Методические указания по подготовке к практическим занятиям по фармакогнозии специальности 060108 «Фармация»

Вид материалаМетодические указания

Содержание


5 семестр и 2 курса 3 семестр ВВ и ДО
3. Цель обучения, воспитания и развития
4. Задачи обучения, воспитания и развития
5. Этапы проведения практического занятия
II. Основная часть занятия
III. Заключительная часть занятия
6. Ориентировочная основа действия (ООД) для проведения самостоятельной деятельности студентов (СДС) или курсантов (СДК) в учебн
Учебная цель
Требования к исходному уровню знаний
Оборудование, материалы.
Работа на занятии.
Пробка (толщина, количество слоев и цвет) Основная паренхима
Механические элементы
Одревесневшие (лигнифицированные) элементы.
Покровная ткань
Кристаллические включения.
При изучении корней и корневищ обращают внимание
При пучковом типе
Препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности.
Объекты для проведения гистохимических реакций
...
Полное содержание
Подобный материал:

ГОУ ВПО

«Владивостокский Государственный медицинский университет Минздравсоцразвития РФ»

Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии


Комплект учебно-методических материалов к

Учебно-методическому комплексу (фармакогнозия)


Методические указания

по подготовке к практическим занятиям

по фармакогнозии

специальности 060108 «Фармация»

«ОСВОЕНИЕ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ»


для студентов 3 курса фармацевтического факультета

5 семестр и 2 курса 3 семестр ВВ и ДО


Утверждены

на методическом совещании кафедры

от______________2011г.

Протокол №


Владивосток 2011 г.


1. Тема: «ОСВОЕНИЕ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ГРУПП ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ»

2. Мотивация: В связи с возросшим ассортиментом медицинских и фармацевтических товаров сформировать профессиональные знания и умения по выбору и использованию необходимой нормативной документации и справочной литературы на медицинские и фармацевтические товары при проведении товароведческого анализа.

3. Цель обучения, воспитания и развития: Сформировать и закрепить у студентов профессиональные знания по основным понятиям и определениям классификаций медицинских и фармацевтических товаров, по структуре и основным разделам Государственных реестров, классификаторов и справочников.

4. Задачи обучения, воспитания и развития:

Научить работать с Государственными реестрами, классификаторами, составлять торговую классификацию для отдельных классов, подклассов, групп, подгрупп, и видов товаров медицинского назначения.

5. Этапы проведения практического занятия




п/п

Название этапа

Цель этапа

Время

1

2

3

4

I. Вводная часть занятия

5-10%

15 мин.

1.

Организация занятия

Мобилизовать внимание студентов на данное занятие




2.

Определение темы, мотивации, цели, задач занятия

Раскрыть практическую значимость занятия в системе подготовки провизора, сформировать мотив и, как следствие, активизировать познавательную деятельность студентов




II. Основная часть занятия

80-90%

150мин.

3.

Контроль исходных ЗУН

Проверка готовности студентов к занятию, выявление исходного уровня ЗУН, обеспечение единого исходного уровня, написание входного тестового контроля, опрос по контрольным вопросам




4.

Общие и индивидуальные задания на СДС в учебное время

Дифференцированное ориентирование студентов к предстоящей самостоятельной их деятельности – определение вариантов задач на изучаемый раздел




5.

Демонстрация методики

Показать ориентировочную основу действия (ООД) и унифицировать методику.

Решение задач по изучаемой теме




6.

Управляемая СДС в учебное время


Овладение необходимыми профессиональными У и Н, решение студентами задач по индивидуальным вариантам




7.

Итоговый контроль

Закрепление ЗУН, овладение алгоритмами, выявление индивидуальных и типичных ошибок и их корректировка, решение задач выходного контроля




III. Заключительная часть занятия

5-10%

15 мин.

9.

Подведение итогов занятия

Оценка деятельности студентов, определение достижения цели занятия




10.

Общие и индивидуальные задания на СДС во вне учебное время

Указание на самоподготовку студентов, ее содержание и характер





6. Ориентировочная основа действия (ООД) для проведения самостоятельной деятельности студентов (СДС) или курсантов (СДК) в учебное время.

Продолжительность занятия: 4 часа (180 мин.).

Учебная цель:

- освоить фармакопейные методы установления подлинности лекарственного растительного сырья;

- освоить технику проведения микроскопического анализа по соответственной нормативной документации;

- научиться определять подлинность сырья по совокупности микроскопических и гистохимических признаков;

- научиться пользоваться ГФ и другой нормативной документацией (НД) на лекарственное сырье;

- научиться анализировать необычные ситуации и находить способы решения возникших проблем.

- освоить методики качественного химического анализа лекарственного растительного сырья, микрохимического анализа;

- освоить и отработать технику приготовления временных микропрепаратов цельного растительного сырья;

- освоить технику микроскопического исследования лекарственного сырья;

- освоить технику гистохимического, микрохимического, химического исследования лекарственного растительного сырья.


Самоподготовка.

Требования к исходному уровню знаний


На основании знаний по ботанике, органической и аналитической химии уметь определять подлинность сырья по совокупности анатомических

признаков, выполнять качественные реакции на наличие биологически активных веществ в сырье согласно требованиям НТД.


Вопросы для самоподготовки.
  1. В чем состоит цель микроскопического анализа?
  2. Опишите технику приготовления временных препаратов.
  3. На основании знаний по ботанике назовите и дайте определение основным микроскопическим диагностическим признакам различных морфологических групп лекарственного растительного сырья (ЛРС): листьев, цветков, трав, плодов, семян, коры, корней, корневищ, клубней, луковиц.
  4. Как сделать поперечный срез коры, корня?
  5. Как сделать поперечный срез мелких семян?
  6. Назовите индифферентные и просветляющие жидкости.
  7. Назовите формы кристаллов кальция оксалата.
  8. Назовите различные типы волосков, железок.
  9. Как отличить при микроскопии корни растений от кор?
  10. Назовите реактивы на слизь, крахмал, целлюлозу, одревесневшие элементы, инулин, на жирные и эфирные масла.


Необходимость в микроскопическом и микрохимическом ис­следовании возникает при анализе резаного, порошкованного, прессован­ного, гранулированного лекарственного растительного сырья, а также при необходимости отличить ЛРС от возможных примесей, внешний вид которых сходен с официнальным сырьем.

Разделы «Микроскопия» в фармакопейных статьях ГФ XI содержат мик­роскопическую характеристику как цельного ЛРС, так и растительного по­рошка без указания степени измельчения.

Микроскопический анализ не может быть окончательным критерием иден­тификации растительного сырья. Только в совокупности с другими методами анализа (макроскопическим, химическим, хроматографическим, люминес­центным) можно достоверно установить подлинность объекта исследования.


Оборудование, материалы.

Для проведения микроскопического анализа требуется ряд оптических приборов и вспомогательных инструментов.

Основ­ные из них: микроскоп, лупа, объективный и окулярный мик­рометры. Для приготовления срезов сырья используют набор ботанических инструментов. Чаще всего это бритва и в особых случаях, если требуется по­лучить серию очень тонких срезов — микротом.


Работа на занятии.

Объекты для изучения основных микроскопических диагностических при­знаков:

образцы цельного лекарственного растительного сырья различных морфологических групп -

листья ландыша, сенны, мяты перечной, крапивы, брусники;

кора дуба, калины;

цветки календулы, липы, ромашки аптечной;

подземные органы — корневища с корнями валерианы, корни девясила, корни алтея, корневища аира; корневища змеевика;

семена и плоды — семена льна, плоды тмина, плоды шиповника, плоды боярышника;

трава спорыша, череды, пустырника;

кора дуба, калины, крушины ломкой.


Задание 1.

Проведите микроскопический анализ цельного лекарственного растительного сырья «листья» по соответствую­щим частным статьям ГФ XI.

Запишите в альбом:

1. Латинское и русское название сырья, производящего растения, семейства.

2. Название НД, по которой будете проводить анализ сырья.
  1. Приготовьте препарат листа с поверхности (один или два объек­та по указанию преподавателя).
  2. Изучите под микроскопом вначале при малом увеличении (далее — м/у), а затем при большом увеличении (далее — б/у) микро- препараты листьев.
  3. Последовательно в каждом препарате изучите эпидерму.

Отметьте форму эпидермальных клеток, тип устьичного аппарата, харак­тер трихом (волоски, железки), наличие и форму кристаллических включений, ме­ханических тканей, различных вместилищ, млечников, секреторных каналов и другие диагностические признаки, характерные для листьев.
  1. Сравните вы­явленные диагностические признаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI на определенный вид сырья.
  2. Сделайте вывод о подлинности объекта исследования.
  3. Зарисуйте в рабочем журнале и обозначьте найденные вами диагностические признаки.


Методика приготовления микропрепаратов листьев, трав, цветков «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья», Государственная фармакопея, XI издание, с. 277-279)


Растительный материал, отобранный для микроскопического изучения, по­мещают в пробирку и проводят его обработку для просветления:

растительный материал заливают 2—3% раствором едкого натра и ки­пятят в течение 1—2 мин. После этого жидкость осторожно сливают, а материал тщательно промывают водой и помещают в чашку Петри.

Кусочки сырья вынимают из воды с помощью скальпеля (или лопаточки) и препаровальной иглы и помещают на предметное стекло в каплю раствора глицерина или воды.

На предметном стекле его кусочек 4 мм разделяют скальпелем или пре­паровальной иглой на две части;

одну из них осторожно переворачивают, чтобы получить возможность наблюдать лист под микроскопом с верхней и нижней сторон.

Стекла, используемые для приготовления микропрепаратов, должны быть чистыми и сухими.

Препарат на предметном стекле накрывают покровным стеклом. При неосторожном накладывании покровного стекла в препарате часто образуются пузырьки воздуха, поэтому стекло следует класть наклонно, прикоснувшись сначала одним краем к жидкости, а затем, придерживая стекло иглой, положить полностью. Попавшие пузырьки воздуха можно удалить легким постукиванием по покровному стеклу тупым концом препаровальной иглы или слегка подогреть над пламенем горелки. После охлаждения рассматривают под микроско­пом, сначала при малом, затем при большом увеличении.

Если включающая жидкость не заполняет всего пространства между предметным и покровным стеклом или она испарилась при нагревании препарата, то ее добавляют сбоку небольшими каплями. Если наоборот, покровное стекло свободно плавает вследствие избыточного количества жидкости, то ее следует отсосать при помощи полоски фильтровальной бумаги, подведенной сбоку.

При приготовлении микропрепарата из толстых листьев предварительно раздавливают скальпелем толстые жилки, а с пластинки стараются снять эпидермис или, размяв лист, от­деляют мезофилл от эпидермиса, чтобы препарат был более тонким.


Задание 2.

Проведите микроскопический анализ цельного лекарственного растительного сырья – кора по соответствующим частным статьям ГФ ХI.

Запишите в альбом:

1. Латинское и русское название сырья, производящего растения, семейства.

2. Название НД, по которой будете проводить анализ сырья.
  1. Приготовьте препарат поперечного среза коры.
  2. Изучите под микроскопом вначале при м/у, а затем при б/у препарат поперечного среза коры.
  3. Изучите основные диагностиче­ские признаки коры.
  4. Обратите внимание на характер и соот­ношение первичной и вторичной коры, механические элементы, кристаллические включения кальция оксалата.
  5. Сравните обнаруженные вами диагностические при­знаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI.
  6. Сделайте вывод о подлинности объекта исследования.
  7. Зарисуйте в рабочем журнале строе­ние коры и обозначьте выявленные вами диагностические признаки.

Пробка (толщина, количество слоев и цвет)

Основная паренхима (форма клеток, наличие включений)

Сердцевинные лучи (однорядные, многорядные, воронковидные)

Механические элементы: лубяные волокна, склериды (их расположение)

Кристаллические включения (одиночные кристаллы, друзы, кристаллоносная об­кладка)


Методика приготовления микропрепарата цельной коры (выписка из общей фармакопейной статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» Государственной фармакопеи, XI издание, с. 280—281)

Готовят поперечные или продольные срезы коры. Кусочки коры размером 2—3 х 0,5—1 см кипятят в пробирке с водой в течение 5 мин.

Раз­мягченные куски выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго по­перечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе глицерина.

Одревесневшие (лигнифицированные) элементы. К срезу на предметное стекло прибавляют несколько капель раствора флороглюцина и 1 каплю 25% раствора серной кислоты. Через минуту жидкость отсасывают полоской фильтроваль­ной бумаги, срез заключают в раствор глицерина и закры­вают покровным стеклом (рассматривают без прогревания); одревесневшие механические элементы окрашиваются в малиново-красный цвет.

Крахмал. Для обнаружения крахмала делают соскоб с сухой коры и рас­сматривают его в растворе Люголя. Крахмальные зерна окрашиваются в синий цвет.


Задание 3.

Проведите микроскопический анализ лекарственного растительного сырья из группы подземных органов:
  1. Приготовьте препарат поперечного среза корня или корневища (по указа­нию преподавателя).

Изучите микропрепарат подземных орга­нов сначала при малом увеличении, затем – на большом, выявите диагностические признаки.
  1. Последовательно в каждом препарате изучите строение (первичное или вторичное), наличие и характер покровной и механической ткани, проводящих пучков, наличие и форму кристаллических включений, секреторных структур (вместилища, млечники, секреторные клетки и др.)
  2. Сравните обнаруженные вами диагностические признаки с описанием раздела «Микроскопия» в частной фармакопейной статье ГФ XI.
  3. Сделайте вывод о подлин­ности объекта исследования.
  4. Запишите русское и латинское названия анализи­руемого сырья.
  5. Зарисуйте в рабочем журнале строение образца анализируемо­го сырья по указанию преподавателя и обозначьте выявленные вами диагности­ческие признаки:

Строение: первичное пучковое; вторичное пучковое; беспучковое, переходное

Покровная ткань (эпидерма, пробка)

Сердцевинные лучи (форма и структура)

Основная паренхима (плотная, рыхлая, аэренхима и др.)

Секреторные образования (вместилища, млечники, секреторные ходы) Кристаллические включения.


Методика приготовления микропрепарата цельных подземных органов (выписка из общей фармакопейной статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» Государственной фармакопеи, XI издание, с. 282)

Размоченные объекты вырав­нивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в растворе глицерина и рассматривают диагностические признаки сначала при малом, за­тем при большом увеличении.

С соскобом сухих подземных органов или порошком проводят необходимые микрохимические реакции.

Наличие одревесневших элементов, крахмала, слизи, жирного и эфирного масла определяют, как указано в разделах «Плоды и семена» и «Коры».

Инулин. Для обнаружения инулина на предметное стекло помещают около 0,1 г порошка, 1—2 капли раствора α-нафтола (резорцина или тимола) и 1 каплю концентрированной серной кислоты;

появляется красновато-фиолетовое ок­рашивание (от резорцина и тимола — оранжево-красное). О наличии инулина можно делать выводы только при отсутствии крахмала.


При изучении корней и корневищ обращают внимание на тип строения (первичное или вторичное строение),

характер расположения проводящей ткани (пучковый или беспучковый тип строения). При пучковом типе строения обращают внимание на строение про­водящих пучков (открытые или за­крытые, коллатеральные или концент­рические), характер их расположения и т. д.;

при беспучковом типе — на ха­рактер древесины, расположение в ней сосудов, на ширину сердцевинных лу­чей.

Проводящие эле­менты луба обычно не играют никакой роли при определении корней, корне­вищ, клубней, так как их строение, как правило, не имеет каких-либо особен­ностей. Только в некоторых растениях ситовидные трубки с возрастом расте­ния претерпевают изменения, подвер­гаются облитерации (теряют функцию проводящей ткани), превращаясь в бес­форменную, сдавленную массу (солод­ка, барбарис и др.). В этом случае на­личие деформированного (облитерированного) луба является характерным для данного вида сырья.

В корнях и корневищах мно­гих растений имеются механические элементы (волокна, реже каменистые клетки). Их форма и характер располо­жения играют большую роль при опре­делении сырья.

В некоторых корнях и корневищах имеются млечники (кен­дырь, одуванчик), в других — секретор­ные вместилища с эфирным маслом или смолой (девясил, женьшень, левзея); их строение, форма и расположе­ние в тканях корня или корневища име­ют важное диагностическое значение.

В паренхиме корней, корневищ, клуб­ней всегда имеется запасное питатель­ное вещество. Чаще всего это крахмал, у растений семейства сложноцвет­ных — инулин, у некоторых других растений (истоды, горечавка, синю­ха) — жирное масло. Характер запас­ного питательного вещества имеет большое значение при определении корней, корневищ, клубней. Особенно большую роль играет при этом крахмал, так как размеры и форма крах­мальных зерен (простые — круглые, овальные, многоугольные и т. д.; сложные из 2—3 или нескольких зерен) являются характерными для каждого вида растения. Многие растения в подзем­ных органах содержат кристаллы щавелевокислого кальция.


Задание 4.

Проведите микроскопический анализ лекарственного растительного сырья плодов и семян:
  1. Приготовьте препарат поперечного среза семян льна и плодов тмина.
  2. Изучите под микроскопом вначале при м/у, а затем при б/у микропрепараты поперечных срезов семян льна и плодов тмина.
  3. В каждом препарате изучите строение околоплодника, характер эпидермы, форму клеток паренхимы, наличие и форму трихом, кристаллических включений, секре­торных структур (вместилища, млечники, секреторные клетки и др.).
  4. Сравните об­наруженные вами диагностические признаки с описанием раздела «Микроско­пия» в частной фармакопейной статье ГФ XI, сделайте вывод о подлинности объекта исследования.
  5. Запишите русское и латинское названия анализируемого сырья.
  6. Зарисуйте в рабочем журнале строение одного из образцов анализируемого сырья и обозначьте выявленные вами диагностические признаки.


Методика приготовления микропрепаратов цельных плодов и семян (выписка из общей фармакопейной статьи «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» Государственной фармакопеи, XI издание, с. 279—280)

Готовят препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности и попе­речные срезы.

Препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности. 2—3 семени или плода кипятят в пробирке в растворе 5% едкого натра в течение 2—3 мин и тща­тельно промывают водой.

Объект помещают на предметное стекло, препаровальными иглами отделяют кожуру семени или ткани околоплодника и рас­сматривают их в растворе глицерина.

Срезы. Для приготовления срезов сухие плоды и семена предварительно размягчают, поместив их на сутки во влажную камеру (влажной камерой слу­жит эксикатор с водой, в которую добавлено несколько капель хлороформа) или водяным паром в течение 15—30 мин или более в зависимости от твердости объекта.

Мелкие плоды и семена запаивают в парафиновый блок размером 0,5 х 0,5 х 1,5 см.

Кончиком нагретой препаровальной иглы расплавляют пара­фин и в образовавшуюся ямку быстро погружают объект.

Срезы объекта де­лают вместе с парафином;

срезы выбирают из парафина препаровальной иг­лой, смоченной жидкостью, и готовят микропрепарат в растворе глицерина.


В порошке плодов диагностическое значение имеют обычно механические элементы, обрывки эфирномасличных канальцев (для зонтичных), иногда рас­положенные на эпидермисе плода во­лоски.

При изучении семян под микроско­пом обычно обращают внимание на

общее строение семени (характер ко­журы, величину запасной питательной ткани — эндосперма,

форму и распо­ложение зародыша — корешка, семя­долей, почечки зародыша).

Более де­тально изучают кожуру семени, кото­рая почти всегда состоит из нескольких слоев характерного строения.

Наибо­лее важное диагностическое значение имеет механический слой кожуры, ко­торый состоит или из вытянутых эле­ментов (типа волокон), или из округ­лых, изодиаметрических.

Строение эн­досперма и тканей зародыша, как пра­вило, у всех растений мало чем отлича­ется, поэтому не имеет диагностическо­го значения.

Лишь в некоторых слу­чаях (у семян чилибухи, плодов зон­тичных) эндосперм имеет очень харак­терное строение и может в числе дру­гих служить диагностическим призна­ком.


Задание 5.

Проведите гистохимические реакции обнаружения БАВ в ЛРС одним из методов.

Объекты для проведения гистохимических реакций:

корни алтея, семена льна, корни одуванчика, девясила, корневище аира, кора крушины, кора дуба или калины.

Приготовьте препарат поперечного среза объекта.

Изучите под микроскопом вначале при м/у, а затем при б/у микропрепараты поперечных срезов по ниже перечисленным методикам.

Запишите результат реакции БАВ с реактивом.

Определение подлинности растительного сырья

Методика.

1. Поперечный срез или порошок сухого сырья помещают на

предметное стекло, прибавляют один из реактивов и накрывают покровным стеклом.

2. Препарат помещают на предметное стекло, накрывают его по­кровным стеклом, а реактив капают рядом с покровным стеклом.

Затем под­носят фильтровальную бумагу к противоположному углу стекла. При этом жидкость засасывается под стекло, а элементы клеток или клеточное содер­жимое вступает в химическое взаимодействие с реактивом. При использо­вании второго метода под микроскопом можно наблюдать за ходом реакции.

Природу клеточной оболочки можно установить реакциями на целлюло­зу и на лигнин (одревеснение).

Целлюлоза (клетчатка). Поперечный срез или порошок (соскоб) сухого сырья помещают на предметное стекло и прибавляют один из следующих реактивов:

а) хлор-цинк-йод — окрашивает клетчатку в сине-фиолетовый цвет; проб­ка и кутикула могут принимать окраску от желтой до коричневой;

б) йод с кислотой серной — окрашивает целлюлозу в синий цвет; окрас­ка интенсивнее, когда в клеточной оболочке больше целлюлозы и меньше других компонентов (лигнина, кутиноподобных веществ и др.);

в) аммиачный раствор меди (II) оксида — под его влиянием клетчатка медленно разбухает и растворяется, кутикула остается нерастворенной;

г) раствор Люголя (0,5 %-ный раствор йода в 1 %-ном растворе калия йодида) — окрашивает целлюлозу в желтый цвет.

Одревесневшие или лигнифицированные стенки клеток .

Срез корня алтея помещают на предметное стекло в 1 %-ный спиртовый раствор флороглюцина.

Реактив удаляют фильтровальной бумагой, а на срез наносят каплю кислоты хлористоводородной концентрированной и через 1 минуту при­бавляют каплю глицерина. Срез накрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом при м/у. Одревесневшие оболочки клеток приобретают вишневое окрашивание.

Крахмал. Поперечный срез корня алтея помещают на предмет­ное стекло и добавляют 1—2 капли раствора Люголя.

Крахмальные зерна окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Для опреде­ления формы, типа и размеров крахмальных зерен препарат готовят в воде или 30 %-ном растворе глицерина.

Слизь. Поперечный срез корня алтея или порошок семян льна помещают на предметное стекло и прибавляют один из перечисленных ниже реактивов.

Реакция с метиленовым синим. Срез помещают на несколько минут в спир­товый раствор метиленового синего (1:5000), затем переносят в глицерин. Слизь окрашивается в голубой цвет.

С меди сульфатом и щелочью. Срез помещают на 5—10 мин в насыщен­ный раствор меди сульфата, промывают водой и переносят в 50 %-ный ра­створ калия гидроксида. Слизь окрашивается в голубой цвет (растения сем. мальвовых) или в зеленый (растения сем. лилейных).

Реакция с тушью. Порошок сырья помещают на предметное стекло в каплю свежеприготовленного раствора туши (1:10) и перемешивают иголкой. На темно-сером фоне выделяются беловатые клетки со слизью, не окрашенные тушью (слизь препятствует проникновению туши).

Инулин. Реакция Молиша является общей на углеводы, но ею пользуются для обнаружения инулина в отсутствие крахмала (в основном у растений семейства сложноцветных).

Обработка микропрепарата спиртом усиливает формирование сферокристаллов инулина.

Поперечный срез корня одуванчика или девясила помещают в 1—2 капли раствора α-нафтола (или тимола) и вводят 1 каплю кислоты серной концентрированной, появляется розово-фиолетовое окрашивание (α-нафтол) или карминово-красное (ти­мол).

Крахмал вступает в указанные реакции, поэтому его присутствие надо исключить, проведя предварительно реакцию с йодом.

Эфирное масло. Поперечный срез аира помещают на 2—3 мин в раствор Судана III, а затем просматривают в воде или 30 %-ном растворе глицерина. Клетки, содержащие эфирное масло, окрашиваются в зеленый цвет.

Жирное масло. Срез семян льна помещают на 2—3 мин в рас­твор Судана III, затем реактив удаляют фильтровальной бумагой, а срез про­мывают 50 %-ным спиртом и переносят в глицерин. Капельки жирного масла окрашиваются в оранжево-красный цвет.

Гидроксиантрахиноны. Поперечный срез коры крушины поме­щают на предметное стекло в каплю 5 %-ного раствора натрия гидроксида или аммония гидроксида, прибавляют каплю глицерина, накрывают покров­ным стеклом и наблюдают под микроскопом красное или фиолетово-крас­ное окрашивание тканей, в которых локализуются антраценпроизводные.

Дубильные вещества. Поперечный срез коры дуба или ко­ры калины помещают в каплю 1 %-ного раствора железа (III) хлорида или 1 %-ного раствора железоаммониевых квасцов, реактив удаляют фильтро­вальной бумагой, на предметное стекло наносят каплю воды, глицерина или хлоралгидрата, накрывают покровным стеклом и наблюдают окрашивание препарата под микроскопом. Ткани, содержащие дубильные вещества, окра­шиваются в черно-синий или черно-зеленый цвет.

Практические навыки

  1. Уметь определять подлинность сырья по совокупности внешних,

анатомических, гистохимических признаков с использованием НТД.
  1. Уметь выполнять качественные реакции по обнаружению в сырье биологически активных веществ согласно требованиям НТД.
  2. Уметь готовить анатомические препараты из различных морфологических групп сырья.



Список литературы для подготовки к занятиям
  1. Муравьева Д.А., Самылина И.А., Яковлев Г.П. Фармакогнозия. М.: Медицина, 2002.
  2. Лекарственное растительное сырье. Фармакогнозия. Учебное пособие. Под ред. Г.П.Яковлева и К.Ф.Блиновой. Санкт-Петербург, СпецЛит, 2004.

3. Государственная Фармакопея СССР, Х1 изд., том 1,2. – М.: Медицина, 1988,1990,( т.2, стр.252-265, 277-282 )