Geum.ru

М. В. Авдеенко 3 > Д. Т. Арыбжанов 6 > О. Н. Асадчикова 10 > Е. В. Беляева 15 > О. А. Бехер 16 > Л. С. Богомолова 18 > С. И. Винтизенко 24 > В. И. Высоцкий 26 > А. В. Дорошенко 34 > Л. А. Ермолаева 38 > Г. С. Жамгарян 39 > Н

Вид материалаДокументы

Содержание


О.Ю. Шилова
Объект и методы исследования
КГУЗ «Красноярский краевой онкологический диспансер», г. Красноярск
Интерфероновый статус у больных раком почки
Подобный материал:
1   ...   22   23   24   25   26   27   28   29   30
^

О.Ю. Шилова


ГУ НИИ онкологии ТНЦ СО РАМН, г. Томск


Изучение механизмов канцерогенеза, ассоциированного с вирусами, составляет одно из важных направлений современной онкологии, т. к. хроническое носительство онкогенных вирусов (в частности, папилломы человека и Эпштейна-Барр) является существенным фактором риска возникновения рака. Известно, что одним из условий, необходимых для развития злокачественных опухолей, в том числе обусловленных онкогенными вирусами, является снижение иммунологического надзора за однородностью клеточных популяций. Следствием этого является более частая реактивация и клиническая манифестация вирусных инфекций у онкологических больных. Известно также, что помимо эндогенных факторов, на скорость развития и течение патологического процесса, обусловленного вирусом, может влиять и тип возбудителя. Представленная работа посвящена определению и типированию в исследуемой ткани больных хроническими заболеваниями и раком гортани вирусов папилломы высокого онкогенного риска, а также оценке гуморальных показателей иммунной системы (антитела к антигенам литической инфекции вируса Эпштейна-Барр), обеспечивающих формирование иммунного ответа.

Цель: определение частоты ассоциации хронических заболеваний и рака гортани с онкогенными вирусами папилломы человека и Эпштейна-Барр.

^ Объект и методы исследования: здоровые лица; больные хроническими заболеваниями (хронический гиперпластический ларингит, папилломатоз) и раком гортани; для определения HPV6, 11, 16, 18, 31, 33 применяли ПЦР с последующей идентификацией ПЦР-продуктов в гель-электрофорезе; наличие специфических антител к антигенам литической инфекции ВЭБ (вирусному капсидному и комплексу ранних) определяли методом непрямой иммунофлюоресценции.

Результаты. В результате типирования вируса папилломы человека в исследуемой ткани были получены следующие результаты: у 3 из 15 здоровых лиц (20,0%) обнаружен HPV6 и у 3 - HPV11 (20%). Среди больных с хроническими заболеваниями миндалин (папилломатоз и хронический декомпенсаторный тонзиллит) у 6 человек (66,7%), включая 2 пациентов с папилломатозом, выявлен HPV6, в трех случаях (33,3%), включая 1 папилломатоз, - HPV11, и у 1 больного (5,6%) идентифицирован HPV18. В очагах гиперпластического поражения гортани частота встречаемости ДНК HPV распределилась следующим образом: HPV6 обнаружена в 3 из 10 изученных образцах (30,0%), ДНК HPV11- у 10,0% (1 человек) и в 10,0% (1 человек)- HPV31. У больных раком гортани в образцах опухолевой ткани с одинаковой частотой определены HPV6 и 11 -11,4% (8 человек) и HPV16,18 - 2,41% (2 человека), последовательности HPV33 идентифицированы в 20,41% (10 человек).

Повышенный титр антител к ВКА ВЭБ мы обнаружили у 7 (13,0%) из 54 обследованных здоровых лиц, 4-х (22,2%) из 18 с хроническими заболеваниями гортани и 16-ти (19,5%) из 82 больных раком гортани. Высокий уровень антител к комплексу ранних антигенов зарегистрирован у 3,7% лиц группы контроля, 11,1% пациентов с хроническими заболеваниями гортани и 9,8% больных раком гортани.

Выводы. Таким образом, увеличение спектра определяемых типов HPV у больных с хроническими заболеваниями и раком гортани, по сравнению со здоровыми лицами, позволяет предположить, что наличие у данных больных умеренно- и высокоонкогенных типов (HPV31, 33, 16 и 18) вирусов папилломы человека может играть определенную роль в малигнизации эпителиальных клеток гортани и дальнейшем прогрессировании патологического процесса, а наличие высоких титров специфических иммуноглобулинов, характеризующих иммунный ответ на EBV, свидетельствует об активации вируса в организме больных хроническими заболеваниями и раком гортани (стадия литический инфекции), которая может быть связана с нарушением иммунологической реактивности при онкологическом процессе.


ВЗАИМОСВЯЗЬ ПАРАМЕТРОВ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА С ПОКАЗАТЕЛЯМИ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПОЧКИ В ПЕРИОД ДО ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ

Е.А. Шкапова, Р.А. Зуков

^ КГУЗ «Красноярский краевой онкологический диспансер», г. Красноярск


Иммунная система является сложной и многокомпонентной, при исследовании ее параметров приходится оперировать большим количеством данных, для интерпретации которых можно использовать методы математического анализа. Таким образом, для изучения закономерностей функционирования иммунной системы необходимо применять методы системного анализа. В связи с этим, было проведено исследование корреляционных взаимосвязей параметров иммунного статуса и хемилюминесцентного (ХЛ) ответа нейтрофилов крови больных местно-распространенным почечноклеточным раком (ПКР) до хирургического лечения (N=132). В качестве группы контроля обследовано 30 здоровых доноров.

Иммунофенотипирование лимфоцитов осуществляли на проточном цитометре FACS-Calibur (Becton Dickinson, USA) с набором реагентов Simul Test IMK-lymphocyte Kit (USA). Концентрацию иммуноглобулинов в сыворотке определяли по методу Манчини (НПЦ «МедБиоСпектр», Россия). Оценку спонтанной и зимозан-индуцированной ХЛ осуществляли на хемлюминометре «CL3606М» (Россия). По результатам исследования была сформирована база данных, на основе которой с помощью пакетов прикладных программ SPSS 10,0 и Statistica 6,0 производился статистический анализ. Проверку гипотезы о статистической достоверности различий выборок проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Для исследования силы взаимосвязей показателей вычислялся коэффициент ранговой корреляции по Спирмену.

Корреляционный анализ показал, что и у здоровых доноров, и у больных ПКР до операции выявлены положительные взаимосвязи между интенсивностью спонтанного ХЛ ответа нейтрофилов и процентным содержанием лимфоцитов в периферической крови (r=0,43; р<0,05 и r=0,83 при р<0,01 соответственно), а также между площадью спонтанной ХЛ кривой и относительным содержанием лимфоцитов (r=0,36 при р<0,05; r=0,81 при р<0,05). У больных ПКР обнаружены отрицательные корреляционные взаимосвязи между временем выхода на максимум спонтанной ХЛ кривой и содержанием лимфоцитов, как относительным, так и абсолютным (r=-0,37, р<0,05 и r=-0,50, р<0,01 соответственно), а также отмечена положительная корреляция указанного выше параметра ХЛ ответа нейтрофилов с концентрацией IgG в сыворотке крови (r=0,36, р<0,05). Интенсивность и площадь спонтанной ХЛ кривой положительно коррелируют относительным содержанием лимфоцитов (r=0,43, р<0,05 и r=0,36, рР<0,05 соответственно). Кроме того, выявлена положительная взаимосвязь между индуцированным временем выхода на пик ХЛ кривой и относительным содержанием CD4+-лимфоцитов (r=0,38, р<0,05), а также отрицательную взаимосвязь с относительным и абсолютным содержанием CD16+/56+-лимфоцитов (r=-0,37, р<0,05 и r=-0,36, р<0,05 соответственно). Интенсивность и площадь зимозан-индуцированного ХЛ ответа находятся в отрицательной взаимосвязи с относительным количеством CD16+/56+-лимфоцитов (r=-0,44, р<0,01 и r=-0,41, р<0,05 соответственно) и положительно коррелируют с абсолютным содержанием CD3+/HLA-DR+- лимфоцитов (r=0,88, р<0,001 и r=0,83, р<0,01 соответственно). Кроме того, обнаружена положительная корреляционная взаимосвязь между площадью стимулированной ХЛ кривой и уровнем IgM в сыворотке крови (r=0,36, р<0,05). Индекс активации связан отрицательными корреляционными взаимодействиями с относительным и абсолютным числом лимфоцитов (r=-0,51, р<0,01 и r=-0,39, р<0,05 соответственно), а также абсолютным содержанием CD8+- и CD16+/56+-лимфоцитов (r=-0,40, Р<0,05 и r=-0,36, р<0,05 соответственно). Так, увеличение относительного количества лимфоцитов у больных ПКР будет сопровождаться повышенным уровнем базового кислородного метаболизма нейтрофилов, и снижением компенсаторных возможностей данной клеточной популяции. Изменение относительного количества Т-хелперов в крови обследуемых в этой группе произойдет параллельно и однонаправленно с изменением времени выхода на максимум интенсивности стимулированной ХЛ кривой. Повышенное содержание NK-клеток в периферической крови будет оказывать ингибирующее влияние на индуцированный ХЛ ответ нейтрофилов и снижать функционально-метаболические резервы этих клеток. Однако увеличение количества активированных Т-лимфоцитов приведет к активации индуцированного зимозаном окислительного метаболизма нейтрофилов. Кроме того, увеличение абсолютного содержания субпопуляции СD8+-лимфоцитов будет сопровождаться снижением возможностей нейтрофилов к реализации своих функциональных возможностей при дополнительной стимуляции in vitro.

Таким образом, корреляционный анализ параметров иммунного статуса и ХЛ ответа нейтрофилов показал увеличение числа взаимосвязей у больных ПКР до хирургического лечения относительно группы контроля (17 и 13 корреляционных взаимосвязей соответственно). Также установлено, что в группе больных ПКР преобладают отрицательные корреляционные взаимосвязи, в то время как в группе здоровых доноров соотношение положительных и отрицательных корреляций составляет 1:1. Обращает на себя внимание то, что в контрольной группе большинство корреляций выявлено между параметрами спонтанного ХЛ ответа нейтрофилов и Т-клеточным звеном иммунной системы. У больных ПКР по сравнению с контрольной группой значительно увеличивается число корреляционных взаимосвязей с параметрами индуцированной ХЛ и появляются взаимосвязи с показателями, характеризующими гуморальное звено.


^ ИНТЕРФЕРОНОВЫЙ СТАТУС У БОЛЬНЫХ РАКОМ ПОЧКИ

ДО И ПОСЛЕ РАДИКАЛЬНОЙ НЕФРЭКТОМИИ