Сравнительная характеристика некоторых биохимических признаков риса
Курсовой проект - Разное
Другие курсовые по предмету Разное
обавляя реактив А и фтористый натрий к прокипяченному ферменту или после предварительного прекращения действия фермента 10%-м раствором ТХУ (1мл фермента + 5мл 10%-го раствора ТХУ).
Активность фосфорилазы выражали в миллиграммах связанного фосфора под действием фермента из 100г ткани. Количество связанного фосфора определяли по разности между содержанием фосфора в контрольной (неорганический фосфор) и опытной пробах (общий фосфор).
.2.3 Определение содержание фитина мокрым озолением
В опытную пробирку налили 2мл реактива А, 1мл 0,1М раствора фтористого натрия и 1мл исследуемой вытяжки, которую предварительно прокипятили или можно добавить 5мл 10%-ого раствора ТХУ, а потом 1мл вытяжки. Фосфор фитина после озоления определяли колориметрическим методом по Лоури и Лопесу в модификации Скулачева, как описано выше.
Количество найденного фосфора (в Р2О5) умножали на коэффициент 1,55 и находили содержание фитина в пересчете на инозитгексафосфорную кислоту.
1.2.4 Определение пленчатости
На дно фарфоровой ступки кладем тонкую металлическую сетку, ею же обтягиваем пестик. Навеску помещаем в ступку и, слегка надавливая на зерно пестиком и вращая его, отделяем пленки, избегая раздавливания зерен. Затем просеиваем через сито с отверстиями размером 2,220 мм или 1,820 мм. Оставшиеся необрушенные зерна вновь помещаем в ступку и шелушим до полного обрушивания. Аналогично поступаем со второй навеской.
Полученные в результате механического или ручного шелушения пленки взвешиваем до сотых долей грамма.
Показатель пленчатости выражаем в процентах (до сотых долей) по отношению к массе взятой навески. Для этого полученную после взвешивания массу пленок при исходной массе 5 г умножаем на 20, при массе навески 10 г - на 10. Расхождения между результатами двух параллельных определений не должны превышать 1,0%. За конечный показатель принимаем среднее арифметическое двух показаний.
.2.5 Пример расчета
(Проростки на 14 сутки сорта Ханкайский-52 урожая 2010 года)
Расчет содержания общего и неорганического фосфора (мг / 100г)
Получив значение оптической плотности, по Калибровочной кривой для определения Р2О5 (рис. 1.) можно найти значения содержания концентрации фосфора в изучаемой вытяжке (табл. 7)
Таблица 3
Определение концентрации Р2О5 10-3 мг / мл
№ повторностиОпытная пробаКонтрольная пробаОптическая плотность Е=660нмконцентрации Р2О5 10-3 мг / млОптическая плотность Е=660нмконцентрации С Р2О5 10-3 мг / мл10,561,120,220,2520,601,220,250,35
Далее значения подставляли в формулу:
и вели расчет отдельно по значениям контрольных и опытных проб (табл. 4 и 5)
Таблица 4
Определение содержания фосфора в контрольных пробах мг/100г
№ повторностиконцентрации С Р2О5 10-3 мг / млVV2CVV2 100V1HV1HX10,25106,11,5250,12,50,256,1020,352,1358,54
Таблица 5
Определение содержания фосфора в опытных пробах мг/100г
№ повторностиконцентрации С Р2О5 10-3 мг / млVV2CVV2 100V1HV1HX111,12106,16,8320,12,50,2527,3321,227,44229,77
Таким образом, среднее значение Робщ.=28,55 мг/100г, а Рнеорг.=7,32 мг/100г.
Перевод значений общего и неорганического фосфора
из мг/100г в %
На 100г приходится 28,55 мг Робщ
Х= = 0,714 мг
На 2,5г …………….. х мг Робщ
мг………….100%
У= = 0,286% ? 0,29%
,714 мг……….У%
Определение активности фосфорилазы (мг/100г)
Активность фосфорилазы выражали в миллиграммах связанного фосфора под действием фермента из 100 г ткани. Вычисляем количество связанного фосфора по разности между содержанием фосфора в опытной (общий фосфор) и контрольной (неорганический фосфор) пробах (табл. 6)
Таблица 6
Определение количества связанного фосфора мг/100г
№ повторностиX1 мг/100гX2 мг/100гX1 - X2 мг/100г127,336,1021,23229,778,5421,23
Определение содержания фитина с перерасчетами из содержания Робщ.
Количество найденного фосфора (в Р2О5) умножали на коэффициент 1,55 и находили содержание фитина в пересчете на инозитгексафосфорную кислоту (табл. 7).
Таблица 7
Пересчет на инозитгексафосфорную кислоту мг/100г
№ повторностиX1 мг/100гX1 * 1,55 мг/100г127,3342,36229,7746,14
Среднеарифметическое значение получили 44,25 мг/100г
На 100г приходится 44,25 мг
Х= = 1,106 мг
На 2,5г …………….. х мг Робщ
мг………….100%
У= = 0,442% ? 0,44%
,106 мг……….У%
Глава 2. Обсуждение результатов исследования
Материалом исследования служили семена, шелуха и проростки риса. Исследовался урожай 2008, 2009 и 2010 гг. Полученные результаты представлены в таблицах.
Таблица 8
Количественное содержание фосфорсодержащих веществ в семенах риса
СортРобщий (%)Фитин (%)Фосфорилаза (мг/100г ткани)123123123Дальневосточный1,42,32,045,010,33,170,300,371,63Дарий-231,32,82,143,82,83,310,270,982,16Луговой1,42,34,944,23,67,660,291,701,81Приозёрный-611,43,25,343,43,28,270,311,102,04Ханкайский-522,13,85,643,710,38,740,461,832,60Ханкайский-4291,43,84,032,23,96,240,321,221,61Далинный4,036,242,21Рассвет3,725,771,84
.- урожай 2008 года; 2 - урожай 2009 года; 3 - урожай 2010 года.
Таблица 9
Количественное содержание фосфорсодержащих веществ и фосфорилазы в проростках риса на 14 сутки
СортРобщий (%)Фитин (%)Фосфорилаза (мг/100г ткани)123123123Дальневосточный0,200,640,370,313,120,572,124,391,40Дарий-230,180,630,410,293,500,644,554,021,53Луговой0,190,850,410,303,310,641,146,412,28Приозёрный-610,200,850,830,333,121,295,126,531,75Ханкайский-520,210,770,290,334,160,445,295,010,27Ханкайский-4290,220,570,970,233,501,506,673,541,54Рассвет0,490,761,50
.- урожай 2008 года; 2 - урожай 2009 года; 3 - урожай 2010 года.
Таблица 10
Количественное содержание фосфорсодержащих веществ и фосфорилазы в проростках риса на 21 сут