Ветеринарно санитарная экспертиза экспортного мяса монголии и установление его видовой принадлежности на основе ДНК диагностики 06.
| Вид материала | Автореферат |
- Ветеринарно-санитарная экспертиза мяса птицы и профилактика пищевых сальмонеллезов, 463.35kb.
- Программа вступительных испытаний в магистратуру по направлению 111900 «Ветеринарно-санитарная, 300.73kb.
- Темы рефератов для поступления в аспирантуру по научной специальности 06. 02. 05 ветеринарная, 7.32kb.
- Приказ № Факультет биотехнологии и ветеринарной медицины Закрепить дисциплины ооп подготовки, 149.71kb.
- Ветеринарно-санитарная экспертиза и оценка продуктов убоя якутских лошадей при афлатоксикозе, 350.28kb.
- Правила ветеринарного осмотра убойных животных, 918.04kb.
- Декан факультета доцент, 1509.81kb.
- Учебное пособие москва 2002, 2601.58kb.
- Программа вступительных испытаний в магистратуру по направлению 110500 «Ветеринарно-санитарная, 328.03kb.
- Волков Александр Трифонович Ветеринарно-санитарная экспертиза продуктов убоя свиней, 421.78kb.
Для генодиагностики, идентификации мяса и установление последовательности нуклеотидов применяли методы молекулярной биологии как ПЦР, ПЦР-ПДРФ, мультиплекс-ПЦР.
Экстракция дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК). Берут 1 г сырого мяса, хорошо его измельчают для выделения ДНК далее проводили по методом фенолфталейн хлорформа.
ПЦР. Берут около 800 нг темплайт ДНК, 25 мкл 10хРСR буфера, 2 мкл dNTP, 2.5 мкл MgCl2, по 2 мкл от каждого праймера, 0.5 мкл Таq ДНК полимеразы. Все составные части смешивают. Циклы полимеразной цепной реакции устанавливают по следующим этапам: предварительный нагрев при температуре 95oС 15 мин., денатурация при температуре 94oС в течение 1 мин., связывание праймеров при температуре 55oС в течение 1 мин., удлинение при температуре 72oС 30 минут, окончательное удлинение при температуре 72oС 7 мин. Всего 35 циклов. Продукт полимеразной цепной реакции опускают на 1% агарозу, окрашивают этидум бромидом и выявляют пятна ДНК.
ПЦР-ПДРФ. Проведение исследований по установлению полимеразной цепной реакцией и полиморфизма по длине отрезанных фрагментов (PCR-RELP): Проводили действие энзимом на продукт ампликаций полимеразной цепной реакцией 12S рРНК гена по каждому виду животных. При этом берут из каждого ампликона по 1 мкг и воздействуют 10 единиц мкл ферментами AluI, HinfI, DdeI (Roche Diagnostics, Mannheim, Германия) при температуре 37oС в течение 1 час. Продукт реакции после его продвижения по 4% агарозе и по 12% ПААГ, окращивали этидиумбромидом. Размер разорванных фрагментов установили методом сравнения стандартным маркером ДНК. Последовательность ДНК, полученной амплификацием из проб анализировали с помощью аппарата ABI 3100. Genetyх (Токио, Япония) с использованием компьютерной программы. Размер фрагментов, соответствующих отдельному виду установливали методом Локаль Саузерн.
Установление последовательности нуклеотидов. После отделения продукта полимеразной цепной реакцией гена МС1R на 1.5% агарозе получен гель содержаюшии пятна ДНК, использован комплекс для очистки (GENECLEAN II kit MP biomedicals, Solon, Ohio, США) и очищен продукт МС1R гена от гелия.
Очищенная ДНК гена МС1R посажена на р GEMT еаsy вектор (Promega, Madison, WI, США, включена в бактерии Escherichia coli JM109 и получены плазмиды. Для проверки включения МС1R в плазмиды использован энзим NotI. Для очищения плазмид, содержащих гены МС1R используют очистительный комплекс (QIAGEN, Maryland, США). Для установления последовательности ДНК использованы PGEM-т easy плазмид Т7 и специфический праймер 3Рb. С помощью автоматических машин АВ1ОR1SM 3100 нами установлена последовательность нуклеиновых кислот (Applied Biosystems, Foster, США). Для установления последовательности гена МС1R нами проведен сравнительный поиск по Benson и др., 2002 и для отличия отличия от аналогов МС1R поиск по BLAST (Altschul и др., 1997). Последовательность превращения основ гена МС1R в аминокислоты установлена нами с использованием компьютерных программ: в частьности программы MacVector (Oxford molecular, Madison, США) и программы Genetyx (Genetyx, Toкио, Япония).
3.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Итоги исследований по изучению производства мяса,его
потребностей для населения Монголии и возможности экспорта
Производство. Сельскохозяйственное производство (23 % ВВП), особенно продукции животноводства, является существенной частью экономики Монголии. В 2009г. сектор животноводства производил 21% ВВП и 12,5% продукции экспорта. Большинство этих продуктов - производство мяса.
В конце 2010г. общее поголовье скота составило 31,8 млн. голов, что меньше на 12,1 млн. чем в 2009 году, что больше на 41% по сравнению с 1985 г., когда поголовье скота было самым низким за последние 30 лет (рис. 1).
Рис. 1. Динамика поголовья скота в Монголии (млн. голов)
По сравнению с 1989 г. процент крупного рогатого скота и лошадей сократился на 3,3 и 2 раза соответственно по сравнению с 2010 г. и возросло поголовье овец и коз.
В мире в среднем потребление мяса на душу населения составляет 41,8 кг / год, в развитых странах - 80,7 кг, в развивающихся странах - 31,8 кг и 97,6 кг / год в нашей стране,что больше на 9,9% рекомендованной ВОЗ нормы (рис. 3).
Рис. 2. Динамика производства мяса в Монголии (млн. тонн)
Рис. 3. Потребление мяса на душу населения (кг / год)
Потребность населения Монголии в мясе и мясных продуктах в 2007 г. составила 188,2 тыс.тонн, в 2008 г.- 223,1 тыс.тонн, в 2009 г. -264,4 тыс. тонн. Доля говядины составляет 21,2%, баранины - 32,8%, конины - 15,1%, козлятины - 28,5%, верблюжатины - 2,1% . Промышленная переработка (колбасы, консервы и др.) производимого мяса составляет около 10% от общего производства.Таким образом, Монголия полностью обеспечивает себя мясом, а избытки экспортирует в другие страны.
Экспорт. Монголия имеет ряд соглашений по экспорту и импорту мяса и сотрудничество в области ветеринарной медицины с такими странами как Россия, Казахстан, Япония, Республика Корея, ОАЭ, Саудовская Аравия и Иран. Более 90% мяса на экспорт было поставлено в Россию.
В 2010 г. общий объем говядины и конины, которые были экспортированы в Россию, составил 3800 и 8900 тонн соответственно. В Иран было экспортировано 1560 тонн баранины,в Китай - 1000 тонн конины, во Вьетнам - 4000 тонн козлятины.Всего на экспорт поставлено 19260 тонн мяса, что на 7,8% большее, чем в 2009 г. Для сравнения в 1980-х гг. мы ежегодно экспортировали более 30 тыс.тонн мяса.За последние 20 лет экспорт мяса снизился на 59%. Однако, существует тенденция увеличения его в последние 3 года ( рис. 4).
Рис. 4.Динамика экспорта мяса (тыс. тонн)
Ресурсы экспорта. На основе рассчитанных прогнозов поголовья сельскохозяйственных животных и выхода мяса с одной головы динамика валового производства мяса имеет тенденцию стабильного роста (таб.3).
Таблица 3
Прогноз валового производства мяса (тыс. тонн в убойном весе)
| Годы | Верблю-жатина | Конина | Говядина | Баранина | Козлятина | ИТОГО |
| 2011 | 3.5 | 16.9 | 34.9 | 77.1 | 53.4 | 185.8 |
| 2012 | 2.8 | 16.4 | 31.4 | 74.3 | 56.0 | 180.8 |
| 2013 | 2.8 | 21.5 | 32.9 | 80.5 | 67.5 | 205.1 |
| 2014 | 3.1 | 30.3 | 38.4 | 93.6 | 86.7 | 252.2 |
| 2015 | 3.8 | 40.6 | 46.4 | 110.6 | 111.2 | 312.6 |
| 2016 | 4.5 | 49.6 | 55.0 | 126.5 | 135.5 | 371.1 |
| 2017 | 5.0 | 53.9 | 60.9 | 135.3 | 151.6 | 406.6 |
| 2018 | 5.0 | 50.7 | 61.1 | 132.1 | 152.1 | 401.0 |
| 2019 | 4.6 | 40.7 | 54.5 | 117.3 | 136.4 | 353.5 |
| 2020 | 3.8 | 28.1 | 43.9 | 97.3 | 113.3 | 286.3 |
Таблица 4
Прогноз численности населения, внутренней потребности в мясе и экспортный потенциал
| Годы | Численность населения, тыс.чел | Внутренная потребность в мясе, тыс.тонн в убойном весе | Экспортная возможность, тыс.тонн в убойном весе |
| 2011 | 2751.2 | 198.1 | 12.3 |
| 2012 | 2784.9 | 200.5 | 19.7 |
| 2013 | 2819.3 | 203.0 | 12.1 |
| 2014 | 2854.5 | 205.5 | 46.7 |
| 2015 | 2890.4 | 208.1 | 104.5 |
| 2016 | 2927.0 | 210.7 | 160.4 |
| 2017 | 2964.3 | 213.4 | 193.2 |
| 2018 | 3002.5 | 216.2 | 184.8 |
| 2019 | 3041.4 | 219.0 | 134.5 |
| 2020 | 3081.2 | 221.8 | 64.5 |
В 2006-2009 гг. фактический экспорт мяса в убойном весе составил 10.9-19.0 тыс. тонн, при возможности около 200 тыс.тонн.
В 2014-2020 гг. экспорт мяса Монголии может составить 47-193 тыс.тонн в убойном весе.
Монголия экспортирует мясные баночные консервы в Россию, в Корею и в Японию.Их общий обьём составил: 349.8 тонн - в 2007 г., 139.3 тонн - в 2008 г., 539.8 тонн - в 2009 г.
В 2009 г. экспортированы мясо, мясные продукты и тонкие кишки на сумму 22.4 млн. американских долларов, что составлят всего лишь 1.1% общего количества экспорта.
Импорт мяса Монголии составляет свинина и свиное сало. В 2008 г. в Монголию было поставлено 15,9 тонн свинины и 119,6 тонн сала, в 2009 г – 16,3 тонны свинины и 97,9 тонны сала, в 2010 г. - 12,0 тонн свинины и 72,3 тонны сала.
3.2. Производственные мощности предприятий по убою скота и обработке мяса
Государственной контрольной инспекцией Монголии зарегистрировано 35 предприятий, мощность которых за одну смену составляет: убой крупных животных - 5752 гол. и 20030 гол. мелких животных. В морозильных камерах этих предприятий можно одновременно заморозить 1072.4 тонн мяса, сохранить - 30237 тонн мяса (таблица 5).
Хотя мясокомбинаты работают сезонно в зависимости от природных и географических особенностей Монголии, 28% из них имеют регулярные операции по производству мяса, колбас и других продуктов. Более чем 100 инженеров -технологов, ветеринарных специалистов и более чем 1000 рабочих работают на этих предприятиях в настоящее время. По аттестации 2010 г. 62,8% предприятий аттестованы. В настоящее время 54% из числа аттестованных имеют лицензии на экспорт мяса (табл 5).
Таблица 5
Данные мощностей промышленных предприятий по обработке мяса
| № | Предприятия | Количество | Мощность | Кадровые ресурсы | | |||||
| | | | Мощность в сутки | Замора-живание, Тонн | Хранение, тонн | Рабочие | Технологи | Ветеринар-ные врачи | | |
| | | | Всего | Крупный скот | Мелкий скот | | | | | |
| 1 | Всего | 35 | 25782 | 5752 | 20030 | 1072.4 | 30237 | 1247 | 31 | 57 |
| 2 | Аккредитованные | 22 | 19110 | 4260 | 14650 | 748.8 | 24887 | 1247 | 27 | 57 |
| 3 | Неаккредитованные | 8 | 3112 | 932 | 2180 | 145.2 | 4460 | | | |
| 4 | Аттестованы в 2010 г. | 4 | 3720 | 520 | 3200 | 175 | 1090 | | | |
| 5 | Не аттестованы | 1 | 40 | 40 | | 3.4 | 200 | | 1 | |
| 6 | Имеющие лицензию на экспорт | 19 | 18987 | 4060 | 14050 | 708.8 | 24087 | 1240 | 26 | 55 |
Несмотря на имеющие мощности, 10% от общего объёма мяса за последние 10 лет произведено на мясоперерабатывающих предприятиях (рис. 5).
Рис. 5. Мясо, заготовленное промышленным способом (тыс.тонн)
Производственные мощности мясокомбинатов Монголии постоянно растут. Однако на сегодня загруженность их составляют около 20%.
3.3 Ветеринарно-санитарная экспертиза экспортного мяса Монголии
Сравнительные данные химического состава и питательной ценности мяса некоторых монгольских животных средней упитанности представлены в табл 6.
Таблица 6
Химический состав и пищевая ценность конины, говядины и баранины ( по данным разных авторов)
| Вид мяса | Химический состав (%) | Питательность (ккал) | Авторы | | ||
| | Влаги | Жир | Белок | Зола | | |
| Конина | 63,8 | 15,3 | 20.3 | 1.2 | 2267,3 | Т.Сайполда 1995,г. |
| Говядина | 75,47 | 2.5 | 20,35 | 1,16 | 2117,1 | Р.Дашдэлгэр 1991,г. Б.Минжигдорж 1996,г. Д.Бадгаа, Л.Бадамханд 2000 г., Б.Энхтуяа 1995 г. |
| Баранина | 75,76 | 2,78 | 18,82 | 1,11 | 2334,6 | |
| Говядина | 72,6 | 4,3 | 21,5 | 1,23 | 2232.9 | Ц.Амарсайхан С.Лхагвасүрэн 2009 г. |
| Баранина | 76,4 | 6,1 | 19,77 | 1.9 | 2432,2 | |
В табл. 7 представлены органолептические показатели мяса говядины и баранины монгольских животных. Из данных этой таблицы видно,что органолептические показатели мяса животных не отличаются от таковых, характеризующих мясо как свежее и подлежащее реализации на пищевые цели без ограничений.
Таблица 7
Органолептические показатели говядины и баранины
| № п/п | Показатели | Характеристика | |
| | | Баранина | Говядина |
| 1. | Внешний вид | Корочка подсыхания бледно-розового цвета, сухая | Корочка подсыхания бледно-розового цвета, сухая |
| 2. | Консистенция | Плотная, упругая, ямка быстро выравнивается | Плотная, упругая, ямка быстро выравнивается |
| 3. | Цвет | Бледно-розовый | Бледно-розовый |
| 4. | Упитанность /степень развития мыщц,конфигурация туш/ | Хорошее развитие мускулатуры, остистые отростки позвонков слегка выступают, слой подкожного жира с просветами и сплошным поливом | Хорошее развитие мускулатуры, остистые отростки позвонков слегка выступают, слой подкожного жира с просветами и сплошным поливом |
| 5. | Запах | Специфический, соответствует виду мяса,свойственный свежему мяса | Специфическии,соответствует виду мяса,свойственный свежему мяса |
| 6. | Поверхность разреза мышц | Слегка влажная, не оставляет влажного пятна на фильтровальной бумаге,цвет- от красного до красно-вишневого | Слегка влажная, не оставляет влажного пятна на фильтровальной бумаге,цвет-от светло-красного до тёмно-красного |
| 7. | Состояние жира | Жир белого или желтоватого цвета, плотный. Консистенция твердая, при раздавливании- крошится | Жир желтого или желтоватого цвета, плотный.Консистенция твердая,при раздавливании- крошится |
| 8. | Состояние сухожилий | Упругие,плотные,поверхность суставов гладкая,блестящая | Упругие,плотные,поверхность суставов гладкая, блестящая |
| 9. | Проба варкой | Бульон прозрачный и ароматный,на поверхности крупные блёстки жира | Бульон прозрачный и ароматный,на поверхности крупные блёстки жира |
| 10. | Вкус (варёное и жареное мясо) | Ароматный, приятный,специфический | Ароматный, приятный, специфический |
Физико-химические показатели говядины. Созревшее мясо крупного рогатого скота, поставляемого на экспорт имеет следуюшие показатели: рH=5.80±0,04; реакция на пероксидазу – отрицательная; реакция с нейтральным формалином – отрицательная; реакция с 5%-ным раствором сернокислой медью в бульоне – отрицательная; проба на аммиак – отрицательная; в мазках-отпечатках – микрофлора отсутствует или единичные микробные клетки.
Физико-химические показатели баранины. Созревшее мясо овец монгольской породы, поставляемого на экспорт имеет следуюшие показатели: рH=5.83±0.10; реакция на пероксидазу – отрицательная; реакция с 5%-ным раствором сернокислой медью в бульоне – отрицательная; проба на аммиак – отрицательная; в мазках-отпечатках – микрофлора отсутствует или единичные микробные клетки.
Микробиологические показатели говядины и баранины. При исследовании мазков-отпечатков из глубоких слоёв мышц, печени и лимфатических узлов мы не всегда обнаруживали микробные тела. Иногда в поле зрения были единичные (5-7 клеток) кокки или палочки. При посеве на питательные среды (агар,среда Эндо) из глубоких слоев мышц, печени и лимфатических узлов (поверхностный шейный,подвздошный округлый) микрофлора не была выделена.