Разработка и стандартизация комплексного растительного средства, рекомендуемого для профилактики и лечения нарушений микрофлоры кишечника 14. 04. 02 фармацевтическая химия, фармакогнозия
| Вид материала | Автореферат |
- Исследования по разработке и стандартизации лекарственных растительных средств для, 904.81kb.
- Синтез, свойства и биологическая активность енаминоамидов ацилпировиноградных кислот, 439.81kb.
- Примерная программа рекомендуется для направления подготовки (специальности) 111801, 717.4kb.
- Исследования по разработке и стандартизации комбинированного антимикробного и регенерирующего, 405.42kb.
- Синтез соединений на основе химических превращений производных α- оксокарбоновых кислот, 643.93kb.
- Синтез, свойства, биологическая активность n-гетериламидов α-оксокислот и продуктов, 367.21kb.
- О нарушениях микрофлоры кишечника маленьких детей, 40.04kb.
- Тематический план лекций по дисциплине «Фармацевтическая химия», 32.57kb.
- Программа курса «Аналитическая химия» специальность «Фармация», 92.69kb.
- Синтез, химические свойства и биологическая активность 1,4-дизамещенных 5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов, 667.95kb.
На правах рукописи
Клыш Екатерина Александровна
РАЗРАБОТКА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ КОМПЛЕКСНОГО
РАСТИТЕЛЬНОГО СРЕДСТВА, РЕКОМЕНДУЕМОГО
ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ НАРУШЕНИЙ
МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА
14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата фармацевтических наук
Самара - 2011
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего
профессионального образования «Башкирский государственный медицинский
университет» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию
Научный руководитель:
Доктор фармацевтических наук Пупыкина Кира Александровна
Официальные оппоненты:
Доктор фармацевтических наук Лякина Марина Николаевна
Доктор биологических наук,
профессор Шаталаев Иван Федорович
Ведущая организация:
Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН
Защита состоится «17» мая 2011 г. в 1000 часов на заседании диссертационного совета Д 208.085.06 при ГОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу: 443079, г.Самара, пр. К. Маркса, 165 Б.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО СамГМУ Минздравсоцразвития России (г. Самара, ул. Арцыбушевская, 171).
Автореферат разослан «___» апреля 2011 г.
Ученый секретарь
д
иссертационного совета,кандидат фармацевтических наук,
доцент И.К. Петрухина
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. В настоящее время наблюдается рост числа заболеваний, связанных с нарушением биологического равновесия между макроорганизмом, то есть человеком, и разнообразными популяциями микробной флоры его отдельных органов и систем, сложившегося в процессе эволюции. Одним из распространенных заболеваний, связанных с нарушением микрофлоры кишечника является дисбактериоз, который выявляется у 75 – 90% пациентов с острыми, хроническими гастроэнтерологическими заболеваниями и практически у всех пациентов с острыми кишечными инфекциями (Парфенов А.И. и др., 2002; Григорьев П.Я. и др., 2004). При длительном дисбактериозе, в результате прогрессирующей потери основных нутриентов, развиваются как общие метаболические расстройства, так и нейрогуморальные нарушения. В патологический процесс вовлекаются пищеварительные органы функционально и топографически связанные с кишечником (желудок, поджелудочная железа, желчные пути), а затем и органы других систем организма, что значительно затрудняет диагностику и лечение дисбактериоза (Барановский А.Ю. и др., 2002). Сформировавшиеся дисбактериозы кишечника трудно поддаются коррекции и для полной нормализации микрофлоры, восстановления эубиоза требуется длительное время.
В терапии заболеваний пищеварительной системы широко используются лекарственные растения, но этого нельзя сказать о дисбактериозах кишечника, часто сопровождающих заболевания данной группы. При этом следует учитывать, что фитотерапия может быть эффективно использована для санации от условно-патогенной микрофлоры, так как лекарственные растения в большинстве своем являются кишечными эубиотиками, уничтожающими патогенную и сохраняющими сапрофитную микрофлору. Недостаточно изучены в клинической практике возможности комплексного лечения нарушений микрофлоры кишечника с применением препаратов растительного происхождения, которые обладают мягкостью действия, низкой токсичностью и могут применяться длительно без существенных побочных явлений. Перспективным является использование многокомпонентных растительных сборов и лекарственных форм на их основе, которые могут повысить надежность ожидаемого лечебного эффекта. Однако, их ограниченный ассортимент среди разрешенных к применению лекарственных растительных средств, ставит актуальным вопрос о разработке и внедрении в практическую медицину новых многокомпонентных растительных средств, обладающих поливалентностью действия.
Цель и задачи исследования. Целью диссертационной работы является разработка комплексного растительного средства в виде сбора, экстракта сухого и драже для профилактики и лечения заболеваний, связанных с нарушениями микрофлоры кишечника.
Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
- обосновать и разработать рациональный состав многокомпонентной растительной композиции;
- провести фармакогностическое изучение сбора, определить показатели подлинности и доброкачественности, разработать методики количественного определения основных групп биологически активных веществ;
- разработать способ получения экстракта сухого из сбора, провести постадийный контроль производства экстракта по действующим и экстрактивным веществам, определить технологические характеристики и показатели качества;
- разработать способ получения кишечнорастворимой лекарственной формы на основе экстракта сухого, определить критерии подлинности и показатели качества;
- провести валидационную оценку методик количественного определения основных групп биологически активных веществ в сборе и лекарственной форме;
- изучить фармакологическую активность разработанных растительных средств при экспериментально моделированном дисбактериозе кишечника;
- разработать нормативную документацию на сбор и лекарственную форму.
Научная новизна. Разработан и обоснован рациональный состав исходной растительной композиции, включающий девять видов лекарственного растительного сырья, разрешенного для применения в медицине, обеспечивающий фармакотерапевтическую активность при экспериментально моделированном дисбактериозе.
С учетом подобранных оптимальных условий и изучения выхода биологически активных веществ на различных стадиях технологического процесса разработан способ получения экстракта сухого и на его основе кишечнорастворимой лекарственной формы в виде драже со стабильными физическими и технологическими показателями.
Изучен качественный состав и количественное содержание биологически активных веществ в растительной композиции, экстракте сухом и лекарственной форме с использованием современных физико-химических методов (хроматографических, хроматомасс- и атомно-адсорбционной спектрометрии). Определены критерии подлинности, показатели качества, необходимые для стандартизации растительной композиции, экстракта сухого, драже и разработаны методики количественного определения в них суммы флавоноидов в пересчете на рутин и дубильных веществ.
Методами фармакологических исследований установлена безопасность и эффективность применения разработанных растительных средств с профилактической и лечебной целью при экспериментально моделированном дисбактериозе кишечника. Приоритет и новизна исследований подтверждены патентом РФ № 2332226 «Сбор лекарственных растений для профилактики и комплексного лечения дисбак-териоза кишечника» и заявкой на изобретение №2010123631«Драже с растительным экстрактом для профилактики и комплексного лечения дисбактериоза кишечника».
Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований составлены проекты фармакопейных статей на сбор для профилактики и комплексного лечения дисбактериоза кишечника и драже на основе экстракта сухого из сбора; технические условия на экстракт сухой (ТУ № 9168-007-26795008-2003).
Результаты исследований по определению подлинности многокомпонентной растительной композиции, установлению показателей качества и методик определения содержания основных групп биологически активных веществ внедрены в учебный процесс кафедр фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии; фармацевтической химии с курсами аналитической и токсикологической химии; фармацевтической технологии с курсом биотехнологии Башкирского государственного медицинского университета, а также работу ООО «Травы Башкирии»; методики количественного определения суммы флавоноидов и дубильных веществ в разработанных средствах апробированы в ГУЗ«Республиканский центр контроля качества и сертификации лекарственных средств» Республики Башкортостан (акты внедрения).
Основные положения, выносимые на защиту:
- результаты исследований по разработке и обоснованию растительной композиции, ее фармакогностическому изучению, установлению показателей подлинности и доброкачественности, необходимых для стандартизации;
- результаты исследований по подбору оптимальных условий экстракции сбора, разработке способа получения экстракта сухого и на его основе кишечнорастворимой лекарственной формы в виде драже, определению критериев подлинности и показателей качества;
- результаты разработки методик количественного определения биологически активных веществ в сборе, лекарственной форме и валидации методик анализа;
- результаты изучения фармакологической активности разработанных средств.
Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на научно-практических конференциях (Уфа 2006, 2008, 2009, 2010; Пермь 2007,2010); научном конгрессе «Традиционная медицина» (Москва, 2007);VII Международном симпозиуме «Новые и нетрадиционные растения и перспективы их использования» (Пущино, 2007); II Российском фитотерапевтическом съезде и международном форуме «Интегративная медицина» (Москва, 2010).
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований Башкирского государственного медицинского университета по проблеме «Изыскание и изучение новых лекарственных средств» и является фрагментом исследований кафедры фармакогнозии с курсом ботаники и основ фитотерапии (номер государственной регистрации № 01200707996).
Публикации. По материалам диссертации опубликованы 21 научная работа, из них в журналах, рекомендуемых ВАК – 3 статьи, 1 патент РФ на изобретение.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 151 странице машинописного текста, содержит 49 таблиц, 34 рисунка. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы «Объекты и методы исследования», трех глав экспериментальной части, выводов и списка литературы, включающего 209 библиографических источников, из которых 18 – иностранных и приложений.
Во введении обоснована актуальность темы, сформулированы цель и задачи исследования, представлены научная новизна и практическая значимость работы, а также изложены основные положения, выносимые на защиту.
В первой главе представлен обзор литературы, отражающий современное состояние проблемы восстановления и лечения нарушений микрофлоры кишечника, направленной на коррекцию основной патологии и устранение причин, вызвавших их развитие, возможности применения лекарственных растений для коррекции дисбиотических нарушений кишечника и уровня стандартизации многокомпонентных лекарственных средств растительного происхождения.
Во второй главе (объекты и методы) приведены сведения об объектах изучения, о методах и приборах, используемых в экспериментах.
Третья глава посвящена разработке и обоснованию рационального состава растительной композиции; изучению химического состава, показателей подлинности и качества, разработке методик количественного определения основных групп биологически активных веществ и их валидации.
Четвертая глава включает результаты экспериментальных исследований по изучению условий получения экстракта сухого из сбора, особенностях выхода биологически активных веществ на различных стадиях технологического процесса, разработке способа получения экстракта сухого и на его основе кишечнорастворимой лекарственной формы, установлению критериев подлинности и качества.
В пятой главе представлены результаты фармакологических исследований по обоснованию безопасности и изучению профилактического, лечебного действия разработанных растительных средств при экспериментально моделированном дисбактериозе кишечника.
Диссертация завершается общими выводами по работе, списком литературы и приложениями.
Основное содержание работы
- Разработка, фармакогностическое изучение и стандартизация
растительной композиции
При подборе отдельных видов лекарственного растительного сырья для растительной композиции учитывали, что лекарственные растения за счет содержания в них разнообразных групп биологически активных веществ, могут оказывать комплексное воздействие на развитие и течение качественных и количественных изменений в составе нормальной кишечной микрофлоры, проявляющееся в подавлении патогенной микрофлоры, стимуляции роста сапрофитной флоры; положительном влиянии на воспаленную слизистую кишечника за счет свертывания белков и образования плотной пленки; активизации процессов восстановления, регенерации и выработки слизи; нормализации моторно-эвакуаторной функции ЖКТ, процессов всасывания, пищеварения, стимуляции секреторной функции кишечника; снятии спазма гладкомышечных волокон органов ЖКТ; повышении защитных сил организма.
Информационно-литературный поиск, а также собственные предварительные исследования позволили произвести выборку 13 видов лекарственного растительного сырья (ЛРС), при этом рассматривались только разрешенные к применению в РФ лекарственные растения. Из отобранных видов ЛРС составляли различные комбинации сбора, включающие от 2 до 13 компонентов, готовили водные извлечения (1:10) и проверяли их активность. Первоначально изучали антимикробную активность и антигрибковую активность. Эффективность действия настоев лекарственных растений и композиций из них оценивали по зоне задержки роста патогенных микроорганизмов в сравнении со стандартными фагами. Результаты исследования позволили выбрать пять вариантов сбора (табл. 1).
Таблица 1
Антимикробная и антигрибковая активность исследуемых объектов
| Исследуемый объект | Зоны задержки роста микроорганизмов, мм | |||||
| St. aureus | Kl. pneu-monie | Ps.aeru-ginosa | Pr.vul-garis | E. сoli | Candi da sp. | |
| Антимикробный сбор | 10,89 ±0,17 | 12,53 ±0,21 | 10,11 ±0,18 | 11,43 ±0,22 | 12,12 ±0,20 | 10,10 ±0,16 |
| Вариант №1: корневища лапчат-ки,листья мяты,шалфея,трава зве-робоя,корн. и кор.девясила -по 2ч | 10,02 ±0,15 | 10,16 ±0,11 | 9,03 ±0,10 | 10,02 ±0,18 | 10,53 ±0,16 | 9,25 ±0,12 |
| Вариант №2: листья шалфея, тра-ва тысячелистника, зверобоя,кор- невища лапчатки, листья мяты, корн. и корни девясила – по 2 ч | 10,77 ±0,16 | 11,36 ±0,22 | 9,74 ±0,18 | 10,43 ±0,18 | 11,47 ±0,15 | 9,45 ±0,16 |
| Вариант №3:трава зверобоя,корн. и корни девясила,корневища лап-чатки, листья мяты, шалфея, тра-ва тысячелистника,череды - по 2ч | 10,92 ±0,20 | 12,49 ±0,18 | 10,03 ±0,16 | 11,50±0,21 | 12,32 ±0,22 | 10,08 ±0,22 |