экспрессии на разных этапах онтогенеза человека.

Тимусы были получены при аутопсиях у людей четырех возрастных групп: внутриутробно умершие плоды, дети первого года жизни, пожилые люди, люди старческого возраста. Для морфологического изучения срезы окрашивали гематоксилин-эозином и толуидиновым синим. Верификацию в тимусе серотонина осуществляли иммуногистохимическим методом с применением соответствующих моноклональных антител (титр 1:150, Dako). Интенсивность реакции оценивалась морфометрически с применением системы компьютерного анализа микроскопических изображений Nikon и лицензионной программы Videotest Morphology 4.0.

Экспрессия серотонина обнаружена в стенках сосудов, тельцах Гассаля, тимоцитах, в эпителиальных клетках долек и в соединительнотканных клетках стромы тимуса. Оптическая плотность иммуноокрашенных клеток повышается с возрастом. Среднее значение оптической плотности в группе внутриутробно умерших плодов составляет 1.97  0.03, а в группе детей первого года жизни составляет 2.05  0.03, что достоверно выше (p<0.05). Наиболее высок этот показатель у людей старческого возраста (2.06  0.01). Наши данные указывают на то, что роль тимуса как эндокринной железы важна в период становления тимуса как лимфоидного органа, а также остается существенной в организме человека даже после значительного угасания иммунной функции тимуса. Принимая во внимание данные о положительных корреляционных связях между усилением экспрессии серотонина в эпителиальных клетках тимуса и усилением пролиферативной активности тимоцитов в корковом веществе тимуса можно говорить о том, что эндогенный серотонин вовлечен в поддержание функций иммунной системы у людей старшего возраста на фоне масштабной инволюции органа.


ИММУНИТЕТ ПРИ ТЯЖЕЛОЙ СОЧЕТАННОЙ ТРАВМЕ

О.Д. Чесноков, асп.

Санкт-Петербургский государственный университет,

Медицинский факультет, Кафедра патологии

Институт экспериментальной медицины РАМН, лаборатория иммуномодуляции отдела общей патологии и патофизиологии.

Санкт-Петербург, Россия


Известно, что тяжелая сочетанная травма сопровождается выраженным стрессом и вторичным иммунодефицитом, что проявляется разнообразными осложнениями гнойно-септического характера. Однако литературные данные о патогенезе этого явления разноречивы. Полагают, что на ранних этапах посттравматического периода имеется гиперпродукция «классических» провоспалительных цитокинов острофазного ответа (интерлейкин-I, TNF-б), а в динамике происходит смена спектра цитокинов с провоспалительного на противовоспалительный (Останин А.А. с соавт., 2002). Возникает процесс, приводящий к дисбалансу цитокинового спектра, что в дальнейшем усиливает иммуносупрессию и приводит к указанным выше осложнениям гнойно-септического характера (Козлов В.К., 2006). Решение проблем профилактики указанных осложнений с помощью иммунокоррекции требует специальных исследований. В задачи настоящего исследования входит изучение интенсивности продукции «лимфоцит-активирующего фактора» (ЛАФ) – интерлейкина-I и TNF-бета – в моноцитах периферической крови у лиц с тяжелой сочетанной травмой и у лиц с тяжелой острой кровопотерей. В эксперименте на мышах изучается реакция бласт-трансформации лимфоцитов в ответ на стимуляцию цитокинами.

Предварительные результаты исследований показывают, что в первом периоде травматической болезни происходит усиление продукции ЛАФ с дальнейшим ее снижением. Избыточная генерализованная продукция цитокинов приводит к развитию токсического шока. В результате возникает задержка реституции нормального иммунологического статуса больных с тяжелой сочетанной травмой и кровопотерей, порождая тяжелые осложнения и раннюю летальность.

Полученные данные показывают перспективность исследований в этом направлении в целях разработки эффективных методов иммунокоррекции при тяжелой сочетанной травме и при острой кровопотере.


КИТАЙСКАЯ НАРОДНАЯ МЕДИЦИНА – СОКРОВИЩНИЦА МИРОВОЙ КУЛЬТУРЫ

Чжао Веньлун, студ.

Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия. Санкт-Петербургский государственный университет, Медицинский факультет, Кафедра патологии.

Санкт-Петербург, Россия

Китайская народная медицина – один из главных идентификаторов китайской нации. Хуан Ди − первый император Китая и автор древнейшей книги по китайской медицине «Хуан Ди Нэй Цзин» (500–300 гг. до нашей эры), столетиями служившей основой образования врачей. Во II в. нашей эры знаменитый врач Хуа То первым применил общий наркоз при хирургических операциях. Методики китайского иглоукалывания и прижигания, известные уже в каменном веке, до настоящего времени играют важную роль в лечении заболеваний. Представления древнекитайских врачей о патофизиологии болезней основаны на теории противоречивого динамического равновесия комплементарных начал «инь» и «ян», отождествлявшихся с водой и огнём. «Инь» – холодное, тусклое, направленное вниз. «Ян» – горячее, светлое, направленное вверх. В норме «инь» и «ян» находятся в гармонии. Заболевание возникает в результате нарушения их равновесия. "Инь" рассматривается как женское пассивное, а "ян" – как мужское активное начало. Медицина Китая признает роль условий обитания в развитии болезней и тесно связана с эколого-гигиеническим учением Фен-Шуй. Так, жена живёт в комнате на севере дома, где нет солнца. Муж – в южной, светлой комнате, дети – в центральной. Рядом с женской комнатой – озеро, а рядом с мужской – гора. Это содействует профилактике болезней. Врачи Древнего Китая насчитывали 5 регуляторных центров тела: "сердце" или "разум" (sin), "легкие" (fei), "печень" (gan), "селезенка" (pi), "почки" (shen). Сознательная регуляция связана с sin, автоматическая – с fei; печени приписывают регуляцию эмоций, селезенке отводят ключевую роль в управлении метаболизмом, а почкам – в депонировании веществ. Считается, что у человека существует 7 эмоций (счастье, гнев, беспокойство, печаль, огорчение, страх и удивление), и избыток каждой бывает болезнетворен. Как лекарства используют янтарь (седативное); персиковые косточки и шафран (для активации кровообращения); китайскую эфедру (для потоотделения), и женьшень (кардио- и иммуностимулятор). Нелекарственные методы представлены массажем, Кунфу и медицинской кухней. Медицина Китая в древности оказала решающее влияние на формирование медицины Индии, Японии, Кореи и Арабского Востока. Это великая сокровищница, которая способствовала расцвету китайской нации.


АЛГОРИТМ ДИАГНОСТИКИ ТОКСИЧЕСКИХ АДЕНОМ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

БЕЗ ПРИМЕНЕНИЯ СЦИНТИГРАФИИ

И.К. Чинчук, асп, Н.И. Тимофеева, асп, А.А Семенов, кл. орд,

Р.А Черников, врач, И.В. Слепцов, врач

Санкт-Петербургский государственный университет,

Медицинский факультет, Кафедра хирургии.

ФГУ СЗОМЦ Росздрава РФ. Санкт-Петербург, Россия


Основным методом диагностики токсических аденом (ТА) является сцинтиграфия щитовидной железы (СЩЖ). Метод является дорогостоящим, оказывает лучевую нагрузку на пациента, не всегда доступен, противопоказан при беременности. Нами предложен комплексный диагностический подход с использованием УЗИ ЩЖ в В-режиме с допплеровским исследованием кровотока, в режиме цветового допплеровского картирования (ЦДК) и энергетического допплеровского картирования (ЭДК) в сочетании с определением тиреоидного статуса и атнтител к рецепторам тиреотропного гормона (рТТГ). Цель работы: Изучить диагностическую значимость комплексного обследования больного с ТА. Материал и методы: Проведено обследование и хирургическое лечение 32 больных с ТА ЩЖ. Наличие ТА подтверждали с помощью СЩЖ с Тс99.Проводили определение антител к рТТГ с целью дифференциальной диагностики между ТА и диффузным токсическим зобом. УЗИ ЩЖ проводили на ультразвуковой установке Vivid 3 General Electric с использованием линейного датчика с частотой 10 МГц в В-режиме, режиме ЦДК и ЭДК. Проводили ультразвуковое допплеровское сканирование верхних щитовидных артерий с определением пиковой систолической скорости кровотока на стороне узла (Vps-1), и на контрлатеральной стороне (Vps-2), пиковой диастолической скорости кровотока (Ved-1) и (Ved-2) соответственно, усредненной скорости (ТАР). Рассчитывали пульсационный индекс (PI) и индекс резистивности (RI). Результаты: Vps-1 была увеличена до 34,5 + 4,95см/с, Vps-2 до 23,7+ 8,45см/с относительно нормы (12,9+3,6 см/с), причем Vps-1 была выше чем Vps-2 (p-level 0,029). Ved-1 у пациентов была повышена относительно нормы (6,0+1,3 см/с) 12,4+1,85 см/с, и достоверно отличалась от Ved-2 с контрлатеральной стороны (p-level 0,027). PI был повышен с обеих сторон. RI сохранился в пределах нормы (0,53+/- 0,06). У 100% пациентов выявлен смешаный тип васкуляризации узла (III тип), которая достоверно коррелировала с повышенным накоплением РФП в исследуемом узле.

Выводы: комплексное дооперационное обследование позволяет установить диагноз ТА ЩЖ без использования СЩЖ.


ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИОФАГОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА ГОЛУБЕЙ С ЦЕЛЬЮ СНИЖЕНИЯ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗОМ ЧЕЛОВЕКА

И.В. Чиркова, асп.

Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии, Кафедра клинической диагностики и болезней молодняка. Москва. Россия


Введение: Сальмонеллез – одна из наиболее распространенных острых кишечных у людей. Самый частый возбудитель сальмонеллеза – Salmonella  typhimurium, переносчиками которой являются синантропные птицы, особенно голуби. С целью снижения заболеваемости целесообразна разработка средств борьбы с сальмонеллезом птиц, осложненным бактерионосительством и антибиотикорезистентностью возбудителей. Одним из таких средств может являться применение безвредных и литически активных бактериофагов.

Материалы и методы: Нами выделено 10 изолятов бактериофагов к S. typhimurium из пометных вод и фекалий голубей по методу обогащения Адамса. Были изучены их морфология и литическая активность. Из числа наиболее активных фагов с литической активностью по методу Аппельмана 10-8, по методу агаровых слоев Грациа 2,0×109 и 1,0×108 приготовлен экспериментальный фаговый препарат для профилактики и лечения сальмонеллеза голубей. При испытании на лабораторных животных оценивали клинические проявления заболевания, выживаемость и результаты бактериологических исследований.

Результаты исследования: При введении 0,5 см3 препарата 10 белым лабораторным мышам массой 14-16 г., предварительно зараженных максимально вирулентным штаммом S. typhimurium в дозе 10 тысяч микробных клеток, выживаемость составила 100%, признаков заболевания не отмечалось. В контрольной группе (n=10) все животные погибли, при аутопсии из паренхиматозных органов была выделена S. typhimurium.

Испытание фага проводили на 30 лабораторных голубях 3-4-месячного возраста с последующим заражением вирулентными изолятами S. typhimurium. Выживаемость в группе из 10 голубей, индивидуально выпаиваемых фагом в дозе 0,5 см3, составила 100%, в группе из 10 голубей, которым препарат добавляли в воду по 10 мл на 1 выпаивание - 90%, при выживаемости 10% в контрольной группе.

Терапевтическая эффективность препарата испытана на трех голубятнях г. Москвы, с заболеваемостью голубей сальмонеллезом 70% при летальности до начала лечения 20%. Через 14 суток после применения препарата при бактериологическом анализе смывов из клоаки у 20% голубей, выборочно исследованных на голубятнях, бактерии рода Salmonella  не выделялись. Случаи заболеваемости и гибели голубей не регистрировались.

Выводы: Бактериофаги S. typhimurium могут использоваться в качестве лечебно-профилактического средства для борьбы с сальмонеллезом синантропных птиц и, таким образом, снижать вероятность заражения сальмонеллезом человека.


ПОКАЗАТЕЛИ СОСТОЯНИЯ СОСУДИСТОЙ СТЕНКИ У МУЖЧИН В ВОЗРАСТЕ ДО 55 ЛЕТ

С РАЗЛИЧНЫМИ ФАКТОРАМИ РИСКА

СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Н.Н. Чиркова, асп.

Российский государственный медицинский университет, Лечебный факультет, Кафедра госпитальной терапии №2. Москва, Россия

Основной целью нашего исследование было изучение зависимости толщины артериальной стенки и скорости пульсовой волны у мужчин с артериальной гипертензией в возрасте до 55 лет от наличия различных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний и ассоциированных клинических состояний, таких как ИБС.

Методы: обследованные 57 мужчин в возрасте от 36 до 54 лет были разделены на 2 группы: 35 пациентов с артериальной гипертензией, 12 пациентов с артериальной гипертензией и ИБС. Всем пациентам проводилось измерение окружности талии и бедер (ОТ и ОБ), роста, массы тела, измерение артериального давления, вычислялся индекс массы тела (ИМТ в кг/м2). Всем пациентам определялся уровень липидов крови. При ультразвуковом исследовании сосудов измерялась толщина комплекса интима-медиа общей сонной артерии (тКИМ ОСА) и общей бедренной артерии (ОБА), каротидно-феморальная скорость пульсовой волны (СПВ).

Результаты. У мужчин с артериальной гипертензией и абдоминальным ожирением (АО, ОТ>94 см) выявлено достоверное увеличение тКИМ ОСА (0,80±0,16 против 0,97±0,15 мм, р=0,01) и СПВ (8,87±3,7 против 7,3±1,4 м/с, р=0,008) по сравнению с пациентами без АО. Различия тКИМ ОСА в группах с ИМТ³30 кг/м2 были более значимы, чем тКИМ ОБА (р=0,02 и р=0,05). У курящих пациентов отмечалось значимое повышение жесткости сосудистой стенки (СПВ 9,43±2,99 против 6,72±0,85 м/с, р=0,01). Положительная корреляционная связь наблюдалась между СПВ и ОТ, ИМТ.

В группе пациентов с артериальной гипертензией и ИБС наиболее существенное влияние на показатели тКИМ ОСА и СПВ и оказывало наличие абдоминального ожирения (р=0,003 и р=0,008). Показатели СПВ достоверно выше у курящих, чем у некурящих (11,64±1,18 против 8,6±1,38 м/с, р=0,001), так и значения тКИМ ОСА (1,33±0,05 против 0,88±0,09 мм, р=0,02).

Выводы: у мужчин в возрасте до 55 лет с артериальной гипертензией наличие абдоминального ожирения, курения ассоциировано с повышенными значениями тКИМ ОСА, СПВ, в меньшей степени тКИМ ОБА. У мужчин с артериальной гипертензией и ИБС наличие этих факторов риска также ассоциировано с повышенными значениями тКИМ ОСА и СПВ, что позволяет считать эти показатели наиболее значимыми в оценке состояния сосудистой стенки.