Geum.ru

Міністерство охорони здоров’я україни український центр наукової медичної інформації І патентно-ліцензійної роботи

Вид материалаДокументы

Содержание


Реєстр. № 300/31/09
Вчена рада УМСА( протокол № 5 від 19.11. 2008р.).
Подобный материал:
1   ...   70   71   72   73   74   75   76   77   ...   99

Реєстр. № 300/31/09




  1. Спосіб підготовки біоінженерних трансплантатів на основі аутологічних мезенхімальних стовбурових клітин
  2. Метою є підвищення ефективності направленої клітинної регенерації сполучних тканин з використанням біоінженерних трансплантатів на основі аутологічних мезенхімальних стовбурових клітин при певних патологіях.
  3. Спосіб ґрунтується на отриманні зависі аутологічних клітин крові у хворих шляхом забору крові з кубітальной вени системою Vacutainer з гепарином в об'ємі 4-5 мл. Можливо стимульований вихід клітин-попередників гемопоезу в периферійну кров шляхом введення гранулоцитарно-макрофагального колонійстимулюючого фактора – філграстима. Філграстим вводиться підшкірно 1 раз на добу по 1,0 Мо (10г)/кг протягом 3-6 днів поспіль. Рекомендується проводити три лейкаферези поспіль на 5-й, 6-й и 7-й дні. Кров відстоюють при кімнатній температурі для осідання еритроцитів. Одержану плазму відбирають в стерильну пробірку і центрифугують при 1500 об/хв для отримання осаду лейкоцитів. Осад лейкоцитів одноразово відмивають стерильним 0,9% розчином хлориду натрію і доводять концентрацію клітин живильним ростовим середовищем до 106 клітин/мл. Ростове середовище містить середовище Ігла (SIGMA), гентаміцин 100 мкг/мл, L-глутамін 30 мг, 5 % аутологічну сироватку. В ростове середовище з лейкоцитами вносять біоматрицю. Культивування лейкоцитів проводять в термостаті при 37˚С з 5 % СО2. На 4 день культивування лейкоцитів на матриці перевіряється поживне ростове середовище на предмет можливого бактеріального забруднення на тіогліколевому середовищі, середовищі Сабуро та на поживному агарі.Через 9-14 днів біоматриця з прикріпленими лейкоцитами відмивається від поживного середовища та використовується для трансплантації органа або тканини з частковим або повним відновленням функції. Дослідження хворих генералізованим пародонтитом були проведені з використанням остеопластичного матеріалу колапану з нанесеними на нього аутологічними мезенхімальними стовбуровими клітинами. Оцінка клінічної ефективності запропонованого способу підготовки біоінженерного трансплантата показала відновлення міжальвеолярних перетинок. Це полягає у зростанні висоти міжальвеолярних перетинок, у відсутності загострень упродовж двох років, у достовірному прирості маси кісткової тканини у вигляді ущільнення кісткової тканини альвеолярних відростків, що було установлено за результатами денситометрії. Середнє значення приросту маси кісткової тканини становило 11,63±1,63% (р<0,001), індивідуальний приріст коливався від 7,23% до 19,64%.Під час проведення фенотипування клітин в суспензії біотрансплантата, методом проточної цитометрії, був отриманий результат, який підтвердив, що з лейкоцитів, які нарощуються на колапані для направленої кісткової регенерації, відбувається задовільний ріст й накопичення гематологічних клітин-попередників (для яких маркер СD34 є специфічним).Таким чином, використання біотрансплантата на основі аутологічних мезенхімальних стовбурових клітин є ефективним для клітинної регенерації сполучних тканин.
  4. Вакутайнер з нанесеним гепарином;мікроскоп бінокулярний Биолам; Термостат; Центрифуга ОПН-3;Камера Горяєва з накривним склом;Пипетка Пастера;Клавішний лічильник для підрахунку формених елементів крові; ЗМА, Київ;Штатив поліетиленовий для пробірок; Бокс 1БП 1-ос, ИЗ. 420.10. Натрію хлорид, кваліфікації “хч”,; Середовище Ігла (SIGMA-CHEMICAL CO. P.O. BOX 14508 ST LOUIS, MO 63178 USA); Глутамін (SIGMA-CHEMICAL CO. P.O. BOX 14508 ST LOUIS, MO 63178 USA); Аутологічна сироватка; Гентаміцину сульфат-Дарниця 4%, стерильно; Поживне середовище для контролю стерильності сухий; Поживний агар сухий (для мікробіологічних досліджень);Глюкоза.
  5. При ушкодженні нирок, кістково-хрящової тканини, м’язових тканей, шкіри, серцево-судинної системи, дихальної системи, травної системи, тканинної інженерії печінки, підшлункової залози, сечовидільної та статевої системи, нервової системи, зв'язок та сухожиль, тканин періодонта, травмах.
  6. Клінічне використання біотрансплантатів не показане на фоні злоякісних процесів, інфікуваннях, при кровотечах, гострих запаленнях.
  7. Заповнення дефекту органа або тканини з частковим або повним відновленням їх функції при різних патологіях.
  8. Необхідно дотримуватись концентрації лейкоцитів 106/мл у поживному середовищі для досягнення ефективного росту стовбурових клітин. Вчасно перевіряти ростове середовище на предмет можливого бактеріального забруднення, яке може виникнути при недотриманні умов антисептики при підготовці біоінженерного трансплантата. При інкубуванні біотрансплантата в поживному середовищі необхідно періодично струшувати вміст пробірки для ресуспендування лейкоцитів.
  9. Публікації у наукових журналах. Інформаційний лист.
  10. НДР «Розробка методу тканинної інженерії з використанням аутологічних мезенхімальних стовбурових клітин» 0106U003240 ,2006-2008 рр.
  11. Деклараційний патент № 16622; опубл.15.08.2006, Бюл. № 8.-3 с. Деклараційний патент № 19148; опубл.15.12.2006, Бюл. № 12.-3 с.
  12. Українська медична стоматологічна академія, Адреса: вул. Шевченка, 23, м. Полтава, 36024.
  13. Кайдашев І. П. служб. т. (0532)56-22-43, Скрипніков П. М. служб. т. (05322) 2-88-18, Богашова Л. Я. служб. т. (05322) 2-86-94, Боброва Н. О. служб. т. (0532)56-22-43, Яриніч-Бучинська Н. П. служб. т. (05322) 2-86-94

  14. Вчена рада УМСА( протокол № 5 від 19.11. 2008р.).

  15. Результати досліджень висвітлені в матеріалах, які можна отримати у авторів.