Группа веществ, изолируемых экстракцией органическими растворителями – пестициды
Методическое пособие - Химия
Другие методички по предмету Химия
?лавления 740С. Технический препарат - загустевшее белое вещество со специфическим запахом.
Хлорофос хорошо растворим в спирте, бензоле, воде, хуже в четыреххлористом углероде. Быстро гидролизуется в щелочных растворах, медленнее в кислых.
Форма выпуска: 75% технический препарат, 7% гранулированный порошок (для борьбы с мухами, паразитами человека и животных).50 для хлорофоса 50-100г.
Карбофос
Чистое вещество - слабо окрашенное в желтый цвет масло со слабым неприятным запахом.
Растворимо в воде при комнатной температуре, хорошо растворимо в спиртах, кетонах, эфирах. При продолжительном нагревании изомеризуется. Медленно гидролизуется водой. При контакте с железом теряет инсектецидные свойства.
Форма выпуска: 30% концентрат эмульсии (для борьбы с тлей, клещами на деревьях, полевых культурах).
Летальная доза карбофоса - 5-10г.
Объекты исследования при отравлении ФОС:
желудок, толстый и тонкий кишечник с содержимым, печень, почки, мозг, легкие, сердце, кровь, моча.
Общая схема исследования на ФОС
Подготовка объекта: измельчить
v
Выделение:
1)настаивание с органическим растворителем (экстракция)
2)настаивание с водой, подкисленной серной кислотой, с последующей экстракцией.
v
Очистка экстракта
v
Получение сухого остатка
(водяная баня, ротационный испаритель)
v
Растворение
v
Исследования на ФОС:
1)предварительные,
2)подтверждающие,
)количественное определение.
Характеристика некоторых методов изолирования
ПрепаратОбъектРаствори- тельрНКратностьОчисткаРастворение сухого остаткаМетафосорганы кровьгексан (1:2) СНCl3 (1:1) гексан2-31-2 ч + 1 ч 4ч +2ч+2ч1) б\в Na2SO4 2)высушивание до V=20мл 3)экстракция ДМФА 4)ТСХ1) гексан 2)ацетонХлорофосорганы кровьвода+ Н2SO4 с экстракцией СНCl3 эфир, CHCl32-32ч+ 1ч +1 ч1) б\в Na2SO4 2)высушивание на водяной банеацетонКарбофос органы кровь растительное сырьебензол CHCl3 CCl41,01 ч х 51)фильтрование через б\в Na2SO4 2)высушивание при 600С 3)из загнившего -дополнительно очистка на Al2O310 мл этанола
Примечания:
Объект без глубокого гнилостного разложения - 1 - 3 дня хранения.
Количество исследуемого биоматериала: для изолирования метафоса - 25 гр., для изолирования хлорофоса и карбофоса - 20- 100 гр.
При исследовании крови ее берут из вены или артерии, добавляют гепарин, а затем исследуют.
Реакцию среды создают серной или соляной кислотой.
Доказательства наличия ФОС
. Предварительные исследования.
.1.Предварительная проба - холинэстеразная.
Носит отрицательное судебно-химическое значение.
Проба выполняется в трех чашках Петри, заполненных агар - агаром.
Первая - холостой опыт. Содержит агар-агар, в лунку которого внесена капля ацетилхолина, капля сыворотки, содержащей ацетил-холинэстеразу и капля индикатора бромтимолового синего.
Вторая чашка - стандартная. Содержит те же компоненты, что и первая, но и каплю стандартного вещества - ФОС.
В третью чашку Петри с агар-агаром вносят компоненты, как и в первую, но добавляют каплю исследуемого экстракта.
После термостатирования цвет индикатора изменяется в чашках, где нет ФОС от синего к желтому.
Во второй чашке, где был стандарт и в третьей, если в исследуемом экстракте был ФОС цвет индикатора остается синим, так как ФОС блокирует холинэстеразу, ацетилхолин не разлагается и рН среды не изменяется.
Схема холинэстеразной пробы:
) АХ + АХЭ + ИНД (синий) > Холин + CH3COOH + ИНД (желтый)
) АХ + АХЭ + ФОС + ИНД (синий) > АХ + ИНД (синий)
4)АХ + АХЭ + ЭКСТРАКТ + ИНД (синий) > АХ + ИНД
(цвет по наличию ФОС в экстракте)
Термостатирование при 380- 400С 30 минут.
Используемый индикатор - бромфеноловый синий.
Принцип:
Ацетилхолин при энзиматическом расщеплении ацетилхолинэстеразой, находящейся в сыворотке, образует холин и уксусную кислоту. Образующаяся CH3COOH меняет реакцию среды на кислую и ведет к изменению цвета индикатора.
ФОС из исследуемого экстракта диффундирует в слой агар - агара, ингибирует фермент, ацетилхолин не расщепляется, реакция среды не меняется, цвет индикатора также не меняется.
Методика пригодна для биоматериала, хранящегося не более 5 дней при комнатной температуре. Продукты гниения угнетают активность холинэстеразы.
Поскольку ФОС обладают слабым ингибирующим действием in vitro, а при их окислении действие усиливается, то пробу проводят как с активацией бромом, так и без нее. Методика активации: к органическому извлечению добавляют бром, через 30 минут избыток брома удаляют 0,1 М раствором тиосульфата натрия.
Методика не специфична (дают ФОС и карбаматы). Однако, проста, наглядна, удобна при серийных исследованиях.
Определение фосфора после минерализации.
Минерализация действием сильных концентрированных кислот.
Фосфат - ион определяют молибдатом аммония в азотно- кислой среде - желтое окрашивание, после добавления восстановительной смеси (бензидин и гидроксид аммония) - синее окрашивание молибденовой сини;
ТСХ - в частных системах растворителей
Метафос
Система: хлороформ - н-гексан или бензол
Проявитель: раствор бромтимолового синего, содержащий серебра нитрат, термостатирование при 600С 20 минут. Обработка уксусной кислотой. Пятна лилового цвета.
Хлорофос
Система: ацетон-н-гексан.
Проявитель: раствор резорцина и карбоната натрия - пятна оранжевого цвета, после термостатиров?/p>