На правах рукописи

Вид материалаАвтореферат

Содержание


Научный консультант
Ведущее учреждение
Общая характеристика работы
Цель исследования
Задачи исследования
Научная новизна
Практическая значимость
Положения, выносимые на защиту
Апробация работы
Внедрение результатов исследований
Публикации по теме диссертации
Структура и объем диссертации
Содержание работы
Экспериментальный раздел
Клинический раздел
Методы исследования
Статистический анализ
Результаты исследования и их обсуждение
Состояние трансмиттеров и электрокожного сопротивления в точках акупунктуры при токсическом повреждении поджелудочной железы в э
Состояние и динамика трансмиттеров в структурах гипоталамуса крыс на фоне однократного и курсового воздействия иглоукалыванием
...
Полное содержание
Подобный материал:
  1   2   3   4


На правах рукописи


СПАСОВА

Наталия Владимировна


РАЗРАБОТКА И НАУЧНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ВОССТАНОВИТЕЛЬНОЙ КОРРЕКЦИИ ВЕГЕТАТИВНЫХ ДИСФУНКЦИЙ У СТУДЕНТОВ МЕТОДОМ КОМПЬЮТЕРНОЙ РЕФЛЕКСОТЕРАПИИ


14.00.51 – восстановительная медицина, лечебная физкультура и спортивная медицина, курортология и физиотерапия


АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук


Москва – 2007

Работа выполнена на кафедре восстановительной медицины ГОУ ВПО Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова


Научный консультант

Академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор РАЗУМОВ Александр Николаевич

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор АГАСАРОВ Лев Георгиевич

Доктор медицинских наук, профессор ВАСИЛЕНКО Алексей Михайлович

Доктор медицинских наук ПОЛЯКОВА Алла Георгиевна

Ведущее учреждение:

Московский областной научно-исследовательский клинический институт

им. М.Ф.Владимирского


Защита состоится «___» ____________ 200__ г. в ____ часов на заседании диссертационного совета Д 208.060.01 при ФГУ Российский научный центр Восстановительной медицины и курортологии (121099, Москва, ул. Новый Арбат, 32).


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГУ Российский научный центр Восстановительной медицины и курортологии (121099, Москва, ул. Новый Арбат, 32).


Автореферат разослан «___»___________ 2007г.


Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор Фролков В.К.


ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность исследования

Формирование государственной политики в сфере охраны здоровья здоровых и практически здоровых лиц является одной из приоритетных задач отечественной системы здравоохранения (Разумов А.Н., 2006).

Наиболее полно данную проблему охватывает новое направление – восстановительная медицина, ориентированная, прежде всего, на восстановление утраченных в результате трудовой деятельности или болезни резервных возможностей человека (Пономаренко В.А., 2001). В настоящее время одной из важнейших проблем, стоящих перед восстановительной медициной, является разработка мероприятий, направленных на сохранение здоровья студентов и преподавателей (Казин Э.М., Блинова Н.Г., Литвинова Н.А., 2000).

Вегетативные расстройства являются одной из актуальных проблем современной восстановительной медицины (Разумов А.Н., Пономаренко В.А., Пискунов В.А., 1996) и встречаются у 50 – 80% взрослого трудоспособного населения России (Яхина Ф.Ф., 1992; Вейн А.М., 2003). Состояние вегетативной дисфункции (ВД) требует особого внимания клиницистов, т.к. значительно ухудшает качество жизни пациентов, снижает работоспособность, понижает функцию внимания и усвоения новых навыков, снижает способность студентов к обучению.

Приходиться констатировать тот факт, что в процессе обучения в ВУЗе здоровье студентов подвергается целому ряду негативных влияний, что вызывает напряжение и срыв гомеостаза и адаптационных механизмов (Лисицин Ю.П., 1986; Казначеев В.П., 1993; Чумаков Б.Н., 2004), а так же развитие десинхронозов – нарушения внутрисистемных и межсистемных механизмов регуляции функций целостного организма (Кривощеков С.Г., Матюхин В.А., Разумов А.Н. и др., 2003; Агаджанян Н.А., Петров В.И., Радыш И.В. и др., 2005). Следствием этого является уменьшение резервных возможностей организма и формирование у студентов ВД.

Из-за системного характера проявлений, присущих ВД, появляется необходимость оказывать медикаментозное воздействие не только на надсегментарные отделы нервной системы, но и на различные органы и системы организма, что приводит к возникновению проблемы полипрогмазии. Учитывая молодой возраст и учебную деятельность студентов, особую актуальность приобретают методы немедикаментозного лечения ВД (Котенко К.В., 2005; Миненко И.А., 2005; Стрелкова Н.И., 2005).

Из всех существующих средств восстановительной медицины для диагностики и последующей коррекции ВД наиболее подходит современная рефлексотерапия (РТ), клиническая эффективность которой при данных нарушениях продемонстрирована рядом авторов (Василенко А.М., 1989; Радзиевский С.А., 1997; Агасаров Л.Г., 2001; Катин А.Я., Катина М.А., 2001; Ананьин Н.Н., Клеменков С.В., Левицкий Е.Ф. и др., 2002; Гойденко В.С., Комарова И.В., 2003; Li Z. еt al., 1992, 2005).

В то же время необходимо отметить, что до настоящего времени многие механизмы действия РТ при ВД остаются недостаточно изученными. В литературе отсутствует единая универсальная методология восстановительной коррекции ВД, которая бы обеспечивала индивидуальный подбор точек акупунктуры (ТА) и методов воздействия на эти точки у пациентов с ВД и позволила бы гарантированно добиваться специалистам восстановительной медицины положительного клинико-лабораторного эффекта при восстановительной коррекции различных вариантов ВД, а так же обладала бы высокой пропускной способностью для максимального охвата такого организованного контингента, как студенты. В связи с этим особую актуальность приобретает разработка новых перспективных методов диагностики и коррекции ВД, основанных на передовых информационных медицинских технологиях.

Учитывая всё вышеизложенное, целью нашего исследования явилось:


Цель исследования

Экспериментально-клиническое обоснование и разработка восстановительной коррекции вегетативных дисфункций у студентов методами рефлексотерапии с использованием современных компьютерных технологий.


Задачи исследования
  1. Изучить в остром эксперименте на животных наличие и распределение экстранейрональных трансмиттеров вегетативной нервной системы (ВНС) (катехоламинов, серотонина, гистамина) в тканях в области ТА в норме; изучить в длительном эксперименте на животных при создании модели поражения органа (поджелудочной железы) динамику содержания экстранейрональных трансмиттеров в ТА, связанных с поджелудочной железой, и их участие в формировании электропроводных свойств ТА.
  2. Изучить в эксперименте на животных динамику содержания трансмиттеров ВНС в структурах гипоталамуса в ответ на однократную процедуру иглоукалывания и курсовое акупунктурное воздействие.
  3. Проследить динамику уровня трансмиттеров ВНС в форменных элементах периферической крови студентов с вегетативными дисфункциями, а также динамику восстановления у них электропроводных свойств электроаномальных ТА в течение 10 сеансов РТ и на фоне стандартного лечения вегетативных дисфункций.
  4. Изучить частоту и характер отклонений вегетативного статуса (вегетативного тонуса, обеспечения жизнедеятельности, реактивности) при различных клинических вариантах вегетативных дисфункций (сердечно-сосудистом, желудочно-кишечном, респираторном), а так же разработать дифференцированную акупунктурную диагностику вегетативных дисфункций на основе изучения особенностей показателей акупунктурных диагностических тестов (Акабане, Накатани, аурикулодиагностики, теста Фолля) при симпатико- и ваготонии, а так же при различных клинических вариантах вегетативных дисфункций.
  5. Разработать принципы дифференцированной РТ вегетативных дисфункций с использованием компьютерной технологии.
  6. Провести анализ клинических результатов использования компьютерной рефлексотерапии (КРТ) при восстановительной коррекции различных вариантов вегетативных дисфункций. Оценить отдаленные (через 9-12 месяцев) результаты и медико-социальный эффект применения КРТ при восстановительной коррекции вегетативных дисфункций у студентов.


Научная новизна

Впервые установлена зависимость величины электропроводности ТА от содержанием в них экстранейрональных трансмиттеров ВНС (катехоламинов, серотонина, гистамина).

Впервые описан механизм формирования электроаномальных ТА при повреждении органа, связанного с данными точками, реализующийся за счет изменения уровней тканевых трансмиттеров в области ТА.

Установлена взаимосвязь ТА с органами, реализующаяся с участием трансмиттерных систем. Впервые отмечено, что при проведении иглоукалывания воздействие на орган-мишень осуществляется посредством изменения трансмиттерного обеспечения в периферической крови и в органе, связанном с данной ТА.

Установлено, что воздействие на ТА приводит к циклическим изменениям уровней трансмиттеров (катехоламинов, серотонина, гистамина) в форменных элементах периферической крови, органах-мишенях с достоверным повышением уровней трансмиттеров к 7 дню РТ (в 3-4 раза от исходного уровня) и последующим достоверным снижением до исходного уровня или ниже к 10 дню РТ.

Впервые установлено участие трансмиттерной системы (катехоламинов, серотонина, гистамина) тканей, органов и форменных элементов периферической крови в 7- дневном биоритме.

Впервые описан ранее неизвестный механизм адаптационного действия РТ, связанный с восстановлением и усилением 7-ми дневного биоритма.

Впервые описан возможный механизм синхронизирующего воздействия на организм человека изменяющегося межпланетного электромагнитного поля через ТА.

Впервые показано участие в возникновении вегетативных дисфункций нарушения 7-дневного биоритма изменения уровней трансмиттеров ВНС.

Предложен немедикаментозный метод восстановительной коррекции вегетативных дисфункций, основанный на выявлении и коррекции электроаномальных точек акупунктурной системы, а так же на усилении и синхронизации естественного 7-дневного биоритма.

Впервые описаны особенности составляющих вегетативного статуса при различных клинических вариантах вегетативных дисфункций, так же особенности состояния акупунктурной системы при различных нарушениях вегетативного статуса и различных клинических вариантах вегетативных дисфункций. Продемонстрирована возможность РТ избирательно и направленно изменять активность трофотропных и эрготропных отделов ВНС, обеспечивая восстановление гомеостатического равновесия у пациентов с вегетативными расстройствами. В рамках одного исследования оценены эффекты РТ с учетом различных клинических вариантов вегетативных дисфункций (сердечно-сосудистого, желудочно-кишечного, респираторного). При этом отмечено более четкое положительное влияние РТ при желудочно-кишечной вегетативной дисфункции, несколько менее выраженное при сердечно-сосудистом варианте и далее – при респираторном. Продемонстрировано, что при вегетативных дисфункциях положительное влияние РТ реализуется за счет коррекции электроаномальности ТА, влияния на трансмиттерные системы и восстановления естественного 7-дневного биоритма.


Практическая значимость

Результаты исследований указывают на целесообразность использования РТ в восстановительной коррекции различных клинических вариантов вегетативных дисфункций у студентов.

Показано, что у пациентов с вегетативными дисфункциями РТ должна рассматриваться в качестве эффективного средства восстановительной коррекции и профилактики формирования стойкой патологии: ее применение способно нормализовывать нарушения вегетативного статуса, гормонально-метаболические показатели (уровень кортизола, мочевой кислоты в крови), снижать уровень циркулирующих иммунных комплексов, антител к тиреоглобулину, нормализовывать состояние электролитного баланса в крови, повышать уровень железа сыворотки крови, повышать интенсивность инфракрасного излучения нижних конечностей, нормализовывать кровенаполнение и тонус мозговых сосудов, улучшать психоэмоциональное состояние студентов с вегетативными дисфункциями.

Результаты работы демонстрируют целесообразность сочетанного использования различных акупунктурных диагностических методик (симптомно-синдромологической, метамерно-сегментарной, Акабане, Накатани, аурикулодиагностики, Фолля) для составления индивидуальной рецептурной прописи ТА при восстановительной коррекции вегетативных дисфункций.

Показано, что воздействие на электроаномальные ТА с дифференцированным выбором вида воздействия (лазеропунктура, электропунктура, укалывание акупунктурной иглой) оказывает у пациентов с желудочно-кишечной и респираторной вегетативной дисфункции более выраженный клинико-лабораторный эффект, чем при использовании стандартного лечения, и сопоставимый со стандартной терапией эффект при сердечно-сосудистом варианте вегетативной дисфункции.

Данные исследования демонстрируют влияние РТ на восстановление естественного 7- дневного биоритма организма человека, возможно, связанного со сменой полярности межпланетного электромагнитного поля.


Положения, выносимые на защиту:

1. В области ТА присутствуют экстранейрональные трансмиттеры ВНС (катехоламины, серотонин, гистамин), имеющие определенные особенности распределения по слоям кожи. Их уровни обусловлены состоянием органа, связанного с данными ТА. Электрокожное сопротивление (ЭКС) в ТА определяется локализацией и уровнем тканевых трансмиттеров в ТА.

2. Иглоукалывание в ТА вызывает однонаправленные ритмические колебания уровней трансмиттеров ВНС (катехоламинов, серотонина, гистамина) в медиобазальном поле гипоталамуса экспериментальных животных.

3. В ответ на проведение курсового воздействия рефлексотерапией у студентов с вегетативными дисфункциями возникают ритмические колебания уровней экстранейрональных трансмиттеров в форменных элементах крови, в отличие от отсутствия таковых при проведении стандартной терапии, КРТ, проводимая студентам с вегетативными дисфункциями, восстанавливает электропроводные свойства ТА.

4. Каждый вариант ВД характеризуется наличием определенных особенностей составляющих вегетативного статуса (вегетативных тонуса, обеспечения жизнедеятельности и реактивности). Ваготония и симпатикотония характеризуются определенными отклонениями биофизических параметров ТА и меридианов. Многообразие клинических проявлений ВД обуславливает неоднородность топических и электрофизиологических характеристик ТА, связанных с соответствующими органами и системами при вегетативных дисфункциях. Акупунктурные методы диагностики позволяют установить для каждого клинического варианта вегетативной дисфункции определенный паттерн измененных меридианов и акупунктурных точек, что обосновывает применение компьютерных технологий для оптимизации акупунктурной диагностики вегетативных дисфункций и их клинических форм.

5. Предложенные принципы дифференцированной и индивидуализированной РТ вегетативных дисфункций и их клинических форм, основанные на использовании компьютерных технологий (обработка данных, преемственность, органическая связь диагностики и контроля за эффективностью восстановительной коррекции, оперативная обработка информации в пределах одного целостного лечебно-диагностического процесса) и ориентированные на восстановление электропроводных свойств ТА, обеспечивают более выраженный восстановительный эффект по сравнению со стандартным лечением вегетативных дисфункций желудочно-кишечного тракта и респираторной системы и сопоставимый со стандартной терапией эффект при сердечно-сосудистом варианте вегетативной дисфункции. Внедрение комплексов автоматизированной КРТ в работу Центров восстановительного лечения ВУЗов обеспечивает существенный медико-социальный эффект при коррекции вегетативных дисфункций у студентов.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на заседании кафедры восстановительной медицины ФДПОП ГОУ ВПО Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова совместно с Учебно-методическим Советом по восстановительной медицине ФГУ Российский научный Центр Восстановительной медицины и курортологии, 2007, на заседании кафедры восстановительной медицины ГОУ Чувашский государственный университет, 2007, на заседании кафедры анатомии и физиологии человека и животных ГОУ ВПО Московский педагогический государственный университет, 2007, представлены на Научно- практической конференции «Немедикаментозные методы лечения», Чебоксары, 2001, на Международном Конгрессе «Здравница –2001», Москва, 2001, Международном Конгрессе «Здравница –2002», Москва, 2002, на Международном Конгрессе «Здравница –2004», Санкт-Петербург, 2004, на Международном Конгрессе «Здравница –2005», Москва , 2005, на Международном конгрессе «Восстановительная медицина и реабилитация –2005», Москва, 2005, на заседании Президиума Международной академии наук информации, информационных процессов и технологий, 2006, на Первом Всероссийском Съезде врвчей восстановительной медицины, Москва, 2007.

Внедрение результатов исследований

Основные положения диссертации внедрены в клиническую работу Центра Здоровья ГОУ Чувашский государственный университет, ГУЗ Республиканский Центр восстановительной медицины и реабилитации, г.Чебоксары, ГУЗ «Центр восстановительной медицины и реабилитации №1» Ростовской области, г. Ростов-на-Дону, Клиники п. Юдино ФГУ РНЦВМиК Росздрава, а так же включены в лекционный курс на кафедрах восстановительной медицины ФДПОП ГОУ ВПО Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова, восстановительной медицины ГОУ Чувашский государственный университет, анатомии и физиологии человека и животных ГОУ ВПО Московский педагогический государственный университет.


Публикации по теме диссертации

По теме диссертации опубликовано 29 печатных работ, в том числе 7 статей в журналах, рекомендованных ВАК, 1 монография, 2 учебно-методических пособия. Получен Патент №2119325 от 27.09.1998 на изобретение «Лечебно-диагностический комплекс рефлексотерапии».


Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 271 стр. машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы (Глава 1), материалов и методов исследования (Глава 2), результатов собственного исследования (Главы 3–7), общего заключения, выводов, практических рекомендаций и библиографии, включающей 402 источника (306 отечественных, 96 иностранных публикаций). Диссертация иллюстрирована 49 таблицами и 21 рисунком.

Основной базой проведения исследования были кафедра восстановительной медицины ФДПОП ГОУ ВПО Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова, Центр Здоровья ГОУ ВПО Чувашский государственный университет, кафедра гистологии цитологии и эмбриологии ГОУ ВПО Чувашский государственный университет, кафедра анатомии и физиологии человека и животных ГОУ ВПО Московский педагогический государственный университет, Клиника п. Юдино ФГУ РНЦВМиК Росздрава.

Выражаю глубокую благодарность за помощь в проведении экспериментального раздела исследований заведующей кафедры гистологии цитологии и эмбриологии Чувашского государственного университета д.б.н., профессору Л.А.Любовцевой, к.м.н. Е.А.Гурьяновой.


СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ


Материалы и методы исследования

По своему характеру работа является экспериментально-клиническим исследованием.


Экспериментальный раздел

Эксперименты проведены на 310 белых беспородных крысах обоего пола. Отбор, обсервацию животных и количество проведенных экспериментов осуществляли согласно рекомендациям И.М. Трахтенберга с соавт.(1991). Первая серия исследований была проведена на 30 интактных крысах, у которых были осуществлены гистоморфологические исследования ТА: TR20, F 13, Е36 и участков кожи вне ТА с определением уровня тканевых трансмиттеров (катехоламинов, серотонина, гистамина) во всех слоях кожи. Во второй серии экспериментов исследования проведены на 60 белых беспородных крысах. Животным первой группы (сравнения), состоящей из 30 крыс, производилось внутрибрюшинное введение оливкового масла в количестве 0,5 мл для имитации фармакологического воздействия. Вторая группа (30 крыс) подвергалась воздействию аллоксаном для создания в организме экспериментального токсического поражения поджелудочной железы. Раствор 5% аллоксана в дозе 17 мг/100 г вводили внутрибрюшинно. В третьей серии экспериментов было использовано 40 крыс. Проводилось изучение однократной процедуры иглоукалывания на уровень трансмиттеров в медиобазальном поле (МБП) и заднем поле (ЗП) гипоталамуса. 20-ти из них была проведена акупунктура в точку TR20, находящуюся в верхней трети ушной костной выемки и связанную с гипоталамусом. У 10 крыс забор материала производили через 10 мин. после извлечения иглы. У 10-ти крыс – через 20 мин. после извлечения иглы. Группу сравнения составили 20 крыс, у которых иглы вводились вне ТА. Забор материала производился в тех же временных промежутках. От каждой крысы получали 3–5 препаратов гипоталамуса. Изучение и измерение каждой структуры проведено в 10 полях зрения. Всего исследовалось до 50 структур в каждом препарате. Все действия проводили под глубоким эфирным наркозом. В 4-ой серии экспериментов на 180 крысах проводилось изучение влияния курсового иглоукалывания в точку TR20 на уровень трансмиттеров в МБП гипоталамуса. 90 животных подвергались курсовому иглоукалыванию в течение 10 дней, забор тканей гипоталамуса производился через день у 10 крыс. Сравнением служили 90 крыс, которым введение игл производилось вне ТА.

Люминесцентное выявление катехоламинов (КА) и серотонина (С) в тканях осуществляли с помощью метода B. Falck`а и N. Hillarp`а, в модификации Е.М. Крохиной. Люминесцентное выявление гистамина (Г) в тканях осуществляли с помощью метода S. Cross`а, S. Ewen`а, F. Rost`а. Для качественной и количественной характеристики тучных клеток (ТК) срезы кожи обрабатывали полихромным толуидиновым синим по A. Unn`а.


Клинический раздел

Обследовано и пролечено 535 студентов, имеющих вегетативные дисфункции. Все обследованные были разделены на 2 репрезентативные группы: основную (415 студентов) и сравнения (120 студентов).

Основная группа (ОГ). Студенты ОГ проходили обследование и восстановительную коррекцию по предложенной нами методике компьютерной рефлексотерапии. Средний возраст студентов составил 22,7±0,5 года (от 16 до 32 лет). Средняя длительность ВД составляла 3,4±0,2 года (от 1 года до 6 лет). В ОГ было 322 (77,6%) женщины и 93 (22,4%) мужчины. У 158 (38%)студентов была зафиксирована ВД с преимущественным поражением сердечно-сосудистой системы (ССС), у 141 (34%) – с вовлечением в процесс желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), у 71 (17%) – дыхательной системы (ДС) и у 45 (11%) – смешанная форма ВД.

Группа сравнения (ГС). Студенты ГС получали лечение ВД стандартными методами, с использованием медикаментозной терапии (бета-блокаторы, препараты бензодиазепинового ряда, антидепрессанты, ноотропы, сосудистые препараты, спазмолитики, ферментативные препараты и др.), физиобальнеолечения (хвойно-жемчужные, йодо-бромные ванны, магнитотерапия, СМТ- терапия, электросон и др.) (Парцирняк С.А, Юнацкевич П.И., 2002; Вейн А.М., 2003; Стрелкова Н.И., 2005). Обследование и динамическое наблюдение за ГС осуществлялось аналогично ОГ. Средний возраст пациентов составил 24,5±0,6 лет (от 16 до 33 лет), давность ВД – 2,6±0,3 года, от 6 мес. до 6 лет. Среди ГС было 88 (73,3%) женщин и 32 (26,7%) мужчины. У 47 (39,2%) студентов была зафиксирована ВД с преимущественным поражением ССС, у 39 (32,5%) с вовлечением в процесс ЖКТ, у 21 (17,5%) – ДС и у 13 (10,8%) – смешанная форма ВД.

Для постановки диагноза ВД и оценки типа нарушений (дисфункция ССС, дисфункция ЖКТ или ДС) использовались диагностические критерии, разработанные А.М. Вейном, А.Д. Соловьевой, О.А. Колосовой (1981), А.М. Вейном, Г.Р. Табеевой, Н.Н. Яхно (1986), А.М. Вейном с соавт. (2003).


Методы исследования

Всем студентам проводили общеклиническое обследование, включающее изучение анамнеза, физическое, лабораторное и инструментальное обследование, консультации невролога, при необходимости – окулиста и других специалистов. Принципы исследования ВНС основывались на клинико-экспериментальном подходе, сущность которого составляли функционально-динамические исследования вегетативного тонуса (ВТ), вегетативной реактивности (ВР), и вегетативного обеспечения деятельности (ВОД) (Вейн А.М., 2003). Психодиагностика проводилась с использованием тестов СМОЛ, Спилбергера STAI, Теста Межличностных Отношений (ТМО), Шкалы Депрессии Бека (Зайцев В.П., 1981, 2004; Вассерман Л.И., Щелкова О.Ю., 2004; Прохоров В.О., 2004).

Лабораторное обследование включало: общий анализ крови с оценкой адаптационных реакций организма (Гаркави Л.Х., Квакина Е.Б., Кузьменко Т.С., 1998); метаболическое тестирование с определением натощаковой гликемии методом цветной реакции с ортотолуидиновым реактивом, мочевой кислоты (МК) – методом прямой спектрофотометрии и липидного спектра крови с использованием реактивов «Ольвекс диагностикум»; определение гормонов щитовидной железы – трийодтиронина, тироксина, тиреотропного гормона, антител к тиреоглобулину (АТ к ТГ) методом твердофазного иммуноферментного анализа; кортизола крови – методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов «Стероид ИФА-кортизол 01»; уровня в крови иммуноглобулинов А, М, G – методом одномерной радиальной иммунодиффузии, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови – с использованием реагентов «Микроанализ ЦИК»; железа и общей железосвязывающей способности сыворотки (ОЖСС), электролитов крови (калия, натрия, кальция, магния) – колориметрическим методом с использованием реактивов «Ольвекс диагностикум»; определение уровня в периферической крови пациентов КА, С, Г гистохимическими методами, идентичными вышеописанным методам определения КА, С, Г в тканях.

Инструментальное обследование включало: электрокардиографическое исследование стандартным методом в 12-ти отведениях в покое; реоэнцефалографию (РЭГ), реовазографию (РВГ) сосудов нижних конечностей на аппаратно-программной диагностической системе «Валента»; тепловизионное исследование нижних конечностей на тепловизионном комплексе «Радуга – 5».

Дополнительное обследование: общий анализ мочи, биохимические анализы крови с определением билирубина и его фракций, трансаминаз, щелочной фосфатазы, С-реактивного белка, креатинина, общего белка и его фракций, протромбинового индекса, иммуноглобулинов Е, антистрептолизина О, офтальмоскопия глазного дна, допплеровское исследование сосудов головы, верхних и нижних конечностей, суточное мониторирование электрокардиографии по Холтеру с исследованием вариабельности сердечного ритма, велоэргометрия, с оценкой толерантности к физической нагрузке, исследование функции внешнего дыхания, электроэнцефалография, рентгенологическое обследование органов грудной клетки и брюшной полости, ультразвуковое исследование сердца, аорты, органов брюшной полости и малого таза, фиброгастродуоденоскопия и др.

Специальное рефлексодиагностическое обследование включало: иридодиагностику, аурикулодиагностику, модифицированные тесты Акабане и Накатани, измерение электрических параметров ТА, диагностику по методу Фолля, которые проводились на аппаратно-программном комплексе «У-син».

Эффективность проводимого лечения учитывали на основании анализа субъективных и объективных показателей.


Статистический анализ

Статистическую обработку результатов исследования осуществляли в соответствии с принципами доказательной медицины и рекомендациями ведущих ученых (Славин М.Б., 1989; Гланц С., 1999; Зайцев В.М., Лифляндский В.Г., Маринкин В.И., 2006; Реброва О.Ю., 2006). В работе использованы методы параметрического и непараметрического анализов.

Определяли и учитывали традиционные показатели описательной статистики: число наблюдений (n), среднее арифметическое (М), стандартное отклонение (σ), стандартная ошибка среднего арифметического (m), минимальное и максимальное значение изучаемого признака, относительные величины (%) и их ошибки. При сравнении двух выборок применяли t-критерий Стьюдента, если имело место, так называемое, неправильное распределение, то оценивали критерии Манна - Уитни или Вилкоксона. При сравнительном анализе относительных показателей (в %) использовали t-критерий для относительных величин, точный критерий Фишера, а также критерий «кси-квадрат» (χ2). Различия между выборками считали статистически значимыми при р<0,05. Для количественной характеристики связи между показателями вычисляли коэффициент линейной (по Пирсону) и ранговой (по Спирмену) корреляции – r. Значения r, принимали как статистически значимые при их р<0,05. Для более детального суждения о динамике исследуемых показателей за конкретный период наблюдения (в процессе лечения) вычисляли интегративные показатели их динамики (ипд) по формуле, предложенной И.В. Мадяновым с соавт.(1995):



где А и В - значения конечного и исходного результатов соответственно.

Статистический анализ работы выполнен на персональном компьютере с использованием разработанных для этого класса задач статистических программ Microsoft Ехсе1 и Statistica for Windows 6.0.


РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ


Локализация и уровень трансмиттеров в ТА у интактных крыс

В результате проведения экспериментальных исследований на крысах с использованием гистохимических методов было установлено, что КА, С, Г присутствовали во всех слоях кожи (эпидермис, сосочковый и сетчатый слои, гиподерма) и тучных клетках. Однако, распределение их было неравномерным, как по слоям кожи в области ТА, так и в зависимости от локализации точки на теле животного. Установлено, что максимальное количество КА, С, Г содержится в норме в эпидермисе и в сетчатом слое кожи. Так в эпидермисе в области точки TR20 уровень КА составлял 7,2±0,8 у.е., а в сосочковом слое 3,6±0,6 у.е. и в гиподерме 1,3±0,6 у.е, р<0,05 для обоих сравнений, уровень С в эпидермисе был 11,4±1,2 у.е., в сравнении с 5,7±0,6 у.е. и 2,7±0,5 у.е. соответственно, р<0,05 для обоих сравнений, уровень Г в эпидермисе составлял 14,5±1,2 у.е. в сравнении с 10,5±1,3 у.е. и 9,0±2,1 у.е. соответственно, р<0,05 для обоих сравнений. В сосочковом слое в F13 и Е36 уровень Г был статистически достоверно ниже, чем в эпидермисе: 12,3±1,4 у.е. против 19,1±1,2 у.е. и 7,5±1,1 у.е. против 12,8±1,2 у.е. соответственно, p<0,05 для обоих сравнений. В сетчатом слое содержалось максимальное количество Г: в области точки TR20 — 20,2±2,4 у.е. в сравнении с сосочковым слоем – 10,5±1,3 у.е., и с 9,0±2,1 у.е. в гиподерме, p<0,05 для обоих сравнений, в Е36 — 16,8±2,2 у.е., в сравнении с сосочковым слоем – 7,5±1,1 у.е., и с 8,0±1,8 у.е. в гиподерме, p<0,05 для обоих сравнений. Также в области TR20 в сетчатом слое содержание КА и С было достоверно выше, чем в гиподерме: 4,6±0,9 у.е. в сравнении с 1,3±0,6 у.е., и 7,3±0,8 у.е. в сравнении с 2,7±0,5 у.е., соответственно, p<0,05 для обоих сравнений. Это свидетельствует о большой биологической значимости именно эпидермиса и сетчатого слоя кожи. Более глубоко залегающий слой – гиподерма также содержит трансмиттеры, но в значительно меньшей концентрации. Так Г она содержала в 2 раза меньше, чем в сетчатом слое во всех изучаемых ТА. Содержание КА и С по сравнению с сетчатым слоем снижено в 1,5-2 раза. Уровень Г, КА и С в гиподерме в области ТА статистически не отличался от уровня их содержания в гиподерме вне ТА.

Были установлены отличия содержания трансмиттеров в ТА и вне ее: так уровни КА и С в эпидермисе в точке Е36 статистически достоверно превышали таковые вне ТА (2,4±0,3 у.е. и 5,4±0,2 у.е. против 1,8±0,3 у.е. и 3,3±0,5 у.е., р<0,05 для обоих сравнений), уровень Г в эпидермисе TR20 так же достоверно отличался от контроля вне ТА: 14,5±1,2 у.е. против 10,9±1,5 у.е., р<0,05.

Так же нами было установлено, что ТА статистически достоверно отличаются по трансмиттерному составу между собой: в эпидермисе точки F13 уровень Г статистически достоверно отличался от такового в области точек TR20 и Е36 (19,1±1,2 у.е. в сравнении с 14,5±1,2 у.е. и 12,8±1,2 у.е. соответственно, р<0,05 для обоих сравнений), а в эпидермисе точки TR20 уровни КА (7,2±0,8 у.е.) и С (11,4±1,2 у.е.) статистически значимо отличались от соответствующих уровней в F13 (1,8±0,6 у.е. и 3,3±0,6 у.е., р<0,05 для обоих сравнений) и в Е36 (2,4±0,3 у.е. и 5,4±0,2 у.е., р<0,05 для обоих сравнений).

По данным ряда авторов в реализации первичного механизма акупунктурного эффекта участвуют ТК (Вержбицкая Н.И., Кромин А.А., 1981; Яблонцев Н.Н., 1983; Deng Y. at al., 1996). Нами установлено, что ТК статистически чаще выявляются в области ТА, чем вне их. Так в эпидермисе точки TR20 в поле зрения в среднем определялось 16,5±2,1 ТК, а вне точки – 10,6±1,1 ТК, р<0,05. Уровни КА, С в ТК практически во всех случаях превышали их уровни в других слоях кожи, за исключением эпидермиса, в котором имелась тенденция к более высокому содержанию данных трансмиттеров, в отличие от уровня Г, который в ТК имел тенденцию к превышению такового во всех других слоях кожи.