Программа фундаментальных исследований Президиума ран

Вид материалаПрограмма

Содержание


ГНЦ Р.Ф- Институт медико- биологических проблем РАН Институт космических исследований РАН
Влияние слабых полей термализованных нейтронов на структурную трансформацию макромолекул днк и разработка протекторных средств д
А.Ю. Цивадзе, А.Г. Липсон, Г.П. Жижина, С.В. Васильева, , М.К. Бородин
Подобный материал:
1   ...   55   56   57   58   59   60   61   62   ...   72

ИССЛЕДОВАНИЕ БИОФИЗИЧЕСКИХ МЕХАНИЗМОВ ВОЗДЕЙСТВИЯ МАЛЫХ ДОЗ ИОНИЗИРУЮЩИХ ИЗЛУЧЕНИЙ И ПОНИЖЕННОГО УРОВНЯ МАГНИТНОГО ПОЛЯ НА БИООБЪЕКТЫ И ВОДНУЮ СРЕДУ ПРИМЕНИТЕЛЬНО К УСЛОВИЯМ ДЛИТЕЛЬНЫХ КОСМИЧЕСКИХ МЕЖПЛАНЕТНЫХ ЭКСПЕДИЦИЙ




В.В.Цетлин 1), Т.К.Бреус2), Т.С.Гурьева1), Ю.И.Гурфинкель2),О.А.Дадашева1). М.А.Левинских1), С.И.Климов2), Е.Л.Нефедова1),

^
1)ГНЦ Р.Ф- Институт медико- биологических проблем РАН
2) Институт космических исследований РАН


По радиационно- физическим условиям межпланетный пилотируемый полет к Марсу будет существенно отличаться от условий на Земле и на орбитах в околоземном пространстве как по составу имеющего высокую биологическую эффективность космического излучения, так и по величине индукции межпланетного магнитного поля. Исследования направлены на установление основ физико- химических и биохимических механизмов метаболизма в условиях облучения малыми дозами при мощности поглощенной дозы, превышающей в 50-1000 раз радиационный фон на поверхности Земли, и в условиях нормального и пониженного земного магнитного поля.

Целью исследований является оценка опасности, которую может представлять для здоровья экипажей пребывание в межпланетном полете. Для этого разработана и испытана методика хронического облучения биологических объектов, в которой для имитации радиационного воздействия выбраны: гамма- излучение источника 60Co и нейтронное излучение от источника Pu(ά,n)Be. Облучение гамма- излучением обеспечивает равномерное поглощение энергии внутри объектов, а нейтроны с энергией до 10 МэВ имитируют нарушения биологических структур, вызываемые корпускулярным космическим излучением.

Проведены исследования эффектов пониженного магнитного поля на всхожесть семян различных высших растений. Получено, что в зависимости от видовой чувствительности снижалась всхожесть семян. В качестве примера осуществления управления процессом прорастания в целях снижения неблагоприятных воздействий низких доз радиации и пониженного магнитного поля семена обрабатывались марганцевокислым калием.

Исследования радиобиологических реакций высших растений показали, что хроническое облучение гамма- излучением вызывает стимуляцию всхожести семян и роста растений (т.н. радиационный гормезис), а нейтронное облучение во всех случаях снижает их всхожесть и энергию роста. Абсолютный эффект зависит от видовой чувствительности растений к радиационному воздействию.

Проведены радиобиологические исследования эмбриогенеза и постэмбрионального развития японского перепела. Гамма- облучение мощностью дозы 1500мкЗв/сут не вызвало каких- либо заметных изменений в развитии зародышей на всем периоде эмбриогенеза. Однако у части эмбрионов, ( как и у зародышей, развивавшихся в условиях космического полета станции МИР, ) были обнаружены различные морфологические нарушения. Процент нарушений в развитии эмбрионов перепелов в этих экспериментах в среднем составлял 15%. Количество эмбрионов с нарушениями развития были удивительно одинаковым для всех серий экспериментов, и не зависело от количества яиц, заложенных на инкубирование. Видно, что не все эмбрионы обладали необходимыми для выживания в условиях малых доз нейтронного излучения адоптивными свойствами. Результаты исследований показали, что выбранные условия радиационного облучения биообъектов, адекватны космическим условиям и неблагоприятно воздействуют на различные виды микроорганизмов, растений и животных Реакция исследованных биообъектов на малые дозы радиации зависит от их индивидуальной видовой чувствительности и радиационной стойкости.

Исследованы эффекты устойчивого изменения электрофизических и биологических свойств воды под действием малых доз радиации и пониженного магнитного поля. Показана роль воды в радиобиологических процессах в условиях низкого уровня радиолиза.


^

ВЛИЯНИЕ СЛАБЫХ ПОЛЕЙ ТЕРМАЛИЗОВАННЫХ НЕЙТРОНОВ НА СТРУКТУРНУЮ ТРАНСФОРМАЦИЮ МАКРОМОЛЕКУЛ ДНК И РАЗРАБОТКА ПРОТЕКТОРНЫХ СРЕДСТВ

ДЛЯ ЗАЩИТЫ ГЕНОМА




^

А.Ю. Цивадзе1, А.Г. Липсон1, Г.П. Жижина2, С.В. Васильева2, , М.К. Бородин2,

Е.И. Саунин1, И.А. Гагина1



В течение второго года исследований (2007 г.) были изучено влияние слабых полей термализованных нейтронов на структурные превращения в растворах ДНК in vitro, а также их влияние на процессы репарации и выживаемости штаммов живых бактерий Е.coli (in vivo).

Облучение растворов ДНК, а также штаммов бактерий E. coli осуществляли путем внесения образцов в ультраслабое поле термализованных нейтронов (УПТН), представляющее собой разреженный нейтронный газ (с низкой нейтронной плотностью n ≤ 10-1 см-3, отвечающий нейтронному потоку 10 Фn ≤ 102 n/ccм2 с распределением по энергиям, близким к Максвелловскому (средняя энергия < Еn >1-10 kT). Радиационные повреждения в облученных различными дозами УПТН растворах ДНК (in vitro) и бактерий E. coli (in vivo) исследовали с помощью комплекса физико-химических методов, разработанных авторами проекта.

С целью поиска химических соединений - ингибиторов структурных изменений (в том числе, подавляющих индукцию двунитевых разрывов ДНК в последействии) было проведено облучение растворов ДНК (0,75-1,0 мг/мл) в Н2О или D2O (99,995% чистоты), содержащих 0,1 М NaCl. Эквивалентные дозы облучения УПТН не превышали 10 μGy, причем используемые мощности дозы УПТН были на порядок меньше применявшихся при облучении пленок ДНК на первом этапе проекта (2006 г.).

С помощью методов ИКС и электрофореза было установлено, что уже под воздействием сверхмалых доз УПТН макромолекулы ДНК в растворе подвергаются значительному конформационному изменению, сопровождающемуся образованием межмолекулярных сшивок. Результаты, полученные в исследованном диапазоне доз УПТН (10 μGy) , указывают на конформационную нестабильность макромолекул ДНК в растворах, возникающую даже при воздействии тепловой компоненты естественного космического нейтронного фона, наблюдаемого на поверхности Земли.

Изучение цито- и гено-токсической активности УПТН было проведено на живых клетках в опытах на диком и сертифицированом репарационно-дефектном (по репарации двунитевых разрывов ДНК) штаммах бактерий E.coli. Была обнаружена зависимость эффекта выживаемости от дозы и мощности дозы УПТН. Следует подчеркнуть, что наблюдалось повышение выживаемости (гормезис) в случае дикого и репарационно-дефектного штаммов бактерий E.coli при облучении в дозе 2,1-2,4 μGy (0,51 μGy/час) в условиях пониженной температуры (19-20оС вместо 37оС). Повышение дозы УПТН до 10,3 μGy в случае репарационно-дефектного штамма приводило к одинаковой выживаемости бактерий в контроле и опыте. Эти данные позволяют предположить, что выживаемость бактериальных клеток зависит не только от генетического контроля, но и от эпигенетических факторов, например, от состояния мембраны. В отчете возможные механизмы влияния экспозиции термических нейтронов будут обсуждены более подробно.

На следующем этапе исследований предполагается изучение влияния на результат воздействия УПТН на живые клетки E.coli активности системы Uvr ABC-эксцизионной репарации (репарирующей сшивки ДНК), SOS - репарационного ответа, RecBCD - и RecFOR- путей гомологической рекомбинации (рекомбинационной репарации) ДНК.

1-Институт физической химии и электрохимии РАН; 2- Институт биохимической физики РАН