Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии
Технология производства и обеспечение качества синбиотиков ЛАКТОСУБТИЛ-ФОРТЕ и АВИЛАКТ-ФОРТЕ. эффективность их применения в птицеводстве
Автореферат докторской диссертации по биологии
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
СКАЧАТЬ ОРИГИНАЛ ДОКУМЕНТА1.4. Практическая ценность работы. Применение синбиотиков АВИЛАКТ-ФОРТЕ и ЛАКТОСУБТИЛ-ФОРТЕ в птицеводстве способствует повышению продуктивности птицы, обеспечению ветеринарного благополучияа птицехозяйств,а гарантии качества, биологической и экологической безопасности как самой продукции, так и процесса ее производства.
По разработанной технологии изготовлено 45 серий препаратов. В доклинических исследованиях и производственныха испытаниях подтверждена их безопасность и эффективность. В птицехозяйстве проведен 21 научно-производственный опыт и два производственных испытания на цыплятах-бройлерах различных кроссов (суммарное поголовье а- 10 000 голов). аРазработаныа способыаа применения синбиотиков при различных путях введения препаратов (выпаивание, смешивание с кормом, напыление на гранулы комбикорма). Результаты испытаний включены в Методические рекомендации по использованию пробиотиков, пребиотиков и симбиотиков в птицеводстве и Методические рекомендации по технологии камерной аэрозольной вакцинации цыплят против НБ.
Экономический эффект от применения синбиотиков ЛАКТОСУБТИЛ-ФОРТЕ и АВИЛАКТ-ФОРТЕ при выращивании бройлеров составил (в расчете на 1000 голов) 7862 и 1374 руб. соответственно.а
С учетом требований системы менеджмента качества и Правил GMP разработана и утверждена в установленном порядке нормативная документация: наа препараты АВИЛАКТ-1К, АВИСУБТИЛ, АВИСТИМ и ЦЕРЕВЕТ - технологические регламенты, стандарты организации (ТУ) и инструкции по применению, на синбиотики ЛАКТОСУБТИЛ-ФОРТЕ и АВИЛАКТ-ФОРТЕ - инструкции по применению.
Опыт применения методологии проектного подхода и доклинических исследованийа использован в Методических рекомендациях по разработке и реализации проекта создания нового лекарственного средства, аРекомендациях по проведению доклинических испытаний новых лекарственных средств для животных и биологически активных добавок к кормам, лМетодических рекомендациях по исследованию стабильности иммунобиопрепаратов на этапе разработки и в условиях действующего производства, аМетодике определения раздражающего действия лечебно-профилактических препаратов для животных и их ингредиентов с помощью теста на хориоаллантоисной оболочке куриного эмбриона (ХЕТ-КАМ тест), Методике определения потенциальной токсичности лечебно-профилактических препаратов для животных и их ингредиентов на куриных эмбрионах (тест эмбриотоксичности).
Разработан в соавторствеа и внедрен ОСТ 100083-95 Продукция агробиологической промышленности. Технологические регламенты производства. Содержание, порядок разработки, построения, согласования и утверждения.,аа основные положения которого в 2010 г. актуализированы с учетом требованийа ГОСТ Р 52249-2009 Правила производства и контроля качества лекарственных средств и включеныа в проект национального стандарта РФ Средства лекарственные для животных. Технологические регламенты производства. Содержание, порядок разработки, согласования и утверждения.аа Материалы документов использованы в 2003-2011 г.г. при внедрении системы менеджмента качества на биопредприятиях: ФГУП Щелковский биокомбинат, Орловская биофабрика, Курская биофабрика, ОАО Покровский завод биопрепаратов.
Результаты работы использованы для обоснования разработанной во ВНИТИБП и одобренной Президиумом Россельхозакадемииа (протокол №4 от 21.04.2011) Концепции научного обеспечения создания и развития региональных биологических предприятий по производству препаратов для защиты животных, растений и средств, повышающих эффективность функционирования агропромышленного комплекса Российской Федерации, а также авошли в алекционный материал курсов повышения квалификации руководителей и специалистов птицеводческих предприятий Новые технологии и пути повышения эффективности производства мяса бройлеров г. Сергиев Посад (ГНУ ВНИТИП Россельхозакадемии), 2011г.
а 1.5.а Основныеа положения диссертационной работы,а которые выносятся на защиту:
- характеристика штаммов микроорганизмова -а продуцентов пробиотиков, пребиотика и белковой кормовой добавки, входящих в состав синбиотиков;
- система получения и контроля посевногоа материала для изготовления препаратов АВИЛАКТ-1К, АВИСУБТИЛ,а АВИСТИМа и ЦЕРЕВЕТ;
- схема доклинических исследований безопасности, активности и стабильности препаратов, гармонизированная са международными требованиями;
- методыа определения безвредности препаратов с помощью биологических тест-систем доорганизменного уровня;
- технология изготовления препаратов с использованием универсальной питательной среды на основе ферментолизата отходова зерносырья;
- антиоксидантное действие как новая характеристика биологической активности пребиотиков;
- эффективность применения синбиотиков априа выращиванииа цыплят-бройлеров; влияние синбиотика АВИЛАКТ-ФОРТЕ на эффективность вакцинации птицы против ньюкаслской болезни;
- способы и экономическая эффективность применения синбиотиков АВИЛАКТ-ФОРТЕ и ЛАКТОСБТИЛ-ФОРТЕ в птицеводстве.
1.6. Апробация работы. Основные материалы диссертацииа доложены и обсуждены: ав виде ежегодных отчетов по темам госзаданий на заседаниях ученого совета и методической комиссии ВНИТИБП (1991 - 2010 гг.);а на секции Ветеринарная биотехнология Отделения ветеринарной медицины РАСХНа (2004-2010 гг.); на пяти Международных конгрессах (XI International congress оf the World Veterinary poultry association, Будапешт,1997 г.; и III Международные ветеринарные конгрессы по птицеводству, Москва, 2005 и 2007 г.г.;а конгрессыа Биотехнология-2009, 2011, Москва, 2009,2011г.г.); на 42 Всесоюзных,а Республиканских, Международных и Всероссийских конференциях, апосвященных научным и практическим проблемам технологии промышленного производства ветеринарных биологических препаратов, проводившихсяа в Москве, Минске, Риге, Киеве, Харькове, Алуште, Петербурге, Саранске, Владимире, Краснодаре, Курске, Пущино, Боровске, Светлогорске, Сергиевом Посаде, Покрове, Щелковоа (1991 - 2011 гг.).
Разработки аудостоены: бронзовой медали и Диплома III степени (Российская агропромышленная выставка Золотая осень, 2002г.), Дипломов V,VI и VII Международных выставок Лаборатория Экспо (2007, 2008, 2009 гг.), Диплома Россельхозакадемииа ааза лучшие азавершенные научные разработки 2010 года.
1.7. Публикации. Основные положения диссертационной работыа опубликованы в 70 научных работах, в том числе в 14а статьяха в изданиях по перечню, рекомендованномуа ВАКа Минобрнаукиа России для публикации материалов докторских диссертаций. По результатам исследованийа получено 4а патента.
1.8. Объем и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, включающих материалы и методы, результаты (4 главы), обсуждение, выводы и практические предложения, содержит 73 таблицы и 33 рисунка.а Список литературы включает 486 источников. В приложении представлены таблицы исходных данных и копии документов, подтверждающих достоверность результатов работы, ее научную и практическую значимость.
1.9. Личный вклад автора заключается в формулировании проблемы, постановке цели и задач исследований, методологическом обосновании путей решения поставленных задач, непосредственном планировании экспериментов и выполнении исследований, обобщении и интерпретации результатов, разработке нормативной документации. Автор принимала личное участие в изготовлении и контроле опытных серий апрепаратов, их испытаниях ав птицехозяйстве, в подготовке научных публикаций и разработке методических документов.
1.10. Благодарности. Автор выражает благодарность научному консультанту, директору ВНИТИБП, академику РАСХНа А.Я. Самуйленко. В выполнении некоторых разделов диссертации принимали участие и оказывали практическую и консультативную помощь сотрудники институтаа Э.Ф. Токарик,а Г.И. Воробьева, В.И. Еремец, Т.А.Скотникова, Н.К.Еремец, А.А. Нежута, А.И. Албулов, Е.П.Сапегина, Е.И.Школьников, М.А.Фролова, Ю.Д. Фролов, Т.А. Авдеева, Т.А.Ломакина, Л.А.Елисеева, С.В.Калугин, а также сотрудники ВГНКИ:а В.И. Смоленский, О.А. Тугаринов; и ВНИТИП: В.И. Филоненко, В.Г. Шоль, И.П. Салеева, В.С.Лукашенко, Ш.А. Имангулов, Г.В. Игнатова - за что приносим им сердечную благодарность.
2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
Работа выполнена в 1991-2011 гг. во ВНИТИБП и аего опытном производстве. Часть исследований проводилиа совместно са сотрудниками ВГНКИ, ГосНиисинтезбелок, ГНУ ВНИТИП Россельхозакадемии,а Института микробиологии РАН, кафедры микробиологииа МГАВМиБ им. К. И. Скрябина, эффективность разработок испытывали ав опытном хозяйстве ГУП аЗагорское ЭПХ ВНИТИП.
Объектами исследований служили: штаммы-продуценты (лактобактерии Lactobacillus acidophilus, шт. 1К, ВКПМ №В-2991;а бациллы Bacillusа subtilis,аа шт. М-8, ВКПМ №B-1948; дрожжи Saccharomyces cerevisiae (diastaticus) ВКПМ-?-1218; ановый штамм высшего гриба Fusarium sambucinum MKF 2001-3, ВКПМ №F-867; автолизат биомассы и культуральная жидкость гриба); новые препараты АВИЛАКТ-1К (жидкий или сухой пробиотик, содержащий живые клетки L. acidophilus, шт. 1К) и аАВИСУБТИЛ (жидкий или сухой пробиотик, содержащий живые клетки B.а subtili,sа шт.М-8); пребиотик АВИСТИМ (культуральная жидкость гриба F.sambucinum ашт. MKF 2001-3); белковая кормовая добавка ЦЕРЕВЕТ (сухая биомаса инактивированных клеток дрожжей S. cerevisiae diastaticus ВКПМЦ?-1218); синбиотикиа АВИЛАКТ-ФОРТЕа (комплекс препаратов АВИЛАКТ-1K+АВИСТИМ) и ЛАКТОСУБТИЛ-ФОРТЕ а(АВИЛАКТ-1K+АВИСУБТИЛ+ЦЕРЕВЕТ).
Для оценки безопасностиа препаратов определяли: токсичность для белыха беспородных мышей (масса тела 12-14 г) после введения внутрибрюшинно препарата в широком интервале доз; токсичностьа для 9-10 сутчных SPF-эмбрионов кур (тест эмбриотоксичности); безвредность для цыплят суточного возраста после введения препаратов с кормом или водой; раздражающее действие на слизистые оболочки (ХЕТ-КАМ Тест в модификации).
Антагонистическую активность пробиотиков характеризовали в опытах: in vitro - по величине задержки роста полевых штаммов патогенных культур эшерихий (К-88, К-99, А-20E) и сальмонелл (S. tuphimurium, S. dublin, S. gallinarum); in vivo - по выживаемости цыплят при контрольном заражении полевым изолятом патогенного штамма E. сoli, выделенного в хозяйстве.а Резистентность к антибиотикам определяли in vitroа дисковым методом. Устойчивость бактерий-пробиотиков к действию желудочного сока (сухой медицинский, желудочный сок Эквин. НПО Биомед, г. Пермь) и желчи (желчь медицинская, ООО Самсон, г.Санкт-Петербург) определяли по изменению количества живых бактерий после контакта с ними. Количество жизнеспособных бактерий определяли высевома на среды MRS-5 иа сусло-агар.
Для характеристики химического состава пребиотика, кормовой добавки и зерноотходов определяли: массовую долю сухих веществ (по ГОСТ 28561-90); массовую долю золы (по ГОСТ 12572-67); массовую долю жира (по ГОСТ 13496.15-97); общий белок (по ГОСТ 26889-86); общее содержание углеводов (по ГОСТ 26176-91); макро- и микроэлементы методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии (на приборе ААS-1N); органические кислоты методом газо-жидкостной хроматографии (на хроматографе Хьюлетт - Паккард, колонка-полисорб); витамины (флюорометрическим методом по ГОСТ 29138-91, 19139-91, 29140-91); состав и содержание аминокислота (на аминокислотном анализаторе Биотроник LC-7000).
Антиоксидантную активность культуральной жидкости гриба определяли амперометрически на прибореа Яуза--01 (Яшин Я.И., Яшин А.Я., 2002).
Эффективность синбиотиков для цыплят-бройлеров (кроссов Смена, Конкурент-2, Кобб - 500а и Кобб - авиан-48) оценивали поа зоотехническим показателям (масса и сохранность птицы, затраты корма); аевропейскому индексу продуктивности (ЕИП, определяемому по формуле ЕИП = АхВ/CхD, где А - живая масса, кг; В - сохранность, %; С - срок выращивания, сутки; D - затраты корма на 1 кг привеса, кг) и акачеству мяса (выхода мясных частей, содержание в них белка и ажира) с использованиема соответствующих арекомендаций, разработанных ГНУ ВНИТИП. Влияние синбиотика на эффективность вакцинации птицы против НБ (вакцина против НБ птиц, штамм Ла-Сота, ТУ 10-19-212-86) оценивали по содержанию антител в сыворотке крови цыплят в реакции торможения гемагглютинации.
Экономическуюа эффективность синбиотиков рассчитывалиаа поаа формуле:
Э = (Сб - Сн) х Ан, где: Сб и Сн - себестоимость 1 кг прироста живой массы в базовом и новом вариантах; Ан - валовый прирост живой массы в новом варианте, кг.
Сухие формы препаратов получали методами сублимационного и распылительного высушивания. Контроль готовых препаратов осуществляли в соответствии с разработанными стандартами организации (СТО).
Статистическую обработку результатов (с числом повторов ?3) проводили методами Кербера в модификации Ашмарина, наименьших квадратов, статистических критериев аСтьюдента-Фишера (t-критерий), аКокса-Стюарта и др. с использованием стандартных программ аMATHCad-2001.
- РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Структурно-логическая асхема достижения цели диссертационной работы представлена на рис 1.
3.1.а Характеристика штаммов микроорганизмов - продуцентов пробиотиков, пребиотика и белковой кормовой добавки
На основании анализа существующего в настоящее время научного подхода иа данных литературы сформулированыа основные критерии отбора штаммов микроорганизмов - продуцентов пробиотиков, пребиотиков и белковых кормовых добавок микробиологической природы.а Штаммы-продуценты получают селекцией по заданным свойствам или выбирают в коллекции промышленных микроорганизмов в соответствии с определенными требованиями. В качестве объектов исследований из Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмова (ВКПМ) ФГУП ГосНИИГенетика нами выбраны: лактобактерии L. acidophilus (группа симбионтов), штамм 1К (ВКПМ № В-2991);а бактерии Bacillusа subtilis (транзиторная группа), штамм M-8 (ВКПМ №: В-3121); дрожжи Saccharomyces cerevisiaediastaticusа (ВКПМ-?-1218).а Для получения пребиотика использован выделенный нами новый штамм высшего лечебного гриба Fusarium sambucinum шт. MKF 2001-3
В дополнение к паспортным данным исследованы характеристики штаммов как продуцентов пробиотиков, пребиотиков и белковых кормовых добавок.
|
Страницы: | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
Авторефераты по всем темам >>
Авторефераты по биологии