Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии
Технология производства и обеспечение качества синбиотиков ЛАКТОСУБТИЛ-ФОРТЕ и АВИЛАКТ-ФОРТЕ. эффективность их применения в птицеводстве
Автореферат докторской диссертации по биологии
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА- Характеристика штамма 1К Lactobacillus acidophilus, В-2991. В соответствии с паспортом штамма имеет следующие характеристики:а выделен из кишечника курицы; по культурально-морфологические признакама - крупные грамположительные палочки; генетически устойчив; генетически не модифицирован; не патогенен для человека (классификация микроорганизмов по СП 1.2.731-99), при работе не требует специальных мер предосторожности; растет на обезжиренном молоке при температуре 37-40С.
аДля штамма определены: чувствительность бактерий к действию желудочного сока и желчи;а антагонистическая активность (АнтА) в отношении патогенных микроорганизмов как основнаяа характеристика пробиотической активности; резистентность ка действию наиболее часто применяемых в птицехозяйствах антибиотиков.
Показано, что лактобактерии данного штамма устойчивыа к воздействию желчи иа несколько меньше Ца желудочного сока: снижение концентрации живых бактерийа по сравнению с исходным значением составило (0,60,2) lg КОЕ/см3 иаа (1,70,3) lg КОЕ/см3 соответственно (n=5).
При определении АнтА в опытах in vitro (n=10)а установлен (рис.2) выраженный антагонизм штамма в отношенииа патогенных микроорганизмов. Определениеа (n=4)а резистентности бактерий штамма 1К ка действию антибиотиков показало (рис. 3), что лактобактерии высокочувствительны (диаметр зоны ЗР >25мм) к кламоксилу, левомицетину, тетрациклину, цефазолину, ампициллину и рифампицину; чувствительны (15-25 мм) к гентамицину; умеренно чувствительны (11-15мм) к офлоксацину, ципрофлоксацину, энрофлону, линкомицину и флавомицину.
Рис. 2. Антагонистическая активность бактерий-пробиотиков.
Рис. 3. Антибиотикорезистентность бактерий-пробиотиков.
- Характеристика штаммаM-8 Bacillussubtilis (В-3121). Штамм M-8 B. subtilis выделен из молока; культурально-морфологические признаки -а грамположительные неоднородные палочки длиной 2-3 мкм; является продуцентомаа протеолитическихаа ферментов; генетически не модифицирован; не патогенен для человека (СП 1.2.731-99),а при работе не требует специальных мер предосторожности; культивируется на ОМ, МПА при рН 7,0-7,2 и температуре 400С.
Для характеристики безопасности штамма в опытах на мышах исследованы: безвредность (при введении per os дозы 10 и 50х109 КОЕ/0,5см3), возможная вирулентность (при введении в/б суспензии живых бактерий в дозе 5 и 10х109 КОЕ)/0,5см3),а токсичность (при введении в/б суспензии инактивированных бактерий в дозе 1,0 и 2,0х109 КОЕ/0,5см3) и токсигенность а(при введении в/б 0,5 и 1,0 см3 культуральной жидкости). Установлено, что за весь период наблюдения (5 суток) животные (по 20 голов в группе) были клинически здоровы, активны, их поведенческие реакции не изменялись.
Исследована чувствительность бактерий данного штаммаа к действию желудочного сока и желчи. Концентрация бактерий после контакта с ними составила (8,60,3) lg КОЕ/см3а и (7,80,2) lg КОЕ/см3 соответственно при исходном значении (9,10,3) lg КОЕ/см3, что свидетельствовало об устойчивостиа к желудочному соку и несколько большей чувствительности к желчи. При исследовании АнтА in vitro (n=10) апоказано (рис.2),а что штамм обладает выраженным антагонизмом в отношенииа патогенных микроорганизмов, превышающим по величине аналогичные значения АнтА для лактобактерий. Установлено (рис.3), что бактерииа B.subtilis более устойчивы к действию антибиотиков по сравнению с лактобактериями.
- Характеристика штамма F. sambucinumMKF-2001-3 (F - 867). Для разработки пребиотика использован новый штамм гриба Fusarium sambucinum MKF-2001-3.а Изучение физиолого-биохимических характеристик штамма, его поддержание, обеспечение чистоты и стабильности свойств проведено нами при участии доктора биологических наук, профессора Воробьевой Г.И. Штамм депонирован в ВКПМ (№F - 867).а В исследованииа безопасности штамма, проведенном ФГУПа Государственный научный центр по антибиотикам, установлено, что он не патогенен для растений и животных, не токсичен; может использоватьсяа при производстве биологически активных веществ а(БАВ) для пищевой промышленности.а
В соответствии с разработанным паспортом штамм имеет следующие характеристики: выделен из растительного сырья;а культурально-морфологическиеа признакиа - на агаризованной среде Чапека и сусло-агаре образует колонии с хорошо развитым воздушным мицелием, сначала белым, затем розовеющим, при старении приобретающим охряно - коричневые тона; физиологические признаки -а сбраживает и ассимилирует сахара, усваивает уксусную, молочную, янтарную и лимонную кислоты, растет на аммонийном азоте;а продукт, синтезируемый штаммом, -а обильный, быстрорастущий мицелий, содержащийа биологически активные вещества в липидной и белковой фракциях и белок в количестве 40-42 %;а активность (продуктивность) штамма а-аа доаа 15 г сухого мицелия на 1л культуральной жидкости;а устойчив к антибиотикам и фагам,а лизирующим клеткиа других штаммов того же вида грибов;а не является генномодифицированным, зоо- и афитопатогенным, не токсичен;а культивируется на солодовом (6-7 Бал) сусло - агаре при 260С 72 часа; поддерживается путем периодических пересевов (3-4 раза в год), культура хранится при 18-200С.
Для оценки нового штамма как продуцента БАВ исследован (табл. 1) химический состав биомассы (БМ), культуральной жидкости (КЖ) и автолизата мицелия (АМ). Показано, что в их состав входят все незаменимые аминокислоты, полный набор микро- и макроэлементов в виде органических соединений, комплекс витаминов группы В. аКультуральная жидкость по сравнению с мицелием гриба содержала больше органических кислота (10,9 г/л): лимонной (0,5 г/л), яблочнойа (0,4 г/л),а фумаровойа (0,3 г/л), янтарнойа (0,5 г/л), щавелево-уксусной (0,3 г/л), уксусной (0,5 г/л).
Таблица 1
Химический состав биомассы, культуральной жидкости и автолизата мицелия гриба
Показатели |
КЖ |
АМ |
БМ |
1 |
2 |
3 |
4 |
Общий анализ (масс %) |
|||
Сухие вещества |
1,5 |
76,8 |
93,1 |
Общий белок |
2,5 |
46,3 |
47,5 |
Жиры |
0,02 |
4,8 |
7,1 |
Углеводы |
13,0 |
18,7 |
22,0 |
Макро- и микроэлементы (мг/г) |
|||
Калий |
45,0 |
13,35 |
19,35 |
Натрий |
17,5 |
аа 5,88 |
1,25 |
Кальций |
12,5 |
1,935 |
29,95 |
Магний |
1,75 |
1,225 |
2,95 |
Железо |
0,005 |
0,922 |
0,65 |
Медь |
0,003 |
0,028 |
0,015 |
Цинк |
0,03 |
0,062 |
0,043 |
Марганец |
0,012 |
0,043 |
0,244 |
Азот |
10 |
23,6 |
34,9 |
Фосфор |
23 |
11,8 |
17,45 |
Никель |
0,001 |
0,006 |
0,01 |
Кобальт |
0,001 |
0,002 |
|
Свинец |
н/обн |
н/обн |
н/обн |
Ртуть |
н/обн |
н/обн |
н/обн |
Мышьякаа |
н/обн |
н/обн |
н/обн |
Аминокислоты (% АСВ) |
|||
изин |
0,18 |
1,98 |
2,8 |
Гистидин |
0,26 |
1,05 |
1,57 |
Аргинин |
0,27 |
2,01 |
2,2 |
Аспарагиновая кислота |
0,41 |
3,17 |
3,25 |
Треонин |
0,18 |
1,33 |
2,00 |
Серин |
0,15 |
1,23 |
1,70 |
Пролин |
0,36 |
1,15 |
1,59 |
Глицин |
0,24 |
1,35 |
1,75 |
Аланин |
0,25 |
1,94 |
3,00 |
Цистин |
0,10 |
0,18 |
аа 0,45 |
1 |
2 |
3 |
4 |
Валин |
0,21 |
1,70 |
1,90 |
Метионин |
0,08 |
0,42 |
0,80 |
Изолейцин |
0,16 |
1,25 |
1,37 |
ейцин |
0,18 |
2,10 |
2,25 |
Тирозин |
0,01 |
1,11 |
1,40 |
Фенилаланин |
0,11 |
1,25 |
1,81 |
Глютаминовая кислота |
0,72 |
3,67 |
4,60 |
Сумма аминокислот |
3,87 |
26,89 |
34,44 |
Витамины (мг/г) |
|||
В1 (тиамина хлорид) |
0,009 |
0,001 |
11,2 |
В2 (рибофлавин) |
0,11 |
0,088 |
60,0 |
В3 (пантетеновая к-та) |
0,06 |
0,145 |
305,0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
В4(холин |
н/обн |
н/обн |
следы |
В5 (никотиновая кислота) |
9,60 |
0,087 |
49,5 |
В6 (пиридоксин) |
0,05 |
0,008 |
15,0 |
В9 (фолиевая кислота) |
0,025 |
0,017 |
12,5 |
В12(цианокобаламин) |
0,020 |
а 0,0002 |
7,5 |
Н (биотин) |
следы |
0,001 |
1,5 |
А (ретинол) |
н/обн |
н/обн |
н/обн |
Е (токоферол) |
0,031 |
0,032 |
0,1 |
Новый штамм гриба Fusarium sambucinum MKF 2001-3 сравнивали ас известным штаммом - Fusarium sambucinum PS-64 (ВКПМ F-165) по продуктивным свойствам и способности КЖа гриба ускорять рост дрожжей. Установили, что масса мицелия, продуцируемая культурой гриба нового штамма, ааувеличилась на 25%, содержание белка - на 5,1%, углеводов - на 3,7% (в том числе гликанов на 6%); авремя накопления биомассы гриба сократилось на 2-4 часа. КЖ нового штамма более эффективно влияла анаа рост дрожжей S. cerevisiae diastaticus ВКПМ - ?-1218, чем КЖ штамма гриба F. s. PS-64: скорость роста увеличивалась на 37,3%,а степень потребления сахаров - на 33,7%, азотаа -а на 34,8% а(в пересчете на Np ), фосфора - на 35,9%а (в пересчете на Р2О5).
3.1.4. Характеристика штамма дрожжей Saccharomycescerevisiae(diastaticus) ВКПМ-?-1218.аСелекция штамм а проведена на гидролизных средах и смеси гидролизных и крахмалсодержащих субстратов. Культурально-морфологическима признаки -а на сусло-агаре имеет вида округлых, гладких, тускло-блестящих, светло-кремовых колоний; аустойчив к фагам, ализирующим клетки других штаммов того же вида микроорганизмов; генетически не модифицирован; не патогенен для человека (СП 1.2.731-99), апри работе не требует специальных мер предосторожности; культивируется на различных углевод- и крахмалсодержащих средах, при рН - 4,2-5,8 и температуреа 30-32С,а способен накапливать биомассу на отходах зернопроизводства (зерно, отруби, мука).
Биомасса дрожжей исследуемого штамма исследована поа химическому составу в сравнении с другими белковыми кормовыми добавками (табл.2).
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии