Физиологическая адаптация американских норок (Mustela vizon Schr.) и серебристо-черных лисиц (Vulpes vulpes L.) при клеточном содержании в условиях Забайкалья
Автореферат докторской диссертации по биологии
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Материал и методы исследований. Эксперименты по изучению внешнесекреторной деятельностиа поджелудочной железы, определению нормы биохимических показателей крови, уровня кортикостероидных гормонов и качественных показателей меха американских норок и серебристо-черных лисиц выполнены авторома работы в период с 1994 по 2010 годы на кафедре анатомии и физиологии человека и животных Бурятского государственного университета и на кафедре экологии и безопасности жизнедеятельности Восточно-Сибирского государственного технологического университета.
8
а Экспериментальная работа выполнена на американских норках и серебристо-черных лисицах. Животные клеточного разведения находились в стандартных условиях на сбалансированном рационе. Исследования проводили на образцах ткани поджелудочной железы, плазмы крови, меховой продукции, полученных от американских норок и серебристо-черных лисиц обоих полов возраста от 2 до 6 лет. Для исследования использовали зверей клеточного разведения звероводнческих и частных хозяйств Баргузинского, Тарбагатайского и Прибайкальского районов Республики Бурятия и Читинского района Забайкальского края.Пищеварительную функцию поджелудочной железы исследовали у серебристо-черных лисиц, оперированных по методу В.Е. Робинсона (1954) с вживлением фистул. Для сравнительно-видового определения ферментной активности поджелудочной железы американских норок и серебристо-черных лисиц исследовали гомогенаты ткани поджелудочной железы. Материал был собран во время осенне-зимнего убоя животных. Извлеченные поджелудочные железы взвешивали и замораживали. В глубоко замороженном состоянии их сохраняли до исследования. Навеску органа в замороженном состоянииа измельчали и растирали в гомогенизаторе в холодном растворе Рингера для получения суспензии гомогената. Смесь центрифугировали в течение 10 минут при 3000 об/мин. Надосадочную фракцию разводили раствором Рингера в зависимости от содержания определяемого фермента.
Активность ферментов рассчитывали на 1г массы или 1мл сока поджелудочной железы.
Суточную динамику внешнесекреторной функции поджелудочной железы серебристо-черных лисиц исследовали с 1-часовым интервалом в 12- часовых дневных и ночных опытах.
Активность ферментов гомогената ткани поджелудочной железы и панкреатического сока, полученного в хроническом опыте, определяли одними и теми же методами анализа.
Активность амилазы по Смит-Рою-Уголеву (1965). Общую протеолитическую активность устанаваливали по расщеплению казеина при фотометрическом контроле (Батоев, 1971). Активность амилазы и протеаз выражали в мг/г.мин или мг/мл.мин, то есть мг расщепленного субстрата 1г железы или 1мл сока в течение 1 минуты.
Активность липазы определяли по гидролизу эмульсии подсолнечного масла (Батоев, Цыбекмитова, 1985). Активность липазы выражали мкмоль/мл.мин или мкмоль/мг.мин.
9
а Для биохимических исследований кровь экспериментальных лисиц получалиа до кормления из плантарной вены, у норок из хвостовой вены. Биохимический анализ крови: общего белка, общего билирубина, глюкозы, мочевины, креатинина, общих липидов, холестерина, триглециридов, мочевой кислоты, активности ферментов: аспартатаминотрансферазы (АсТ), аланинаминотрансферазы (АТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), креатинкиназы (КК), ?-амилазы, ?-глутамилтрансферазы (?-ГТФ) проводили на полуавтоматическом биохимическом анализаторе RAL CLIMA MC - 15 (Испания).Для биохимического анализа крови использовали набор реагентов ЗАО Вектор-Бест (Новосибирская область) и набор реагентов фирмы Витал Диагностикс СПб (г. Санкт-Петербург).
Определение уровня кортикостероидов в плазме крови осуществляли радиоиммуным методом. Кровь экспериментальных животных получали, как и при исследовании её биохимических показателей.
Анализ шкурковой продукции выполняли согласно ГОСТ 2790-88 Шкурки лисицы клеточного разведения невыделанные, ГОСТ 6803-72 Шкурки лисиц серебристо-черных, платиновых, снежных и черно-бурых выделанные, RTG/01/2-94 Общие положения методики по испытанию селекционных достижений на отличимость, однородность и стабильность, RTA/01/1-95 Особенности испытания пород животных на отличимость, однородность и стабильность.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Динамика экзокринной функции
аподжелудочной железы у серебристо-черных лисиц
Динамику секреции панкреатического сока и ферментов у лисиц мы определяли в дневное и ночное время при сбалансированном рационе кормления. Суточную динамику деятельности поджелудочной железы лисиц определяли в полусуточных хронических опытах.
10
а Результаты исследований свидетельствуют, что секреция панкреатического сока у лисица имеет прерывистый характер, выделения панкреатического сока в состоянии натощак не наблюдается. Уровень пищеварительной деятельности поджелудочной железы лисиц в течение суток не является постоянным. Количество панкреатического сока и активность ферментов имеют значительные колебания, которые связаны с приемом корма и совпадают с двигательной активностью животных (таблица 1).Таблица 1 - Динамика выделения панкреатического сока и активность ферментов у серебристо-черных лисиц, Mm, n=5
Время опыта |
Кол-во сока, мл |
Амилаза, мг/мл.мин |
Протеаза, мг/мл.мин |
ипаза, мкмоль/мл.мин. |
|||||
день |
ночь |
день |
ночь |
день |
ночь |
день |
ночь |
день |
ночь |
09.00. |
21.00. |
0,4 |
0,5 |
3533,2 |
4053,9 |
1060,8 |
1221,1 |
8,30,12 |
9,20,16 |
10.00. |
22.00. |
2,4 |
2,8 |
9044,8 |
9975,7а |
2921,1 |
3462,5 |
10,80,17 |
11,20,11 |
11.00. |
23.00. |
2,0 |
2,2 |
8475,5 |
9496,5 |
2721,5 |
3202,7 |
10,90,02 |
12,50,09 |
12.00. |
24.00. |
1,6 |
1,8 |
6003,7 |
7994,6 |
1820,9 |
3011,8 |
9,00,14 |
12,00,17 |
13.00. |
01.00. |
0,6 |
1,5 |
4302,4 |
7505,7 |
1180,9 |
2891,2 |
8,60,12 |
11,50,14 |
- |
02.00. |
- |
0,8 |
- |
5104,3 |
- |
2441,1 |
- |
10,60,10 |
- |
03.00. |
- |
0,5 |
- |
3522,5 |
- |
1330,9 |
- |
9,00,06 |
Мср ав течение суток m |
|||||||||
1,4 |
6584,4 |
2271,3 |
10,30,11 |
В начале активной деятельности органа лисиц наблюдается преобладание амилазы, а в последующем увеличивается содержание протеаз и липазы. Такая последовательность, очевидно, предохраняет амилазу от разрушения протеолитическими ферментами. аВ течение первого часа после приема корма утренней порции выделение панкреатического сока возрастает в 6 раз, амилолитическая активность в 2,6 раза, протеолитическая - в 2,7 раз, липазы - 1,3 раза. а
11
а Усиление функции органа наблюдается в ночное время, особенно выражена секреторная реакция поджелудочной железы во время вечернего кормления, так как данный период совпадает с повышением двигательной активности животного, которое приходит в состояние охоты. Очевидно, эта рефлекторная реакция лисиц закреплена длительной эволюцией вида. Снижение экзокринной деятельности поджелудочной железы наблюдается в течение 4-5 часов.В среднем в течение суток активность амилазы составила 658 мг/мл.мин, протеаз -а 227 мг/мл.мин,а липазыа - 10,3 мкмоль/мл.мин.
Характерные признаки видового питания лисиц отражает протеазно-амилазное соотношение панкреатического сока, установленное при изучении суточной динамики секреции и составляет при этом 1:2,9. Ход выделения ферментов панкреатического сока поджелудочной железы лисиц напоминает динамику секреции у собак в исследованиях Ц.Ж. Батоева (1993).
Таким образом, сокоотделение поджелудочной железы лисиц происходит непостоянно. Соответственно периодам кормления происходит повышение сокоотделения и выделения ферментов. Высокая концентрация ферментов сока поджелудочной железы лисиц обусловливает большую интенсивность процессов расщепления питательных веществ. Функциональная деятельность поджелудочной железы серебристо-черных лисиц адаптирована к видовому питанию, что нашло отражение в активности ферментов и протеазно-амилазном соотношении.
Сравнительный анализ функциональной деятельности поджелудочной железы у американских норок и серебристо-черных лисиц
Для получения данных в сравнительном аспекте проведены экспериментальные исследования по изучению активности ферментов гомогената ткани поджелудочной железы норок и лисиц (таблица 2).
Таблица 2 - Активность ферментов в гомогенате ткани поджелудочной железы пушных зверей, Mm
Вид животных |
n |
Амилаза мг/г.мин |
Протеазы мг/г.мин |
ипаза мкмоль/г.мин |
Протеазно- амилазное соотношение |
Норки |
22 |
8517,6 |
4053,9 |
140,2 |
1 : 2,1 |
исицы |
24 |
6766,2 |
2341,9 |
110,1 |
1 : 2,8 |
аа 12
а Активность амилазы в гомогенате поджелудочной железы у лисиц составила 6766,2 мг/г.мин, у норок - 8517,6 мг/г.мин. Общая протеолитическая активность гомогената хищных пушных зверей имела параллельные изменения по сравнению с амилолитической активностью. Концентрация протеаз у норок составила 4053,9; у лисиц 2341,9 мг/г.мин. Липаза имеет такое же распределение как амилаза и протеазы. Активность липазы в среднем у норок составляет 14,00,2; у лисиц - 110,1 мкмоль/г.мин.Сравнивая результаты исследований активности ферментов в панкреатическом соке и гомогенате ткани поджелудочной железы, следует отметить незначительные различия в показателях. Отличия активности амилазы в панкреатическом соке и в гомогенате ткани поджелудочной железыа лисиц составили 2,7%, протеаз - 3,1%, липазы - 5,8%.
Эволюционная адаптация поджелудочной железы к качеству питания исследованных животных проявляется при сопоставлении соотношения протеаз к амилолитической активности. По результатам исследований протеазно-амилазное соотношение у норок составляет 1:2,1; у лисиц 1:2,8. При изучении экзокринной функции поджелудочной железы лисиц протеазно-амилазное соотношение в панкреатическом соке составило 1:2,9.
Анализ данных показал, что метод определенияа активности ферментов в гомогенате ткани поджелудочной железы является достоверным и может использоваться при изучении данной функции у животных, применение фистул у которых затруднено. По данным P. Kohishevski (1973), проводившего исследования активности ферментов поджелудочной железы европейской норки дикой популяции, соотношение протеолитической активности к амилолитической составляет 1:2. Тогда как у норок клеточного содержания, в рационе которых в большей степени присутствуют растительные корма, это соотношение составляет 1:2,1. Несмотря на различные методы, использованные в исследованиях P. Kohishevski и в наших опытах, протеазно-амилазное соотношение у европейской норки дикой популяции и американской норки клеточного разведения приблизительно одинаковы.
а 13
а Для растительноядных и всеядных видов характерна адаптивная диссоциация пищеварительных ферментов, их организм генетически запрограммирован на потребление самой разнообразной пищи (Уголев, 1972, 1980). По данным В.М. Олейник (1984) у кроликов, как представителей грызунов, протеазно-амилазное соотношение в поджелудочной железе составляет 1:21,2; у всеядных крыс 1:11,5. Согласно нашим ранним исследованиям (Санжиева, 1993) у белок данное соотношение составляет 1:20, ондатр 1:34. По результатам исследований С.Н. Сафаровой (1977) у нутрий отношение амилолитической активности к общему количеству протеаз составляет 1:290.На рисунке 1 в сравнительном аспекте представлены результаты наших экспериментов иа других исследователей, выполненные под руководством Ц.Ж. Батоева.
Рисунок 1 - Соотношения активности протеаз и амилазы поджелудочной железы в связи с типами питания разных видов животных и птиц.
Примечание - Куры, утки, гуси (исследования Батоева ); собаки (Цыбекмитовой); свиньи а(Алиева); норки, песцы, лисицы, белки, ондатры (Санжиевой.); голуби (Аюрзанаевой); черная ворона, ворон (Содбоевой); сорока (Баниевой).
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |