Антиоксидантные свойства кормов для цыплят-бройлеров
Дипломная работа - Сельское хозяйство
Другие дипломы по предмету Сельское хозяйство
ние суммарного содержания антиоксидантов в корме проводилось на приборе ЦветЯуза-01-АА с амперометрическим детектированием (АД). Амперометрическое детектирование заключается в измерении электрического тока в ячейке, возникающего при окислении анализируемого вещества на поверхности рабочего электрода при подаче на него определенного потенциала. Таким образом, при применении АД регистрируется изменение тока, протекающего через ячейку, обусловленное изменением концентрации анализируемого вещества. В качестве материала рабочего электрода используется стеклоуглерод. Прибор работает следующим образом: насос постоянно прокачивает элюент, забирая его из емкости через всю систему. В кран-дозатор в положении ввод стандартным медицинским шприцем вместимостью 1 см3 в дозируемую петлю вводится исследуемый раствор. Поворотом ручки крана в положение анализ поток элюента направляет определенную дозу исследуемого вещества, заключенную в петле, в ячейку детектора. В этой ячейке на поверхности рабочего электрода происходит окисление молекул исследуемого вещества, при этом возрастает электрический ток между двумя электродами.
Способность к захвату свободных радикалов флавоноидами или другими полифенолами может измеряться величиной окисляемости этих соединений на рабочем электроде амперометрического детектора. Сигнал регистрируется в виде дифференциальных выходных кривых. С помощью специального программного обеспечения производится расчет площадей или высот пиков (дифференциальных кривых) анализируемого и стандартного веществ. Для анализа используется среднее значение из 3 последовательных измерений. В качестве стандартного вещества (элюента) применялся антиоксидант кверцетин.
Амперометрический метод - единственный непосредственно измеряющий содержание всех антиоксидантов в пробе.
Для подготовки анализируемого вещества были взяты пробы трех образцов кормов массой 0,2 г. в трех повторностях. Полученные навески переместили в колбы и залили горячей бидистиллированной водой объемом 50 мл., затем их настаивали в течение часа, периодически помешивая, и, по истечении времени, отфильтровали, получив необходимую для дальнейшей работы экстракцию.
Перед началом работы необходимо построить градуировочный график кверцетина. Для этого последовательно измеряют сигналы стандартных градуировочных растворов кверцетина с массовой концентрацией 0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 мкг/мл.
Полученные данные для построения графика кварцетина представлены в таблице №1.
Таблица 1
Значения сигналов стандартных градуировочных растворов кверцетина с массовой концентрацией 0,2; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0 мкг/мл.
Концентрация кверцетина; мкг/млПовторностьСреднее значение сигнала1230,21381341281330,52432282322341470475458468291993392492541927193019561938
Настоящая методика обеспечивает выполнение измерений содержания антиоксидантов исследуемого образца с погрешностью, не превышающей 5% во всем диапазоне измеряемых величин при доверительной вероятности 0,95.
Рис. 1. Градуировочный график кверцетина
При помощи полученного уравнения (6), вычисляется значение массовой концентрации антиоксидантов в исследуемых образцах комбикорма. Для этого измеряются сигналы исследуемого раствора для каждой пробы в трех повторностях и для каждого рассчитываются их среднее арифметическое, которое подставляется в уравнение (6) вместо y.
Из линейного уравнения с одной неизвестной определяется значение Х, которое соответствует значению массовой концентрации антиоксидантов исследуемого образца, найденному по градуировочному графику кварцетина, мг/г.
После того, как значение X стало известным, остается вычислить непосредственно само содержание антиоксидантов в исследуемом комбикорме по формуле (7).
(7)
где
Х` - содержание антиоксидантов, мг/г;
Х - значение массовой концентрации антиоксидантов исследуемого образца, найденное по градуировочному графику кварцетина, мг/г;
V - объем раствора анализируемой пробы, мл;
m - масса навески корма, г;
N - кратность разбавления анализируемого образца.
.2.6 статистическая обработка данных
Так как данные получатся в результате повторных измерений, их нужно подвергнуть статистическому анализу. Имея выборку, необходимо рассчитать:
1)среднее арифметическое выборки, рассчитывается по формуле (8):
(8)
где
сумма вариантов выборки;
n - количество вариантов.
)стандартное отклонение (S) от среднего значения отдельных вариантов совокупности рассчитывается по формуле (9):
(9)
где
? - сумма;
f - частота;
x - отдельные значения;
х-2 - среднее арифметическое.
Глава 3. Экспериментальная часть
.1 количественное содержание каротиноидов в кормах для цыплят-бройлеров
Основным методом определения достаточности обеспечения сельскохозяйственных животных каротином и витамином А является анализ кормов на их содержание с последующим расчетом количества каротина и витамина А в рационах и сопоставление полученных данных с потребностью. При более полном анализе рационов необходимо учитывать все вещества, положительно или отрицательно влияющие на доступность и усвоение каротина и витамина А. [27]
После спектрофотометрического анализа корма на количественное содержание в нем каротиноидов была произведена статистическая обработка полученных данных. На рисунке №2 н