Клинико-иммунохимическая оценка проницаемости гематоэнцефалического барьера новорожденных из двоен, родившихся после применения вспомогательных репродуктивных технологий. 14. 00. 09 педиатрия 03. 00. 04 биохимия
| Вид материала | Автореферат диссертации |
- Приказ 28 апреля 2007 г. N 195 об организации работы по направлению на лечение бесплодия, 218.87kb.
- Приказ от 20 г. №, 1369.14kb.
- Приказ Минздрава РФ от 26 февраля 2003, 598.06kb.
- Штамп учреждения Выписка из амбулаторной карты, 58.3kb.
- Вые аспекты вспомогательных репродуктивных технологий, в том числе «суррогатного материнства»,, 88.16kb.
- Клинико-иммунологическая характеристика и иммунотерапия пневмонии у новорожденных,, 653.89kb.
- «О вспомогательных репродуктивных технологиях и гарантиях прав граждан при их применении», 237.55kb.
- Адаптация недоношенных новорожденных детей при церебральной ишемии (клинико-функциональное, 394.95kb.
- Актуальные вопросы преодоления бесплодия: консервативные и оперативные методы лечения,, 39.86kb.
- Основные вопросы конференции: Демографические проблемы в России и Сибирском регионе, 25.17kb.
На правах рукописи
Вайнштейн Наталья Петровна
Клинико-иммунохимическая оценка проницаемости
гематоэнцефалического барьера новорожденных из двоен,
родившихся после применения вспомогательных
репродуктивных технологий.
14.00.09 - педиатрия
03.00.04 - биохимия
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Москва 2009
Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Российский государственный медицинский университет федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»
Научные руководители:
доктор медицинских наук, профессор Мухина Юлия Григорьевна
академик РАМН, профессор Чехонин Владимир Павлович
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор Демин Валерий Федорович
доктор медицинских наук, профессор Сенцова Татьяна Борисовна
Ведущее учреждение:
ФГУ "Московский НИИ педиатрии и детской хирургии Росмедтехнологий"
Защита состоится «7» сентября 2009 г. в 14.00 ч. на заседании диссертационного совета
Д 208.072.02 при Российском государственном медицинском университете по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке университета РГМУ по адресу: 117997, г. Москва, ул. Островитянова, д. 1
Автореферат диссертации разослан«12» апреля 2009г.
Ученый секретарь диссертационного совета
Д.м.н.профессор Котлукова Наталья Павловна
Актуальность проблемы
Вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ), в частности экстракорпоральное оплодотворение и перенос эмбриона, активно внедрены в клиническую практику в течение последних двух десятилетий [В.И.Кулаков, Б.В.Леонов 2000]. Большое значение в связи с этим приобретают исследования, посвященные оценке состояния ребенка в раннем неонатальном периоде с последующим прогнозом его дальнейшего развития, состояния здоровья и отсроченных результатов [В.И.Кулаков и др., 1995; В.О. Бахтиярова, 1993 г; В.М. Здановский, И.И. Витязева, 2000].
Значительная доля (от 20 до 30%) беременностей, наступивших в результате применения ВРТ, многоплодные. В связи с этим, современные исследователи проводят раздельный анализ исходов одноплодных и многоплодных беременностей [Frans M. Helmerhorst, Denise A. M. Perquin и др., 2004].
Течение многоплодной беременности характеризуется более частыми осложнениями, задержкой внутриутробного развития плодов, малым сроком гестации, низкой оценкой по шкале Апгар при рождении, что обуславливает принципиально другую структуру заболеваемости и частоту перинатальных повреждений ЦНС у детей, родившихся от многоплодной беременности (Чуловский Ю.И., Рудакова Е.Б., и др. 2003 г.). Если ориентироваться на существующие многочисленные сообщения, в которых идет речь о существенном отличии показателей здоровья детей из одноплодных, двуплодных и трехплодных беременностей, то становится очевидным, что существует проблема более частых перинатальных повреждений ЦНС у детей из многоплодных беременностей. Однако при раздельном анализе исходов одноплодных и многоплодных беременностей отдаленные (до 2-7 лет) многоцентровые исследования детей из двоен, зачатых с применением ВРТ, показывают, что риск неврологических осложнений и церебрального паралича у них не выше, чем в контрольной группе детей из двоен соответствующего пола и возраста [Pinborg, Loft, 2004].
Особенно актуально изучение состояния ЦНС у описанной категории детей в раннем неонатальном периоде. Отсутствие золотого стандарта диагностики перинатальных поражений ЦНС в раннем неонатальном периоде вынуждает неонатологов и невропатологов использовать комплекс методов диагностики (НСГ, МРТ, компьютерная томография, ЭЭГ и др.), которые не всегда дают возможность получить исчерпывающую информацию, необходимую для оценки степени тяжести повреждения ЦНС новорожденных. Перспективными для прижизненной оценки состояния ЦНС являются биохимические и иммунохимические методы, позволяющие анализировать некоторые изменения метаболизма в ткани мозга, сопровождающиеся появлением в сыворотке крови специфических для мозга веществ.
Нейроспецифические белки (НСБ) являются структурными компонентами клеток нервной ткани, выполняя специфические для ЦНС функции (ферментные, рецепторные, регуляторные, транспортные, модуляторные и др.). Вследствие того, что НСБ синтезируются клетками нервной ткани, не контактирующими с иммунокомпетентными клетками, они иммунотолерантны и отсутствуют в крови в иммуногенных концентрациях в норме. В то же время хорошо известны заболевания, при которых из-за нарушения резистентности ГЭБ НСБ могут элиминироваться в кровь, порой в высоких концентрациях. Ряд НСБ широко применяется в диагностических целях как маркеры проницаемости ГЭБ [Aurell A. 1991; Blennow M. 1995; 1996; Dotevall L. 1996; Eng L. 2000, Hermann M. 2000; Чехонин В.П. 2001; Van Geel W. J. 2002 Herrmann 2003; Jauch E. 2000; Kristjansdottir R. 2001; Sporer B. 2004; Petzold A. 2004]. Среди них наиболее эффективны - основной белок миелина (ОБМ) - один из белков, входящих в состав миелиновой оболочки [А.П.Хохлов, Ю.Н.Савченко, 1990, Deber C.M., Reynolds C.J. 1991, Чехонин В.П. и соавт. 2000, Семенова А.В. 2002, Harauz A. 2004, Tzakos A.G. 2005] и нейроспецифическая енолаза (НСЕ) – белок дифференцированных нейронов, катализирующий превращение 2-фосфоглитерата в фосфоенолпируват [Kaiser E. at al.1989, Чехонин В.П и соавт. 2000, Ingebrigsten T. еt al. 2003, Lamers K.J.еt al. 2003, Herrmann M.2003, Pineda J.A. 2004, Begaz T.2006.].
Этиологически различные повреждения нервной ткани (гипоксия-ишемия, травма, инфекции) вызывают сложные нарушения в виде изменения проницаемости гематоэнцефалического барьера с элиминацией в кровь нейроспецифических белков, обладающих высокой антигенностью [О.И.Гурина, 2005]. Воздействие широкого спектра факторов «перинатального риска», таких как гипоксия-ишемия, родовая травма, неонатальные кардиореспираторные и метаболические дисфункции, врожденные инфекции и ряд других, вызывает нарушение мембранных функций астроцитов и эндотелиоцитов церебральных капилляров, формирующих гематоэнцефалический барьер [В.П.Чехонин, С.О.Рогаткин, и др. 2003]. Контакт НСБ с иммунокомпетентными клетками крови может приводить к различному по мощности иммунному ответу, специфичному по отношению к соответствующему белку, приводя к появлению в крови соответствующих аутоантител. Антитела к нейроспецифическим белкам, в свою очередь, могут проникать через поврежденный гематоэнцефалический барьер и связываться с соответствующими антигенами в ткани мозга, где при посредничестве факторов комплемента происходит запуск неспецифичных острофазовых реакций, приводящих к аутоиммунному воспалению и цитотоксическому отеку [В.П.Чехонин, И.А.Рябухин, О.И.Гурина и др., 1997].
В доступной литературе отсутствуют публикации, касающиеся сравнительного анализа уровней ОБМ и НСЕ и антител к ним в сыворотке крови новорожденных детей из двоен различного гестационного возраста, рожденных с применением вспомогательных репродуктивных технологий и естественным путем. Иммуноферментный анализ пуповинной крови дает возможность получить представление о пренатальных и интранатальных воздействиях, которые и являются решающими для инициации перинатального поражения ЦНС у новорожденного и позволяет избежать венепункции и ятрогенной анемизации, что особенно актуально у детей ОНМТ и ЭНМТ. Поиск путей решения данной проблемы ведется многими исследователями (Володин Н.Н. 2000-2007, Dammann O, Leviton A. 2007; Rennie JM 2007, Wyatt JS. 2007, Hossain MA.2008, Katidou M, 2008, Dammann O.2008, Taniguchi H.2008, Chen W,2009).
В частности, показана значимость определения уровня нейроспецифической енолазы околоплодных вод (Гурина О.И. 1996, Rosengren L.1998-2009, Гащенко О.В.2005] или нейроспецифической енолазы пуповинной крови [Гончарова О.В. и др, 2005 ] в качестве диагностического критерия перинатальных гипоксических поражений ЦНС.
Цель исследования
На основании клинических и иммунохимических показателей оценить состояние здоровья, частоту поражений центральной нервной системы, состояние гематоэнцефалического барьера у новорожденных из двоен гестационного возраста от 32 до 39 недель, родившихся в результате применения экстракорпорального оплодотворения, по сравнению с детьми из двоен, родившихся от беременностей, наступивших естественным путем.
Задачи исследования
1. Сравнить состояние здоровья новорожденных детей из двоен, рожденных от беременностей, наступивших в результате применения ВРТ и от беременностей, наступивших естественным путем.
2. Оценить частоту поражений головного мозга на основании применения нейросонографического метода у новорожденных детей из двоен, рожденных от беременностей, наступивших в результате применения ВРТ и от беременностей, наступивших естественно.
3. Определить диагностическое значение уровней ОБМ и НСЕ и антител к ОБМ и НСЕ в сыворотке пуповинной крови для оценки состояния ЦНС новорожденных из двоен групп сравнения.
4. Провести анализ влияния различных пренатальных и перинатальных факторов (в том числе применения ВРТ) на уровни ОБМ и НСЕ и аутоантител к ним в сыворотке пуповинной крови новорожденных детей из двоен групп сравнения.
Научная новизна работы
Впервые выявлено, что группы детей из двоен, рожденных от беременностей, наступивших естественным путем и с применением ВРТ, сформированные на основании сходного срока гестации от 32 до 39 недель, оказались сходны по массо-ростовым показателям (p >0.1), по заболеваемости ЗВУР, тяжелыми респираторными расстройствами, перинатальными поражениями ЦНС, обменными нарушениями, по потребности в переводе на второй этап выхаживания. Показано отсутствие влияния фактора применения ВРТ на заболеваемость в раннем неонатальном периоде, частоту перинатального поражения ЦНС.
Дети в обследованных группах имели следующие варианты нейросонографической картины: норма, незрелость и перинатальное поражение (последствия перинатальной гипоксии-ишемии, антенатально перенесенной инфекции и ВЖК). Впервые прослежена взаимосвязь между вариантами нейросонографической картины и уровнями ОБМ и НСЕ и антител к ним в сыворотке крови у детей из двоен. Клинические и\или нейросонографические признаки перинатального поражения ЦНС выявлены в равных долях в группах ВРТ (18%) и БНЕ (17%). Все дети из этих подгрупп внутриутробно подвергались действию неблагоприятных факторов течения беременности. Эти дети имели достоверные иммунохимические отличия от подгрупп «нормы» и «незрелости» в виде повышения уровней ОБМ (p<0. 01) и НСЕ (p<0. 01) и в ряде случаев появления антител к этим НСБ. В то же время, при сравнении подгрупп ВРТ и БНЕ с «гипоксически-ишемическими изменениями» уровни как НСЕ (p >0.1), так и ОБМ (p >0.1) в подгруппах не отличались.
Продемонстрированное отсутствие достоверных различий в концентрациях как основного белка миелина, так и нейроспецифической енолазы и антител к ним в сыворотке пуповинной крови новорожденных сходного гестационного возраста из двоен, родившихся от наступивших естественно беременностей и с применением вспомогательных репродуктивных технологий, позволило говорить об отсутствии влияния фактора применения ВРТ на состояние гематоэнцефалического барьера и частоту перинатальных поражений ЦНС.
Практическая значимость
1. Для благоприятного исхода многоплодной беременности в виде «take home baby» фактор многоплодия намного более важен, чем фактор применения ВРТ. Применение ВРТ имеет связь с отягощенным бесплодием анамнезом матерей, и оказывает влияние на течение и исход многоплодной беременности в основном в качестве причины многоплодия.
2. Обследованные дети из двоен, рожденных, от беременностей, наступивших естественным путем и с применением ВРТ, при одинаковом сроке гестации от 32 до 39 недель сходны по массо-ростовым показателям, течению раннего неонатального периода и заболеваемости. На основании нашей работы можно говорить об отсутствии влияния ВРТ на состояние здоровья в раннем неонатальном периоде и частоту перинатальных поражений ЦНС детей из двоен.
3. Определение концентрации ОБМ и НСЕ и антител к ним в сыворотке пуповинной крови целесообразно использовать для ранней диагностики перинатальных повреждений ЦНС у детей из двоен различного гестационного возраста.
4. Для раннего выявления поражения структур мозга целесообразно проведение НСГ и/или иммунохимического анализа ОБМ и НСЕ и антител к ним всем детям из двоен, независимо от применения ВРТ, как новорожденным группы высокого риска внутриутробного и перинатального повреждения ЦНС.
5. Неинвазивный метод забора пуповинной крови для проведения иммуноферментного анализа ОБМ, НСЕ и антител к этим белкам в сыворотке пуповинной крови позволяет избежать болезненной процедуры венепункции и может быть использован для диагностики перинатального поражения ЦНС у новорожденного.
Апробация работы. Диссертация выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы кафедры детских болезней №2 ГОУ ВПО РГМУ РОСЗДРАВА.
Основные положения работы были представлены в периодической печати, на IV Российском конгрессе «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии» (Москва, 2005). Работа была апробирована на объединенной научно-практической конференции сотрудников кафедры детских болезней №2 ГОУ ВПО РГМУ и отдела фундаментальной и прикладной нейробиологии Государственного научного центра социальной и судебной психиатрии им. В. П. Сербского 28.06.2007 года.
Внедрение в практику. Результаты исследования внедрены в практику отделения патологии новорожденных ДГКБ №13 им. Н.Ф.Филатова, научно-исследовательскую работу и учебный процесс отдела фундаментальной и прикладной нейробиологии Государственного научного центра социальной и судебной психиатрии им. В. П. Сербского (зав. отделом – академик РАМН, проф. В.П. Чехонин) и кафедры детских болезней №2 (зав. кафедрой - проф. Ю.Г. Мухина) ГОУ ВПО РГМУ Росздрава.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, из них 3 – в центральной печати.
Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из 4 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа изложена на _ страницах машинописного текста, иллюстрирована _ рисунками, содержит _ таблиц. Список литературы включает ___источников, из них _ отечественных и _ зарубежных.
Содержание работы
Объект и методы исследования
В раннем неонатальном периоде было обследовано 176 детей (88 двоен) с гестационным возрастом (ГВ) от 32,5 до 39,5 недель. Из исследования были исключены дети со сроком гестации менее 32 недель, перенесшие тяжелую асфиксию в родах, дети со значимыми пороками развития, с явным течением внутриутробной инфекции, с тяжелыми поражениями ЦНС. Мальчиков было 105, девочек - 71, детей из монохориальных двоен - 36, из бихориальных двоен - 140. В соответствии с целью и поставленными задачами были сформированы 2 группы детей. В первую группу были включены 88 детей из 44 двоен, рожденных с применением вспомогательных репродуктивных технологий (группа ВРТ), во вторую – 88 детей из 44 двоен, рожденных в результате беременностей, наступивших естественным путем (группа БНЕ) – см. таблицу 1.
Таблица 1.
Сравнительная характеристика групп ВРТ и БНЕ по соотношению полов, гестационному возрасту (ГВ), массе и шкале Апгар.
| Группа | ВРТ, N=88 | БНЕ, N=88 |
| Из них мальчиков, n | 53 | 52 |
| Из них девочек, n | 35 | 36 |
| ГВ, нед | 32,5 - 38,5 | 32,5 - 39,5 |
| Масса при рождении, г | 1120 - 3640 | 970 - 3600 |
| Оценка по шкале Апгар на 1-й минуте | 5-8 | 5-8 |
| Оценка по шкале Апгар на 5-й минуте | 6-10 | 6-9 |
При формировании групп каждой двойне из группы ВРТ подбиралась «контрольная» двойня с соответствующим сроком гестации. Решение о включении в исследование принималось при рождении, когда еще не было возможности оценить нейросонографическую картину. Таким образом, в каждую группу вошли по 4 двойни со сроком гестации 32,5-34 недели, по 22 двойни со сроком гестации 34,5-37,5 недель, по 18 двоен со сроком гестации 38 и более недель (таблица 2). Акушерская тактика при родоразрешении беременности после применения ВРТ предусматривает расширение показаний к кесареву сечению. Оперативное родоразрешение применено в группе ВРТ в полтора раза чаще и в несколько более ранних сроках. В связи с этим в подгруппе ВРТ с гестационным возрастом 34,5-37,5 значения медианы срока гестации и степени зрелости детей несколько меньше, чем в соответствующей подгруппе БНЕ.
Таблица 2.
Формирование групп ВРТ и БНЕ с учетом гестационного возраста.
| Группа | ВРТ | БНЕ | р | |
| ГВ 32,5 – 34 нед. | Число детей в группе, n | 8 | 8 | |
| ГВ, нед. * | 33.25 (32.5-34) | 33.25 (32.5-34) | p > 0.10 | |
| Ст. зрелости по шкале Дубовица, нед. * | 33 (32-33) | 33.5 (33-34) | p > 0.10 | |
| Масса при рождении, г. * | 1677.5 (1330-1990) | 1660 (1355-1735) | p >0 .10 | |
| Рост при рождении, см. * | 42 (40.5-43) | 40.5 (38.5-41.5) | p > 0.10 | |
| ГВ 34,5 – 37,5 нед. | Число детей в группе, n | 44 | 44 | |
| ГВ, нед. * | 35.5 (35.5-36.5) | 37.5 (36-37.5) | p <0.05 | |
| Ст. зрелости по шкале Дубовица, нед* | 36 (35-36) | 37 (37-37) | p <0.05 | |
| Масса при рождении, г.* | 2480 (2315-2660) | 2665 (2260-2800) | p <0.05 | |
| Рост при рождении, см.* | 47 (46-48) | 48 (46.5-49) | p <0.05 | |
| ГВ 38 и более нед. | Число детей в группе, n | 36 | 36 | |
| ГВ, нед. * | 38 (38-38.5) | 38 (38-38.5) | p >0 .10 | |
| Ст. зрелости по шкале Дубовица, нед.* | 38 (38-39) | 38 (38-39) | p >0 .10 | |
| Масса при рождении, г.* | 3040 (2720-3260) | 2890 (2800-3105) | p < 0.10 | |
| Рост при рождении, см.* | 50.5 (49-51) | 49 (47-50.5) | p >0 .10 | |
* - медиана и интерквартильный размах
Для всех двоен был собран материнский анамнез, включая сведения о профессии, возрасте, соматических и гинекологических заболеваниях матери, количестве и исходе предыдущих беременностей, при бесплодии – его причине и длительности, особенности течения данной беременности и родов, способе родоразрешения (оперативное или через естественные родовые пути), осложнениях родов.
Для каждого ребенка были учтены: оценка состояния при рождении, антропометрические данные, степень зрелости по шкале Дубовица, течение раннего неонатального периода, оценка состояния и степень поражения ЦНС, динамика симптомов. При наличии соматического заболевания - его динамика и исход, проводимые терапевтические мероприятия, результаты дополнительных лабораторных (общий анализ крови, мочи, газовый состав крови (рН, рСО2, рО2, ВЕ), электролиты (Cа++, Nа+, К+, Cl-), биохимическое исследование крови (билирубин и его фракции, общий белок, мочевина, глюкоза, АЛТ и АСТ)) и инструментальных методов исследования (УЗИ, рентгенография – по показаниям).
Неврологический диагноз устанавливался на основании классификации перинатальных поражений нервной системы у новорожденных [Н.Н. Володин, 2004]
Нейросонографическое исследование проводилось всем наблюдавшимся детям с целью объективизации клинических признаков перинатального поражения ЦНС на 1-4 сутки жизни. Детям в тяжелом состоянии – в динамике. Ультразвуковое сканирование головного мозга проводилось через большой родничок секторальными датчиками (5 МГц и 7,5 МГц) аппарата "Microimager 2000" фирмы "Ausonics" (Австралия) по общепринятой методике - путем последовательного получения 10 стандартных сечений в коронарной и сагиттальной плоскостях [В. В. Митьков, М. В. Медведев., 2003].
Обследование детей проводилось на базе ГУЗ НИЦ Центр Планирования Семьи и Репродукции (главный врач – д.м.н. профессор М.А. Курцер) в 2003-2005гг.
Иммунохимическое обследование проведено в отделе фундаментальной и прикладной нейробиологии Государственного научного центра социальной и судебной психиатрии им. В. П. Сербского (зав. отделом – академик РАМН, проф. В.П. Чехонин). В данной работе мы использовали сывороточный уровень основного белка миелина (ОБМ) и антител к нему (АТ к ОБМ) в качестве маркеров состояния олигодендроцитов и сывороточный уровень нейроспецифической енолазы и антител к ней (АТ к НСЕ) в качестве маркеров состояния нейронов. На основании анализа перечисленных иммунохимических показателей проводилась оценка степени нарушения деятельности гематоэнцефалического барьера [Терлецкая Я.Т., Я.В. Белик, 1987; В.П.Чехонин и соавт., 2007]. Количественное определение уровней ОБМ, НСЕ и антител к ним в сыворотке пуповинной крови было произведено при помощи «сэндвич»-варианта иммуноферментного анализа [A.Voller Et all., 1976] на основе моноклональных антител в модификации, разработанной в отделе фундаментальной и прикладной нейробиологии Государственного научного центра социальной и судебной психиатрии им. В. П. Сербского под руководством В.П. Чехонина.
Кровь для исследования брали при рождении из вены пуповины в объеме 1.0-2.0 мл. Кровь центрифугировали в течение 10 минут при 2000 g. Сыворотку крови в объеме 500 мкл замораживали при температуре -23° С.
При статистической обработке результатов использована программа Statistica 6.0. Распределение большей части полученных данных отличалось от нормального и для их описания были вычислены медиана и интерквартильный размах. Для сравнения двух групп переменных, имеющих распределение, отличное от нормального, применен критерий Колмогорова-Смирнова. Для анализа различия частот в двух группах применен двусторонний точный критерий Фишера. Различия считались достоверными при р<0.05.
Результаты работы
Средний возраст матерей в группе ВРТ (44 женщины) и в группе БНЕ ( 44 женщины) был примерно одинаков - 31,86 и 29,52 лет соответственно (р>0.1). Примерно равная доля женщин в группах имела отягощенный по соматическим заболеваниям анамнез – 34 (77%) и 32 (72%) соответственно. В группе ВРТ у матерей в 2 раза чаще диагностировались гинекологические заболевания - у 40 (91%) матерей против 20 (45,5%) в группе БНЕ, в том числе воспалительные (26 и 18) и спаечные (18 и 3) процессы репродуктивной системы. Акушерский анамнез был отягощен (самопроизвольными выкидышами, абортами, внематочными беременностями, а так же наличием первичного и вторичного бесплодия) у всех матерей в группе ВРТ и у 34 (77%) в группе БНЕ. Как видно из приведенных данных репродуктивная функция женщин, вынужденных использовать вспомогательные репродуктивные технологии, нарушена в большей степени (таблица 3).
Данная беременность была первой для 24 (55%) из 44 женщин как в группе ВРТ, так и в группе БНЕ, повторной для 20 из 44 (по 45%) как в группе ВРТ, так и в группе БНЕ.
Анализ особенностей течения беременности у матерей обследованных детей выявил, что беременность протекала без осложнений у небольшой части матерей (в группе ВРТ - у 1 женщины, в группе БНЕ - у 8). Подавляющее большинство многоплодных беременностей протекало с осложнениями в обеих группах (рис.2 и 3).
Обращает на себя внимание, что угроза прерывания в 1 половине беременности встречалась в группе ВРТ в 3 раза чаще (р<0,0005 ), а во 2 половине в 2 раза чаще (р<0,002), чем в группе БНЕ. Гестоз в виде водянки или нефропатии встречался в обеих группах с одинаковой частотой, но в группе ВРТ в 2 раза чаще (р<0,004) выявлялась более тяжелая его форма – нефропатия. Следовательно, дети группы ВРТ подвергались внутриутробному влиянию неблагоприятных факторов в несколько большей степени, чем дети группы БНЕ, что обусловлено не только действием вспомогательных репродуктивных технологий, но и состоянием здоровья женщин, прибегающих к их использованию. Все двойни, родившиеся в результате применения вспомогательных репродуктивных технологий, были бихориальными. Из 44 двоен, рожденных в результате беременностей, наступивших естественным путем, 18 (40%) были монохориальными, 26 (60%) - бихориальными.