Технология производства вакцин против сальмонеллеза телят и поросят
Контрольная работа - Сельское хозяйство
Другие контрольные работы по предмету Сельское хозяйство
10 суток все посевы на питательных средах должны оставаться стерильными.
Составление серии вакцины против паратифа поросят
Чистые проинактивированные монокультуры сальмонелл S. dublin, S. choleraesuis и S. typhimurium с концентрацией 4 млрд.м.к./см3 смешивают в соотношении 1: 1. К смеси монокультур добавляют до 0,1% алюмокалиевых квасцов, а через 6-24 часа до 0,1% хлористого кальция. Квасцы и хлористый кальций добавляют в виде 10%-ных растворов, простерилизованных в течение 1 часа при температуре 118-1200 С. Одновременно вакцину подщелачивают 10%-ным раствором натрия гидроокиси до рН 7,6. Приготовленную вакцину через 2 суток после ее составления высевают на питательные среды: по 3 флакона с МПБ, МППБ и 3 пробирки с МПА и средой Сабуро. На третьи сутки из посевов на МПБ делают пересев на 3 пробирки с МПА, МППБ и МПБ.
Составление серии вакцины против паратифа телят
Чистые проинактивированные монокультуры сальмонелл S. dublin и S. typhimurium с концентрацией 4 млрд.м.к./см3 смешивают в соотношении 1: 1. Остальные технологические моменты идентичны, как и при изготовлении вакцины против паратифа поросят.
Расфасовка вакцин
После установления стерильности (отсутствия роста на питательных средах) вакцину расфасовывают по 50, 100 и 20 см3 соответственно в чистые стерильные стеклянные флаконы емкостью 50, 100 и 200 см3.
Контроль вакцины против паратифа телят и поросят
Контроль биопрепарата проводят путем определения следующих показателей: - внешнего вида;
стерильности;
безвредности;
активности;
концентрации водородных ионов (рН).
Определение внешнего вида. Для определения внешнего вида все флаконы с вакциной встряхивают, просматривают в проходящем свете. Одновременно проверяют правильность маркировки.
Флаконы с вакциной должны быть без трещин, плотно укупорены, содержать жидкость соломенно-желтого цвета с серо-белым осадком, без посторонних механических включений.
Определение стерильности. Для контроля стерильности вакцину высевают на питательные среды: МПА,МПБ, среду Сабуро и Китта-Тароцци. В посевах на питательных средах рост посторонней микрофлоры должен отсутствовать.
Определение безвредности. Для проверки на безвредность вакцину вводят внутрибрюшинно 4 белым мышам массой 16-18 г в дозе 0,3 см3 и внутримышечно 2 кроликам в дозе 3,0 см3 (по 1,5 см3 в каждое бедро с внутренней стороны).
Все животные должны оставаться живыми и здоровыми в течение 10 суток после иммунизации.
Определение активности. Смесь вакцины вводят внутримышечно 10 голубям в дозе 1 см3. Через 16-20 суток после введения вакцины всех вакцинированных голубей и 5 контрольных (не вакцинированных) заражают внутримышечно 2 ЛД50 дозой культуры S. choleraesuis № 370 при контроле вакцины против паратифа поросят и 2 ЛД50 дозы культуры S. dublin при определении иммуногенности вакцины против паратифа телят.
Невакцинированные голуби должны пасть на 2-10 сутки после заражения, а иммунизированные - должны выжить в течение 7 суток (срок наблюдения).
Определение концентрации водородных ионов (рН). Концентрацию водородных ионов в вакцине определяют потенциометрическим методом согласно инструкции приложенной к прибору.
рН вакцины должно быть в пределах 7,0-7,6.
Приготовление живых сухих вакцин
Приготовление питательных сред, хранение и поддержание штаммов, приготовление культур 1 и 2 генерации осуществляется, как указано выше.
сальмонеллез паратиф вакцина поросенок
Производственное выращивание сальмонелл
Выращенную и проверенную на чистоту матриксную культуру 2 генерации с соблюдением условий стерильности, засевают каждый серовар в отдельный ферментер в стерильную питательную среду (бульон Хоттингера или двухкомпонентная питательная среда), охлажденную до 370С из расчета 5-6% матриксной расплодки к общему объему питательной основы
Для стимуляции роста культур сальмонелл и биосинтеза специфических антигенов к питательной среде добавляют 50 мг/дм3 сульфата магния, 100 мг/дм3 тиосульфата натрия, 0,08-0,09% 7,5%-ного стерильного раствора левомизола или другие стимуляторы роста.
Культуру, засеянную в ферментер, выращивают 8-9 часов при температуре 36-380С с постоянным перемешиванием при 60 об/мин и непрерывной аэрации из расчета насыщения одного литра бактериальной суспензии воздухом 1: 1.
Выращенную культуру проверяют на чистоту путем микроскопии и высева в пробирки с МПА, МПБ, МППБ и в чашки Петри с МПА.
При изготовлении вакцины против сальмонеллеза свиней смешивают в равном соотношении монокультуры S. choleraesuis TS-177 и S. typhimurium № 3, а в производстве вакцины против сальмонеллеза молодняка (телят) S dublin № 6 и S. typhimurium № 3.
Составление серии вакцины
Смесь монокультур смешивают с защитной средой в соотношении 1:1.
Среду для высушивания готовят по следующей прописи: в кипящей дистиллированной или деминерализованной воде растворяют желатин 1,5-2%, после чего добавляют 10% сахарозы. смесь кипятят не более 5-6 минут. Устанавливают рН 7,6-7,8 4-10% -ным раствором натрия гидроокиси, фильтруют через полотняный фильтр, разливают по 18-ти литровым бутылям по 12 литров и стерилизуют при температуре 1190С в течение 30 минут. После стерилизации среду высушивания проверяют на стерильность путем высева на МПА, МПБ, МППБ. рН после стерилизации должна быть 6,8-7,2.
Расфасовка вакцины
Расфасовку вакцины производят при непрерывном перемешивании. Флаконы закрывают двойной мар