Технология производства вакцин против сальмонеллеза телят и поросят
Контрольная работа - Сельское хозяйство
Другие контрольные работы по предмету Сельское хозяйство
вом культур на полужидкий агар или исследуют культуру методом висячей капли.
Культуральные свойства. Сальмонеллы образуют на поверхности МПБ равномерное помутнение среды, незначительный легко разбивающийся осадок, на МПА через 16-24 часа инкубации - круглые, выпуклые с гладкой поверхностью и ровными краями колонии S-формы.
Для контроля диссоциации культуры сальмонелл выращивают в течение 16-24 часов на МПА, смывают физиологическим раствором, доводят концентрацию до 1-2 млрд м.к./см3 по оптическому стандарту мутности и прогревают в водяной бане при температуре 1000 С в течение часа. Учет реакции производят через 1 и 24 часа после термообработки.
Культуры S-формы после кипячения не термоагглютинируют и осаждаются в виде пуговицы на дно пробирки, при встряхивании легко ресуспендируются в виде равномерной взвеси.
Культуры SR- и R- формы после кипячения термоагглютинируются и осаждаются в виде зонтика на дно пробирки, при встряхивании зонтик разбивается на хлопья и комочки. Такие культуры нельзя использовать для производства вакцины и их бракуют.
Производственный штамм Salmonella dublin № 373 принадлежит к серогруппе Д1 и содержит антигены: соматические О1,О9, О12, Vi и жгутиковые g и р. Штамм ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, ксилозу, сорбит, арабинозу, дульцит. Данный штамм патогенен для белых мышей, морских свинок и телят. ЛД50 для белых мышей массой 14-16 г при подкожном введении составляет 100 микробных клеток.
Производственный штамм Salmonella choleraesuis 370 принадлежит к серогруппе С1 и содержит антигены: соматический О6 и О7 и жгутиковый I фазы С и II фазы 1 и 5. Указанный штамм ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, манит, ксилозу и сорбит. Штамм патогенен для белых мышей, морских свинок, голубей и поросят. ЛД50 для белых мышей массой 14-16 г при подкожном введении составляет 100 микробных клеток.
Производственный штамм Salmonella typhimurium 371 принадлежит к группе В и содержит антигены: соматические О1, О4, О5, и О12 и жгутиковые I фазы i и II фазы 1 и 2. Данный штамм ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, ксилозу, сорбит, арабинозу и дульцит. Он патогенен для белых мышей, морских свинок, голубей, ягнят и телят. ЛД50 для белых мышей массой 14-16 г при подкожном введении составляет 100 микробных клеток.
Производственные штаммы S. typhimurium 371, S. dublin 373 и S. choleraesuis 370 используют при изготовлении инактивированных вакцин.
Производственный штамм Salmonella choleraesuis TS-177 принадлежит к серогруппе С1, непатогенен. При подкожном введении 10 млн.м.к./см3 вызывает гибель не более 2 из 10 белых мышей массой 16-18 г. По морфологии штамм представляет собой грамотрицательную палочку. На МПБ штамм через 8-10 часов роста вызывает равномерное помутнение среды, на МПА образует колонии S-формы, на МППЖА - диффузный рост. Штамм при посеве на среде, содержащей углеводы и многоатомные спирты, ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, маннит, сорбит, дульцит, арабинозу, ксилозу, не ферментирует лактозу, сахарозу, не свертывает молоко, не разжижает желатин, не образует индол, образует сероводород. Штамм агглютинируется сальмонеллезными монорецепторными сыворотками О-6, 7; Н-с; 1; 5.
Производственный штамм Salmonella dublin № 6 принадлежит к серогруппе Д1, апатогенен. ЛД50 для белых мышей массой 14-16 г составляет 107 микробных клеток, а для морских свинок массой 400 г - 1010 микробных клеток. Штамм получен из популяции стрептомицинзависимого мутанта и по морфологии представляет собой грамотрицательную палочку. На МПА штамм через 24 часа роста образует колонии S-формы, на МПБ - через 10-12 часов вызывает равномерное помутнение среды, а на МППЖА через 24 часа - диффузный рост. Штамм при посеве на среды, содержащие углеводы и многоатомные спирты, ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, мальтозу, маннит, ксилозу, дульцит, арабинозу, сорбит, образует сероводород, не образует индол. Штамм агглютинируется сальмонеллезными монорецепторными сыворотками О-1, 9, 12 и Н-g, м.
Производственный штамм Salmonella typhimurium № 3 принадлежит к серогруппе В, непатогенен. ЛД50 для белых мышей массой 14-16 г составляет 107, а для морских свинок массой 300-500 г - 510 микробных клеток. Штамм получен из стрептомицинзависимого мутанта и по морфологии представляет собой грамотрицательную палочку. На МПА штамм через 24 часа роста образует колонии S-формы, на МПБ - через 10-12 часов вызывает равномерное помутнение среды, а на МППЖА через 24 часа - диффузный рост. Штамм при посеве на среды, содержащие углеводы и многоатомные спирты, ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, маннит, ксилозу, дульцит, арабинозу, не свертывает молоко, не разжижает желатин, образует сероводород, не образует индол. Штамм агглютинируется сальмонеллезными монорецепторными сыворотками О-1, 4, 5, 12 и Н-1, 2.
Производственные штаммы S. typhimurium № 3, S. dublin № 6, S. cholerarsuis TS-177 используются для изготовления сухих живых вакцин.
Приготовление питательных сред
Приготовление бульона Хоттингера. Фарш мышечной ткани крупного рогатого скота ресуспендируют в очищенной воде в соотношении 1:1,5. На 1 дм3 смеси добавляют 200-300 г поджелудочной говяжьей железы, 10-20 г хлороформа (консервант). рН приготовленной смеси доводят раствором двууглекислой соды или раствором натрия гидроокиси. Ферментолиз ведут при рН 8,0 и температуре 38-420 С в течение 4-5 суток.
Первые 6-8 часов перемешивают через каждый час, а затем 3-4 раза в сутки.
В процессе ферментолиза ежедневно определяют рН среды и корректируют ее 10%-ным раствором натрия гидроокиси или двууглекислой соды.
Биохимическ