Красняков Владимир Кириллович Совершенствование донорства крови и ее компонентов в Санкт-Петербурге 14. 00. 29 гематология и переливание крови диссертация
| Вид материала | Диссертация |
- Специальность: 051301 общая медицина, 70.4kb.
- Обеспечение качества получения и клинического применения компонентов крови в субъекте, 404.49kb.
- Прямое переливание крови (методические рекомендации), 154.15kb.
- Методика и техника переливания крови и ее компонентов, 440.57kb.
- кальцинированный аортальный стеноз-состояние системного гемостаза и реологических, 538.36kb.
- Номинации конкурса на Премию «СоУчастие», 76.46kb.
- Неопухолевые лимфаденопатии. 14. 00. 29 гематология и переливание крови, 1061.02kb.
- Молекулярно-генетическая природа первичных гемофагоцитарных лимфогистиоцитозов в россии, 381.26kb.
- Приказ Минздрава РФ от 25 ноября 2002 г. N 363 "Об утверждении Инструкции по применению, 912.25kb.
- Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток в лечении врожденных и приобретенных, 1375.99kb.
ОБЪЕКТ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Диссертационное исследование основано на всестороннем изучении контингента доноров станции переливания крови Санкт-Петербурга и донорского отдела Российского НИИ гематологии и трансфузиологии. Обследуемые лица являлись донорами плазмы, форменных элементов или цельной крови в период с 1992 по 2007 год. Изучение было проведено в отношении пола и возраста доноров, их социального положения, вида донорства, числа кроводач и других показателей. Также были обследованы больные, госпитализированные в клиники института, которым проводилась гемотрансфузионная терапия.
2.1 Объект и материал исследования
Объектом исследования служили ___ доноров крови и ее компонентов города Санкт-Петербург, а также _____ больных, получавших гемотрансфузионную терапию в клиниках РосНИИГТ.
Количество доноров по годам представлено в таблице 1.
В соответствии с приказом № ____ сыворотки крови регулярных доноров, а также лиц, изъявивших желание сдать кровь, были обследованы на наличие гемотрансмиссивных инфекций (гепатитов В и С, СПИДа, сифилиса), кроме этого, во всех образцах определяли уровень АЛАТ. На наличие этих агентов были исследованы и сыворотки крови больных, находящихся на лечении в клиниках института. Общее количество обследованных сывороток составило ____ образцов. Распределение по годам представлено в таблице 2.
Помимо этого, у 350 доноров было проведено изучение распределения антигенов системы HLA 1 классса, при этом одновременное изучение HLA и специфических тромбоцитарных генов было выполнено у 60 доноров тромбоконцентрата.
Также был выполнен анализ документации, используемой при организации донорской службы на СПК и проведении обследования добровольцев для донорства на СПК РФ, и публикации по агитационно-просветительской работе по привлечению к донорству.
2.2. Методы исследования
Специфические маркеры вирусных инфекций определяли в сыворотке крови обследуемых методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Исследования выполнялись на оборудовании фирмы Санофи Диагностик Пастер (Франция): ридер PR 2100, промыватель PW 40, инкубатор IPS и фирмы Текан (Австрия), автоматический ИФА-анализатор Минисвифт.
2.2.1. Обследование на наличие HBsAg выполняли на основании приказа № 322 МЗ РФ от 21.10.2002 г. и приказа № 364 МЗ РФ от 14.09.2001 г. Исследования проводили с помощью коммерческих тест-систем фирмы Био-Рад (Франция) и фирмы Вектор-Бест (г. Новосибирск) в соответствии с прилагаемыми к наборам инструкциями.
Тест-системы фирмы Био-Рад:
1. Монолиза Ag HBs Плюс – это одноэтапный ИФА, основанный на «сэндвич»-методе, в котором используют три типа моноклональных антител, подобранных по их способности связывать различные субтипы Ag HBs. В качестве твердой фазы используют полистироловые лунки, покрытые одним типом моноклональных антител. Два других типа антител связаны с пероксидазой. Качественное определение включает в себя следующие стандартные этапы:
а) Разнесение контрольных образцов и исследуемых сывороток в лунки микропланшета.
б) Внесение конъюгата в лунки микропланшета.
в) Инкубация.
г) Промывание и развитие ферментативной реакции на твердой фазе при добавлении раствора субстрата.
д) Остановка ферментативной реакции, измерение оптической плотности при 450/620 нм и интерпретация результатов.
2. Монолиза AgHBs Ультра – одноэтапный ИФА, также основанный на принципе «сэндвича», в котором используют не только моно-, но и поликлональные антитела, подобранные по их способности связывать различные субтипы HBs антигена, которые определены ВОЗ и характеризуют большинство различных штаммов вируса гепатита В. В качестве твердой фазы служат лунки разборного планшета, для сорбции используются мышиные моноклональные антитела. Конъюгат представляет собой смесь мышиных моноклональных и козьих поликлональных антител против HBs антигена, связанных с пероксидазой. Этапы методики не отличаются от приведенных выше.
Тест-системы фирмы Вектор-Бест:
Вектогеп В-HBs-антиген-стрип – иммуноферментная тест-система для определения HBs антигена с использованием рекомбинантного антигена и моноклональных антител. Принцип анализа – твердофазный двухступенчатый «сэндвич»-метод ИФА.
Схема проведения анализа:
а) Внесение образца в лунки планшета с сорбированными моноклональными антителами к HBs-антигену.
б) Инкубация, промывка.
в) Внесение конъюгата (конъюгат антител к HBs антигену с пероксидазой хрена).
г) Инкубация, промывка.
д) Внесение субстратной смеси (ТМБ Н2О2) и инкубация.
е) Остановка реакции стоп-реагентом и измерение оптической плотности при 450/620 нм, интерпретация результатов.
Пробы со значениями поглощения на уровне и выше cut-off анализировались повторно в дублях.
В случае получения положительного или сомнительного результата в скрининге проводили обязательное выполнение подтверждающих тестов с использованием тест-систем на основе реакции нейтрализации тех же производителей – Вектор-Бест и Вектогеп В-HBs-антиген, подтверждающий тест-стрип, содержащий рекомбинантный антиген и моноклональные антитела. Анализ основан на параллельном тестировании образца в двух лунках планшета с проведением в одной из них прямого, а в другой – конкурентного типа ммуноферментного анализа. При этом в лунки с конкурентным типом ИФА вносили раствор подтверждающего агента, содержащий поликлональные антитела к HBsAg. Если процент подавления составлял не менее 50%, то образец признавался положительным.
2.2.2. Обследование на наличие маркеров гепатита С проводили на основании приказа № 322 МЗ РФ от 21.10.2002 г. и приказа № 364 МЗ РФ от 14.09.2001 г.
Исследования проводились коммерческими тест-системами фирмы Био-Рад и фирмы Вектор-Бест в соответствии с прилагаемыми инструкциями.
Тест-системы фирмы Вектор-Бест:
РекомбиБест анти-ВГС и Бест анти-ВГС. Данные тест-системы представляют собой набор реагентов, основой которого являются рекомбинантные антигены вируса гепатита С, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструктурной (NS3, NS4, NS5) областью генома ВГС и иммобилизированные на поверхности лунок разборного полистиролового планшета. Содержащиеся в сыворотках крови человека антитела к ВГС (IgG и IgM), взаимодействуя с рекомбинантными антигенами, иммобилизованными на твердой фазе, вызывали образование комплекса антиген-антитело и выявлялись с помощью иммуноферментного конъюгата.
Тест-системы фирмы Био-Рад:
Монолиза ВГС АГ-АТ Ультра. Данная тест-система предназначена для совместного определения как антигена, так и антител к вирусу гепатита С, что делает ее более чувствительной и дает возможность значительно сократить серонегативный период по сравнению с вышеупомянутыми системами. Она близка по чувствительности к антигенным тестам и определению РНК вируса методом ПЦР. Тест-система содержит моноклональные антитела к ядерному антигену ВГС и рекомбинантные антигены NS3 и NS4, фиксированные на поверхности лунок планшета. Обе реакции: детекция антигена и детекция антител происходят в одной и той же лунке.
Пробы со значениями поглощения на уровне и выше cut-off анализировали повторно в дублях.
Образцы с первично-положительным результатом на наличие антител к вирусу гепатита С исследовали в подтверждающем тесте с использованием реагентов фирмы Вектор-Бест – Бест анти-ВГС и анти-ВГС-спектр. Данные тест-системы включают рекомбинантные антигены ВГС, соответствующие участкам белков, кодируемых структурной (core) и неструктурной (NS3, NS4, NS5) областью генома ВГС, иммобилизованные раздельно на поверхности лунок полистиролового планшета. Образование комплекса «антиген-антитело» выявляли с помощью иммуноферментного конъюгата. Результаты интерпретировали согласно инструкции по применению данной тест-системы.
2.2.3. Обследование на наличие маркеров ВИЧ проводили на основании приказов МЗ РФ №292 от 31.07.01 и № 364 от 14.09.2001 г.
Донорскую кровь обследовали с помощью самых чувствительных тест-систем 4-го поколения, которые способны одновременно определять анти-ВИЧ-антитела и антиген вируса. Качественные комбинированные тесты позволяют определить антиген в концентрации 15-30 пг/мл на фоне высокой аналитической чувствительности при детекции антител, что дает возможность сократить серологическое окно и обеспечить высокую надежность получаемого результата на всем протяжении сероконверсионного периода.
При обследовании применяли следующие тест-системы:
- КомбиБест ВИЧ-1,2 АГ/АТ (Фирмы Вектор-Бест).
Основой набора являются рекомбинантные антигены ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и антитела к ядерному антигену р24ВИЧ-1, иммобилизованные на поверхности лунок разборного планшета и входящие в состав конъюгатов.
- Дженскрин Плюс ВИЧ Аг/Ат, Дженскрин Ультра ВИЧ Аг/Ат (Фирмы Био-Рад).
Набор предназначен для выявления ВИЧ антигена и различных антител, связанных с ВИЧ 1 и ВИЧ 2 вирусами в сыворотке человека. Твердая фаза состоит из моноклональных антител против р24 ВИЧ 1 антигена, очищенного антигена: gp 160 рекомбинантного белка с композиционным полипептидом, состоящим из различных последовательностей вируса, вставленных в хорошо сохраненные последовательности группы ВИЧ 1 штамма 0, и пептидов, воспроизводящих иммунодоминантные эпитопы белков оболочки ВИЧ 2. Конъюгаты основаны на использовании биотинилированных поликлональных антител к АГ ВИЧ, gp41 и gp36 пептидов (воспроизводящих иммунодоминантные эпитопы глюкопротеидов оболочки ВИЧ1 и ВИЧ2) и того же самого композиционного полипептида ВИЧ1, используемого для твердой фазы.
Отрицательные результаты, полученные в антигенном и антительном тесте, означают отсутствие ВИЧ-инфекции. В случае выявления положительного или неопределенного результата проводили два повторных исследования в дублях. Если после проведения повторных исследований полученная величина оптической плотности оказывалась меньше критической, начальный результат считали неподтвержденным, и образец расценивали как ВИЧ-отрицательный. Если хотя бы одна из проб в повторном исследовании демонстрировала положительный результат, образец считали положительным в данном тесте. Дальнейшее исследование данного образца (постановка ИФА с другими тест-системами и постановка иммуноблота) проводилось в Городской иммунологической лаборатории.
2.2.4. Обследование на наличие антитрепонемных антител выполняли на основании приказа МЗ РФ №87 от 26.03.01 с помощью следующих методов:
1). Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА).
РПГА проводили с использованием тест-системы фирмы Био-Рад ТРНА 200, в которой используются птичьи эритроциты, покрытые антигенами Treponema Pallidum (штамм Николса) для связывания со специфическими антителами, присутствующими в сыворотке. Клетки находятся в растворе, содержащем специальные компоненты для элиминации неспецифических реакций. Результаты теста оценивали визуально. В случае положительной реакции наблюдали характерную гемагглютинацию.
2). Реакция микропрецититации с кардиолипиновым антигеном.
При проведении реакции микропреципитации в пробирку вносили 3 капли инактивированной сыворотки и добавляли 1 каплю эмульсии кардиолипинового антигена. Ингредиенты перемешивали встряхиванием в течение 5 минут, добавляли 3 капли 0,9% раствора хлористого натрия и оставляли при комнатной температуре на 5 минут. Результаты теста также оценивали визуально. При положительной реакции происходило выпадение хлопьев разной величины.
2.2.5. Исследование антигенов I класса системы HLA (локусов А и В)
Определение антигенов I класса системы HLA (локусов А и В) проводили методом серологического типирования в стандартном лимфоцитотоксическом тесте (ЛЦТТ) с использованием набора антилейкоцитарных сывороток («HLA-сыворотки», «Гисанс», Санкт-Петербург).
Для проведения ЛЦТТ из периферической крови обследуемого лица выделяли лимфоциты по методу Boyum (1974). Жизнеспособность выделенных клеток должна быть не менее 90%.
Проведение ЛЦТТ. В каждую лунку микропланшета с анти-HLA-сыворотками вносили по 1,0 мкл взвеси выделенных лимфоцитов в концентрации 2х106/мл. Планшеты инкубировали при температуре 220С в течение 30 минут. По окончании инкубации в каждую лунку вносили по 5,0 мкл кроличьего комплемента и продолжали инкубировать при тех же температурных условиях в течение 60 минут.
Для дифференциации живых (интактных) и погибших лимфоцитов в каждую лунку вносили по 2,0 мкл 5% раствора эозина и через 2-5 минут фиксировали результат, добавляя в каждую лунку 5,0 мкл 40% формальдегида (рН 7,2). Учет реакции производили при помощи светового инвертированного микроскопа не ранее, чем через 30 минут после фиксации (для осаждения клеток в лунке планшет). Результат реакции оценивали по 8-балльной системе, соответственно количеству погибших клеток (таблица 1).
Таблица 1
Оценка результатов ЛЦТТ
| % погибших клеток | Оценка реакции | Оценка в баллах |
| 0%-10% | Отрицательная | 1 |
| 11%-20% | Сомнительно-отрицательная | 2 |
| 21%-50% | Слабо-положительная | 4 |
| 51%-80% | Положительная | 6 |
| 81%-100% | Сильно-положительная | 8 |
- Молекулярное типирование генов системы HLA.
Проведение молекулярного типирования генов системы HLA (локуса DRB1*) предполагает несколько этапов: выделение геномной ДНК, проведение полимеразной цепной реакции и детекцию полученных результатов.
Выделение ДНК проводили с использованием иммуномагнитных частиц. Процесс получения ДНК включал клеточный лизис и адсорбцию освободившейся ДНК на поверхности иммуномагнитных частиц, отделение полученного комплекса ДНК с частицами при помощи магнита, промывку комплекса от оставшихся количеств потенциальных ПЦР-ингибиторов и растворение его в ресуспендирующем буфере. В работе использовали реактивы “Dynabeadc DNA DIRECT Blood” (Dynal BIOTECH, Норвегия).
Проведение полимеразной цепной реакции выполняли с использованием SSP-метода, при котором исследуемая ДНК амплифицируется с панелью сиквенс-специфических праймеров. Амплификация происходит с теми парами праймеров, нуклеотидные последовательности которых полностью комплементарны нуклеотидным последовательностям образца ДНК. Некомплементарные праймеры не связываются с ДНК, и амплификация не происходит. В работе использовали следующие реагенты для HLA-генотипирования: HLA-ДНК-ТЕХ (ДНК-Технология, Россия), Dynal AllSet-tm (Dynal BIOTECH, Норвегия), Biotest ( ), Protrans ( ). Постановку полимеразной цепной реакции проводили в строгом соответствии с инструкциями, прилагаемыми к каждому набору реагентов.
Детекцию результатов осуществляли посредством электрофореза в агарозном геле. Успешная амплификация приводила к образованию фрагмента ДНК определенной длины, который выглядел при ультрафиолетовом свете в геле, окрашенном этидиумом бромидом, как светящаяся полоса.
- Статистическая обработка результатов исследований.
Статистический анализ полученных данных проводили с помощью персонального компьютера с использованием стандартного пакета прикладных программ для “Microsoft-Excel”, версия 7,0 для Windows 2000, применяя методы общей статистики (М, σ, процентное распределение), сравнения двух величин по t-тесту Стъюдента с определением вероятности различий – p.
ГЛАВА 3
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ДОНОРСТВА КРОВИ В САНКТ-ПЕТЕРУБРГЕ ЗА ПОСЛЕДНИЕ 15 ЛЕТ
Изменения количественного и качественного состава доноров С-Петербурга на протяжении последних 15 лет
За последние 15 лет в нашей стране в целом, и в С-Пб в частности, произошли значительные социально- экономические, демографические, правовые изменения, напрямую коснувшиеся службы крови. Они заключались в уменьшении числа станций переливания крови, отмене льгот для доноров и падении престижности донорства, снижении активности работы выездных донорских бригад, производивших забор крови на предприятиях – как из-за уменьшения числа предприятий, так и по причине негативного отношения владельцев частных предприятий к донорству, ухудшении агитационно-просветительской работы. Немалое значение имело также снижение уровня жизни и уменьшение продолжительности жизни населения. Определенную роль сыграло увеличение отбраковки лиц, желающих сдать кровь, по причине выявления у них гемотрансмиссивных инфекций, таких как СПИД, сифилис, гепатит С, значительный рост которых среди населения нашей страны отмечен в эти годы.
3.1. Изменение общего количества доноров крови.
Изменение общего количества доноров крови С-Пб на протяжении 15 лет представлено на рис.1.
Рис. 1. Общее количество доноров крови в Санкт-Петербурге (1992-2007г.г.).
Как видно из представленного графика (рис. 1), количество доноров крови в Санкт-Петербурге на протяжении рассматриваемого периода времени уменьшилось в два раза. Особенно резким это уменьшение было в 1993 – 1998 годах. Начиная же с 2000г., наблюдается стабилизация и затем - некоторое увеличение численности доноров.
Известно, что число доноров на тысячу населения считают показателем, достаточно точно отражающим как отношение к донорству, так и его состояние в стране.
Изменение количества доноров на 1000 населения в С-Пб представлено на рис. 2.
Рис. 2. Число доноров крови на 1000 населения в Санкт-Петербурге
Результат проведенного анализа (рис.2), свидетельствует о том, что аналогично уменьшению общего числа доноров, уменьшилось и количество доноров на тысячу населения: если в 1992г. оно составляло 20, то в 1999г. – меньше 10. При этом следует учесть, что реально это соотношение еще меньше, поскольку в Санкт-Петербурге проживает значительное количество незарегистрированных мигрантов. Наибольшее падение этого показателя также пришлось на 1998-1999г., а с 2000г. отмечается стабилизация и даже некоторое увеличение его – до 12 доноров на тысячу населения в 2007г.
Естественно, что общее число кроводач в Санкт-Петербурге уменьшилось с 1992г. в соответствии с уменьшением количества доноров, однако с 2000г. наблюдается стойкая стабилизация этого числа (рис. 3), что позволяет рационально планировать расход донорской крови и направления использования ее запасов.
Рис. 3. Общее количество кроводач в Санкт-Петербурге
Причины уменьшения численности доноров были рассмотрены выше, а причины увеличения их в последние годы связаны, на наш взгляд, с реорганизацией донорской службы в С-Пб, реконструкцией материальной базы, в том числе оснащением станции современным оборудованием. Немалую роль сыграло и возрастание интереса государства к донорству, выразившееся в появлении нового Закона о донорстве (200 г.). Большое значение для нашего города имеют организованные по инициативе СПК акции сдачи крови администрацией города во главе с губернатором, транслируемые средствами массовой информации.
3.2. Доноры плазмы и клеток
В настоящее время принят значительно более строгий подход к переливанию крови: в подавляющем большинстве случае переливают не цельную кровь, а ее компоненты – эритроцитную массу, плазму, или тромбоконцентрат - в соответствии с клиническими показаниями.
Рис. 4. Количество доноров плазмы в С-Пб (1992-2007г.г.)
Количество доноров плазмы за эти годы изменилось следующим образом (рис. 4): в 1992г. их было 1728, наименьшее численность - - наблюдалась в 1999г., а в 2007г. их стало 2352, что более чем на пол-тысячи превысило показатели относительно благополучного в отношении донорства, исходного в нашем анализе 1992 года. Значительный подъем наблюдался лишь в 1995г., что, вероятно, связано с началом внедрения в 1995г. автоматического плазмафереза.
В процентном же отношении к общему числу доноров соответствующих годов эти изменения еще больше: в 1992г. доноры плазмы составляли лишь 1,8% от числа всех доноров, а в 2007г. – уже 5,2% (рис. 5), т.е. доля доноров плазмы возросла практически в 3 раза, что, безусловно, следует расценивать, как положительный факт, поскольку именно плазма является наиболее востребованным клиниками компонентом, а также наиболее ценным сырьем для производства препаратов.
Рис. 5. Относительное содержание доноров плазмы среди доноров крови С-Пб (1992-2007г.г.)
Общее количество плазмадач в Санкт-Петербурге, естественно, также снизилось в соответствии с уменьшением числа доноров: если в 1992г. оно составило около 24 000, то в 1999 – уже менее 10 000. Но уже в 2000г. наметился подъем, и в последние годы это количество стабильно несколько превышает 10 000 в год (рис. 6).
Рис. 6. Общее количество плазмадач в Санкт-Петербурге с 1992 по 2007г.г.
Учитывая же, что средняя доза плазмадачи по сравнению с 1992г. возросла практически в два раза – с 300,0 мл до 600,0 (рис. 7) – становится понятным, что заготовка плазмы в Санкт-Петербурге достигла сравниваемого уровня 1992г.
Рис. 7. Средняя доза плазмадачи в Санкт-Петербурге
Число плазмадач на одного донора в год, снизившееся с 14 в 1992г. до 4 в 1995г. (рис. 8), увеличилось до 6, и на этом уровне держится практически стабильно. Можно считать этот уровень удовлетворительным.
Рис. 8. Количество плазмадач на 1 донора в год в Санкт-Петербурге
Что касается однократных плазмадач, то как их абсолютное число (рис. 9), так и относительное содержание (рис. 10) очень резко снизилось, а в последние годы пришло практически к нулю.
Рис. 9. Количество однократных плазмадач в Санкт-Петербурге
Рис. 10. Относительное содержание однократных плазмадач в Санкт-Петербурге
В отношении двукратных плазмадач в Санкт-Петербурге динамика следующая: после значительных колебаний как абсолютного числа, так и соотношения с другими видами, в последние 5 лет наблюдений – с 2003г. – их количество составляет около 4 000 в год, что соответствует 35-40% от общего числа плазмадач (рис. 11, рис. 12).
Рис. 11. Количество двукратных плазмадач в Санкт-Петербурге
Рис. 12. Относительное содержание двукратных плазмадач в Санкт-Петербурге
Принципиальные изменения претерпели безвозмездные плазмадачи в Санкт-Петербурге: если в 1992г. их насчитывалось около 2 000, и они составляли лишь 4% от всех плазмадач, то с 2005г. их число возросло до 10 000 – 11 000, что составило 100%. Достижение полностью безвозмездных плазмадач, явилось, безусловно, большим достижением службы крови Санкт-Петербурга (рис. 13, рис. 14).
Рис. 13. Количество безвозмездных плазмадач в Санкт-Петербурге
Рис. 14. Относительное содержание безвозмездных плазмадач в Санкт-Петербурге
И вполне естественно, что после получения станцией нового оборудования как абсолютное, так и относительное число автоматических плазмадач увеличилось, составляя 6 000 -7 000 ежегодно, т.е. 60%-70% от общего числа (рис. 15, рис. 16).
Рис. 15. Количество автоматических плазмадач в Санкт-Петербурге
Рис. 16. Количество автоматических плазмадач в Санкт-Петербурге
Доноры клеток представлены донорами тромбоцитов. Неуклонное снижение числа этих доноров происходило также параллельно общему снижению, стабилизация произошла в 2005г., а с 2006 начался резкий – в 4, а затем в 6 раз по сравнению с 2005г. – подъем (рис. 17). Это, безусловно, связано с переоснащением станции и внедрением автоматического метода получения тромбоцитов.
Рис. 17. Число доноров тромбоцитов (по годам).
Что касается относительной доли доноров клеток среди всего массива доноров, то после резкого уменьшения этой доли до 0,5% в 2006г. (рис. 18), она затем возросла почти до 3%, превысив исходные показатели, составлявшие несколько менее 2,5%.
Рис. 18. Относительное содержание доноров тромбоцитов (по годам).
Динамика количественного и возрастного состава доноров
Рис. 19. Соотношение мужчин и женщин среди доноров Санкт-Петербурга
Изучение соотношение мужчин и женщин среди доноров Санкт-Петербурга показало, что если в 1992-1996 годах оно было примерно равным, и даже с некоторым преобладанием мужчин, то начиная с 1997г. наблюдается стойкое преобладание женщин, их доля устойчиво составляет 55-62% (рис. 19). Возможно, это связано с алкоголизацией населения, особенно мужского, и поэтому с более частым отводом мужчин от донорства из-за повышения АЛАТ.
Что касается возраста доноров, то эти показатели также значительно изменились: если в исходном для нашего исследования 1992г., когда структура донорской службы соответствовала советскому периоду, молодые доноры составляли 20%, доноры старшей возрастной группы – от 40 до 60 лет – 30%, а большую часть – 50% - составляли люди в возрасте от 30 до 39 лет (рис. 20), то с 1993г. доля доноров старшей возрастной группы увеличилась до 40 с небольшим процентов, при этом появились доноры, возраст которых превышал 60 лет. Безусловно положительным фактом следует считать неуклонный рост доли доноров до 29 лет, превышающей в последние годы 40%, хотя доля лиц в возрасте от 30 до 39 лет уменьшилась более чем в 2 раза, и составляет в последние годы лишь 15-20%.
Рис. 20. Соотношение различных возрастных групп среди доноров Санкт-Петербурга
Интересно отметить изменение характеристик социальной структуры доноров: первые безработные среди доноров появились в 1995 г., в 2000г. их численность достигла 1%, и с тех пор продолжает, с колебаниями, повышаться (рис. 20).
Рис. 20. Доля безработных среди доноров Санкт-Петербурга
Очень сильно возросла доля студентов и курсантов военных училищ, сдающих кровь: если в 1992г. их было 12,5% среди прочих, то в последние годы, при неуклонном росте, доля их достигает 32-37% (рис. 21). Вероятно, именно они повлияли на возрастной состав доноров, значительно увеличив количество их в возрасте до 29 лет.
Рис. 21. Доля студентов и курсантов среди доноров Санкт-Петербурга
3.3. Первичные доноры и доноры резерва
Количество первичных доноров уменьшалось с 1992г. вплоть до 2000г., и только в 2001г. начало постепенно увеличиваться (рис. 22). С 2002г., параллельно увеличению первичных, начало увеличиваться также и общее количество доноров. Безусловно, с точки зрения увеличения общего числа доноров, возрастание числа лиц, пришедших впервые дать кровь, является положительным фактом, свидетельствующим о том, что проводимая станцией переливания крови агитационно-просветительская работа среди населения, а также улучшение материально-техничесой базы, позволившее сделать процедуру дачи крови безопасной и более комфортной для донора, дала свои положительные результаты.
Рис. 22. Количество первичных доноров в Санкт-Петербурге
Относительное содержание первичных доноров также значительно увеличилось, достигнув 60% в 2007г. (рис. 23)
Рис. 23. Относительное содержание первичных доноров среди общего массива
доноров в Санкт-Петербурге
Однако, при анализе соотношения первичных доноров и доноров резерва, показано, что как абсолютные (рис. ), так и относительные (рис. ) соотношения этих групп доноров за рассматриваемый период времени изменились коренным образом: если в 1992г. первичных доноров было лишь 20,2%, и этот процент позволял поддерживать стабильное общее число доноров, то в 2006-2007 годах лишь значительный приток первичных доноров, которые стали составлять больше половины (в 2007г. – 74,8%), позволил добиться реального увеличения донорского контингента.
Рис. 24. Соотношение количества первичных доноров и доноров резерва среди доноров Санкт-Петербурга
Решение этой первоочередной задачи – увеличения общего числа доноров – еще не решило всех остальных проблем, поскольку именно доноры, регулярно сдающие кровь, у которых выполнено полное фенотипирование, позволяют целенаправленно подбирать пару донор-реципиент при наличии антител у реципиента, или в случае редкой группы. Точно так же именно постоянные доноры дают возможность подбора тромбоцитов по антигенам системы HLA или тромбоцитарным для сенсибилизированных реципиентов. И еще одним немаловажным аргументом в пользу постоянных доноров является значительно более низкая выявляемость (а значит, и заболеваемость) гемотрансмиссивными инфекциями, что показано нами в главе .
3.4. Платные и безвозмездные доноры
Параллельно уменьшению числа кроводач, уменьшалось и число безвозмездных кроводач. Однако с 2005г. наблюдается стабильное повышение этого числа, что безусловно является достижением (рис. 25).
Рис. 25. Количество безвозмездных кроводач в Санкт-Петербурге
Очень важным достижением последних трех лет – с 2005 по 2007 – является 100% безвозмездность кроводач в Санкт-Петербурге (рис. 26).
Рис. 26. Доля безвозмездных кроводач в Санкт-Петербурге
В 1992г. эта доля составляла 90%, затем она неуклонно снижалась, и в 1997г. большая часть кроводач были платными, безвозмездных было лишь 40%. Однако постепенно процент безвозмездных кроводач увеличивался, и с 2005г. все кроводачи являются безвозмездными.
Средняя доза безвозмездных кроводач, до 1996г. составлявшая 340,0-360,0 мл, в 1997г. достигла 400,0 мл, и постепенно повышаясь, в последние 3 года стабильно составляет 450,0 мл (рис. 27).
Рис. 27. Средняя доза безвозмездных кроводач в Санкт-Петербурге
. Количество безвозмездных кроводач на 1 донора в год в Санкт-Петербурге по сравнению с 1992г., когда на донора приходилось 1,7 кроводачи, также снижалось до 1,1 кроводачи в 2000г. (рис. 28), а затем, постепенно повышаясь, в последние три года наблюдения составляет 1,4 кроводачи на донора.
Рис. 28. Количество безвозмездных кроводач на 1 донора в год в Санкт-Петербурге
Таким образом, за годы наблюдения значительно изменились как число, так и структура донорских кадров Санкт-Петербурга: общая численность доноров значительно снизилась, так же как и количество доноров на тысячу населения, снизилось число плазмадач.
Изменился возрастной и половой состав доноров: если в 1992-1994 годах мужчин и женщин было приблизительно поровну, а в некоторые годы мужчины даже преобладали, то с 1997г. доля женщин четко возросла, не опускаясь ниже 55%.
Доля доноров старшей возрастной группы несколько увеличилась, появились доноры в возрасте старше 60 лет, но при этом в 2 с лишним раза больше стала и доля наиболее молодых – до 29 лет. Это увеличение прямо коррелирует с аналогичным неуклонным увеличением пропорции студентов и курсантов среди доноров, наблюдающимся в течение всего изучаемого периода: в 2008г. их стало около 40%, в то время как в 1992г. было лишь 12%.
В 1994 впервые среди доноров появились безработные, и с 2000г. их доля, постепенно увеличиваясь, составляет от 1 до 2% от общего числа.
Однако с 1998-2000г.г. прослеживается положительная динамика, выравнивание и даже улучшение ряда показателей: как общее количество доноров, так и число их на тысячу населения стабилизировалось, и даже несколько возросло в последние годы, достигнув 12 человек на тысячу жителей Санкт-Петербурга.
Безусловно, результатом активной агитационно-просветительской работы и улучшения качества работы СПК стало значительное увеличение доли первичных доноров среди доноров резерва: если в 1992г. на 88,7% доноров резерва приходилось 17,9% первичных доноров, то в 2000 – на 67,6% уже 26,1%, а в 2007 на 78,1% доноров резерва пришлось 58,5% первичных доноров. Это наблюдение следует расценивать двояко: с одной стороны, происходит увеличение числа доноров за счет притока новых добровольцев, что, безусловно, является положительным фактом. С другой же стороны, значительно уменьшается количество активных, постоянных доноров, которые, как известно, представляют собой основу регулярной, плановой службы крови, в работе которой должна быть предусмотрена возможность вызова донора редкой группы, донора с полным фенотипом, что, естественно, невозможно при преобладании доноров, впервые явившихся для кроводачи. Такие доноры, которые могут явиться для дачи крови лишь однократно, более опасны и в инфекционном отношении: известно, что гемотрансмиссивные инфекции у регулярных доноров встречается значительно реже.
Количество доноров плазмы по сравнению с 1992г. также несколько повысилось, а доля доноров плазмы даже увеличилась с 2% до 5%. Практически отсутствуют однократные плазмаферезы, доля двукратных возросла. Количество плазмаферезов на одного донора в последние годы стабилизировалось и составляет 6 за год. В два раза увеличилась средняя доза взятия плазмы, достигнув в последние годы 600,0 мл.
Увеличилась и доля доноров тромбоцитов в общей структуре донорских кадров.
И безусловным достижением последнего времени является уменьшение, а с 2005г. и полное отсутствие платных доноров. Все крово- и плазмадачи в Санкт-Петербурге являются безвозмездными.