Особенности постнатального морфогенеза мышечной оболочки фундального отдела желудка белых крыс при длительном потреблении диспергированной пищи 03. 00. 25 гистология, цитология, клеточная биология

Вид материала

Автореферат диссертации

Содержание Содержание работы материал и методы исследования Результаты исследования и их обсуждение 2. Особенности постнатального морфогенеза мышечной оболочки желудка при питании диспергированной пищей 3. Сравнительная характеристика постнатального морфогенеза мышечной оболочки желудка при питании диспергированной и недиспергиро

Подобный материал:

• Морфометрические особенности постнатального развития околоушной слюнной железы крыс, 388.58kb.
• Морфофункциональная характеристика слизистой оболочки кишечника потомства самок крыс, 303.36kb.
• Цитологические особенности вторичных миелодисплазий при лимфомах 03. 00. 25 гистология,, 526.98kb.
• Структурно-функциональная характеристика нонапептидергической гипоталамо-гипофизарной, 343.48kb.
• Формирование конечного мозга крыс после нарушения эмбрионального развития, вызванного, 370.65kb.
• Закономерности дегенерации и адаптации сетчатки глаз при экспериментальных ретинопатиях,, 745.16kb.
• Экспериментальное обоснование применения нейропептидов в комплексной терапии острого, 259.86kb.
• Морфофункциональная характеристика пульпы зуба и оценка иммунного статуса при кариесе,, 552.48kb.
• Молекулярные механизмы апоптоза при окислительном стрессе 14. 00. 16 патологическая, 606.37kb.
• Лимфоидные органы и миокард в системе мать-плод при вибрации, воздействии кадмием, 640.36kb.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалом исследования послужили 204 самца беспородных белых крыс. На 21-е сутки после рождения животных произвольно разделяли на контрольную и две (I и II) опытные группы. Животных контрольной группы содержали в обычных условиях вивария на естественном для грызунов
корме, основу которого составляло цельное зерно пшеницы, а также
разрезанные на большие куски овощи. Животных I опытной группы с 21-х по 360-е сутки эксперимента кормили диспергированным кормом того же состава (измельченное на мельнице зерно, пропущенные через мясорубку овощи). Животные II опытной группы потребляли диспергированный корм до 120-х суток постнатального онтогенеза, после чего переводились до окончания эксперимента (360-е сутки онтогенеза) на естественный для
грызунов корм (корм животных контрольной группы). Кормление
осуществлялось два раза в сутки, при этом обеспечивался свободный доступ животных к корму и воде.

Для периодизации постнатального онтогенеза крыс использована
схема, предложенная В. И. Махинько и В. Н. Никитиным (1975). В возрасте 21-х (поздний молочный период), 45-ти (препубертатный период), 60-ти (препубертатный период), 120-ти (пубертатный период), 180-ти
(репродуктивный период), 270-ти (период возмужания), 360-ти (период
первой зрелости) суток животных контрольной и I опытной групп
взвешивали и декапитировали под эфирным наркозом. Декапитацию
животных II опытной группы, предварительно наркотизированных эфиром, проводили на 180-е, 270-е и 360-е сутки постнатального онтогенеза.

Объектом исследования послужил фундальный отдел желудка, участки которого фиксировали в 10% нейтральном формалине, затем обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заключали в парафин (Меркулов Г. А., 1969). Поперечные срезы толщиной 5-6 мкм изготавливали с помощью
санного микротома МПС-2, затем окрашивали гематоксилином и эозином (Елисеев В. Г., 1967). Окрашенные срезы заключали в бальзам.

Морфологические исследования включали: 1. Определение
абсолютной и относительной толщины продольного и циркулярного слоев, а также толщины мышечной оболочки в целом (мкм, %). 2. Определение
средних показателей площади продольного сечения ядер гладких миоцитов циркулярного и продольного слоев мышечной оболочки (мкм²), которые коррелируют с важнейшей интегративной характеристикой
морфофункционального состояния клеток – их средними объемами
(Автандилов Г. Г., 1992). 3. Определение количества ядер гладких миоцитов продольного и циркулярного слоев мышечной оболочки на стандартной площади среза (400 мкм² при увеличении ´1000), в ходе которого ядра
гладких миоцитов подсчитывали в 50 произвольно выбранных участках гладкой мышечной ткани (%). 4. Вычисление среднего показателя ядерно-цитоплазматического отношения гладких миоцитов (%). Поскольку прямое вычисление ядерно-цитоплазматического отношения для гладких миоцитов (ЯЦО_ГМ) мышечной оболочки желудка оказалось невозможным из-за
нечеткости границ цитоплазмы, для его определения использовали формулу: ЯЦО_ГМ = (NS₂/(S₁ - NS₂))´100%, где S₁ – стандартная площадь среза (400 мкм²), S₂ – средняя площадь сечения ядра гладкого миоцита, N – количество ядер гладких миоцитов на стандартной площади среза (S₁). 5. Установление средней скорости (V_ср.) прироста толщины продольного и циркулярного
слоев, а также мышечной оболочки в целом с помощью формулы: V_ср. =
(L₁-L₂)/T (мкм/сутки), где L₁ – средняя величина показателя в начальный
период времени, L₂ – средняя величина показателя в конечный период
времени, Т - период времени.

Описание, сравнительно-морфологический анализ и морфометрия структур проводились на постоянных микропрепаратах с помощью
бинокулярного микроскопа Axiostar plus («Carl Zeiss», Германия) при
увеличениях 10´10, 10´100. Для морфометрического исследования
применялась компьютерная видеотестсистема, включающая микроскоп
«Axiostar plus», цифровую фотокамеру Canon Power Shot G 5 («Canon»,
Германия) и компьютерную программу денситофотометрии «Месоs-С 1». При определении линейных размеров проводили не менее 50 измерений структур каждого животного, среднюю площадь исследуемой структуры
определяли по итогам измерения 500 структур у каждого из изученных
животных. Все возрастные группы были представлены в исследовании не менее пятью опытными и контрольными животными. Полученные
морфометрические данные подвергали статистической обработке с
определением критерия значимости (Т) по Стьюденту, уровень значимости был принят р<0,05 (Лакин Г. Ф., 1990). Изготовлено и изучено 500
постоянных гистологических препаратов, а также 25000 микрофотографий мышечной оболочки желудка. Результаты исследования запротоколированы, а также документированы таблицами, микрофотографиями, схемами.


РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ


1. Морфологическая характеристика постнатального развития

мышечной оболочки желудка в норме


Мышечная оболочка (МО) фундального отдела (ФО) желудка белых крыс характеризуется интенсивным (более чем трехкратным) утолщением в раннем постнатальном онтогенезе (рис. 1, 2): в период с 21-х по 180-е сутки постнатального онтогенеза ее толщина возрастает с 32,50±1,45 мкм до 104,21±1,32 мкм (р<0,05). Наиболее интенсивное разрастание гладкой
мышечной ткани МО происходит с 21-х по 60-е сутки (рис. 3), когда
толщина МО увеличивается более чем в два раза (р<0,05). Показатели
среднего прироста МО оказываются в этот период самыми высокими в
исследованном отрезке постнатального онтогенеза (р<0,05), составляя
0,47 мкм/сутки с 21-х по 45-е сутки и 1,54 мкм/сутки с 45-х по 60-е сутки (табл. 1). Со 120-х по 180-е сутки средняя скорость прироста МО снижается до 0,38 мкм/сутки (р<0,05). Рост гладкой мышечной ткани МО практически приостанавливается со 180-х по 360-е сутки постнатального онтогенеза (табл. 1), в течение которых средняя скорость прироста МО составляет
0,01-0,03 мкм/сутки, а толщина МО относительно стабилизируется (р>0,05).

На всем исследованном отрезке постнатального онтогенеза степень
развития циркулярного слоя МО желудка превышает (р<0,05) таковую
продольного слоя (табл. 2, 3). Более существенны различия между
циркулярным и продольным слоями в средней скорости прироста (рис. 4, 5), которая оказывается более высокой (р<0,05) для циркулярного слоя в раннем постнатальном онтогенезе (21-180 сутки), достигая максимума с 45-х по 60-е

сутки (1,30 мкм/сутки). Примечательно, что если в циркулярном слое
средняя скорость прироста становится минимальной со 180-х суток и
сохраняет стабильность в последующем, то в продольном слое это
происходит раньше (с 60-х суток по 360-е сутки). Более значительными (р<0,05) эти различия оказываются в позднем постнатальном онтогенезе (табл. 1, 2). Обращает внимание тот факт, что период наиболее интенсивного прироста гладкой мышечной ткани в циркулярном слое продолжается с 21-х по 180-е сутки, тогда как интенсивный прирост продольного слоя заканчивается к 60-м суткам (рис. 7, 8).



Рис. 1. Мышечная оболочка фундального отдела желудка (поперечный срез) 45- (а - 100; г - 1000), 180- (б - 100; д - 1000) и 360-суточных
(в - 100; е - 1000) животных контрольной группы. Окраска гематоксилином и эозином


В динамике значений ядерно-цитоплазматического отношения гладких миоцитов циркулярного слоя МО в постнатальном онтогенезе можно
выделить три этапа (рис. 13). На первом этапе (21-60 сутки) они достигают максимума (табл. 2), на втором этапе (120-180 сутки) значения ядерно-цитоплазматического отношения снижаются до минимума (8,46±1,13 %; 9,53±0,30 %) и на третьем (270-360 сутки) несколько возрастают (11,14±
0,43 %; 11,27±0,13 %). Следовательно, степень дифференцированности
гладких миоцитов циркулярного слоя (обратно пропорциональная значениям ядерно-цитоплазматического отношения) оказывается самой низкой (р<0,05) в период с 21-х по 60-е сутки. У 120- и 180-суточных животных этот
показатель достигает максимума (р<0,05) и несколько снижается в
последующем (270-360 сутки).

Указанные изменения степени дифференцированности гладких
миоцитов циркулярного слоя МО обусловлены увеличением площади
(и, следовательно, объема) ядер гладких миоцитов, но, в большей мере,
увеличением объема их цитоплазмы (рис. 11). Так, увеличение объема ядер (о котором судили на основании показателя их площади сечения)
происходит с 21-х по 60-е сутки (р<0,05), после чего показатель
относительно стабилизируется (табл. 2).