Вестник белорусской государственной сельскохозяйственной академии №2 2010 животноводство и ветеринарная медицина

Вид материалаДокументы
Содержание лейкоцитов и лейкограмма в крови подопытных животных.
Воспроизводительная способность подопытных животных.
Подобный материал:
1   2   3   4   5   6   7   8   9


Гематокрит – часть объема крови, приходящаяся на долю эритроцитов. Гематологический анализатор определяет гематокрит с точностью до 1% из-за невозможности полного удаления плазмы между клетками. Величина гематокрита у подопытных животных изменялась незначительно.

Содержание гемоглобина в крови нетелей в последние два месяца стельности и в день отела было выше, чем в послеродовой период. Максимальным оно было за 7–4 дней до отела. В это время у животных первой группы величина его была существенно больше, чем на 11–13, 24–27 и 40–45-й дни после отела (Р<0,01). Существенным было различие за 7–4 дней до отела и между группами: выше содержалось гемоглобина в крови у животных 1-ой группы (Р<0,01). В день отела различия между группами отсутствовали.

Повышение уровня гемоглобина в крови в самом конце беременности, очевидно, происходит вследствие начала дегенеративных изменений в плаценте. Среднее содержание гемоглобина в эритроците постепенно увеличивалось до 11–13-го дня послеродового периода у всех подопытных животных. Однако значения показателя варьировали в пределах 15,3–17,1 пг, что свидетельствует о не высоком содержании гемоглобина в нормальном по объему эритроците и, возможно, о слабой степени гипохромии, которая считается истинным показателем недостатка железа в организме.

Среднеклеточная концентрация гемоглобина в эритроците увеличивалась к моменту отела, а у животных 2-ой группы – к 40–45-му дню после отела. Различия между группами были существенными за 7–4 дней до отела (Р<0,01), на 11–13 и 40–45-й день после отела (Р<0,05). До родов ниже этот показатель был у животных 2-ой группы, а после отела – у животных 1-ой группы, что может быть связано с отрицательным воздействием антибиотических веществ, применяемых ими в первые дни после отела чаще, чем животными 2-ой группы.

Корреляционный анализ показал, что содержание эритроцитов и гемоглобина у подопытных животных в течение последних двух месяцев стельности существенно не изменялось, но среднеклеточный гемоглобин увеличивался (r= -0,27; P<0,01).

В этот период с увеличением количества эритроцитов средний объем их уменьшался (r= -0,39; P<0,01); уменьшалась и абсолютная ширина распределения эритроцитов (r= -0,32; P<0,01), а относительный показатель их увеличивался (r= 0,53; P<0,01). Увеличению эритроцитов сопутствовало увеличение гематокрита (r= 0,74; P<0,01), количества тромбоцитов (r= 0,27; P<0,01) и концентрации гемоглобина в крови (r= 0,73; P<0,01), но среднеклеточный гемоглобин уменьшался (r= -0,32; P<0,01).

Концентрация гемоглобина не зависела от среднего объема эритроцитов, но с объемом эритроцитов среднеклеточный гемоглобин коррелировал положительно (r= 0,75; P<0,01), а среднеклеточная концентрация гемоглобина отрицательно (r= -0,27; P<0,01).

В послеродовой период средний объем эритроцитов и гематокрит уменьшались (r= -0,24; P<0,01 и r= -0,15; P<0,05). Наблюдалось также снижение среднеклеточного гемоглобина (r= -0,17; P<0,05) и абсолютной ширины распределения эритроцитов (r= -0,22; P<0,01).

С увеличением числа эритроцитов относительная ширина их распределения, гематокрит и концентрация гемоглобина в крови увеличивались (r= 0,45, 0,76 и 0,79; P<0,01).

Средний объем эритроцитов проявлял прямую корреляционную связь с абсолютной шириной распределения эритроцитов, гематокритом, средним объемом тромбоцитов, шириной распределения тромбоцитов, процентом больших тромбоцитов, концентрацией гемоглобина в крови и среднеклеточным гемоглобином (r= 0,89, 0,47, 0,28, 0,34, 0,48, 0,32 и 0,74; P<0,01). Отрицательная связь объема эритроцитов была с относительной шириной их распределения и среднеклеточной концентрацией гемоглобина (r= -0,22 и -0,38; P<0,01).

Концентрация тромбоцитов до родов не изменялась, однако процент больших клеток уменьшался (r= 0,30 P<0,01). Меньше содержалось тромбоцитов в день отела (217,2 и 200,3 тыс./мм3), а наибольшее количество их было на 24–27-й день после отела (269,7 и 231,1 тыс./мм3 соответственно у животных 1-ой и 2-ой групп). Однако существенное различие было лишь у животных 1-ой группы. Более высокое содержание тромбоцитов у них наблюдалось во все периоды исследования, но достоверным различие между группами было только за 2 мес. до отела (P<0,05).

В послеродовой период отмечалось уменьшение среднего объема тромбоцитов (r= -0,16; P<0,05), а другие изменения не были существенными. Проявлялась положительная корреляция концентрации тромбоцитов со средним и компактным объемом их, а также с процентом больших клеток (r= 0,18, 0,50 и 0,16; P<0,05–0,01).

Содержание лейкоцитов в крови подопытных животных представлено в табл. 3.

В конце беременности число лейкоцитов увеличивалось (r= -0,26; P<0,05). Максимальное содержание их было в день отела – 8,8–8,7·109/л. В это время у животных 1-ой группы их было существенно больше, чем за 1–2 мес. и за 7–4 дней до отела (P<0,05 и P<0,01), а у животных 2-ой – больше, чем за 7–4 дней до отела (P<0,01).


Таблица 3. Содержание лейкоцитов и лейкограмма в крови подопытных животных.

Показатели

n

Период исследования крови

За 1– 2 мес.

до отела

За 7–4 дней

до отела

В день отела

11-13 день

после отела

24-27 день

после отела

40-45 день

после отела

Количество лейкоцитов, 109

1





2

7,8 ± 0,1

7,8 ± 0,1

7,9 ± 0,1

7,9 ± 0,1

8,2 ± 0,1

8,2 ± 0,1

8,2 ± 0,2

8,1 ± 0,1

8,8 ± 0,1

9,0 ± 0,1

8,6 ± 0,2

8,7 ± 0,2

8,3 ± 0,1

7,9 ± 0,1

8,8 ± 0,2

8,6 ± 0,2

7,7 ± 0,1

7,6 ± 0,1

7,9 ± 0,2

8,1 ± 0,1

7,4 ± 0,1

7,4 ± 0,1

7,4 ± 0,1

7,8 ± 0,1

Базофилы, %

1





2

0,04 ± 0,03

0

0,09 ± 0,08

0,1 ± 0,05

0,04 ± 0,03

0,07 ± 0,06

0

0,04 ± 0,03

0,12 ± 0,06

0,07 ± 0,06

0,20 ± 0,1

0,10 ± 0,05

0,12 ±0,06

0,13 ± 0,09

0,09 ± 0,08

0,10 ± 0,05

0,15 ± 0,07

0,13 ± 0,09

0,20 ± 0,1

0,1 ± 0,05

0,04 ± 0,03

0

0,09 ± 0,08

0

Эозинофилы, %

1





2

4,4 ± 0,2

4,3 ± 0,3

4,6 ± 0,3

4,0 ± 0,2

3,9 ± 0,2

3,9 ± 0,2

3,8 ± 0,3

3,8 ± 0,2

4,1± 0,3

3,7 ± 0,2

4,6 ± 0,5

3,9 ± 0,2

4,0 ± 0,2

4,1 ± 0,3

3,9 ± 0,3

4,1 ± 0,2

6,4 ± 0,4

6,5 ± 0,6

6,3 ± 0,4

7,3 ± 0,4

6,8 ± 0,4

6,6 ± 0,6

7,1 ± 0,4

8,3 ± 0,3

Нейтрофилы, %

Миелоциты, %

1





2

0,04 ± 0,03

0,07 ± 0,06

0

0,04 ± 0,03

0

0

0

0,04 ± 0,03

0,04 ± 0,03

0

0,09 ± 0,08

0,1 ± 0,05

0,04 ± 0,03

0,07 ± 0,06

0

0,04 ± 0,03

0

0

0

0,1 ± 0,05

0

0

0

0,04 ± 0,03

Юные, %

1





2

0,4 ± 0,1

0,4 ± 0,2

0,4 ± 0,1

0,5 ± 0,2

0,3 ± 0,1

0,4 ± 0,2

0,3 ± 0,1

0,4 ± 0,1

0,3 ± 0,1

0,3 ± 0,1

0,3 ± 0,2

0,7 ± 0,2

0,3 ± 0,1

0,4 ± 0,2

0,2 ± 0,1

0,4 ± 0,1

0,15 ± 0,07

0,2 ± 0,1

0,09 ± 0,08

0,4 ± 0,1

0,12 ± 0,06

0,07 ± 0,06

0,2 ± 0,1

0,4 ± 0,2

Палочкоядерные, %

1





2

4,1 ± 0,2

4,2 ± 0,2

4,0 ± 0,2

4,4 ± 0,2

4,5 ± 0,2

4,9 ± 0,3

4,0 ± 0,2

3,3 ± 0,2

5,2 ± 0,3

5,4 ± 0,4

4,8 ± 0,4

5,8 ± 0,3

3,8 ± 0,2

4,1 ± 0,2

3,4 ± 0,2

3,0 ± 0,1

3,6 ± 0,2

3,5 ± 0,3

3,6 ± 0,3

3,3 ± 0,2

3,4 ± 0,1

3,4 ± 0,2

3,4 ± 0,2

3,2 ± 0,2

Сегментоядерные, %

1





2

27,9 ± 0,6

28,5 ± 0,7

27,2 ± 0,9

27,5 ± 0,9

33,6 ± 0,7

33,5 ± 0,8

33,6 ± 1,3

34,1 ± 0,8

34,8 ± 0,9

35,5 ± 0,8

34,0 ± 1,7

35,0 ± 0,8

28,2 ± 0,7

27,7 ± 0,9

28,8 ± 1,2

28,2 ± 0,7

24,5 ± 0,6

24,9 ± 0,9

23,9 ± 0,8

24,1 ± 0,8

23,7 ± 0,7

23,5 ± 0,7

23,9 ± 1,4

23,8 ± 0,7

Лимфоциты, %

1





2

59,5 ± 0,6

59,1 ± 0,7

60,1 ± 1,1

59,5 ± 1,1

54,2 ± 0,8

53,7 ± 0,8

55,0 ± 1,4

54,8 ± 1,0

52,0 ± 1,0

51,7 ± 1,2

52,5 ± 1,7

50,9 ± 1,0

59,4 ± 0,8

59,3 ± 0,8

59,5 ± 1,6

60,0 ± 0,8

61,3 ± 0,7

60,8 ± 1,1

62,1 ± 0,6

61,0 ± 0,8

62,1 ± 0,7

62,4 ± 0,7

61,7 ± 1,4

60,1 ± 0,5

Моноциты, %

1





2

3,5 ± 0,2

3,5 ± 0,2

3,6 ± 0,3

4,0 ± 0,2

3,4 ± 0,2

3,5 ± 0,2

3,3 ± 0,3

3,5 ± 0,2

3,4 ± 0,1

3,3 ± 0,2

3,5 ± 0,2

3,5 ± 0,2

4,2 ± 0,2

4,2 ± 0,3

4,1 ± 0,3

4,2 ± 0,2

3,9 ± 0,2

4,0 ± 0,3

3,8 ± 0,3

3,8 ± 0,2

3,8 ± 0,2

4,0 ± 0,2

3,6 ± 0,3

4,1 ± 0,2


Особенно заметно было увеличение сегментоядерных нейтрофилов и в целом нейтрофилов (r= -0,51 P<0,01 и r= -0,44 P<0,01). Количество палочкоядерных нейтрофилов и лимфоцитов уменьшалось (r= 0,21; P<0,05 и r = 0,37; P<0,01). Взаимосвязь относительного содержания лимфоцитов и нейтрофилов (в т.ч. сегментоядерных нейтрофилов) отрицательная, высоко достоверная (r= -0,96 и -0,91; P<0,01). Увеличению миелоцитов сопутствовало увеличение юных нейтрофилов (r= 0,43; P<0,01 и r= 0,22; P<0,05). А с увеличением юных нейтрофилов увеличивался и процент палочкоядерных (r= 0,31 P<0,01), а также базофилов и эозинофилов (r= 0,35 P<0,01 и r= 0,23 P<0,05). Различия между группами по общему числу лейкоцитов и их отдельным формам были не существенными.

В послеродовой период, напротив, отмечалось снижение лейкоцитов (r= -0,54 P<0,01), причем наиболее существенное палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов (r= -0,47 и -0,69 P<0,01), при одновременном увеличении эозинофилов и лимфоцитов (r= 0,64 и 0,56; P<0,01). Максимального значения содержание эозинофилов достигало к 40–45 дням. У первотелок 2-й группы оно составило 8,3±0,3%. Снижение содержания лейкоцитов в основном было обусловлено снижением сегментоядерных нейтрофилов (r= 0,47; P<0,01). Увеличение содержания эозинофилов сопровождалось снижением всех форм нейтрофилов (r= -0,51; P<0,01) и в наибольшей мере палочкоядерных и сегментоядерных (r= -0,32 и -0,47; P<0,01). Но наиболее выраженное снижение нейтрофилов (в т.ч. палочкоядерных и сегментоядерных) было связано с увеличением лимфоцитов (r= -0,93, -0,90 и -0,57; P<0,01). Очевидно, в этот период в связи с бактериальной обсемененностью и развитием воспалительного процесса в матке ярко проявились реакции клеточного и гуморального иммунитета.

Показатели воспроизводительной способности первотелок после выздоровления приведены в табл. 4.


Таблица 4. Воспроизводительная способность подопытных животных.


Показатели

1 группа

2 группа

в среднем





Осеменено коров, всего

26

15

11

26

в том числе плодотворно: n

26

15

11

21

%

100

100

100

80,8

Оплодотворилось после 1-го осеменения, %

80,7

80,0

81,8

47,6

Интервал от отела (дней) до: первого осеменения

75,1 ± 6,9

53,3  3,6

104,9  10,0

101,7  14,5

оплодотворения

85,9 ± 7,3

61,0  5,3

119,9  7,9

159,8  18,9

Индекс осеменения

1,19 ± 0,08

1,20 ± 0,10

1,18 ± 0,10

1,95 ± 0,20


Первое осеменение подопытных животных было проведено в различные сроки. Наиболее коротким интервал до осеменения был у коров 1а группы – 53 дня. Такой показатель даже короче стандарта (65 дней). Животные 1б и 2-й групп были осеменены значительно позднее – через 105 и 102 дня, что связано прежде всего с более поздним восстановлением у них половой цикличности. После первого осеменения оплодотворилось 80,7% животных 1-й группы и 47,6% животных 2-й группы. Различие между 1а и 1б группами незначительное. Для оплодотворения всех животных 2-й группы потребовалось 1–4 осеменения, а 1-й группы – 1–2 осеменения. Индекс осеменения составил соответственно 1,95 и 1,19. Различие существенное (P<0,01).

Интервал от отела до оплодотворения у коров 1-й группы не превысил стандарта и на 73,9 дня оказался короче, чем у животных 2-й группы (Р<0,01). Но минимальным он был у животных 1а группы – 61 день. Различие по этому показателю с животными 1б группы существенное (Р<0,01). Это можно объяснить многократностью введения в матку большого объема тилозинокара животным 1б группы, что, как правило, задерживает проявление половой цикличности и в целом отрицательно влияет на репродуктивную способность животных.

Проведение корреляционного анализа гематологических показателей до отела и после отела и показателей воспроизводительной способности позволило выявить ряд существенных связей.

Интервал от отела до оплодотворения отрицательно коррелировал со среднеклеточной концентрацией гемоглоина до отела (r= -0,17 P<0,05) и в день отела (r= -0,30 P<0,01). В день отела и на 40–45-й день после отела компактный объем тромбоцитов также отрицательно коррелировал с интервалом до оплодотворения (r= -0,28 P<0,01 и r= -0,29 P<0,01). Отрицательная корреляция этого интервала проявлялась и с содержанием палочкоядерных нейтрофилов до отела (r= -0,26 Р<0,05).

Увеличение юных нейтрофилов после родов сопровождалось увеличением интервала от отела до оплодотворения и индекса осеменения (r=0,26 и 0,26 Р<0,01). Такой же характер связи этих показателей воспроизводительной способности проявлялся с содержанием юных нейтрофилов в день отела (r=0,40 Р<0,01 и 0,30 Р<0,05) и на 40–45 день после отела (r=0,39 и 0,49 Р<0,01). Связь интервала до оплодотворения с содержанием миелоцитов на 40–45 день после отела также была существенной (r=0,35 Р<0,05).

Иной характер связи проявляли интервал от отела до плодотворного осеменения и индекс осеменения с содержанием палочкоядерных за 7–4 дней до отела (r= -0,39 Р<0,01 и r = -0,29 Р<0,05) и сегментоядерных нейтрофилов на 40–45 день после отела (r = -0,29 и -0,28 Р<0,05).

Заключение

У первотелок с задержанием последа морфологические показатели крови и концентрация гемоглобина в конце стельности и после отела изменялись в пределах нормы. В конце стельности и в день отела гемоглобина содержалось больше, чем в послеродовой период. Максимальным содержание его было за 7–4 дней до отела. По мере приближения родов наблюдалось увеличение среднеклеточного гемоглобина (P<0,01) и числа лейкоцитов (P<0,05), особенно сегментоядерных нейтрофилов (P<0,01). Количество палочкоядерных нейтрофилов и лимфоцитов уменьшалось (P<0,05 и P<0,01). Концентрация тромбоцитов не изменялась, однако процент больших клеток также уменьшался (P<0,01). В послеродовой период, напротив, отмечалось снижение лейкоцитов (P<0,01), причем наиболее существенное – палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов (P<0,01), при одновременном увеличении эозинофилов и лимфоцитов (P<0,01). Средний объем эритроцитов и гематокрит уменьшались (P<0,01 и P<0,05). Снижались также среднеклеточный гемоглобин (P<0,05) и абсолютная ширина распределения эритроцитов (P<0,01).

Различия между группами по изученным показателям, как правило, не были существенными. Однако среднеклеточная концентрация гемоглобина в эритроците после отела ниже была у животных 1-ой группы, что может быть связано с более частым применением антибиотических веществ в первые дни после отела.

При консервативном способе лечения первотелок основные критерии плодовитости соответствовали стандарту. Наилучшие показатели достигнуты при использовании суппозиториев и комплекса антибиотических веществ (1а группа). Многократное применение тилозинокара для устранения осложнений хотя и обеспечивало высокий уровень оплодотворяемости после первого осеменения, но задерживало проявление половой цикличности и удлиняло период от отела до оплодотворения (1б группа). После мануального отделения последа срок до первого осеменения увеличивался, снижалась оплодотворяемость, удлинялся интервал от отела до оплодотворения.

Воспроизводительная способность животных проявляла тесную корреляционную связь с рядом изученных показателей крови. С увеличением среднеклеточной концентрации гемоглобина до отела интервал до оплодотворения уменьшался. Уменьшение интервала было связано также с увеличением компактного объема тромбоцитов и содержания сегментоядерных нейтрофилов на 40–45 день после отела. Увеличение юных нейтрофилов в послеродовой период и миелоцитов на 40–45 день после отела сопровождалось увеличением этого показателя и индекса осеменения.

Характер этих связей указывает на важность обеспечения матки до отела кислородом и интенсивности проявления клеточного иммунитета после отела для обеспечения метаболических процессов и структурных изменений в половых органах и последующего оплодотворения.


Литература


1. Бегунов, В.С. Эффективность различных препаратов при медикаментозном лечении задержания последа у коров / В.С. Бегунов // Исследования молодых ученых в решении проблем животноводства: сб. науч. тр. Междунар. науч.-практ. конф. молодых ученых и преподавателей сельскохозяйственных учебных заведений и научно-исследовательских учреждений. Витебск, 2001. С. 9.

2. Валюшкин, К.Д. Акушерско-гинекологическая диспансеризация коров и нетелей: учеб. пособие / К.Д. Валюшкин, А.Р. Камошенков. Смоленск, 2005. С. 56–58.

3. Валюшкин, К.Д. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных / К.Д. Валюшкин, Г.Ф. Медведев. Минск: Ураджай, 2001. С. 528–529.

4. Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных / И.М. Карпуть. Минск: Ураджай, 1986. 183 с.

5. Копытин, В.К. Основы повышения плодовитости коров / В.К. Копытин, В.С. Шипилов. Смоленск, 2004. С. 54.

6. Кудрявцев, А.А. Клиническая гематология животных / А.А. Кудрявцев, Л.А. Кудрявцева. М.: Колос, 1974. 399 с.

7. Медведев, Г.Ф. Совершенствование клинического (ректального) метода исследования воспроизводительных органов. Интенсиф. произв. мол. и говяд. // Сб. науч. тр. БСХА. 1985. Вып. 130. С. 56–60.

8. Методические указания по комбинированному лечению задержания последа у коров: рекомендации / Г.Ф. Медведев, Н.И. Гавриченко, В.С. Бегунов [и др.]. Молодечно: ОДО Евроконтакт, 2005. 12 с.

9. Романенко, Н.И. Физиолого-биохимический статус высокопродуктивных коров холмогорской породы / Н.И. Романенко [и др.] // Селекция сельскохозяйственных животных на устойчивость к болезням и повышение естественной резистентности / ВНИИплем. М., 1989. С. 113–120.

10. Bearden, H. Joe. Applied Animal Reproduction / H. Joe Bearden, John W. Fuquay // 3rd ed. 1992. 352 p.

11. Retained fetal membranes in large animals // The Merck Veterinary Manual. 2003. P. 74–79.

12. Mollo, A. The use of oxytocin for the reduction of cow placental retention, and subsequent endometritis / A. Mollo, M.C. Veronesi, F. Cairoli, F. Soldano // Anim. Reprod. Sci. 1997. Vol. 48. №1. P. 47–51.

13. Geoffrey, H. Veterinary Reproduction & Obstetrics / Geoffrey H. Arthur, David E. Noakes, Harold Pearson, Timothy J. Parkinson // Seventh Edition. W.B. Saunders Company Ltd. 1996. P. 291–301.

14. Arthurۥs Veterinary Reproduction and Obstetrics / Edited David E. Noakes, Timothy J. Parkinson, C.W. Gary. England. Eighth Edition. 2001. W.B. Saunders Comp. Ltd. 868 р. (Reprinted 2007)


УДК 636.22/.28:611:619:616-053.3