Вучебно-методической разработке представлен план практических занятий по частной микробиологии с вирусологией для студентов стоматологического факультета список теоретических вопросов по каждой теме.

Вид материала

Содержание

Подобный материал:

1 2 3 4

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования « Ставропольская государственная

медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Учебно-методическая разработка по частной микробиологии с вирусологией для студентов стоматологического факультета

Ставрополь, 2012г.

УДК 616- 093/ 098 (07)

ББК 52.64я73

У-91

Учебно-методическая разработка по частной микробиологии с вирусологией для студентов стоматологического факультета.- Ставрополь: Изд: СГМА, 2012.-68с.

Составители: зав. каф. проф. И.А. Базиков; проф. Т.В Таран. доценты: А.Х. Казиев, Е.В. Лысогора, ассистенты: И. В. Климанович, В.А. Лысогора, М. М. Минасян, Е.В. Чекрыгина.

В учебно-методической разработке представлен план практических занятий по частной микробиологии с вирусологией для студентов стоматологического факультета список теоретических вопросов по каждой теме. Предложен список учебной литературы и тематический план лекций.

Предназначен для студентов 2-го курса стоматологического факультета при изучении частной микробиологии, вирусологии.

Рецензенты:

Ходжаян А.Б. д.м.н., профессор, заведующая кафедрой биологии

СтГМА;

Тимченко Л.Д. профессор кафедры общей биологии СГУ

Разрешено к печати редакционно-издательским советом СтГМА

УДК 616- 093/ 098 (07)

ББК 52.64я73

У-91

Ставропольская государственная

Медицинская академия,2012

ПЛАНЫ ЗАНЯТИЙ ПО ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ

ДЛЯ СТУДЕНТОВ СТОМАТОЛОГИЧЕСКОГО факультета

ПЕРЕЧЕНЬ ОСНОВНЫХ ТЕОРЕТИЧЕСКИХ ВОПРОСОВ, ОБСУЖДАЕМЫХ НА ЛЕКЦИЯХ И ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЯХ ПО ЧАСТНОЙ МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ

Характеристика возбудителя:
1. Историческая справка.
2. Таксономия (семейство, род, вид(ы)).
3. Основные биологические свойства (морфология, ультраструктура, тинкториальные, культуральные, биохимические, резистентные, антигенные, факторы патогенности, патогенность для животных).

Эпидемиология (источники инфекции, пути передачи и входные ворота инфекции).

Краткая характеристика заболевания.
1. Принцип патогенеза и основные клинические формы.
2. Особенности иммунитета.

Микробиологические методы диагностики (исследуемый материал, используемые питательные среды, экспресс - методы диагностики, а также методы индикации и идентификации).

Общая характеристика медико-биологических препаратов по следующей схеме:

1. Что содержит препарат?

2. Как его получают?

3.Для чего его применяют?

ЗАНЯТИЕ 1

Тема: «ОБЩАЯ ВИРУСОЛОГИЯ».

Цель - научится применять полученные знания по общей микробиологии в частной, ознакомится с устройством и особенностями работы вирусологической лаборатории. Разобрать лабораторные методы исследования применяемые при вирусных заболеваниях, научится определять титр вирусов в РГА, ставить и учитывать реакцию торможения гемагглютинации применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

I. Вопросы для обсуждения:

1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме.

II. практическая работа:

Методы лабораторных исследований при вирусных заболеваниях:

1. Вирусоскопический: микроскопия мазков с внутриклеточными включениями (Тельца Бабеша - Негри, Морозова – Пашена, Гварниери, мазок - отпечаток со слизистой носа, РИФ).

2. Вирусологический:

а) выделение вирусов из инфекционного материала (культура клеток, куриный эмбрион, животные);

б) определение вируса в материале (ЦПД, реакция гемагглютинации, гемадсорбции);

в) идентификация выделенного вируса (РСК, преципитация, РИФ, РТГА, РГА, цветная проба, реакция нейтрализации вируса и др.);

г) учет РГА, РТГА, определение титра взвеси вируса (антигена) на культуре клеток (цветная проба).

3. Биологический: методы заражения животных, определение вирусного инфицирования. Реакция нейтрализации вируса на животных.

4. Серологический:

а) реакции иммунитета, РТГА, РН, РСК, РИФ, ИФА, РНГА, преципитации, задержки ЦПД и др.

б) учет реакции нейтрализации для обнаружения титра антител (цветная проба, РН).

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Какие методы используются для культивирования вирусов.

б) Как заражают новорожденных мышей?

в) Что собой представляют тельца Бабеша -Негри и какими методами их окрашивают?

г) Что такое культура ткани?

д) Ткани каких органов используются для получения культур клеток?

е) Какие среды и солевые растворы применяют для выращивания и обработки культур ткани?

ж) Какого возраста эмбрионы используются для заражения?

з) Зачем делают пересев клеток при поддержании штамма культуры клеток в лабораторных условиях.

и) Какого возраста эмбрионы используются для заражения?

к) Как определяют место расположения при овоскопии?

л) Как обрабатывается эмбрион перед заражением?

м) Какие существуют методы заражения куриного эмбриона?

н) Как обнаруживают наличия вируса в культуре клеток?

о) С какой целью может быть использован метод цветных проб?

п) Как ставят реакцию гемадсорбции? Как выглядит положительная реакция гемадсорбции?

р) Что собой представляет метод бляшек?

с) Как обнаруживают вирус в курином эмбрионе?

т) Как вскрывают зараженный эмбрион?

у) Как обнаруживают вирус гриппа в курином эмбрионе?

ф) Как вскрывают зараженный эмбрион?

х) Почему происходит реакция агглютинации эритроцитов в присутствии вируса гриппа? Каков механизм этой реакции?

ц) Что такое реакция торможения (нейтрализация) гемагглютинации? Для чего она используется?

ч) Как обнаруживают изменения в хорионаллантоисной оболочке, вызванные вирусом?

IV. Письменное задание:

1. Записать методику заражения куриного эмбриона.

2. Перечислить ингредиенты для постановки РГА.

3. Перечислить ингредиенты для постановки РТГА.

19.Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. – М.: Медицина, 1999.

20.Краткий терминологический словарь микробиолога-биотехнолога / Под ред. Ю.А. Овчинникова. – М.: АН СССР, 1989 г.

21.Елинов Н.П. Основы биотехнологии. – С-Петербург: Изд. фирма «Наука», 1995 г.

22.Микробиология А.А. Воробьев, А.С. Быков, Е.П. Пашков, А.М.Рыбакова. – М., 1998 г.

ЗАНЯТИЕ 2

Тема: « МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ГРИППА И ЗАБОЛЕВАНИЙ ПОЛОСТИ РТА, ВЫЗЫВАЕМЫХ ВИРУСОМ ГЕРПЕСА»

Цель - научится применять полученные знания по общей микробиологии в частной. Разобрать лабораторные методы исследования применяемые при вирусных заболеваниях, научится определять титр вирусов в РСК, ставить и учитывать реакцию торможения гемагглютинации применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача. Ознакомится с основными респираторными инфекциями, вызываемые вирусами, их лабораторной диагностики. Разобрать особенности иммунитета и механизм действия интерферона.

.

Семейство: Orthomyxoviridae Семейство: Herpesviridae

Род: Influenzavirus Род: Alphaherpesvirus.

Вид: Грипп А Вид: Virus herpes simplex

Грипп В Virus herpes zoster

I. Вопросы для обсуждения

Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме.

II. Практическая работа:

Методы лабораторной диагностики гриппа и герпеса:

1. Вирусоскопический: риноцитоскопия, РИФ;

2. Вирусологический:

а) Произвести забор материала от больного респираторными вирусными инфекциями (носоглоточный смыв, соскобы с герпетических высыпаний, содержимое пузырьков). Метод подготовки исследуемого материала к посеву на куриный эмбрион.

б) Методика выращивания чистой культуры вируса с использованием куриного эмбриона, культуры клеток. Постановка РГА для доказательства накопления вирусов в клетках и идентификация вирусов в РТГА, РСК и др.

3. Поставить РТГА, провести учет этой реакции.

4. Профилактика и лечение респираторных вирусных инфекций с помощью биопрепаратов. Диагностические препараты.

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Дайте общую характеристику ортомиксовирусов, герпесвирусов.

б) Какую структуру имеет вирион гриппа, герпеса?

в) Какие микробиологические методы применяются для диагностики вирусных респираторных и герпетических инфекций?

г) В чем особенность серологических методов диагностики ОРВИ?

д) Какими методами выделяется культура вируса гриппа и вируса герпеса?

е) Каким методом обнаруживается наличие вируса гриппа, выращенного на курином эмбрионе?

ж) На чем основана РТГА? Каковы особенности ее постановки и учета результатов при обнаружении противогриппозных антител?

IV. Письменной задание:

Записать метод постановки РИФ для диагностики гриппа, герпесвирусной инфекции.
Как определяют агглютинирующий титр вируса в РГА.

ЗАНЯТИЕ 3

Тема: « МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЭНТЕРОВИРУСНЫХ

ИНФЕКЦИЙ И ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ».

Цель – научится применять полученные знания по общей микробиологии в частной. Разобрать лабораторные методы исследования применяемые при вирусных заболеваниях печени и ЦНС, научится определять титр вирусов в РСК, реакции нейтрализации вирусов методом цветной пробы, ставить и учитывать реакцию торможения гемагглютинации, ознакомится с РИФ, ИФА, ПЦР применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

Семейство: Picornaviridae

Род: Enterovirus

Виды: возбудитель полиомиелита – Poliovirus poliomielitis

возбудитель Коксаки А, В

возбудитель EСНО.

ВИРУСЫ ВЫЗЫВАЮЩИЕ ГЕПАТИТЫ:

Семейство: Picornaviridae

Род: Hepatovirus

Вид: HAV.

Семейство: Hepadnaviridae

Род: Orthohepadnavirus

Вид: HBV.

Семейство: гепатит Е - подобные вирусы

Вид: HЕV.

Семейство: Flaviviridae

Род: Hepacivirus

Вид: HCV, HDV.

Семейство: Deltavirus

Вид: HDV (дефектный)

Семейство: Circinoviridae

Вид: HTTV

I. Вопросы для обсуждения

1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме.

II. Практическая работа:

1. Вирусологический метод диагностики полиомиелита:

а) выращивание вируса на культурах клеток и лабораторных животных;

б) идентификация вирусов в реакции нейтрализации методом цветной пробы.

2. Серологический метод:

Обсуждение реакций, применяемых для серодиагностики заболеваний, вызываемых ЕСНО (РТГА), вирусами КОКСАКИ А и В (реакция нейтрализации и цветной пробы), вирусами полиомиелита (РН, преципитации, РСК, ИФА).

3. Диагностика вирусных гепатитов.

а) диагностика вирусного гепатита В:

- определение австралийского антигена в крови больного иммуноферментным методом, методом встречного иммуноэлектрофореза, РСК, преципитации. ПЦР - диагностика. Определение антител к НВS -антигену.

б) диагностика вирусного гепатита А:

- обнаружение вируса в фекалиях больного с помощью ИФА, РИА, РЭМ. Подготовка исследуемого материала.

- серодиагностика - определение нарастания титра антител с помощью ИФА.

в) Методы серодиагностики при НСV, НDV вирусных инфекциях.

4. Специфическая профилактика и лечение энтеровирусных инфекций.

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Какова классификация пикорновирусов?

б) Дайте общую характеристику группы энтеровирусов?

в) Какие вирусологические методы применяют для диагностики полиомиелита и других энтеровирусных заболеваний?

г) Как выделяют вирус полиомиелита от больных?

д) Какие серологические методы диагностики могут быть использованы при заболевании полиомиелитом?

е) Какие заболевания вызывают вирусы Коксаки и Есно?

ж) Какие способы применяются для обнаружения и выделения вирусов Коксаки?

з) Как обнаруживают и идентифицируют вирусы Коксаки А и В?

и) Как определяется цитопатическое действие вируса полиомиелита?

к) Каковы пути заражения А-, F– гепатитами?

л) Дать характеристику вирусных В , С- и Е- гепатитов?

н) Что такое интерферон?

IV. Письменное задание:

Записать методику получения культуры вируса полиомиелита из испражнений больного;
Составить таблицу дифференциальных признаков энтеровирусов по принципу их культивирования и патогенности.
Перечислить серологические реакции, применяемые для диагностики НВV, НDV, НСV.

ЗАНЯТИЕ 4

ИТОГОВОЕ ПО ТЕМЕ:

«МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ»

Цель – закрепление теоретических знаний, применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

Морфология и структура вирионов.
Морфология и структура вируса гриппа.
Морфология и структура вируса полиомиелита
Морфология и структура вируса герпеса
Признаки, отличающие вирусы от прокариот.
Методы культивирования вирусов
Результаты взаимодействия вируса с клеткой при острой и персестирующей вирусной инфекции.
Вирусоскопический метод. Внутриклеточные включения вирусного происхождения, характеристика.
Персистенция вирусов. Виды персистенции. Характеристика их.
Интеграция нуклеиновой кислоты вирусов в клеточный геном. Фазы процесса. Проявление.
Основы классификации вирусов
Вирусологическая диагностика вирусных инфекций
Морфология и антигенная структура вируса гепатита В
Морфология и антигенная структура вируса гепатита А
Морфология и антигенная структура вирусов Коксаки и ЕСНО.
Морфология и антигенная структура ретровируса - ВИЧ.
Особенности строения и антигенная характеристика вируса гепатита В и С
Особенности противовирусного иммунитета.
Химический состав вирионов. Вирусная РНК и ДНК
Структура и антигенная характеристика вируса гепатита В и С
Вирусологический метод диагностики гепатита А.
Вирусологический метод диагностики гепатита В
Вирусологический метод диагностики гриппа
Вирусологический метод диагностики вирусов Коксаки и ЕСНО.
Особенности строения и антигеная характеристика вируса гепатита В.
Серологические реакции для диагностики гриппа.
Вирусологические методы диагностики энтеровирусных инфекций
Принцип патогенеза гриппозной инфекции и вирусологический метод диагностики.
Серологические реакции, используемые при диагностике полиомиелита.
Серологические реакции для диагностики энтеровирусных инфекций.
Серологические реакции для диагностики гепатита В.
Методы вирусологической диагностики полиомиелита
Вирусологическая диагностика полиомиелита.
Интерферон. Характеристика препарата. Механизм действия.
Живая полиомиелитная вакцина.
Пассивная иммунопрофилактика гепатита А. Характеристика препарата.
Принцип патогенеза гепатита А.
Противогриппозные сыворотки.
Препараты для специфической активной профилактики гриппа.
Принципы приготовления генно-инженерных вакцин. Специфическая профилактика гепатита В.
Убитые вакцины для профилактики вирусных инфекций.
Вакцины для специфической профилактики полиомиелита.
Серологический метод исследования при диагностике гепатита А.
Принцип постановки реакций ГА и ТГА.
Использование РСК, реакции преципитации, РНГА при лабораторной диагностике вирусных инфекций
Стадии взаимодействия вируса с клеткой.
Экспресс диагностика вирусных инфекций.
Патогенез гепатита В и вирусологический метод диагностики.
Постановка реакции нейтрализации вирусов методом цветной пробы.

ЗАНЯТИЕ 5

Тема: « МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА КОЛИ- ИН ФЕКЦИИ».

Цель - научится применять полученные знания по общей микробиологии в частной на примере Е.соli и ознакомится с различными методами лабораторной диагностики применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача. Изучить их основные биологические свойства; познакомиться с патогенезом и основными клиническими формами эшерихиозов; разобраться в принципах и методах лабораторной диагностики коли - инфекции.

Семейство: Enterobacteriaceae

Род: Еsherichia

Вид: E. Coli

I. Вопросы для обсуждения

1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме.

II. Практическая работа:

1. Самостоятельное изучение демонстрационного материала:

а) морфология кишечной палочки в мазках, окрашенных по Граму;

б) стенд-информация по теме: "Кишечное семейство бактерий";

2 Коли-инфекции.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

- первый этап: посев исследуемого материала на среду Эндо;

- второй этап: учет результатов роста на среде Эндо, микроскопия подозрительных колоний;

а) постановка ориентировочной реакции агглютинации с поливалентными ОВ-coli -агглютинирующими сыворотками и материалом из колоний;

б) по результатам положительной реакции агглютинации сделать пересев выбранной колонии на скошенный агар (указать цель этого действия);

в) поливалентные и моновалентные (моноспецифические) ОВ -coli агглютинирующие сыворотки, получение, использование.

-третий этап: определение чистоты культуры на скошенном агаре;

а) микроскопия мазков (окраска по Граму), критерии чистоты культуры.

б) пересев на "пестрый ряд" (указать цель посева);

в) постановка развернутой реакции агглютинации с моноспецифическими ОВ -coli сыворотками;

-четвертый этап:

а) учет результатов роста на средах "пестрого" ряда,

б) учет развернутой реакции агглютинации;

Вывод: обосновать полученный результат.

3. Санитарно-бактериологическое исследование воды: определение коли-титра двухфазным бродильным методом.

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Почему кишечную палочку считают санитарно – показательным микроорганизмом при санитарном обследовании объектов внешней среды?

б) Что такое коли – титр и коли – индекс?

в) Каково антигенное строение кишечной палочки?

г) Как выделяют чистую культуру диареегенной кишечной палочки?

д) Какой антиген (О или К) определяют в реакции агглютинации с живой культурой?

е) Как обнаруживается О – антиген у кишечной палочки?

ж) По какому антигену окончательно судят о принадлежности бактерий к патогенному серовару?

з) На какие категории и по каким признакам подразделяют диареегенные кишечные палочки?

и) Какими факторами патогенности обладают энтеротоксигенные кишечные палочки? Каков генетический контроль их синтеза?

к) Чем обусловлена патогенность энтеротоксигенных кишечных палочек?

л) Чем обусловлена патогенность энтероинвазивных кишечных палочек?

м) С чем связана патогенность энтерогеморрагических кишечных палочек?

н) Каковы основные пути заражения диареегенными кишечными палочками?

о) Можно ли отличить колонии диареегенных кишечных палочек от колоний непатогенных кишечных палочек на дифференциально - диагностических средах? Если можно, то в каких случаях?

IV. Письменное задание:

а) Роль неспецифической защиты при коли-инфекциях. Записать определение коли-титра двухфазным бродильным методом.

б) Перечислить различные варианты диареегенных кишечных палочек.

в) Дифференциальные признаки УПКП и ЭПКП.

г) Решение ситуационных задач по теме занятия.

ЗАНЯТИЕ 6

Тема: « МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ»

(особо опасная инфекция).

Цель – ознакомится с особо опасными инфекциями на примере холерного вибриона. Изучить основные биологические свойства возбудителя; познакомиться с патогенезом и клиническими формами заболевания; разобраться в принципах и методах экспресс-диагностики применение которых, необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

Семейство: Vibrionaceae

Род: Vibrio

Виды: V. cholerae биовар -cholerae

V. cholerae биовар –eltor

V. cholerae серовар О 139.

I. Вопросы для обсуждения

1. Обсуждение теоретических и практических вопросов по теме занятия по общепринятой схеме.

II. Практическая работа:

1. Демонстрационный материал:

а) стенд: "Возбудители холеры";

б) морфология холерного классического и холерного вибриона Эль-Тор в мазках.

в) дифференциальные признаки вибрионов: холерного классического, холерного Эль-Тор, холероподобного;

2. Исследование воды на холеру. Бактериологический метод:

- методика взятия пробы из воды, материала от больного с подозрением на холеру, из трупа. Патрон для пересылки фекалий;

- изучение колоний холероподобного вибриона на щелочном агаре, приготовление мазков, окраска по Граму;

- биохимические свойства и реакция холера-рот;

- серодиагностика холерных вибрионов, постановка развернутой реакции агглютинации с "О" холерной сывороткой, учет результатов;

- ускоренная диагностика холеры по Ермольевой, учет результатов;

3. Биопрепараты: вакцина, агглютинирующие сыворотки, Инаба, Огава, Гикошима, бактериофаг, холероген -анатоксин.

III.Вопросы для самоподготовки:

а) Каковы морфологические, культуральные и биохимические особенности холерного вибриона?

б) По каким признакам отличают холерный вибрион от холероподобного?

в) Как происходит заражение при холере?

г) Монофаги холерные жидкие (2 мл), состав назначение.

д) Принцип патогенеза диареи при холере.

IV. Письменное задание:

Объяснить смысл терминов: «биовар», «серовар».
Чем характеризуется особо опасная инфекция?
Методы ускоренной диагностики холеры.

ЗАНЯТИЕ 7

Blog

Содержание

Тема: «ОБЩАЯ ВИРУСОЛОГИЯ».