Дальневосточное отделение государственный природный заповедник

Вид материала

Список использованных источников
5.2. Отчеты научных сотрудников, работавших в заповеднике по прикомандированию
1. Паразитические нематоды дождевых червей
2. Изучение почвенных энтомопатогеных нематод

Подобный материал:

1 2 3 4 5 6 7 8 9

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ

1 Программа и методика наблюдений за ценопопуляциями видов растений Красной Книги СССР. 1986.

2 Кожевников А.Е., Коркишко Р.И., Кожевникова З.В. Состояние и проблемы охраны флоры юго-западной части Приморского края // Ком. чтения. Вып. 51. Владивосток: Дальнаука, 2005. С. 101-123.

3 Коркишко Р.И. Сосудистые растения заповедника «Кедровая падь» // Флора и фауна заповедников. М., вып. 82. 2000. 83 с.

4 Коркишко Р.И. Сосудистые растения // Кадастр растений и грибов заповедника «Кедровая падь». Владивосток: Дальнаука. 2002. С. 31-66.

5 Коркишко Р.И. Сосудистые растения заказника «Барсовый» и их охрана // В сб.: Научные исследования в заповедниках Дальнего Востока. Мат-лы YI Дальневосточной конференции по заповедному делу, 15-17 октября 2003, Хабаровск. Хабаровск: ИВЭП ДВО РАН, ч. II. 2004.

6 Кожевников А.Е., З.В. Кожевникова, Р.И. Коркишко. Основные особенности таксономического состава локальной флоры горы Голубиный утес (Хасанский региональный природный парк, Приморский край) // Флора и растительность Сибири и Дальнего Востока. 3 Международная конференция. Тез. докладов. Красноярск, 2001. С. 23-27.

7 Кожевников А.Е., З.В. Кожевникова, Р.И. Коркишко. Голубиный утес как рефугиум западнопацифических теплоумеренных реликтовых элементов флоры на юге Российского Дальнего Востока // Растения муссонного климата. Тез. II –ой междунар. Научн. Конф. Владивосток, Дальнаука. 2000. С. 91-92.

8 Кожевников А.Е., Кожевникова З.В. Находка на российском Дальнем Востоке Mitrasacme indica из нового для флоры России семейства Loganiaceae // Ботан. журн. 2000. Т.85, N5. С. 130-134.

9 Кожевников А.Е., Кожевникова З.В. Новый для флоры России род Lipocarpha (Cyperaceae) с территории российского Дальнего Востока (Приморский край) // Бюл. Моск. общ-ва испыт. прир. Отд. биол. 2000 Т. 105, Вып. 2. С. 58.

10 Кожевников А.Е., Кожевникова З.В. Новый для флоры России вид Utricularia caerulea L. (Lentibulariaceae) с территории Хасанского природного парка (Приморский край) // Бюл. Моск. общ-ва испыт. прир. Отд. биол. 2000. Т. 105, Вып. 3. С. 66-68.

11 Кожевников А.Е., Кожевникова З.В. Hypericum laxum (Hypericaceae) - новый вид для флоры России (Приморский край) // Бот. журн. 2001. Т. 86, N 4. С. 160-163.

12 Шибнева И. В., Коркишко Р. И. О новом местонахождении Liparis kumokiri F. Maek. в заповеднике Кедровая Падь // В сб.: Животный и растительный мир Дальнего Востока. Сер. Экология и систематика растений. Уссурийск: УГПИ, 2001. Вып. 5. С. 46-52.

13 Нечаева Т.И. Конспект флоры заповедника «Кедровая падь» // Флора и растительность заповедника «Кедровая падь». Владивосток, 1972. С. 43-88.

14 Красная книга РСФСР (Растения). М.: Росагропромиздат, 1988. 590 с.

15 Коркишко Р.И. О современном состоянии ценопопуляций редких видов сосудистых растений заповедника Кедровая Падь // V Дальневосточная конференция по заповедному делу, посвященная 80-летию со дня рождения академика РАН А.В. Жирмунского. Владивосток, 12-15 октября 2001 г.: Материалы конференции. Владивосток: Дальнаука, 2001. С. 154-155.

16 Филонов К. П., Нухимовская Ю. Д. Летопись природы в заповедниках СССР. Методическое пособие. М.: Наука, 1985. 144 с.

17 Работнов Т. А. Жизненный цикл многолетних травянистых растений в луговых ценозах // Тр. БИН АН СССР. Сер. 3. Геоботаника. 1950. Вып. 6. С. 7-204.

18 Уранов А. А. Возрастной спектр фитоценопопуляций как функция времени и энергитических волновых процессов // Научн. докл. Высш. школы. Биол. Науки, 1975, № 2. С. 7-34.

19 Вайнагий И. В. О методике изучения семенной продуктивности растений // Ботан. журн. 1974. Т. 59, № 6. С. 826-831.

20 Вайнагий И. В. Методика определения семенной продуктивности представителей семейства лютиковых // Бюл. Гл. бот. сада. 1990. Вып. 155. С. 86-90.

21 Буч Т. Г. Классификация плодов растений Уссурийского заповедника им. В. Л. Комарова // Комаровские чтения. Вып. ХХХ. Владивосток: ДВНЦ АН СССР, 1983. С. 90-109.

22 Артюшенко З. Т., Федоров А. А. Атлас по описательной морфологии высших растений. Плод. Л.: Наука, 1986. 392 с.

23 Меликян А. П., Вышенская Т. Д. Сем. Berberidaceae // Сравнительная анатомия семян. Т. 2. Л.: Наука, 1986. С. 185-191.

24 Николаева М. Г., Разумова М. В., Гладкова В. Н. Справочник по проращиванию покоящихся семян. Л.: Наука, 1985. 348 с.

25 Ценопопуляции растений (основные понятия и структура). М.: Наука, 1976. 217 с.

26 Шибнева И. В. Liparis kumokiri (Orchidaceae) на Дальнем Востоке России // Ботан. журн. 2004. Т. 89, № 10. С. 1633-1636.

27 Шибнева И. В. Microbiota decussata в бассейне реки Бикин // В сб.: V Дальневосточная конференция по заповедному делу. Матер. конф. Владивосток: Дальнаука, 2001. С. 313-315.

28 Шибнева И. В. Флористические находки в бассейне реки Бикин // В сб.: Научные исследования в заповедниках Дальнего Востока. Материалы VI Дальневосточной конференции по заповедному делу, Хабаровск: 15-17 октября 2003 г. Хабаровск: ИВЭП ДВО РАН, 2004. Ч. 2. С.

29 Гаранин В.И., Даревский И.С. Программа изучения амфибий и рептилий в заповедниках // Амфибии и рептилии заповедных территорий. М.: 1987. С. 5-8.

30 Гаранин В.И., Панченко И.М. Методы изучения амфибий в заповедниках // Амфибии и рептилии заповедных территорий. М.: 1987. С. 8-25.

31 Динесман Д.Л., Калецкая М.Л. Методы количественного учета амфибий и рептилий // Методы учета численности и географического распространения наземных позвоночных. М.: 1952. С. 329-341.

32 Коротков Ю.М. О количественном учете некоторых амфибий на местах размножения в Приморском крае // Вестн. Зоологии. Киев: АН Украины, № 2, 1973. С. 80-82.

33 Мунхбаяр Х., Кузьмин С.Л. Краткая методика сбора материала по экологии земноводных и пресмыкающихся МНР. Дэвтэр, № 18, 1986. С. 136-147.

34 Cromp M.L., Scott N.J. Visual encounter surveys (VES) // Measuring and Monitoring Biological Diversity (Standard Methods for Amphibians). Washington: Smithsonian institution Press Washington and London, 1984. P. 84-92.

35 Daniels Ranjit R.F. Methodology for inventorying amphibians and Reptiles // Hamadryad. 1980. P. 3-9.

36 Маслова И.В. Сравнительная характеристика биологии земноводных Южного Приморья: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. Владивосток: 2001а. 23 с.

37 Маслова И.В. Ассамблеи и гильдии земноводных Южного Приморья // V Дальневосточная конференция по заповедному делу, посвященная 80-летию со дня рождения академика РАН А.В. Жирмунского. Владивосток, 12-15 октября 2001 г.: Материалы конференции. Владивосток: Дальнаука, 2001б. С. 178-180.

38 Коркишко В.Г. Экологические особенности и поведение дальневосточного леопарда. Автореф. Дисс. … канд. Биол. Наук. М.: 1986. 27 с.

39 Пикунов Д.Г., Коркишко В.Г. Леопард Дальнего Востока. М.: Наука, 1992. 189 с.

40 Korkishko V. The census of the amur leopard as a method of estimate of rare species of large mammals. Proc. Of the Annual Meeting of the Mammological Society of Japan, Toyama, 3-6.10.2002.

41 Пикунов Д.Г., Д.Г. Микелл, В.К. Абрамов, В.Г. Коркишко, И.Г. Николаев. Отчет по результатам учета численности дальневосточного леопарда 2003// Ин-т Географии ДВО РАН, 2003а.

42 Пикунов Д.Г., Д.Г. Микелл, В.К. Абрамов, И.Г. Николаев, И.В. Середкин, А.А. Мурзин, В.Г. Коркишко. Результаты исследования популяций дальневосточного леопарда (Panthera pardus orientalis) и амурского тигра (Panthera tigris altaica) на юго-западе Приморского края, Дальний Восток России, февраль 2003 года. Владивосток. 2003б. 62 c.

5.2. ОТЧЕТЫ НАУЧНЫХ СОТРУДНИКОВ, РАБОТАВШИХ В ЗАПОВЕДНИКЕ ПО ПРИКОМАНДИРОВАНИЮ

5.2.1. Отчет группы по изучению паразитов беспозвоночных центра паразитологии ИПЭЭ РАН. Результаты работы в заповеднике «Кедровая Падь» в июле 2006 года

Спиридонов С.Э.

К настоящему времени удалось закончить анализ морфологических и молекулярных данных по материалам, собранным группой по изучению нематод беспозвоночных во время экспедиционного выезда в заповедник Кедровая Падь в июле 2006 года. Полученный материал можно разделить на две основные части: паразитические нематоды дождевых червей и патогенные почвенные нематоды семейства Steinernematidae. Этим двум основным направлениям нашей работы соответствуют два раздела данного отчета.

1. ПАРАЗИТИЧЕСКИЕ НЕМАТОДЫ ДОЖДЕВЫХ ЧЕРВЕЙ

ЗАПОВЕДНИКА КЕДРОВАЯ ПАДЬ

Во время работы в заповеднике Кедровая Падь было вскрыто 210 беспозвоночных, из них 119 дождевых червей, 81 моллюск и 10 диплопод. В моллюсках были обнаружены не определенные пока мермитиды, диплоподы оказались свободными от инвазии. Дождевые черви были представлены двумя семействами – Lumbricidae и Moniligastridae. Из люмбрицид фоновым видом, обитающим как в заповеднике, так и в других районах Приморского края, является Eisenia nordenscioldi pallida, эндемичный подвид Eisenia с обширным ареалом. 45% этих червей оказались инвазированными ранее описанной нами дрилонематидой Dicelis ussuriensis Spiridonov et al., 2005. Интенсивность заражения составляла от 1 до 23 экз. нематод. Прочие виды люмбрицид, космополитные Apporectodea calliginosa, A. rosea и Lumbricus rubellus, не были заражены. Другим фоновым видом дождевых червей в заповеднике является единственный представитель тропического семейства Moniligastridae - Drawida ghilarovi. Эти крупные зеленоватые черви предпочитают почвы под кедровниками, менее многочисленны под пологом широколиственного леса и отсутствуют в луговой почве. Более 60% вскрытых дравид оказались заражены нематодами, принадлежащими к надсем. Drilonematoidea. В ряде случаев наблюдали одновременную инвазию 2-3 видами нематод. Интенсивность заражения колебалась от 2-3 до 78 экз. нематод. Были найдены два вида Siconema из сем. Ungellidae (один из видов был самым многочисленным, до 62 экз. в полости тела хозяина), один вид очень редкого монотипического сем. Crearocercidae (2-5 экз. в одном черве) и единственный экземпляр Drilonematidae gen. sp. (Filiponema?).

Обнаружение представителей семейства Ungellidae у дождевых червей в Приморье в 2003 году было для нас достаточно неожиданным, ведь ранее эти паразитические нематоды отмечались лишь в тропических и субтропических регионах. Выявление нематод этого семейства в заповеднике Кедровая Падь подтверждает закономерный характер первого обнаружения – по-видимому, дождевые черви Юга Приморского края достаточно сильно заражены этими интересными паразитическими нематодами тропического происхождения. В 2006 году были вскрыто значительное количество дождевых червей, в результате чего выяснилось, что фауна экзотических паразитических нематод в Кедровой Пади еще богаче, чем мы ожидали, и представлена несколькими видами трех семейств.

1.1. Сем. Ungellidae

Нематоды этого семейства характеризуются своеобразной морфологической особенностью – наличием крюков на головном конце тела. Задний конец тела самок (и реже самцов) этих нематод сильно утолщен, поскольку заключает в себе особый орган невыясненной пока функции (т.н. «хвостовой орган»). На головном конце унгеллид из Кедровой Пади различимы мелкие крюки (Рис.1), а на утолщенном хвостовом конце самок (Рис. 2) четко различим хвостовой орган (Рис.3). Для региона Юго-Восточной Азии, из которого описано большинство видов унгеллид, характерно присутствие в фауне той части родов унгеллид, у самцов который утрачен спикулярный аппарат и нематоды пребывают в состоянии постоянной копуляции. Обнаруженные нами два вида унгеллид также являются представителями одного из родов этой группы – Siconema. Это очень мелкие нематоды (взрослые нематоды - 900-1100 мкм длиной) со своеобразной морфологий, которая, видимо, отражает их паразитирование в специфической среде полости тела дождевых червей: головные крюки, измененная форма тела, чрезвычайно развитые хвостовые органы (у одного из найденных видов они открываются округлыми отверстиями на поверхности тела, у другого в отверстиях заметна губчатая ткань).

Изучение морфологии унгеллид, собранных в 2006 году в заповеднике Кедровая Падь, полностью подтвердило первоначальное определение. Оба вида сиконем являются новыми для науки, описания видов будут подготовлены и опубликованы.

Р

ис. 1. Головной конец самки Siconema sp. 1 из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного близ Золотого ручья в заповеднике «Кедровая Падь».

Рис. 2. Хвостовой конец самки Siconema sp. 1 из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного близ ручья Первый Золотой в заповеднике «Кедровая Падь».

Рис. 3. Хвостовой конец самки Siconema sp. 1 из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного близ Золотого ручья в заповеднике Кедровая Падь (видно отверстие хвостового органа).

Рис. 4. Головной и хвостовой концы самки Siconema sp. 2 из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного в опаде на сопке близ усадьбы в заповеднике Кедровая Падь.

1.2. Семейство Creagrocercidae

Надо сказать, это загадочное семейство стоит особняком среди Drilonematoidea, значительно отличаясь от других семейств этого надсемейства. Пока описан единственный вид этих нематод, Creagrocercus barbatus Baylis, 1943. С.Э. Спиридоновым в музейном материале в африканском черве-октохетиде была найдена нематода, отнесенная им к Creagrocercidae gen. sp., значительно отличающаяся от типового вида. Еще одна находка креагроцерцид также была из музейного материала - бразильских червей-глоссосколецид (вид пока не описан). Таким образом, креагроцерциды – эо очень редкие формы. Тем более неожиданным было обнаружение креагроцерцид на Дальнем Востоке России. В 2003 году нами в Приморском крае были найдены всего 2 экз. креагроцерцид. В прошедшем году нам удалось получить более представительный материал этих нематод как для изучения морфологии, так и молекулярных исследований.

Рис. 5. Головной и хвостовой концы самки Creagrocercus sp. из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного близ 2-го Золотого ручья в заповеднике Кедровая Падь.

1.3. Семейство Drilonematidae

Представители этого семейства паразитируют у дождевых червей самых разнообразных таксонов, в частности, у люмбрицид (а на территории России, за малым исключением, обитают только эти черви) отмечены только два рода этого семейства. До сих пор дрилонематиды не были отмечены у червей-монилигастрид, и наша находка является первой такого рода. Нематоды по ряду признаков напоминают род Filiponema (крупные амфиды и характерные хвостовые органы), однако материал недостаточен для надежной идентификации (единственная самка). Желателен поиск дополнительного материала.

Рис. 6. Головной конец самки Drilonematidae gen. sp. из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного в опаде на сопке вблизи усадьбы в заповеднике Кедровая Падь.

Рис. 7. Хвостовой конец самки Drilonematidae gen. sp. из дождевого червя Drawida ghilarovi, собранного в опаде на сопке вблизи усадьбы в заповеднике Кедровая Падь.

1.4. Использование материала, собранного в Кедровой пади, для изучения молекулярной таксономии и филогении паразитических нематод дождевых червей.

Рис. 8. Дендограмма филогенетических отношений нематод отряда Rhabditida и родственных групп, построенная по результатам анализа последовательности 18S rDNA.

(Критерий – парсимония, из1459 признаков (нуклеотидов) равного таксономического веса, постоянных - 242б неинформативных – 480, информативных – 737. Отсутствие нуклеотида рассматривается как "fifth base")

Обнаружение столь экзотических нематод как и на территории заповедника «Кедровая Падь» позволило собрать материал не только для морфологических, но и для молекулярно-таксономических исследований. Основной интерес представляло определение таксономического положения этих экзотических нематод в системе класса. Для этого были получены нуклеотидные последовательности достаточно консервативных в эволюционном отношении доменов рибосомальной ДНК – участка 18S rDNA и участка D2D3 rDNA. Полученные последовательности сравнивались с последовательностями других нематод, уже депонированных в ГенБанке. Для этого были построены выравнивания и проведен анализ методом максимальной экономии (maximum parsimony).

На Рис. 8 представлено филогенетическое древо взаимоотношений тех обнаруженных в Кедровой Пади нематод – паразитов дождевых червей с другими нематодами. Видно, что креагроцерциды занимают совершенно особое положение и не попадают в единую группу с такими паразитами дождевых червей как сиконемы и дицелис (сборы 2003 года).

Рис. 9. Филогенетические отношения нематод отряда Rhabditida и родственных групп, построенная по результатам анализа последовательности D2D3 rDNA. А – консензусное древо; филограмма с указанием генетической дистанции – линейка – 10 информативных нуклеотидов.

(Критерий – парсимония, из729 признаков (нуклеотидов) равного таксономического веса, постоянных – 150, неинформативных – 303, информативных – 276. Отсутствие нуклеотида рассматривается как "fifth base")

Эти данные полученные на домене 18S rDNA подтверждаются и на другом домене - D2D3 rDNA (Рис. 9). На филограмме 9, Б представлена филограмма отражающая генетическую дистанцию между изученными формами. Видно, что креагроцерциды по результатам анализа домена D2D3 rDNA хоть и образуют единую группу со свободноживущими нематодами, вроде плектид и даже селяхинематид, но находятся, все же, на значительном расстоянии от этих групп.

2. ИЗУЧЕНИЕ ПОЧВЕННЫХ ЭНТОМОПАТОГЕНЫХ НЕМАТОД
В ЗАПОВЕДНИКЕ «КЕДРОВАЯ ПАДЬ».

Исследования по почвенным энтомопатогенным нематодам были начаты нами в Керовой Пади еще в 2003 года, когда было выявлено присутствие неизвестного вида рода Steinernema, из группы видов “affine-intermedium”. В 2006 году мы вновь выделили эту форму, однако до сих пор не можем надежно культивировать ее в лаборатории (как впрочем и большинство видов этой группы).

За время работы в 2006 году на территории заповедника «Кедровая Падь» было собрано более 112 проб почвы и выделено 6 культур почвенных энтомопатогенных нематод. После доставки в лабораторию нами было проведено молекулярно-таксономическое исследование (выделение ДНК и амплификация, клонирование и секвенирование) фрагментов рибосомальных генов (ITS1+5.8S+ITS2). Эти исследования показали, что доминантной формой в пойменных участках заповедника близ р. Кедровая оказывается штейнернематида группы «monticolum» с последовательностью ITS1+5.8S+ITS2 участка почти идентичной одной из депонированных в Генбанке NCBI под именем «Steinernema ashiunense». Различия составили всего 5 нуклеотидов на весь участок ITS1+5.8S+ITS2. Быть может такие различия представляют лишь межпопуляционные различия. Насколько нам известно, описание этого вида пока не опубликовано. Появление названий в Генбанке ранее опубликования приводит к конфликту с Кодексом зоологической номенклатуры, поскольку в традиционном смысле последовательность – это не описание, и само появившееся название становится «nomen nudum». Остается надеяться, что такие нередкие ныне конфликты между традиционной и молекулярной таксономией могут быть формально разрешены, а пока мы воздерживаемся от каких-либо действий в отношении обнаруженных нематод, поскольку рассматриваем публикацию названия, как намерение наших японских коллег описать этот вид. Тем не менее, сам факт обнаружения на материковой части Азии вида почти идентичного по нуклеотидным последовательностям форме с Японских островов представляет значительный интерес. В 2006 году в Кедровой Пади был также выделен космополитный вид Steinernema feltiae. Этот вид обычен в луговых экосистемах и агроценозах Евразии. По нуклеотидным последовательностям ITS1+5.8S+ITS2 этот изолят относится к так называемым «азиатским» формам вида. Ранее эта же форма данного вида была отмечена на Японских островах и нами на Камчатке. Значительные нуклеотидные различия были выявлены между типовой последовательность рибосомальной ДНК нематоды Steinernema carpocapsae и последовательностью нематод этого вида, обнаруженными в 2006 году в заповеднике «Кедровая Падь». Требуется дополнительное исследование (возможны ошибки при ПЦР или при клонировании).

Рис. 10. Филогенетические отношения в пределах рода Steinernema и положение культуры нематод этого рода(2006-9 = Kp9), обнаруженной в 2006 году в заповеднике Кедровая Падь.

Изучение видов рода Steinernema группы “monticolum”представляет значительный интерес. Первый вид этой группы – Steinernema monticolum- был описан с юга Корейского полуострова. Второй вид – S. robustispiculum был найден в Китае. К настоящему времени нами обнаружены неописанные виды или изоляты неясной таксономической принадлежности в Германии, на Камчатке, и вот теперь - в Кедровой Пади. В систематике нематод этого рода используется такой морфологический признака, как строение кутикулярных ребер на латеральных полях инвазионных личинок. Нами были исследованы латеральные поля у личинок из Кедровой Пади и основного вида этой группы – нематод Steinernema monticolum из Кореи. Выявлены существенные различия в строении латеральных полей этих двух видов (Рис.11 и Рис. 12)). Видно, что у вида S. monticolum имеются мощные субмаргинальные ребра, а в средней части поля имеются два тонких ребра. У штейнернематид группы “monticolum”выделенных в Кедровой Пади нематод субмаргинальные ребра тоньше, а в центре поля лишь одно ребро кутикулы.

Рис.11. Латеральное поле инвазионной личинки Steinernema sp. из культуры выделенной в 2006 году в заповеднике Кедровая Падь.

Рис.11. Латеральное поле инвазионной личинки Steinernema monticolum из типовой культуры (Корея).

Blog

Дальневосточное отделение государственный природный заповедник

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ