Вучебно-методической разработке представлен план практических занятий по общей микробиологии с вирусологией для студентов лечебного факультета, список теоретических вопросов по каждой теме.

Вид материала

Содержание

Подобный материал:

1 2 3

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования

« Ставропольская государственная

медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального

развития Российской Федерации

Учебно-методическая разработка по общей микробиологии с вирусологией для студентов лечебного факультета

Ставрополь, 2012 г.

УДК 616- 093/ 098 (07)

ББК 52.64я73

У-91

Учебно-методическая разработка по общей микробиологии с вирусологией для студентов лечебного факультета.- Ставрополь: Изд: СГМА, 2012.-53с.

Составители: зав. каф. проф. И.А. Базиков; проф. Т.В Таран. доценты: А.Х. Казиев, Е.В. Лысогора, ассистенты: И. В. Климанович, В.А. Лысогора, М. М. Минасян, Е.В. Чекрыгина.

В учебно-методической разработке представлен план практических занятий по общей микробиологии с вирусологией для студентов лечебного факультета, список теоретических вопросов по каждой теме. Предложен список учебной литературы и тематический план лекций.

Предназначен для студентов 2-го курса лечебного факультета при изучении общей микробиологии c вирусологией .

Рецензенты:

Ходжаян А.Б. д.м.н., профессор, заведующая кафедрой биологии

СтГМА;

Тимченко Л.Д. профессор кафедры общей биологии СГУ

Разрешено к печати редакционно-издательским советом СтГМА

УДК 616- 093/ 098 (07)

ББК 52.64я73

У-91

Ставропольская государственная

Медицинская академия,2012

ЗАНЯТИЕ № 1

Тема: «МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ. МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ».

Цель – ознакомиться с режимом работы микробиологической лаборатории, приобрести навыки микроскопического метода диагностики применение которого необходимо будущим специалистам в рамках обязанности врача. Овладеть техникой приготовления мазка из микробной смеси.

I. Вопросы для обсуждения:

1. Режим работы в микробиологической лаборатории

2. Иммерсионная система оптического микроскопа

II. Практическая работа:

1. Демонстрация приготовления сложных красящих растворов (основной карболовый фуксин Циля, фуксин Пфейффера).

2. Техника приготовления мазка из микробной смеси, окраска простым способом, микроскопия.

3. Овладение техникой микроскопирования с иммерсионной системой.

4. Демонстрация основных форм бактерий (шаровидные, палочковидные, извитые).

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Назначение микробиологических лабораторий, принцип работы, оборудование.

б) Световой микроскоп, устройство, ход лучей в иммерсионной и сухой системах микроскопа.

в) Изучение морфологии микроорганизмов в живом и окрашенном состоянии.

Нативные и фиксированные препараты.

г) Состав и приготовление сложных красящих растворов.

д) Основные формы бактерий.

ЗАНЯТИЕ №2

Тема: «МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ (продолжение)».

Цель – разобраться в особенности строения грамположительных и грамотрицательных бактерий, приобрести навыки микроскопического метода диагностики, применение которого необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

I. Вопросы для обсуждения:

1. Строение бактериальной клетки.

2. Окраска по методу Грама.

3. Особенности строения клеточной стенки Грам «+» и Грам «-» бактерий.

4. Особенности строения клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий.

5. Споры. Спорообразование.

6. Окраска по методу Циля-Нильсена (в модификации по Ожешко).

7. УИРС: «Эволюция оптических методов исследования в микробиологии». Распределение докладов.

II. Практическая работа:

1.Приготовить мазок из взвеси стафилококков и кишечных палочек с окраской по Граму.

2. Приготовить мазок из кислотоустойчивых бактерий с окраской по Цилю-Нильсену в модификации по Ожешко.

3. Программированный контроль по методам окраски.

4. Демонстрация:

а) мазков из стафилококков и кишечных палочек, окрашенных по Граму;

б) мазков из микобактерий, окрашенных по Цилю-Нельсену;

в) мазков в люминесцентном микроскопе.

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Классификация микроорганизмов

б) Морфология, ультраструктура и химический состав бактерий

в) Строение бактериальной клетки.

г) Окраска по методу Грама.

д) Особенности строения клеточной стенки Грам «+» и Грам «-» бактерий.

е) Особенности строения клеточной стенки кислотоустойчивых бактерий.

ж) Споры. Спорообразование.

IV. Письменное задание:

а) Записать методику окраски по методам Грама и Циля-Нильсена.

б) Нарисовать схему строения бактериальной клетки.

ЗАНЯТИЕ №3

Тема: «МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ (продолжение)».

Цель - разобраться в особенности строения бактерий имеющих капсулу, различные включения, приобрести навыки микроскопического метода позволяющего обнаружить эти структуры у микроорганизмов, что позволит будущим специалистам в рамках обязанностей врача проводить точную диагностику заболевания.

I. Вопросы для обсуждения:

1. Включения у бактерий.

2. Окраска волютиновых зерен по методу Нейссера.

3. Капсулы бактериальной клетки. Методы окраски. Демонстрация окрашенных препаратов микробов с капсулой.

4. Морфология грибов: плесневых, дрожжеподобных, дрожжей.

5.Морфология актиномицетов.

6.Классификация и морфология спирохет.

7. Особенности строения спирохет, видимых при электронной микроскопии.

8. Устройство и назначение конденсора тёмного поля зрения.

II.Практическая работа:

1. Приготовить мазок из кислого молока с окраской по Нейссеру.

2. Приготовить мазок из дрожжей с окраской по Граму.

3. Демонстрация включений у молочнокислых бактерий при окраске по Нейссеру и Лёффлеру.

4. Демонстрация бледных трепонем в тёмном поле зрения.

5. Демонстрация боррелий клещевого возвратного тифа при окраске по Романовскому-Гимза.

III. Вопросы для самоподготовки:

а) включения у бактерий,

б) капсула бактерий,

в) морфология патогенных для человека грибов (дрожжеподобные грибы),

г) морфология спирохет,

д) морфология микоплазм,

е) морфология риккетсий,

ж) морфология актиномицетов.

IV. Письменное задание:

а) Записать технику окраски волютиновых зёрен по Нейссеру и Лёффлеру

б) Нарисовать в виде схемы капсулу бактериальной клетки

в) Зарисовать ультраструктуру спирохет

г) Зарисовать псевдомицелий дрожжеподобных грибов.

ЗАНЯТИЕ №4

Тема: «МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ.

МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ (окончание)».

Цель – ознакомление с основными свойствами вирусов, структурой и химическим составом, этапами взаимодействия вирусов с клеткой. А также с методами стерилизации и дезинфекции, что позволит будущим специалистам в рамках обязанностей врача проводить дезинфекционные мероприятия.

I. Вопросы для обсуждения:

1. Классификация вирусов.

2. Структура и химический состав вирусов.

5. Этапы взаимодействия вируса с клеткой.

6. Стерилизация. Методы, аппаратура, режим работы.

7. Дезинфекция. Методы, средства, режим использования.

II. Практическая работа:

1. Постановка опыта действия карболовой кислоты на культуру E. coli и учёт результатов.

2. Приготовить мазок – отпечаток со слизистой носа, окраска по Романовскому-Гимза для определения вирусных включений (колонии вирусов).

3. Демонстрация телец Бабеша-Негри в клетках мозга при бешенстве.

4. Демонстрация аппаратуры для стерилизации.

5. Демонстрация дезинфектантов.

6. Программированный контроль: «Отличительные признаки основных групп микроорганизмов» (карта №1).

7. Программированный контроль: « Методы стерилизации» (карта №2).

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Классификация вирусов.

б) Структура и химический состав вирусов.

в) Этапы взаимодействия вируса с клеткой.

г) Тельца Бабеша-Негри. Вирусоскопический метод определения вирусов (включения вирусной колонии).

д) Стерилизация. Методы стерилизации, используемые в медицине и микробиологии. Методы контроля стерилизации.

е) Дезинфекция. Основные группы дезинфектантов, области применения и режим использования.

IV. Письменное задание:

а) Записать методику окраски по Романовскому-Гимза

б) Записать схему методов стерилизации

в) Перечислить дезрастворы, их концентрацию и режим использования в лабораторной практике и медицине.

ЗАНЯТИЕ №5

Тема: «ЭВОЛЮЦИЯ ОПТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИЗУЧЕНИЯ

МИК РООРГАНИЗМОВ».

Цель – закрепление теоретических знаний, применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача

I. Вопросы для обсуждения:

1. САРС: изложение тем рефератов.

2. Итоговый контроль по теме «Микроскопические методы исследования в микробиологии» (письменно).

Вопросы к итоговому занятию по морфологии микроорганизмов.

Режим работы микробиологической лаборатории.
Световой микроскоп. Устройство. Применение.
Электронный микроскоп. Устройство. Применение.

Люминесцентный микроскоп. Устройство. Применение.
Иммерсионная система оптического микроскопа. Темнопольная микроскопия.

6.Микропрепараты. Мазок, нативный препарат, способы приготовления.

7.Назначение микробиологических лабораторий. Принципы работы. Оборудование.

8.Основные отличия прокариот и эукариот.

9.Классификация бактерий. Основные формы бактерий.

10.Основные принципы классификации микробов.

11.Строение бактериальной клетки.

Жгутики, капсулы, споры. Строение. Спорообразование.

13. Ультраструктура бактериальной клетки.

14. Строение клеточной стенки у грамположительных и грамотрицательных бактерий.

15.Включения у бактерий. Строение кислотоустойчивых бактерий.

16. Простые и сложные методы окрашивания.

17. Методы выявления спор и капсул у бактерий.

18. Методы выявления жгутиков и включений у бактерий.

19. Основные принципы окраски по Граму, Цилю – Нильсену.

20. Классификация и морфология грибов.

21. Классификация и морфология риккетсий.

22. Классификация и морфология спирохет.

23. Особенности строения спирохет, видимых при электронной и световой микроскопии.

24. Морфология актиномицетов.

25. Классификация и морфология микоплазм.

26. Особенности биологии вирусов.

27. Классификация вирусов.

28. Строение и химический состав вирусной частицы.

29. Характеристика вируса, вириона, вироида и приона.

30. Типы взаимодействия вируса с клеткой.

31. Продуктивный тип взаимодействия вируса с клеткой. Характеристика.

32. Интегративный тип взаимодействия вируса с клеткой. Характеристика.

33.Фазы репродукции вируса.

34.Характеристика адсорбции, проникновения и дезинтеграции.

35. Характеристика транскрипции и репликации.

36. Характеристика сборки вирусной частицы и ее выхода из клетки.

37. Методы стерилизации и их краткая характеристика.

38. Правила кипячения, прокаливания на огне, фильтрования через бактериальные фильтры.

39. Методы стерилизации, автоклавирование, пастеризация, тиндализация.

ЗАНЯТИЕ №6

Тема: «ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. ПИТАНИЕ»

Цель - разобраться в особенности проникновения питательных веществ в микроорганизм, в разнообразных типах питания и питательных сред, приобрести навыки дифференцировки бактерий с помощью питательных сред, применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

I. Вопросы для обсуждения:

1.Типы питания микроорганизмов: аутотрофы, гетеротрофы, прототрофы, ауксотрофы.

2.Механизмы питания бактерий – пассивная диффузия, облегченная диффузия, активный транспорт.

3.Условия, необходимые для культивирования микроорганизмов в бактериологической лаборатории.

4.Классификация, состав и назначение искусственных питательных сред.

5.Значение основных питательных сред в культивировании микроорганизмов.

6.Значение дифференциально – диагностических питательных сред в идентификации различных видов микроорганизмов.

II. Практическая работа:

1.Естественные питательные среды и их назначение.

2.Приготовление сложных питательных сред. Приготовление сред с углеводами, сывороточных и кровяных сред (среда Леффлера и щелочная 1% пептонная вода).

3.Дифференциально – диагностические среды. Приготовление среды Эндо.

4.Программированный контроль, заполнение карты №3 «Питание микроорганизмов».

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Типы питания микроорганизмов: аутотрофы, гетеротрофы, прототрофы, ауксотрофы.

б) Механизмы питания бактерий – пассивная диффузия, облегченная диффузия, активный транспорт.

в) Условия, необходимые для культивирования микроорганизмов в

бактериологической лаборатории.

IV. Письменное задание:

а) Составить классификацию питательных сред по способу

приготовления, составу и назначению.

б) Записать типы питания микроорганизмов.

ЗАНЯТИЕ №7

ТЕМА: «БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР АЭРОБОВ».

Цель - разобраться в понятиях - культура микроорганизма, штамм, биовар; уяснить этапы выделения чистой культуры аэробов; приобрести навыки приготовления мазков из исследуемого материала и чистой культуры; отработать навыки посевов и пересевов на плотных питательных средах; ознакомиться с классическим методом лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, идентификации и дифференцировки бактерий, применение которого необходимо будущим специалистам в рамках обязанности врача.

I. Вопросы для обсуждения:

1.Понятия: культура микроорганизмов, смешенная культура, чистая культура, колония, штамм, биовар, аэробы.

2.Этапы идентификации выделенной чистой культуры микроорганизмов.

3.Короткий «пестрый» ряд: цель использования, состав питательных сред. 4.Методика посева на «пестрый» ряд.

5.Учет результатов роста микроорганизмов на средах «пестрого» ряда.

Значение полученных данных для определения вида выделенной чистой культуры бактерий.
Знакомство с термостатом.

II. Практическая работа:

- Выделение чистой культуры аэробов:

й этап. Микроскопия исследуемого материала, окраска по Граму. Посев на МПА в чашку Петри для получения изолированных колоний.
й этап. Учет роста на агаре в чашках Петри: микроскопическое изучение колоний; приготовление мазка из изолированной колонии, пересев изолированной колонии на скошенный агар в пробирку для накопления чистой культуры выделенных бактерий.

3 – й этап.

а) Определение чистоты выделенной культуры: приготовление мазка со скошенного агара и окраска по Граму, микроскопия, заключение.

б) Пересев чистой культуры со скошенного агара на среды короткого

«пестрого» ряда.

4 – й этап – учет ферментативной активности выделенной чистой культуры.

Определение вида (идентификация) выделенной чистой культуры по морфологическим, тинкториальным и биохимическим свойствам.

Программированный контроль: заполнение карты № 4 «Выделение чистых культур аэробов».

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Р. Кох и его заслуги в создании метода выделения чистых культур микроорагнизмов.

б) Культура бактерий: чистая и смешанная, колония, штамм, биовар, серовар, фаговар.

в) Этапы выделения чистой культуры микроорганизмов.

г) Значение метода выделения чистых культур микроорганизмов в диагностике инфекционных заболеваний.

е) Какие ферменты микроорганизма ответственны за изменение цвета питательной среды и газообразование в «поплавках» при посеве на МПБ с моносахаридами?

з) Какие ферменты микроорганизмов ответственны за положительную пробу на индол и сероводород при выращивании бактерий на питательной среде?

IV. Письменное задание:

а) Указать принципы выделения чистых культур аэробов.

б) Записать схему выделения чистых культур аэробов по этапам.

в) Записать состав сред Гисса.

г) Описатьметоды определения протеолитических ферментов (проба на индол и сероводород)

д) Описать методы определения сахаролитических ферментов.

ЗАНЯТИЕ № 8

ТЕМА: «БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ. ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТЫХ КУЛЬТУР АНАЭРОБОВ».

Цель – научится выделять чистую культуру анаэробов из исследуемого материала, отработать навыки приготовления мазков из исследуемого материала и чистой культуры, посевов и пересевов на плотных и жидких питательных средах, обучится способам создания анаэробных условий в лаборатории, ознакомится с классическим методом лабораторной диагностики анаэробных инфекций, идентификации и дифференцировки бактерий, применение которого необходимо будущим специалистам в рамках обязанности врача.

I. Вопросы для обсуждения:

1.Методы создания анаэробных условий культивирования микроорганизмов: физический, химический, биологический.

2.Этапы выделения чистой культуры анаэробов.

3.Питательные среды, используемые при культивировании анаэробов.

II. Практическая работа:

1.Этапы выделения чистой культуры анаэробов:

1-й этап: накопление материала, п осев взвеси почвы на среду Китт-Тароцци.

2-й этап: учет результатов роста на среде Китт-Тароцци. Пересев смешанной культуры в трубки Вейон-Виньяля.

3-й этап: учет роста в трубках Вейон-Виньяля. Микроскопия мазков из изолированных колоний. Пересев на среду Китт-Тароцци.

4-й этап: микроскопия выделенной чистой культуры анаэробов. Контроль чистоты полученной культуры.

1.Тестовый контроль. Заполнение карты №5 «Выделение чистой культуры анаэробов».

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Анаэробный тип дыхания микроорганизмов.

б) Принципы создания анаэробных условий.

в) Особенности питательных сред, применяемых для культивирования

анаэробов.

IV .Письменное задание:

1.Записать методы создания анаэробных условий.

2.Записать состав среды Китт-Тароцци.

ЗАНЯТИЕ № 9

ТЕМА: «БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. МИКРОФЛОРА ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ И ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА».

Цель - разобраться в понятиях нормофлоры, условно-патогенной флоры, патогенной флоры, человека и окружающей среды; отработать навык приготовления мазков из колоний и посев микроорганизмов, провести санитарно – бактериологические исследования воды, воздуха, микрофлоры желудочно-кишечного тракта, применение которых необходимо будущим специалистам в рамках обязанностей врача.

I. Вопросы для обсуждения:

Изучение микрофлоры окружающей среды и организма человека, её практическое значение для медицины.
Методы определения микрофлоры полости рта, микрофлоры воды, воздуха в медицинских и учебных помещениях.
Нормальная микрофлора тела человека, количественные и качественные показатели.
Санитарно-бактериологические исследования: полости рта, кожи человека и содержимого желудочно-кишечного тракта, трактование полученных результатов.

II. Практическая работа:

Санитарно-бактериологическое исследование воды:

а) определение микробного числа (воды).

б) определение коли- титра и коли- индекса различных объектов окружающей среды.

Санитарно-бактериологические исследования воздуха: посев воздуха в учебном помещении, учет роста качественный (приготовление мазков) и количественный (подсчет колоний).
Санитарно-бактериологические исследования микрофлоры организма человека:

а) микрофлоры кожи: посев отпечатков пальцев на МПА в чашки Петри с последующим макроскопическим и микроскопическим изучением выросших колоний;

б) микрофлоры полости рта:

микроскопия мазка из зубного налета, посев слизи из зева методом «кашлевых пластинок» и микроскопическое изучение выросших колоний.

в) микрофлоры желудочно-кишечного тракта: посев спражнений на МПА и среду Эндо и микроскопический учет выросших колоний.

4. а) Учет действия света на рост микроорганизмов (опыт Бухнера).

б) Знакомство с пигментообразующими культурами.

III. Вопросы для самоподготовки:

а) Нормальная микрофлора воды и почвы и их роль в процессах

самоочищения окружающей среды.

б) Понятие о санитарно-показательных микробах окружающей среды и

организма человека.

в) Правила и методы отбора проб воды и воздуха, определение микробного числа, коли - титра, коли- индекса, количества микроорганизмов в 1 м³воздуха и их санитарно-эпидемиологическое значение.

г) Понятие о нормальной микрофлоре организма человека, её количественная и качественная характеристика и значение для организма (витаминообразующее, ферментативное и активизирующее иммунную систему).

д) Гнотобиология – понятие и значение этого раздела медицины.

IV. Письменное задание:

а) Методика определения микробного числа воды.

б) Перечислить санитарно - показательные микроорганизмы в воде, почве и воздухе в медицинских учреждениях.

в) Основные показатели для санитарно – гигиенической оценки исследуемых объектов окружающей среды, организма человека.

ЗАНЯТИЕ №10

Blog

Содержание