Пособие предназначено для практических врачей любых специальностей. Отдел патоморфологии и цитологии (2Е)

Вид материалаДокументы

Содержание


Отдел патоморфологии и цитологии (2е)
2. Перечень медицинских услуг.
2Е 1001 Гистологическое исследование любого материала
Диагностическая ценность метода.
Форма представления результатов исследования.
Клиническая интерпретация результатов исследования.
Показания к использованию метода.
2Е 2001 Цитологические исследования любого материала
Назначение метода.
Диагностическая ценность метода.
Форма представления результатов исследования.
Клиническая интерпретация результатов исследования.
Показания к использованию метода.
Назначение метода.
Диагностическая ценность метода.
Форма представления результатов исследования.
Клиническая интерпретация результатов исследования.
Показания к использованию метода.
Диагностическая ценность метода.
Форма представления результатов исследования.
...
Полное содержание
Подобный материал:

Иркутский областной клинический

консультативно - диагностический центр





Медицинские услуги

(пособие для врачей)


Часть VI

  1. ОТДЕЛ ПАТОМОРФОЛОГИИ И ЦИТОЛОГИИ




            1. Иркутск, 2004



Иркутский областной клинический консультативно - диагностический центр. Медицинские услуги. Часть V. Отдел патоморфологии и цитологии (пособие для врачей) / Составители к.м.н. С.С. Голубев, Л.Ю. Раевская, А.Н. Кыштымова, И.В. Калашникова. Под общей редакцией к.м.н., доцента И.В. Ушакова // Иркутский диагностический центр. – Иркутск, 2004. – с.9.


В пособии содержится информация о медицинском оборудовании и технологиях отдела патоморфологии и цитологии, представлен перечень медицинских услуг, цели исследований, показания и противопоказания к исследованиям.


Пособие предназначено для практических врачей любых специальностей.


ОТДЕЛ ПАТОМОРФОЛОГИИ И ЦИТОЛОГИИ (2Е)

  1. Медицинское оборудование и технологии.


Деятельность отдела направлена на исследование прижизненно взятого материала у больного (операционного и биопсийного материала, мазков и отпечатков) при самой различной патологии с помощью широкого спектра гистологических, цитологических, цитогенетических методик.

Разнообразие исследуемого материала и насущная необходимость его подробного исследования в минимально возможные сроки позволяет выделить

основные направления в деятельности отдела:
  • экстренное исследование биопсий и операционного материала (полное приготовление препаратов и выдача заключения в течение 5 – 10 мин.),
  • обычное гистологическое исследование с развернутой палитрой методик фиксации и окраски (в т.ч. и бактериоскопических), выдача заключения через 24 часа;
  • все виды цитологических исследований,
  • все виды цитогенетических исследований с использованием цитогенетической рабочей станции Leica-QFISH,
  • иммуноморфологическое исследование с использованием метода моноклональных и поликлональных антител,
  • использование автоматизированного компьютерного анализа изображения исследуемого материала – морфометрическое исследование (Image-analyse).


Основные технологические этапы обработки материала и используемое оборудование:

1. Прием материала и фиксация в фиксирующих средах (ускоренная с помощью взбалтывателя, в термостате, в микроволновой печи).

2. Проводка материала в автомате для вакуумной проводки “Sacura VIP-E150F” с программированием до 72 час емкостью до 150 кусочков одновременно.

3. Заливка в парафин и формирование блоков в системе для автоматической заливки материала " Sacura TEC-IV".

4. Резка срезов на микротомах (санных и роторных фирмы “Microm”) и использованием одноразовых ножей. Резка низкозамороженных срезов осуществляется на замораживающем микротоме “Sacura CM-502” и на санном микротоме "Microm HM400R" с замораживающей насадкой "К 300", позволяющими делать высококачественные срезы толщиной до 1-2 микрон.

5. Покраска срезов гистологическими и гистохимическими методиками осуществляется в автомате для покраски срезов “Sacura DRS-601A”, позволяющем в автоматическом режиме высококачественно окрашивать одновременно до 60 препаратов 10 красителями; иммуноморфологическими методиками в автомате для иммуноморфологической окраски препаратов "Sacura IHS-20", позволяющем высококачественно одновременно окрашивать 20 препаратов 5 иммуноморфологическими сыворотками при использовании метода моно- и поликлональных антител различных вариантов;

6. Покрытие срезов на предметных стеклах покровными стеклами в автомате Cover Tech;

7. Приготовленные высококачественные гистологические и цитологические препараты подаются в кабинеты врачей-патоморфологов и цитологов для исследования с помощью исследовательского микроскопа "Olympus BX50-32E01/PM20-L2" с автоматической фотонасадкой для высококачественной документации исследуемого материала и бинокулярных световых микроскопов "Olympus CHT-213E", с расширенными исследовательскими возможностями, с последующим оформлении на персональном компьютере заключения. В случаях, требующих дополнительных исследований препараты изучаются с помощью люминесцентной микроскопии на люминесцентном микроскопе "Olympus BX50-32E01/PM30-DRX" для углубленного иммуноморфологического исследования с использованием метода меченных антител, позволяющего с большой точностью диагностировать опухолевые процессы и компьютерной микроскопической видеосистемы “Quantimet 550IW” для цифрового анализа патоморфологического и цитологического материала и углубленной диагностики с камерой высокого разрешения, позволяющей проводить количественный анализ изображения по реальным цветам или оптическим плотностям. Формат изображения 6000х4000 пикселей, что позволяет подсчитывать трудно различаемые объекты или слабофлуоресцирующие. Данная система дает возможность получать результаты с наименьшими искажениями при высокой производительности и с мегапиксельным разрешением.

8. Цитогенетическая диагностика на разных тканях (периферическая кровь, ворсины хориона/плаценты, костный мозг, кровь плода) позволяет охватить спектр наследственной и врождённой патологии, обусловленной численными и структурными хромосомными аномалиями.

                1. Основные преимущества:
  • Использование всей имеющейся аппаратуры в отделе патоморфологии и цитологии ДЦ позволяет ускорить обработку разных групп материала в среднем в 4-6 раз и получать подробное заключение по биопсийному материалу через 5-6 час, что значительно сокращает время обследования больного.
  • Сочетание применения двух морфологических диагностических методов – гистологического и цитологического при исследовании одного объекта значительно повышает достоверность окончательного заключения.
  • Использование для диагностики в сложных случаях развернутого перечня методик окраски и, особенно, иммуноморфологических позволяет практически исключить диагностические ошибки.
  • Микроскопический морфологический компьютеризированный комплекс “Quantimet 550IW” позволяет выявлять полиплоидии при анализе количества ДНК в морфологическом материале, что дает возможность с помощью количественной оценки с высокой степенью достоверности дифференцировать предопухолевые и опухолевые изменения в биопсийном и операционном материале. Комплекс оснащен программным обеспечением, позволяющим на глубоком исследовательском уровне решить любые морфометрические проблемы самых различных патологических процессов.
  • Отделение цитогенетики ДЦ является многопрофильным, охватывающим практически все виды и разделы цитогенетической диагностики, что соответствует лучшим мировым стандартам.


2. Перечень медицинских услуг.


2Е 1001

Гистологическое исследование любого материала

2Е 2001

Цитологическое исследование любого материала

2Е 3001

Иммуноморфологическое исследование любого материала

2Е 4001

Морфометрическое исследование (Image-analyse) любого материала

2Е 5001

Исследование кариотипа в биоптатах хориона

2Е 5002

Исследование кариотипа в культуре лимфоцитов

2Е 5003

Определение пола плода в I триместре беременности

2Е 5004

Исследование кариотипа плодной крови

2Е 5005

Исследование кариотипа в культуре костного мозга

2Е 5006

Молекулярно-цитогенетический метод исследования (FISH)

2Е 5007

Исследование С- гетерохроматиновых регионов хромосом

2Е 5008

Количественное определение миксоплоидий

2Е 5009

Цитогенетическая диагностика анемии Фанкони

2Е 5010

Исследование кариотипа при микроделеционных синдромах

2Е 5011

Определение филадельфийской (Ph) хромосомы

2Е 5012

Прямой метод исследования кариотипа костного мозга
          1. 2Е 1001 Гистологическое исследование любого материала

Назначение метода. предназначен для морфологического иссле­дования тканевых образцов, полученных при эндоскопических щип­цовых и пункционных биопсиях, операциях.

Диагностическая ценность метода. Позволяет диагностировать на светооптическом уровне все виды дистрофических, воспалитель­ных, компенсаторно-приспособительных и опухолевых процессов.

Форма представления результатов исследования. Результаты иссле­дования представляются в виде текстового протокола, содержащего описание технологии обработки материала, микроскопической кар­тины, заключение (формулируется в соответствии с международными классификациями болезней), дополнительные замечания (содержит дополнительную диагностически значимую информацию, не вошед­шую в заключение) и рекомендации. При использовании бактериоскопических методов возможна верификация возбудителей ряда ин­фекционных заболеваний (хеликобактериоз, туберкулез и др.).

Клиническая интерпретация результатов исследования. Как пра­вило, заключение носит конкретно нозологический характер. В ряде случаев (недостаточный объем материала, необходимость выпол­нения уточняющих исследований и др.) дается описательный ответ с указанием общепатологического характера наблюдаемого пато­логического процесса (воспаление, дистрофия и др.) — в этих слу­чаях окончательное заключение возможно только по материалам повторной биопсии.

Показания к использованию метода. Морфологическому иссле­дованию подлежат все тканевые образцы, получаемые при инвазивных диагностических и лечебных манипуляциях и операциях. Обязательна морфологическая верификация всех предопухолевых, опухолеподобных процессов и опухолей, ряда воспалительных (ге­патиты, гастриты и др.), в том числе и инфекционных (туберкулез и др.) заболеваний.

        1. 2Е 2001 Цитологические исследования любого материала




  • (исследование мазков, отпечатков, биологических жидкостей на предмет выявления типирования клеточного состава):
  • экстренное исследование мазков, отпечатков, взятых интраоперационно, в течение нескольких минут,
  • обычное цитологическое исследование с развернутыми методиками окрасок,
  • иммуноморфологическое цитологическое исследование с использованием метода моно- и поликлональных антител,
  • автоматизированный компьютерный анализ материала.

Назначение метода. Предназначен для морфологического иссле­дования клеточных образцов (мазки, мазки-отпечатки), полученных при эндоскопических, браш- и пункционных биопсиях, а также центрифугатов биологических жидкостей (экссудаты, транссудаты, со­держимое кистозных полостей), отделяемого и секретов желез.

Диагностическая ценность метода. Позволяет диагностировать на светооптическом уровне все виды дистрофических, воспалитель­ных, компенсаторно-приспособительных и опухолевых процессов. При использовании бактериоскопических методов возможна вери­фикация возбудителей ряда инфекционных заболеваний (хеликобактериоз, туберкулез, гонорея, трихомониаз, гарднереллез и др.).

Форма представления результатов исследования. Результаты ис­следования представляются в виде текстового протокола, содержа­щего описание технологии обработки материала, микроскопичес­кой картины, заключение (формулируется в соответствии с международными классификациями болезней), дополнительные за­мечания (содержит дополнительную диагностически значимую ин­формацию, не вошедшую в заключение) и рекомендации.

Клиническая интерпретация результатов исследования. Как пра­вило, заключение носит конкретно нозологический характер. В ряде случаев (недостаточный объем материала, необходимость выпол­нения уточняющих исследований и др.) дается описательный ответ с указанием общепатологического характера наблюдаемого патологического процесса (воспаление, дистрофия и др.) — в этих слу­чаях окончательное заключение возможно только по материалам повторной биопсии.

Показания к использованию метода. Цитологическому исследо­ванию подлежат все клеточные образцы, получаемые при инвазивных диагностических и лечебных манипуляциях и операциях. Обя­зательна морфологическая верификация всех предопухолевых, опухолеподобных процессов и опухолей, ряда воспалительных (в том числе и инфекционных) заболеваний.

              1. 2Е 3001 Иммунноморфологическое исследование любого материала

Назначение метода. Предназначен для верификации антигенных структур, связанных с белковыми, белково-полисахаридными, белково-липидными тканевыми образованиями (клетки и клеточные мембраны, волокна, основное вещество соединительной ткани и др.) в тканевых образцах, получаемых при эндоскопических и пункционных биопсиях, операциях.

Диагностическая ценность метода.

Позволяет:
  • исследовать на светооптическом уровне особенности местного иммунитета слизис­тых оболочек (воспалительные заболевания),
  • верифицировать иммунокоплексные и антительные поражения тканевых структур (ауто-иммунные и иммунокомплексные болезни),
  • определять иммунофенотип клеток (опухоли кроветворной и лимфоидной тка­ней),
  • устанавливать принадлежность клеток к тому или иному орга­ну (верификация опухолей по метастазу),
  • уточнить гистогенез опухолей и типировать синтезируемые опухолевыми клетками веще­ства (карциноиды и др.),
  • верифицировать возбудители ряда инфек­ционных заболеваний (хеликобактериоз, боррелиоз и др.).

Форма представления результатов исследования. Результаты ис­следования представляются в виде текстового протокола, содержа­щего описание технологии обработки материала, микроскопичес­кой картины, заключение (формулируется в соответствии с международными классификациями болезней), дополнительные за­мечания (содержит дополнительную диагностически значимую ин­формацию, не вошедшую в заключение) и рекомендации.

Клиническая интерпретация результатов исследования. Резуль­таты исследования не имеют самостоятельного нозологического значения и рассматриваются как дополнительные диагностически значимые факты в комплексе с данными других видов исследова­ний (гистологических, цитологических и др.). Поэтому заключение носит описательный характер.

Показания к использованию метода. Иммуноморфологическое исследование назначается врачом-патологоанатомом после проведенных обычных гистологических и цитологических методик. Обязательна иммуногистохимическая верификация всех биопсий почек при гломерулопатиях, всех опухолей кроветворной и лимфоидной тканей.


2Е 4001 Морфометрическое исследование (image- analyse) любого материала


Назначение метода. Предназначен для проведения выявления полиплоидии при анализе количества ДНК в предопухолевых и опухолевых процессах, процессах регенерации; проведения различного уровня научных морфометрических исследований в любом биологическом материале, из которого возможно приготовить качественные гистологические и цитологические препараты.

Диагностическая ценность метода. Дает возможность с помощью количественной оценки с высокой степенью достоверности дифференцировать предопухолевые и опухолевые изменения в текущем биопсированном и операционном материале, дифференцировать опухолевые и регенераторные изменения. Комплекс оснащен программным обеспечением, позволяющим на глубоком современном исследовательском уровне решить любые морфометрические проблемы самых различных патологических процессов, включая внутриклеточные.

Форма представления результатов исследования. Результаты ис­следования представляются в виде текстового протокола, содержа­щего описание технологии обработки материала, микроскопичес­кой картины, таблиц полученных показателей с подробной статистической обработкой. Заключение формулируется в соответствии с задачами проведенного исследования. Дополнительные за­мечания содержат дополнительную научно значимую ин­формацию, не вошедшую в заключение, и рекомендации.

Клиническая интерпретация результатов исследования. Резуль­таты исследования рассматриваются как дополнительные диагностически значимые факты в комплексе с данными других видов исследова­ний в соответствии с задачами проводимого научного исследования. Поэтому заключение носит описательный характер.

Показания к использованию метода. Морфометрическое исследование большей частью является глубоко научным исследованием и лишь для выявления полиплоидии при анализе количества ДНК в предопухолевых и опухолевых процессах назначается врачом-патологоанатомом после проведенных обычных гистологических и цитологических методик.


Цитогенетические методы исследования


2Е5001-2Е5012 Цитогенетические методы исследования


Назначение методов. Предназначены для выявления численных или структурных нарушений хромосомного набора как причины патологического состояния организма.

Показания к использованию.
  • Подозрение на хромосомную болезнь по фенотипическим признакам (изменение формы и размеров черепа, лица и его пропорций, аномалии конечностей, кожи, гениталий и т.д.)
  • Множественные врождённые пороки развития (МВПР)
  • Задержка умственного и физического развития
  • Задержка и нарушение полового развития (первичная аменорея, гинекомастия и т.д.)
  • Нарушение репродуктивной функции неясного генеза у мужчин и женщин (мертворождения и рано умершие дети, 2 и более спонтанных аборта в ранних сроках беременности, рождение детей с множественными врождёнными пороками развития (МВПР), замершая беременность в анамнезе)
  • Мужская и женская стерильность (при исключённой гинекологической и андрологической патологии)
  • Наличие в семье предыдущего ребёнка с хромосомной аномалией
  • Сбалансированная хромосомная перестройка у одного из родителей
  • Выявление биохимических и ультразвуковых маркёров при пренатальном скрининге беременных.
  • Наличие в семье Х-сцепленного заболевания с высоким риском наследования
  • Обследование плода при возрасте беременной старше 39 лет.
  • В онкогематологии - предположение заболевания по клинической симптоматике с целью уточнения диагноза, диф. диагностики, мониторинга эффектов лечения, оценки состояния ремиссии и прогноз течения заболевания.


В зависимости от исследуемой ткани (кровь, ворсины хориона, костный мозг), алгоритмов и целей исследования цитогенетические методы представлены следующими видами:

2Е5001 Исследование кариотипа в биоптатах хориона (пренатально).

Диагностическая ценность метода. При наличии ультразвуковых и биохимических маркёров врождённых пороков развития плода проводится инвазивная процедура аспирации ворсин хориона в первом триместре беременности с цитогенетическим исследованием биологического материала для исключения или подтверждения наличия хромосомных аберраций у плода.


2Е5002 Исследование кариотипа в культуре лимфоцитов.

Диагностическая ценность метода. Проводится для установления или исключения диагноза при подозрении на хромосомную болезнь по фенотипическим признакам; наличии врождённых пороков развития у новорожденных; при задержке умственного, физического и полового развития; при нарушении репродуктивной функции неясного генеза, мужской и женской стерильности (при исключённой гинекологической и андрологической патологии)

2Е5003 Определение пола плода в I триместре беременности (пренатально).

Диагностическая ценность метода. Определение пола плода проводится на ранних сроках (9-10недель), что позволяет прервать нежелательную (например, Х-сцепленные заболевания в анамнезе) беременность с меньшим количеством осложнений для женщины.


2Е5004 Исследование кариотипа плодной крови (пренатально).

Диагностическая ценность метода. Исследование возможно во втором-третьем триместрах беременности и отражает картину состояния числа и структуры хромосом именно плода, т.к. пуповинная кровь является истинно плодной тканью в отличие от ворсин хориона и плаценты.

2Е5005 Исследование кариотипа в культуре костного мозга.

Диагностическая ценность метода. Цитогенетическое исследование костного мозга проводится у пациентов с опухолевыми заболеваниями крови для подтверждения(постановки) диагноза, мониторинга терапии и оценки качества ремиссии.


2Е5006 Молекулярно-цитогенетический метод исследования (FISH).

Диагностическая ценность метода. Позволяет исследовать нормальные и аномальные хромосомы и их число в любых типах клеток, находящихся на разных стадиях клеточного цикла, в том числе и в интерфазе. Это особенно важно при проведении пренатальной диагностики на малом количестве материала и в тех случаях, когда клетки исследуемой ткани трудно поддаются культивированию, например при анализе опухолевых клеток.


2Е5007 Исследование С- гетерохроматиновых регионов хромосом.

Диагностическая ценность метода. При специфической обработке хромосомных препаратов в некоторых парах хромосом выявляются крупные блоки околоцентромерного гетерохроматина. Известно, что увеличенные и уменьшенные гетерохроматиновые блоки наследуются кодоминантно и сегрегируют в семье. Такие семьи и отдельные её члены составляют группы риска, состоящие из детей с задержкой психомоторного развития, множественными врождёнными пороками и/или микроаномалиями развития, а также супружеских пар с нарушением репродуктивной функции (спонтанные аборты, бесплодие, рождение детей с врождёнными аномалиями и умственной отсталостью).


2Е5008 Количественное определение миксоплоидий.

Диагностическая ценность метода. При наличии неясной клинической картины и подозрении на существование клонов клеток с разной хромосомной конституцией (миксоплоидов) для исключения или подтверждения диагноза и определения соответствующей тактики ведения пациента требуется исследование большого числа метафазных пластинок (100-200 вместо стандартных 11-17). Большое значение это исследование имеет для девочек с нарушениями полового развития, у которых наличие даже минимального количества клеток, содержащих Y-хромосому, исключает заместительную терапию без оперативного удаления гонад.


2Е5009 Цитогенетическая диагностика анемии Фанкони.

Диагностическая ценность метода. Fanconi anaemia (FA) является редким рецессивным заболеванием, характеризующимся недостаточностью костного мозга, различными соматическими аномалиями и чувствительностью к опухолям. Она характеризуется также хромосомной нестабильностью и гиперчувствительностью к crosslinking агентам и является генетически гетерогенным заболеванием.

Диагностика основана на выявлении в крови нарушения механизмов репарации ДНК в присутствии алкилирующих агентов (митомицин-С и диепоксибутадиен). Уровень аберраций сравнивается с контрольными образцами крови здорового человека, содержащими аналогичные химические вещества, и без них.


2Е5010 Исследование кариотипа при микроделеционных синдромах.

Диагностическая ценность метода. Развитие клинической картины микроделеционных синдромов связано с повреждением критических районов хромосом разной локализации. С помощью обычного исследования хромосомного состава выявить эти повреждения невозможно, необходимы специальные цитогенетические методы. При подозрении на такие синдромы как Прадера-Вилли, Ангельмана, Видемана-Беквита, Ди Джорджи, Лангера-Гидеона и т.д. необходим высокоразрешающий бэндинг, для чего проводится соответствующая пробоподготовка с синхронизацией культуры метатрексатом и увеличением времени культивирования до 96 часов.


2Е5011 Определение филадельфийской (Ph) хромосомы (костный мозг, кровь).

Диагностическая ценность метода. Качественное и количественное определение Ph-хромосомы как основного маркера острого и хронического лимфо- и миелолейкозов у детей и взрослых позволяет мониторировать ответ на терапию и оценивать качество ремиссии, проводится неоднократно за время лечения и после него.


2Е5012 Прямой метод исследования кариотипа костного мозга.

Диагностическая ценность метода. При необходимости в срочном установлении диагноза и для определения тактики лечения тяжёлых больных получение прямых препаратов позволяет провести диагностику и дать быстрый ответ в день забора материала.

Клиническая интерпретация результатов исследования. Результаты исследования рассматриваются как дополнительные диагностически значимые факты в комплексе с данными других видов исследований.

Форма предоставления результатов исследования. Текстовая, с описанием кариотипа согласно международной системе для цитогенетической номенклатуры человека или “ISCN (1995)”.