Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии

Физиологическая адаптация американских норок (Mustela vizon Schr.) и серебристо-черных лисиц (Vulpes vulpes L.) при клеточном содержании в условиях Забайкалья

Автореферат докторской диссертации по биологии

  СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА  
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
 

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материал и методы исследований. Эксперименты по изучению внешнесекреторной деятельностиа поджелудочной железы, определению нормы биохимических показателей крови, уровня кортикостероидных гормонов и качественных показателей меха американских норок и серебристо-черных лисиц выполнены авторома работы в период с 1994 по 2010 годы на кафедре анатомии и физиологии человека и животных Бурятского государственного университета и на кафедре экологии и безопасности жизнедеятельности Восточно-Сибирского государственного технологического университета.

8

а Экспериментальная работа выполнена на американских норках и серебристо-черных лисицах. Животные клеточного разведения находились в стандартных условиях на сбалансированном рационе. Исследования проводили на образцах ткани поджелудочной железы, плазмы крови, меховой продукции, полученных от американских норок и серебристо-черных лисиц обоих полов возраста от 2 до 6 лет. Для исследования использовали зверей клеточного разведения звероводнческих и частных хозяйств Баргузинского, Тарбагатайского и Прибайкальского районов Республики Бурятия и Читинского района Забайкальского края.

Пищеварительную функцию поджелудочной железы исследовали у серебристо-черных лисиц, оперированных по методу В.Е. Робинсона (1954) с вживлением фистул. Для сравнительно-видового определения ферментной активности поджелудочной железы американских норок и серебристо-черных лисиц исследовали гомогенаты ткани поджелудочной железы. Материал был собран во время осенне-зимнего убоя животных. Извлеченные поджелудочные железы взвешивали и замораживали. В глубоко замороженном состоянии их сохраняли до исследования. Навеску органа в замороженном состоянииа измельчали и растирали в гомогенизаторе в холодном растворе Рингера для получения суспензии гомогената. Смесь центрифугировали в течение 10 минут при 3000 об/мин. Надосадочную фракцию разводили раствором Рингера в зависимости от содержания определяемого фермента.

Активность ферментов рассчитывали на 1г массы или 1мл сока поджелудочной железы.

Суточную динамику внешнесекреторной функции поджелудочной железы серебристо-черных лисиц исследовали с 1-часовым интервалом в 12- часовых дневных и ночных опытах.

Активность ферментов гомогената ткани поджелудочной железы и панкреатического сока, полученного в хроническом опыте, определяли одними и теми же методами анализа.

Активность амилазы по Смит-Рою-Уголеву (1965). Общую протеолитическую активность устанаваливали по расщеплению казеина при фотометрическом контроле (Батоев, 1971). Активность амилазы и протеаз выражали в мг/г.мин или мг/мл.мин, то есть мг расщепленного субстрата 1г железы или 1мл сока в течение 1 минуты.

Активность липазы определяли по гидролизу эмульсии подсолнечного масла (Батоев, Цыбекмитова, 1985). Активность липазы выражали мкмоль/мл.мин или мкмоль/мг.мин.

9

а Для биохимических исследований кровь экспериментальных лисиц получалиа до кормления из плантарной вены, у норок из хвостовой вены. Биохимический анализ крови: общего белка, общего билирубина, глюкозы, мочевины, креатинина, общих липидов, холестерина, триглециридов, мочевой кислоты, активности ферментов: аспартатаминотрансферазы (АсТ), аланинаминотрансферазы (АТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), креатинкиназы (КК), ?-амилазы, ?-глутамилтрансферазы (?-ГТФ) проводили на полуавтоматическом биохимическом анализаторе RAL CLIMA MC - 15 (Испания).

Для биохимического анализа крови использовали набор реагентов ЗАО Вектор-Бест (Новосибирская область) и набор реагентов фирмы Витал Диагностикс СПб (г. Санкт-Петербург).

Определение уровня кортикостероидов в плазме крови осуществляли радиоиммуным методом. Кровь экспериментальных животных получали, как и при исследовании её биохимических показателей.

Анализ шкурковой продукции выполняли согласно ГОСТ 2790-88 Шкурки лисицы клеточного разведения невыделанные, ГОСТ 6803-72 Шкурки лисиц серебристо-черных, платиновых, снежных и черно-бурых выделанные, RTG/01/2-94 Общие положения методики по испытанию селекционных достижений на отличимость, однородность и стабильность, RTA/01/1-95 Особенности испытания пород животных на отличимость, однородность и стабильность.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Динамика экзокринной функции

аподжелудочной железы у серебристо-черных лисиц

Динамику секреции панкреатического сока и ферментов у лисиц мы определяли в дневное и ночное время при сбалансированном рационе кормления. Суточную динамику деятельности поджелудочной железы лисиц определяли в полусуточных хронических опытах.

10

а Результаты исследований свидетельствуют, что секреция панкреатического сока у лисица имеет прерывистый характер, выделения панкреатического сока в состоянии натощак не наблюдается. Уровень пищеварительной деятельности поджелудочной железы лисиц в течение суток не является постоянным. Количество панкреатического сока и активность ферментов имеют значительные колебания, которые связаны с приемом корма и совпадают с двигательной активностью животных (таблица 1).

Таблица 1 - Динамика выделения панкреатического сока и активность ферментов у серебристо-черных лисиц, Mm, n=5

Время опыта

Кол-во сока, мл

Амилаза,

мг/мл.мин

Протеаза,

мг/мл.мин

ипаза,

мкмоль/мл.мин.

день

ночь

день

ночь

день

ночь

день

ночь

день

ночь

09.00.

21.00.

0,4

0,5

3533,2

4053,9

1060,8

1221,1

8,30,12

9,20,16

10.00.

22.00.

2,4

2,8

9044,8

9975,7а

2921,1

3462,5

10,80,17

11,20,11

11.00.

23.00.

2,0

2,2

8475,5

9496,5

2721,5

3202,7

10,90,02

12,50,09

12.00.

24.00.

1,6

1,8

6003,7

7994,6

1820,9

3011,8

9,00,14

12,00,17

13.00.

01.00.

0,6

1,5

4302,4

7505,7

1180,9

2891,2

8,60,12

11,50,14

-

02.00.

-

0,8

-

5104,3

-

2441,1

-

10,60,10

-

03.00.

-

0,5

-

3522,5

-

1330,9

-

9,00,06

Мср ав течение суток m

1,4

6584,4

2271,3

10,30,11

В начале активной деятельности органа лисиц наблюдается преобладание амилазы, а в последующем увеличивается содержание протеаз и липазы. Такая последовательность, очевидно, предохраняет амилазу от разрушения протеолитическими ферментами. аВ течение первого часа после приема корма утренней порции выделение панкреатического сока возрастает в 6 раз, амилолитическая активность в 2,6 раза, протеолитическая - в 2,7 раз, липазы - 1,3 раза. а

11

а Усиление функции органа наблюдается в ночное время, особенно выражена секреторная реакция поджелудочной железы во время вечернего кормления, так как данный период совпадает с повышением двигательной активности животного, которое приходит в состояние охоты. Очевидно, эта рефлекторная реакция лисиц закреплена длительной эволюцией вида. Снижение экзокринной деятельности поджелудочной железы наблюдается в течение 4-5 часов.

В среднем в течение суток активность амилазы составила 658 мг/мл.мин, протеаз -а 227 мг/мл.мин,а липазыа - 10,3 мкмоль/мл.мин.

Характерные признаки видового питания лисиц отражает протеазно-амилазное соотношение панкреатического сока, установленное при изучении суточной динамики секреции и составляет при этом 1:2,9. Ход выделения ферментов панкреатического сока поджелудочной железы лисиц напоминает динамику секреции у собак в исследованиях Ц.Ж. Батоева (1993).

Таким образом, сокоотделение поджелудочной железы лисиц происходит непостоянно. Соответственно периодам кормления происходит повышение сокоотделения и выделения ферментов. Высокая концентрация ферментов сока поджелудочной железы лисиц обусловливает большую интенсивность процессов расщепления питательных веществ. Функциональная деятельность поджелудочной железы серебристо-черных лисиц адаптирована к видовому питанию, что нашло отражение в активности ферментов и протеазно-амилазном соотношении.

Сравнительный анализ функциональной деятельности поджелудочной железы у американских норок и серебристо-черных лисиц

Для получения данных в сравнительном аспекте проведены экспериментальные исследования по изучению активности ферментов гомогената ткани поджелудочной железы норок и лисиц (таблица 2).

Таблица 2 - Активность ферментов в гомогенате ткани поджелудочной железы пушных зверей, Mm

Вид

животных

n

Амилаза

мг/г.мин

Протеазы

мг/г.мин

ипаза

мкмоль/г.мин

Протеазно-

амилазное соотношение

Норки

22

8517,6

4053,9

140,2

1 : 2,1

исицы

24

6766,2

2341,9

110,1

1 : 2,8

аа 12

а Активность амилазы в гомогенате поджелудочной железы у лисиц составила 6766,2 мг/г.мин, у норок - 8517,6 мг/г.мин. Общая протеолитическая активность гомогената хищных пушных зверей имела параллельные изменения по сравнению с амилолитической активностью. Концентрация протеаз у норок составила 4053,9; у лисиц 2341,9 мг/г.мин. Липаза имеет такое же распределение как амилаза и протеазы. Активность липазы в среднем у норок составляет 14,00,2; у лисиц - 110,1 мкмоль/г.мин.

Сравнивая результаты исследований активности ферментов в панкреатическом соке и гомогенате ткани поджелудочной железы, следует отметить незначительные различия в показателях. Отличия активности амилазы в панкреатическом соке и в гомогенате ткани поджелудочной железыа лисиц составили 2,7%, протеаз - 3,1%, липазы - 5,8%.

Эволюционная адаптация поджелудочной железы к качеству питания исследованных животных проявляется при сопоставлении соотношения протеаз к амилолитической активности. По результатам исследований протеазно-амилазное соотношение у норок составляет 1:2,1; у лисиц 1:2,8. При изучении экзокринной функции поджелудочной железы лисиц протеазно-амилазное соотношение в панкреатическом соке составило 1:2,9.

Анализ данных показал, что метод определенияа активности ферментов в гомогенате ткани поджелудочной железы является достоверным и может использоваться при изучении данной функции у животных, применение фистул у которых затруднено. По данным P. Kohishevski (1973), проводившего исследования активности ферментов поджелудочной железы европейской норки дикой популяции, соотношение протеолитической активности к амилолитической составляет 1:2. Тогда как у норок клеточного содержания, в рационе которых в большей степени присутствуют растительные корма, это соотношение составляет 1:2,1. Несмотря на различные методы, использованные в исследованиях P. Kohishevski и в наших опытах, протеазно-амилазное соотношение у европейской норки дикой популяции и американской норки клеточного разведения приблизительно одинаковы.

а 13

а Для растительноядных и всеядных видов характерна адаптивная диссоциация пищеварительных ферментов, их организм генетически запрограммирован на потребление самой разнообразной пищи (Уголев, 1972, 1980). По данным В.М. Олейник (1984) у кроликов, как представителей грызунов, протеазно-амилазное соотношение в поджелудочной железе составляет 1:21,2; у всеядных крыс 1:11,5. Согласно нашим ранним исследованиям (Санжиева, 1993) у белок данное соотношение составляет 1:20, ондатр 1:34. По результатам исследований С.Н. Сафаровой (1977) у нутрий отношение амилолитической активности к общему количеству протеаз составляет 1:290.

На рисунке 1 в сравнительном аспекте представлены результаты наших экспериментов иа других исследователей, выполненные под руководством Ц.Ж. Батоева.

Рисунок 1 - Соотношения активности протеаз и амилазы поджелудочной железы в связи с типами питания разных видов животных и птиц.

Примечание - Куры, утки, гуси (исследования Батоева ); собаки (Цыбекмитовой); свиньи а(Алиева); норки, песцы, лисицы, белки, ондатры (Санжиевой.); голуби (Аюрзанаевой); черная ворона, ворон (Содбоевой); сорока (Баниевой).

  СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА  
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
     Авторефераты по всем темам  >>  Авторефераты по биологии