Российская академия наук

Вид материала

Тезисы

Содержание Коррекция нарушений антиоксидантного статуса у больных ишемической болезнью сердца, получающих статины Гематологические эффекты производного малеимида на фоне оксидативного стресса, вызванного введением хлорида кобальта Микрокапсулирование бад Особенности окислительной модификации белков эритроцитов при плоскоклеточном раке и аденокарциноме легкого Целью работы Материалы и методы. Влияние антиоксиданта «тиотриазолин» на формирование митохондриальной дисфункции в условиях моделирования оксидативного стресса Стресс как биологическая модель для оценки Исследование антиоксидантной активности

Подобный материал:

• Основание Петербургской академии наук, 49.85kb.
• Спонсоры конференции: Фармацевтическая фирма «Санофи-Авентис», 74.5kb.
• Ш. Н. Хазиев (Институт государства и права ран) Российская академия наук и судебная, 297.05kb.
• Научный журнал «Вопросы филологии» Оргкомитет: Сопредседатели, 53.54kb.
• Научный журнал "Вопросы филологии" Оргкомитет: Сопредседатели, 47.73kb.
• Котов Сергей Викторович доктор медицинских наук, профессор Савин Алексей Алексеевич, 547.92kb.
• Н. д кондратьева Международный фонд Н. д кондратьева и Российская академия естественных, 13.13kb.
• Российская академия наук отделение общественных наук ран, 74.85kb.
• Высочество Князь Монако Альберт II и другие. Сдоклад, 38.69kb.
• Ипээ ран www sevin ru, 22.27kb.

КОРРЕКЦИЯ НАРУШЕНИЙ АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА, ПОЛУЧАЮЩИХ СТАТИНЫ


Белая О.Л., Бондар К.Ю., Артамошина Н.Е., Байдер Л.М.,

Куроптева З.В., Наглер Л.Г.


Московский государственный медико-стоматологический Университет, Москва, ул.Делегатская, д.20/1, olgabelaya@km.ru,

Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН, Москва, ул. Косыгина, д.4, zvk@sky.chph. ras.ru


Цель: изучение изменений антиоксидантного статуса больных с постинфарктным кардиосклерозом (ПИКС) под влиянием симвастатина (вазилипа) и путей коррекции выявленных нарушений антиоксидантных ферментов с помощью препаратов с антиоксидантным действием.

Материалы и методы: в исследование включены 132 больных ИБС (ПИКС) с лислипидемией Па и Пб типа по классификации ВОЗ (средний возраст 58 лет) и 20 условно здоровых человек (средний возраст 47 лет), разделенных на 2 группы. В 1 группу включено 112 больных, в течение 3-6 мес. получавших симвастатин в суточной дозе 20 мг на фоне традиционной кардиальной терапии, во 2 группу – 20 больных ИБС, получавших только традиционную кардиальную терапию. Общепринятыми методами всем больным проводилась ЭКГ, холтеровское мониторирование, в плазме крови определяли содержание липидов, продуктов их перекисного окисления (ПОЛ), методом электронного парамагнитного резонанса активность антиоксидантной системы церулоплазмин/трансферрин (АОС ЦП/ТФ).

Результаты: После 3 мес. лечения выявлено, что у 67 (60%) больных 1 группы снижение атерогенных липидов сопровождалось снижением содержания диеновых конъюгатов (ДК) на 33% и продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП) на 26 % и ростом активности АОС ЦП/ТФ на 10% (p<0,001). У 45 больных (40%) произошла интенсификация процессов ПОЛ в среднем на 30% (p<0,001), активность АОС ЦП/ТФ снизилась на 15% (p<0,001), что сопровождалось повышением трансаминаз в 2 раза. После лечения появились отсутствовавшие ранее прямые корреляционные связи между уровнем трансаминаз и продуктов ПОЛ (r=0,56, p<0,001). В течение 3 последующих мес 17 больных (средний возраст 59 лет) с нарушением процессов ПОЛ на фоне лечения симвастатином получали 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат (мексидол) в дозе 375 мг/сут (подгруппа А), 16 больных (средний возраст 59 лет) - убихинон Q₁₀ (кудесан) в дозе 30мг/сут (подгруппа Б). 12 больных (средний возраст 58 лет), не получавших антиоксидантные препараты, включено в подгруппу сравнения (подгруппа В). К 6-му месяцу лечения целевые уровни ОХС отмечены в подгруппе А у 76% больных, в подгруппе Б у 69%, в подгруппе В у 42%, ХС ЛПНП соответственно у 47, 27 и 25% больных ИБС. Содержание продуктов ПОЛ в подгруппах А и Б достигло уровня здоровых лиц в отличие от подгруппы В, где произошла интенсификация процессов окисления. Лечение 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинатом и убихиноном Q₁₀ в течение 3 мес привело к достоверному повышению активности АОС ЦП/ТФ соответственно на 42 и 36%, уменьшению количества эпизодов ишемии и длительности депрессии ST в сутки в среднем на 40%, в подгруппе В – на 20%, нормализации печеночных трансаминаз.

Выводы: Симвастатин в дозе 20 мг/сут, применяемый в течение 3 мес в комплексной кардиальной терапии, обладает антиоксидантной и антиперекисной активностью у 60% обследованных больных ИБС. Комбинированная терапия, включающая симвастатин и препараты 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридина сукцинат и убихинон Q₁₀ у больных ИБС в течение 3 мес наряду с коррекцией антиоксидантного статуса способствует достижению целевых уровней атерогенных липидов, достоверному уменьшению количества эпизодов и длительности ишемии миокарда.


ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ПРОИЗВОДНОГО МАЛЕИМИДА НА ФОНЕ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА, ВЫЗВАННОГО ВВЕДЕНИЕМ ХЛОРИДА КОБАЛЬТА


Белинская И.В., Рыбальченко В.К., Островская Г.В., Яблонская С.В., Филинская Е.М.


Киевский национальный университет имени Тараса Шевченко, Киев-601, ул.Владимирская, 64, e-mail: byelinska@univ.kiev.ua


Ингибитор ряда протеинкиназ (EGFR, FGFR, YES, SRC, ZAP70, Syk, PDK1 и др.), производное малеимида (1-(4­Cl-бензил)-3-Cl-4-(СF₃-фениламино)-1Н-пиррол-2,5-дион - МИ), подавляет пролиферацию опухолевых клеток, наиболее активно клетки аденокарциномы толстого кишечника человека (SW-620). Указанные протеинкиназы играют важную роль в пролиферации, дифференцировании и функционировании клеток крови, поэтому использование данного ингибитора может оказывать воздействие на систему крови. Ранее нами показано, что на фоне кобальт-индуцированного окислительного стресса МИ в значительной степени восстанавливает состояние антиоксидантной системы печени и клеток кишечника, снижает нефротоксическое влияние оксидативного стресса у крыс. Целью работы было исследование влияния МИ (1/100 ЛД₅₀ 5 мг/кг per os, масляный раствор) на клеточный состав крови на фоне оксидативного стресса, вызванного введением хлорида кобальта (II) (15 мг/кг, внутрибрюшинно), после 10 дней введения.

Хлорид кобальта приводит к существенным изменениям в эритроидной линии гемопоэза: увеличивается концентрация гемоглобина, количество эритроцитов, гематокрит, средний объем эритроцитов, содержание гемоглобина в эритроцитах (р<0,05). Количество тромбоцитов и лейкоцитов не изменяется. Анализ распределения лейкоцитов свидетельствует об уменьшении относительного содержания нейтрофиль­ных гранулоцитов и увеличении лимфоцитов (р<0,05), что компенсируется количеством лейкоцитов. Введение МИ вызывает увеличение концентрации гемоглобина, количества эритроцитов и гематокрита, уменьшение количества лейкоцитов приводит к снижению абсолютного содержания моноцитов и лимфоцитов (р<0,05), и тенденции к снижению нейтрофильных и эозинофильных гранулоцитов (р<0,1). Введение МИ на фоне хлорида кобальта приводит к более существенному увеличению количества эритроцитов (р<0,05). По сравнению с контрольной групой остаются увеличенными концентрация гемоглобина, количество эритроцитов, гематокрит, средний объем эритроцитов, содержание гемоглобина в эритроцитах. Уменьшение количества лейкоцитов приводит к снижению абсолютного содержания нейтрофильных и эозинофильных гранулоцитов, лимфоцитов, моноцитов (р<0,05).

Таким образом, МИ на фоне СоCl₂-индуцированного оксидативного стресса приводит к большему увеличению количества эритроцитов, что свидетельствует об синергизме этих соединений. Уменьшение количества лейкоцитов в крови вероятно связано с ингибированием МИ протеинкиназ и влиянием на пролиферацию и дифференцирование ранних гемопоэтических предшественников в костном мозке, что проявляется уменьшением количества субпопуляций лейкоцитов. Исходя из выше изложенного, при использовании МИ как противоопухолевого препарата необходимо учитывать его действие на клетки крови, эритроциты и лейкоциты, и контролировать эти показатели.


МИКРОКАПСУЛИРОВАНИЕ БАД


Белкин Ю.Д., Литвишко В.С., Москалев Е.В.¹


РЭА им. Г.В.Плеханова, Москва, Стремянный пер. д.28

¹ООО “Микрокапсулирование”, Санкт-Петербург, LVS-1@mail.ru


В настоящее время самостоятельно или в составе функциональных продуктов питания находят применение инкапсулированные формы биологически активных добавок. Большинство биодобавок применяют в микрокапсулированном виде с целью увеличения продолжительности действия с одновременным снижением концентрации в организме. Микрокапсулированные формы лучше хранить и удобнее дозировать. БАД заключают в оболочки для обеспечения высвобождения в нужном участке желудочно-кишечного тракта.

Известно получение твердых водонерастворимых БАД микрокапсулированием в расп-лавы путем диспергирования гидрофобного пленкообразующего материала в водной среде. Возможность капсулирования водорастворимых веществ в мягких условиях без гидролизующего воздействия среды, без изменения рН и без повышения температуры реализуется в методе с упариванием легколетучего растворителя. Для БАД представляют интерес щелочерастворимые полимеры, обеспечивающие сохранность микрокапсул в кислых средах содержимого желудочного сока и избирательное высвобождение капсулированного вещества в щелочной среде кишечника.

По методу отверждения расплавов при охлаждении дисперсии можно микрокапсу-лировать водорастворимые вещества. Получаемые таким образом микрокапсулы устойчивы в водных средах и могут высвобождать содержимое при расплавлении или механическом разрушении оболочек. В качестве материала оболочки могут применяться природные воска, гидрированные природные масла и животные жиры.

Высушиванием при распылении дисперсии капсулируемого вещества в растворе полимера получают большое количество пищевых и душистых веществ.

Приведенные методы (химические и физико-химические) рекомендуется использовать для получения образцов капсул с целью исследования их эксплуатационных показателей. Сами же методы малотехнологичны, являются периодическими, основаны на использовании растворов и дисперсий. Помимо основного аппарата, в технологиях используется много вспомогательного оборудования (воздуходувки, калорифер, фильтры, насосы) и ручного труда (подготовка растворов, контроль качества и мытье оборудования).

Для массового, крупнотоннажного, непрерывного производства более приемлемы современные физические методы, основанные на формировании оболочек с помощью механических, “не мокрых” способов.

В ООО ”Микрокапсулирование” совместно с РЭА им. Г.В.Плеханова разработана технология получения капсул из расплава. Производство капсулированных добавок, основано на распылении различных веществ (твердых, жидких, пастообразных) в восках. По этому способу не требуется растворять компоненты в воде или других растворителях, с последующим удалением жидкости нагреванием и сушкой, а также использовать дорогостоящее оборудование. Выбор температурного режима материала и скорость вращения турбины определяют размер капсул, который может варьироваться от 50 до 1000 микрон.

Совместно со Всеросийским научно-исследовательским институтом рыбного хозяйства и океанографии проведены работы по получению свободно-сыпучих гранул из гидролизата мидий, который представляет собой водный раствор аминокислот, низкомолекулярных пептидов, полиненасыщенных жирных кислот и микроэлементов в солевом растворе.


Особенности окислительной модификации белков эритроцитов при плоскоклеточном раке и аденокарциноме легкого


Белоногов Р.Н., Титова Н.М., Савченко А.А.


ГОУ ВПО Красноярский государственный медицинский университет

ФГОУ ВПО Сибирский федеральный университет

НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН

г. Красноярск; e-mail: ro-x@yandex.ru


Рак легкого занимает ведущие позиции в структуре онкологической заболеваемости. Как правило, местные проявления опухоли выражены достаточно слабо, что сильно затрудняет раннюю диагностику и борьбу с этим заболеванием. Большое значение имеют вопросы о том, какие системные изменения в организме вызывает возникающая опухоль. Многие биологические особенности опухоли в значительной мере зависят от ее гистологической структуры. Развитие рака легкого довольно часто сопровождается гематологическими нарушениями, которые, как правило, прямо, или опосредовано связаны с состоянием эритроцитов. Однако патогенез данных нарушений остается неизученным до конца. Развитие окислительного стресса играет немаловажную роль в происхождении многих из них. Белки эритроцитов, подвергшиеся окислительной деструкции, имеют длительный период распада, что делает их перспективным маркером интенсивности свободно- радикального окисления.

Целью работы определить содержание показателей редокс-зависимой модификации белков в эритроцитах больных плоскоклеточным раком и аденокарциномой легкого.

Материалы и методы. На базе Красноярского краевого онкологического диспансера обследовано 62 больных с плоскоклеточным раком (ПКРЛ) и 32 – с аденокарциномой легкого (АКЛ). Средний возраст больных 53,4±2,4 года. В качестве контрольной группы были обследованы 35 здоровых доноров аналогичного возраста. В эритроцитах проводилось определение показателей окислительной модификации белков – альдегидных и кетонных форм карбонильных производных белков (КПБ), молекул средней массы, тиоловых групп белков.

Результаты. Уровень альдегидных форм КПБ при ПКРЛ увеличивается на 64%, при АКЛ – на 88%. Уровень кетонных форм КПБ в эритроцитах при ПКРЛ увеличивается на 71%, при АКЛ – на 520%. Уровень молекул средней массы в эритроцитах при ПКРЛ увеличился на 12%, при АКЛ – на 22%. Содержание SH-групп белков в эритроцитах, в зависимости от гистологического варианта рака легкого по сравнению с контролем, выше при ПКРЛ на 33% и при АКЛ на 26%.

На основании полученных данных можно судить об интенсификации свободно- радикального окисления в организме при раке легкого. Выраженность данных процессов в значительной мере зависит от гистологической структуры опухоли. Увеличение образования активных форм кислорода вызывает усиление окисления биологических молекул и может приводить к повреждению клеток и тканей, что играет важную роль в патогенезе рака легкого.


ВЛИЯНИЕ АНТИОКСИДАНТА «ТИОТРИАЗОЛИН» НА ФОРМИРОВАНИЕ МИТОХОНДРИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ В УСЛОВИЯХ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОКСИДАТИВНОГО СТРЕССА IN VITRO


Беленичев И.Ф., Бухтиярова Н.В, Мазур И.А., Папвлов С.В.

Запорожский государственный медицинский университет


69035 Запорожье, пр. Маяковского, 26 olybelenicheva@mail.ru


Целью исследования - оценить влияние оригинального антиоксидантного препарата «Тиотриазолин»на развитее митохондриальной дисфункции нейронов коры головного мозга крыс при моделировании оксидативного стресса in vitro

Материалы и методы. В суспензии митохондрий , выделенных из головного мозга крыс , предварительно вносили антиоксидант тиотриазолин (10–5 М ). Оксидативный стресс моделировали инкубацией с 500 мкМ DNIC (железо динитрозольный комплекс) Определяли содержание АТФ, интермедиатов цикла Кребса, активность митохондриальной креатинфосфокиназы (мх-КФК), скорость открытия митохондриальной поры, содержание bcl-2-протеина.

Результаты исследования. Предварительное внесение в суспезию митохондрий тиотриазолина приводило к торможению открытия поры митохондрий выделенных из нейронов головного мозга, увеличивало продукцию АТФ за счет интесификации реакций в цикле Кребса на трикарбоновом и дикарбоновом участках (повышение уровня изоцитрата и малата), нормализовало транспорт энергии (активность мх-КФК) и повышало уровень антиапоптического bcl-2-протеина в митохондриях по сравнению с контрольными пробами.

Вывод. Формирование митохондриальной дисфункции имеет, свободнорадикальные механизмы, что обосновывает прменение антиоксидантов


СТРЕСС КАК БИОЛОГИЧЕСКАЯ МОДЕЛЬ ДЛЯ ОЦЕНКИ

АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСА IN VIVO


Богданов Г.Н.


Институт проблем химической физики РАН,

142432, М.О., г. Черноголовка, пр-т Академика Семенова, д. 1,

mdv@icp.ac.ru


В современной фармакологии антиоксиданты образуют самостоятельный разряд, включающий несколько классов и групп лекарственных препаратов. Это, вслед за продолжающимся в мире бумом повсеместного использования антиоксидантов, свидетельствует о полном признании научных основ и молекулярных механизмов терапевтического действия ингибиторов свободнорадикальных реакций и их направленного применения для коррекции патогенетических процессов, протекающих с участием свободных радикалов. К числу таких процессов относятся лучевая болезнь, атеросклероз, стресс, онкологические, нейродегенеративные и другие заболевания.

В этом свете нельзя не отметить, что арсенал имеющихся методов оценки антиоксидантного статуса организма содержит только методы in vitro или ex vivo, тогда как проблема его оценки in vivo остается нерешенной из-за отсутствия адекватных биологических объектов исследования.

В качестве такого объекта впервые предлагается использовать экспериментальных животных в состоянии индуцированного стресса.

Общий адаптационный синдром (триада Селье, стресс) как системное патологическое состояние организма характеризуется на клеточном уровне свободнорадикальными реакциями цепного пероксидного окисления липидов (ПОЛ) в рамках концепции окислительного стресса, приводящего к явлениям мембранной патологии. Ведущая роль в патогенезе стресса принадлежит «активным формам кислорода» являющимся свободнорадикальлными инермедиатами восстановления молекулярного кислорода. К их числу относится супероксидный анион-радикал, и липо- или гидропероксидные радикалы, которым отводится роль первичных медиаторов в индукции стресса и основных посредников отдельных стадий патогенеза в треаде Селье. Регуляция ПОЛ направлена, главным образом, на их дезактивацию, т.е. на торможение ключевых элементарных реакций окислительного стресса.

При этом поддрержание окислительного гомеостаза обеспечивает система антиоксидантного статуса, включающая ферменты антирадикальной защиты и ингибиторы биоантиоксиданты, как предупреждающие, так и замедляющие развитие стресс-реакции.

При индукции стресса плаванием каждое животное помещали в воду и фиксировали время (τ), когда оно начинает тонуть. Это происходит по завершении периодов тревоги и сопротивления, т.е. при наступлении фазы истощения, когда заторможен базовый метаболизм, снижен иммунитет и нарушен антиоксидантный статус организма вследствие дефицита антиоксидантов. В этом состоянии животное забивали и извлекали печень и головной мозг, из которых выделяли митохондрии для последующего определения содержания диеновых конъюгатов (ДК) в липидах митохондриальных мембран, а также активности супероксиддисмутазы (СОД).

Экспериментально установлено, что за фиксированное время (τ) достижения фазы истощения происходит увеличение содержания ДК относительно нормы на 25-40 %, а значит, такое же увеличение интенсивности ПОЛ. Одновременно с этим отмечено снижение активности СОД, удельного содержания двойных связей в липидах мембран, а также активности мембраносвязанных ферментов окислительного дезаминирования биогенных аминов.

В случае предварительного введения водорастворимых или амфифильных антиоксидантов (анфен, фенозан, темпол, мексидол) эти показатели окислительного стресса претерпевали изменения в направлении их нормализации.

Одновременно с этим время (τ) возрастает почти вдвое, что позволяет рассматривать его как параметр антиоксидантной защиты и, стало быть, антиоксидантного статуса организма. Следовательно, по изменению τ можно тестировать in vivo новые биологически активные соединения на их способность проявлять прямое или опосредованное воздействие на антиоксидантный статус in vivo.

На основе корреляционных соотношений, связывающих время τ с отдельными параметрами окислительного стресса, возможно создание универсального критерия оценки состояния антиоксидантного статуса in vivo, такого, как, например, скорость изменения того или иного параметра по достижении фазы истощения при индуцированном стрессе.


Исследование антиоксидантной активности

овощей


Бординова В. П., Макарова Н. М.


ГОУВПО «Самарский государственный технический университет»,

Самара, Россия ,443100, г. Самара, ул. Молодогвардейская, д. 244,

тел. 88463322069, e-mail: white-kitten-63@mail.ru


Последнее десятилетие дало множество фактов, доказывающих, что определенную роль в развитии многих заболеваний играют свободные радикалы. Одним из наиболее негативных является формирование липидной пероксидации. Если свободные радикалы окисляют липиды, происходит образование опасной формы липидного пероксида. Многие ученые связывают ее образование с раком, болезнями сердца, ускоренным старением и иммунным дефицитом. Свободные радикалы - это аномальные молекулы, имеющие непарный электрон на последнем электронном уровне, который делает их крайне нестабильными. В этом состоянии они способны обратимо или необратимо разрушить вещества всех биохимических классов, включая и свободные аминокислоты, липиды и липопротеины, углеводы и молекулы соединительных тканей, отнимая электрон у молекул, и, тем самым, нарушая хрупкий химический баланс организма.

Предотвратить образование свободных радикалов путем объединения свободных электронов в пары может добавление в питание антиоксидантов. Антиоксиданты действуют как ловушки для свободных радикалов. Отдавая электрон свободному радикалу, они останавливают цепную реакцию, действуя как буфер для электронов. Правильная регуляция этого баланса помогает организму расти, вырабатывать энергию, бороться с инфекцией и детоксицировать химические и загрязняющие вещества. Антиоксиданты содержатся в различных растениях, фруктах, плодах и ягодах.

В нашей работе на наличие антиоксидантной активности изучались овощи, произрастающие на территории Самарской области - томат «Перцевидный»; морковь «Каратель»; картофель «Пензенская скороспелка»; баклажан «Фиолетовое чудо F1»; кабачок «Белогор F1»; перец «Кардинал F1» (сиреневый), «Калифорнийское чудо» (зеленый), «Белозерка» (белый), «Подарок Молдовы» (красный), «Желтый бык НК» (желтый); репа, овощные полуфабрикаты – перцевая масса, томатный концентрат, томатный сок и хлебобулочные изделия - хлеб «8 злаков», «Бородинский», «Прибалтийский», «Столичный», «Юбилейный», батон «Отрубной», булка «Городская».

Нами проводилось исследование их химического состава на содержание фенольных веществ и флавоноидов. Также изучалась их антиоксидантная активность с помощью свободного радикала DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl), ингибирование перокисления линолиевой кислоты на системе β-каротин-линолиевая кислота и линолевой кислоты, определялась их восстанавливающая сила.

По полученным данным были выявлены образцы овощей, овощных полуфабрикатов и хлебобулочных изделий с наиболее высокими и низкими антиоксидантными свойствами. Полученные данные позволяют установить зависимость между показателями химического состава образцов: фенолов и флавоноидов и антиокислительной активностью. В результате исследований сделаны выводы и даны рекомендации по использованию исследуемых образцов овощей и овощных полуфабрикатов для производства функциональных хлебобулочных изделий с антиоксидантными свойствами.