Отчет с, 0 ч., рис , табл 1, источников 29, прил Ключевые слова

Вид материала

Отчет

Подобный материал:

• Реферат отчет 213 с., 12 ч., 63 рис., 18 табл., 223 источников, прил, 258.47kb.
• Отчет представлен на 51 с., состоит из 5 ч., 12 рис., 2 табл. Ключевые слова, 22.72kb.
• Реферат Отчет 134 с.,5 ч., 70 рис., 23 табл., 151 источников, прил, 76.3kb.
• Реферат Отчет 89 с., 6 ч., 35 рис., 2 прил, 264.68kb.
• Отчет представлен на 47 с.; состоит из 4 частей; основная часть содержит 26 пунктов, 23.76kb.
• Реферат Отчет 177 с., 3 ч., 199 рис., 12 табл., 72 источников, 1 прил, 33.16kb.
• Реферат отчет стр, рис., таблиц, источников, прил, 3.58kb.
• Реферат отчет 98 с., 2 ч., 32 рис., 43 источника, 8 прил, 150.95kb.
• Реферат Отчет 118 с., 7 ч., 30 рис., 12 табл., 43 источника, 1 прил, 280.87kb.
• Отчет 86 с., 34 рис., 15 табл., 53 источника, 2 приложения. Ключевые слова : структура, 56.56kb.

№ РНП.2.2.2.3.16050 “Изучение экспрессии гена SUP35 дрожжей Sacchoromyces cerevisiae”


РЕФЕРАТ.

Отчет с, 0 ч., рис 2., табл 1, источников 29, прил.0.

Ключевые слова: регуляция экспрессии генов, инициация трансляции, транскрипционные факторы.

Объект исследования: дрожжи Saccharomyces cerevisiae.

Цель работы: изучение экспрессии гена SUP35 дрожжей S. cerevisiae на уровне транскрипции и трансляции.

Методика:. Cтандартные методы генетики микроорганизмов, молекулярно-биологические методы (сайт направленный олигонуклеотидный мутагенез, ПЦР, лигирование), использовавшиеся для получения дрожжевых векторов, несущих мутантные аллели гена SUP35.

Результаты работы: оценены возможные плейотропные проявления мутаций в сайтах связывания транскрипционных факторов промоторной области гена SUP35 (аллели sup35-Abf1, sup35-Reb1A, sup35-Reb1B, sup35-Reb1C, sup35-Mbp1 sup35-Gcn4). При тестировании влияния промоторных мутаций гена гена SUP35 на осмочувствительность, дыхательную компетентность, температурочувствительность, чувствительность к беномилу и к аминогликозидному антибиотику паромомицину для штаммов с мутантными аллелями никаких отличий по сравнению со штаммом дикого типа обнаружено не было. Получена аллель гена SUP35 несущая делецию кодона АТГ1 ( sup35-ATG1). Оценено влияние аллели sup35-ATG1 и ранее полученной аллели sup35-AGG1 на жизнеспособность клеток дрожжей при использовании различных штаммов и при выращивании дрожжей в различных физиологических условиях. Мы показали, что что у гаплоидного штамма 19А-Д780 (sup35::TRP1 [CEN SUP35⁺ URA3]) замещение аллели SUP35 дикого типа на мутантную аллель sup35-AGG₁ (АТГ₁АГГ) или sup35-ATG1 приводит к летальности при выращивании клеток на глюкозе в качестве источника углерода. Замена глюкозы на галактозу или голодание по гистидину частично восстанавливает жизнеспособность мутантов sup35-AGG₁ [2] и sup35-ATG1.

В настоящей работе мы показали, что у гаплоидного штамма 8-7А-Д832 (sup35::TRP1 [CEN SUP35 URA3]) замещение аллели SUP35 дикого типа на мутантную аллель sup35-AGG₁ или sup35-ATG1 приводит к снижению жизнеспособности при выращивании клеток на глюкозе, но не является летальным. Нами также показано отсутствие жизнеспособности дрожжей у штамма 19А-Д780 (sup35::TRP1 [CEN SUP35⁺ URA3]) при замещение аллели SUP35 дикого типа на мутантную аллель sup35-AGG₁ при выращивании клеток на среде с галактозой и содержащей 0.1% глюкозы. Мутация sup35-AGG₁ также приводит к летальности при любых проверенных условиях выращивания как у гибрида, полученного в скрещивании 19А-Д780 х 8-7А-Д832, так и у автодиплоидов, полученных у обоих родительских штаммов. Нами получена серия плазмид, несущих ген ADE2 в качестве селективного маркера и аллель гена SUP35 дикого типа или мутантные аллели sup35-AGG₁ или sup35-ATG1. Разработана система для скрининга генов, участвующих в процессе регуляции транскрипции и трансляции гена SUP35 в различных физиологических условиях.

Основные конструктивные, технологические и технико-эксплуатационные характеристики: дрожжи Saccharomyces cerevisiae являются удобным модельным объектов для исследования базовых физиологических процессов, происходящих в клетке. В частности могут служить прекрасным объектом для изучения эволюционно консервативных генов, кодирующих компоненты аппарата трансляции и транскрипции.

Степень внедрения: полученные данные о регуляции экспрессии эволюционно консервативного гена SUP35, контролирующего один из важнейших процессов жизнедеятельности клетки- синтез белка, могут быть использованы при чтении лекций.

Рекомендации по внедрению или итоги внедрения результатов НИР: Использование полученных данных при чтении курсов лекций ‘’Молекулярная биология’’, ‘’Молекулярная генетика’’, ‘’Генетический контроль трансляции’’.

Область применения: исследование базовых механизмов синтеза белка.


Экономическая эффективность или значимость работы: результаты работы могут иметь значение для понимания механизмов регуляции экспрессии генов на уровне транскрипции и трансляции в зависимости от физиологических условий.

Прогнозные предположения о развитии объекта исследования: развитием объекта исследования может быть разработка новых систем контроля синтеза белка

Результаты опубликованы в 1 статье и 2 тезисах.