Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии

Диагностика респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота и особенности проявления болезни в современных условиях ведения животноводства

Автореферат докторской диссертации по биологии

СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА

Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |

 

СТРОГАНОВА

ИРИНАа ЯКОВЛЕВНА

ДИАГНОСТИКА РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И ОСОБЕННОСТИ ПРОЯВЛЕНИЯ БОЛЕЗНИ В СОВРЕМЕННЫХ УСЛОВИЯХ ВЕДЕНИЯ

ЖИВОТНОВОДСТВА

06.02.02 - ветеринарная микробиология,а вирусология, эпизоотология,а микология са микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора биологических наук

 

 

Новосибирск - 2011

Работа выполнена в ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии и в Институте прикладной биотехнологии и ветеринарной медициныа ФГОУ ВПО Красноярский государственныйа аграрныйа университет

аНаучный консультант:аа аа доктор ветеринарных наук, профессор

а Глотов Александр Гавриловича

Официальные оппоненты:а доктор биологических наук,

старший научный сотрудник

а Семенихин Владимир Иванович,

а

а доктор ветеринарных наук, профессор

Барышников Петр Иванович,

доктор биологических наук, профессор

Забережный Алексей Дмитриевич

Ведущая организация: ГНУ Краснодарский научно-исследовательский а ааветеринарный институт Россельхозакадемии

Защита состоится 29 ноября 2011 г. в л10 часов на заседании диссертационного совета Д.006.045.01. при Государственном научном учреждении Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Россельхозакадемии по адресу: 630501, Новосибирская область, Новосибирский район, п. Краснообск, ГНУ ИЭВСиДВ, а/я 8.

С диссертацией можно ознакомиться в Сибирской научной сельскохозяйственной библиотеке Россельхозакадемии.

Автореферат разослан л___ ________ 2011 г.

 

Ученый секретарь

диссертационного совета Г.М. Стеблева

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. В настоящее время в России возрастает удельный вес хозяйств по производству молока. В некоторые из них осуществляется ввоз высокопродуктивного скота из других стран. Высокая молочная продуктивность коров часто сопровождается нарушением обмена веществ, что приводит, в частности, к активизации различных инфекционных агентов (А.Г. Шахов и соавт., 2000; Ю.Н. Федоров, 2006). Существуют также молочно-товарные фермы, в которых концентрация животных и их продуктивность бывают разными, а ввод новых животных ограничен. Учитывая существование различных по направлению, численности, концентрации и продуктивности животных хозяйств, эпизоотическая ситуация в них по инфекционным болезням может различаться.

Широкое распространение в молочных хозяйствах получили респираторные болезни животных (О.Г. Петрова и соавт., 2002; К.П. Юров и соавт., 2003; Т.И. Глотова, 2006; М.И. Гулюкин и соавт., 2007; J. Kampa et al., 2009; K.A. Woodbine, 2009; J.F. Ridpath, 2010).

Эти болезни, как правило, протекают с участием нескольких возбудителей, синергетическое взаимодействие которых приводит к усилению тяжести инфекционного процесса (Н.Н. Крюкова и соавт., 1984; В.А. Мищенко и соавт., 2000; Н.Ю. Басова, 2002; А.Г. Глотов и соавт., 2008; Н.Р. Будулов, 2009; D.G. Bryson, 2000; K. A. Brogden et al., 2002).

Одним из этиологических агентов данной патологии является респираторно-синцитиальный вирус крупного рогатого скота (РСВ КРС), относящийся к семейству Paramyxoviridae, роду Pneumovirus. Во многих зарубежных странах его относят к числу наиболее важных патогенов молочного скота (L.E. Larsen, 2000; S. Hagglund, 2005; C. Luzzago et al., 2010;а B.W. Brodersen, 2010).

Первые сообщения о РСИ КРС в нашей стране относятся к 1975 году (В.В. Гуненков и соавт., 1975). Изучению болезни и разработке средств и методов диагностики были посвящены работы Г.А. Халенева (1976),

Г.Д. Метревели (1983), Т.М. Кочиш (2004), И.Н. Матвеевой (2008) и других.

Несмотря на относительно высокую степень изученности многих вирусных болезней, в нашей стране данных, касающихся роли этого возбудителя в возникновении респираторных болезней, в том числе в ассоциациях с другими вирусами, недостаточно. Изучение этой инфекции длительное время сдерживалось из-за высокой лабильности вируса и слабой его способности к размножению в культурах клеток, что, в свою очередь препятствовало разработке диагностических препаратов. Поэтому многие вопросы, касающиеся диагностики, особенностей эпизоотической ситуации, возрастной восприимчивости животных к инфицированию вирусом, характераа проявления болезни в молочных хозяйствах в зависимости от их специализации и уровня молочной продуктивности коров остаются открытыми.

Цель и задачи исследований. В связи с этим целью работы являлась разработка эффективных способов серологической и вирусологической диагностики респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота и изучение их роли при комплексной оценке особенностей проявления болезни в современных условиях ведения молочного животноводства, в том числе в аспекте смешанных инфекций, протекающих с участием других вирусов и условно-патогенных бактерий.

Для достижения указанной цели были поставлены задачи:

1. Определить и отработать оптимальные параметры выделения, типирования и культивирования РСВ КРС в различных культурах клеток с целью получения антигена, а также - изготовить и испытать эффективность экспериментальных серий эритроцитарного диагностикума в РНГА для выявления антител к вирусу.

2. Изучить пригодность ОТ-ПЦР для типирования вируса в лабораторных условиях, определить ее значение в диагностике болезни у крупного рогатого скота, выяснении роли вируса в этиологии массовых респираторных болезней, а также выявлении наиболее восприимчивых половозрастных групп животных в молочных хозяйствах различного профиля, с учетом наличия импортного и местного скота.

3. С использованием серологического и молекулярного методов исследований провести комплексный анализ особенностей проявления респираторно-синцитиальной инфекции в современных условиях при различных эпизоотических и хозяйственных ситуациях, в том числе в ассоциации с другими вирусными и бактериальными агентами.

Научная новизна. Выделен штамм вируса К-18, депонированный в коллекции микроорганизмов ФГУ ГНЦ вирусологии и биотехнологииа Вектор Роспотребнадзора под наименованием Штамм вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота К-18, V-406. Подана заявка на получение патента на изобретение РФ № №2010134476 от 17.08.2010 г. Метод первичной изоляции штаммов вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота, штамм вируса Bovine Respiratory Syncitial Virus для изготовления диагностических препаратов.

Новизной обладают данные по изучению чувствительности первично-трипсинизированных и перевиваемых (гомологичных и гетерологичных) линий культур клеток к РСВ КРС. Подобраны и рекомендованы для практического использования наиболее чувствительнные культуры клеток. Определены оптимальные условия культивирования, обеспечивающие максимальное накопление вируса. Показана чувствительность к вирусу новой перевиваемой линии культуры клеток ТЭБ, рекомендованной для его выделения из проб биоматериала от животных.

Отработаны методы ранней индикации, контроля размножения и учета инфекционной активности вируса в чувствительных культурах клеток. В том числе показано преимущество ОТ-ПЦР перед традиционными методиками выявления и титрования вируса: цитопатогенное действие (ЦПД); методы бляшкообразующих единиц (БОЕ) и фокусообразующих единиц (ФОЕ); цитоморфологические исследования и электронная микроскопия. Установлены сроки хранения вируссодержащей суспензии и выделенной РНК вируса при различных температурных режимах. Изучена возможность дальнейшего использования штаммов вируса PC-Б и К-18 для изготовления эритроцитарного диагностикума. Показано, что чувствительность культур клеток к вирусу имеет штаммовую зависимость. Разработан лабораторный регнламент культивирования вируса с целью изнготовления специфического эритроцитарного антигена для серологической диагностики респираторно-синцитиальной инфекции крупнонго рогатого скота, овец и коз в РНГА.

С помощью серологических и молекулярных методов исследований показано широкое распространение РСИ КРС в Российской Федерации, а также в хозяйствах региона Сибири с интенсивным типом ведения молочного животноводства. При помощи ОТ-ПЦР выявлены наиболее восприимчивые к инфицированию вирусом половозрастные группы животных. Выявлены особенности эпизоотической ситуации по РСИ КРС, а также смешанным вирусно-бактериальным болезням в условиях промышленного молочного животноводства Сибири с наличием или отсутствием импортированного скота. Изучена частота проявления болезни в зависимости от наличия сопутствующих вирусных инфекций (инфекционный ринотрахеит, вирусная диарея, аденовирусная инфекция и других), а также от некоторых эпизоотологических и хозяйственных факторов. Впервые показана зависимость частоты инцидентности болезни в крупных молочных хозяйствах от уровня серопозитивности и наличия животных, персистентно инфицированных вирусом ВД-БС КРС. Выявлены и изучены ассоциации вирусов и бактерий, возникающие при вспышках массовых респираторных болезней, протекающих у крупного рогатого скота с участием РСВ КРС. Изучена частота выявления вируса в моноварианте и в ассоциациях с бактериями семейства Pasteurellacceae.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные результаты создают перспективы использования серологического и вирусологического методов диагностики РСИ КРС в производственных условиях с целью объективной комплексной оценки эпизоотической ситуации и для оптимизации противоэпизоотических мероприятий в хозяйствах с интенсивным типом ведения животноводства, в том числе решении вопроса о специфической профилактике болезни.

Кроме того, они расширяют научные знания относительно спектра чувствительных культур клеток к РСВ КРС, биологических свойств и роли вируса в этиологии респираторных болезней крупного рогатого скота на крупных молочных комплексах. Комплекс диагностических методов аисследований может использоваться также при дальнейшем изучении эпизоотической ситуации, патогенеза РСИ КРС и смешанных вирусных и вирусно-бактериальных инфекций, протекающих по синергетическому типу.

Внедрение полученных результатов. Материалы диссертации использованы при разработке научно-методических рекомендаций и положений:

- Респираторно-синцитиальная инфекция крупного рогатого скота, утвержденных подсекцией "Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока" отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 1 от 26 января 2010 г.).

- Вирусные и вирусно-бактериальные респираторные болезни молодняка крупного рогатого скота, утвержденных научно-техническим советом Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Красноярский государственный аграрный университет" (протокол № 2 от 14 декабря 2010 г.).

- Стратегия общих и специальных мероприятий при респираторных болезнях молодняка крупного рогатого скота вирусно-бактериальной природы, утвержденных научно-техническим советом Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Красноярский государственный аграрный университет" (протокол № 2 от 14 декабря 2010 г.).

- Методы молекулярной биологии и их использование в диагностике вирусных болезней крупного рогатого скота, утвержденных подсекцией "Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока" отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 1 от 11 февраля 2011 г.).

- Индикация и идентификация респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота в культурах клеток, утвержденных подсекцией "Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока" отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 1 от 11 февраля 2011 г.).

- Профилактика и лечение вирусных респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота", утвержденных научно-техническим советом Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования "Красноярский государственный аграрный университет" а(протокол № 4а от 20 апреля 2011 г.).

Основные положения диссертационной работы использованы при разработке научно-технической документации на:

1. Тест-систему для серологической диагностики респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота, овец и коз в РНГА (ТУ-10-19-162-91).

2. Тест-систему для выявления вируса респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота методом полимеразной цепной реакции (Свидетельство о Госрегистрации № ПВР-1-8.9/02499).

Апробация работы. Основные положения диссертации были долонжены на: Всесоюзной научно-практической конференции Интенсификация сельскохозяйственного производства в условиях радикальной экономической реформы, Сумы, 1989; Научной конференции профессорско-преподавательского состава КрасГАУ Наука - сельскохозяйственному производству, Красноярск, 1993; Научной конференции профессорско-преподавательского состава КрасГАУ Наука - сельскохозяйственному производству, Красноярск, 1995; ХI Международном симпозиуме Реконструкция гомеостаза, Красноярск, 1998; Актуальные проблемы ветеринарного обеспечения животноводства Сибири, Новосибирск, 2006; Международной школе - конференции Социально-экологические проблемы природопользования в Центральной Сибири, Красноярск, 2008; Всероссийской научно-практической конференции ФГОУ ВПО КрасГАУ Инновации в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития, Красноярск, 2009; Межрегионарной научно-практической конференции Аграрно-экономическая наука республики Тыва: основные результаты и перспективы, Кызыл, 2009; Международной конференции Проблемы современной аграрной науки ФГОУ ВПО КрасГАУ, Красноярск, 2009; Международной конференции Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов, посвященной 40-летию ВНИТИБП, Московская область, Щелковский район, поселок Биокомбината, ВНИТИБП, 2009; Международной научно-практической конференции Ветеринарная медицина. Современные проблемы и перспективы развития, Саратов, 2010; Международной научно-практической конференции Современные научно-практические достижения в ветеринарии, Киров, 2010; IV Международной конференции молодых ученых Новейшие направления развития аграрной науки в работах молодых ученых, Новосибирская область, п. Краснообск, 2010; Всероссийской очно-заочной научно-практической конференции Инновация в науке и образовании: опыт, проблемы, перспективы развития, Красноярск, 2010; Международной научно-практической конференции Научные основы улучшения ветеринарного благополучия и продуктивности сельскохозяйственных животных, Кызыл, 2010; XIII Международной научно-практической конференции Аграрная наука - сельскохозяйственному производству Монголии, Сибири и Казахстана, Улаанбаатар, 2010; Всероссийской научно-практической конференции Проблемы экономического развития и обеспечения безопасности в области ветеринарии, Троицк, 2010; Международной заочно научной конференции Проблемы современной аграрной науки, Красноярск, 2010; Международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию со дня основания Института экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Актуальные вопросы ветеринарной медицины Сибири, Новосибирская область, п. Краснообск, 2010; VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием Молекулярная диагностика - 2010, Москва, 2010.

СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА

Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |

     Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии