Экспериментально-клиническое обоснование применения импульсного низкочастотного электромагнитного поля при сочетанных заболеваниях, объединенных недифференцированной дисплазией соединительной ткани 14.

Вид материала

Автореферат

Содержание Экспериментальные исследования Клинические исследования Метод лечения Результаты собственных исследований Результаты клинических исследований Практические рекомендации

Подобный материал:

• Экспериментально-клиническое обоснование применения импульсного низкочастотного электромагнитного, 103.49kb.
• Перечень медицинских услуг при заболеваниях костно-мышечной системы и соединительной, 58.61kb.
• Автореферат диссертации на соискание ученой степени, 379.98kb.
• 1. Общая характеристика системы соединительной ткани, 474.44kb.
• Клинико-инструментальные особенности острых нарушений мозгового кровообращения у лиц, 396.55kb.
• А мышечной ткани, б соединительной ткани, в эпителиальной ткани, 45.82kb.
• Экспериментально клиническое обоснование комплексной терапии больных частичной атрофией, 673.15kb.
• Е. Г. Мартемьянова синдром недифференцированной дисплазии соединительной ткани и заболевания, 203.63kb.
• О единицах и размерностях основных характеристик электромагнитного поля, 207.94kb.
• Компьютерная программа «Методика диагностики и алгоритмированного выбора терапии Дисплазии, 1454.14kb.

Таблица 1.

Распределение детей по возрасту

Количество	Возраст (лет)	Итого:
детей	7 - 9	10 - 13	14 - 16
абсолютное	39	65	32	136
%	28,7	47,8	23,5	100

^ Экспериментальные исследования


Экспериментальные исследования были проведены на базе Центральной научно-исследовательской лаборатории при Российском государственном медицинском университете на 21 молодом кролике-самце породы «шиншилла» с исходной массой тела 2,0 - 2,5 кг. Исследования проведены в соответствии с основными положениями международной резолюции ARVO (Ассоциации по офтальмологии и исследованию зрения).

В условиях хронического эксперимента для создания оптимального варианта модели миопической болезни на первом этапе на 9 кроликах (18 глаз) было отработано введение под конъюнктиву в зону экватора глаза ферментных препаратов по различным схемам. В зависимости от технологии моделирования миопической болезни все животные были подразделены на 3 группы: в 1-й группе ежедневно в течение 4 мес. осуществляли введение под конъюнктиву в зону экватора глаза лидазу 64 ЕД; во 2-й - под конъюнктиву в зону экватора глаза вводили лонгидазу 3000 МЕ один раз в 3 дня; в 3-й - подконъюнктивальные инъекции препарата «Лонгидаза» 3000 МЕ (1 раз в 3 дня) сочетались с введением гипертонического раствора хлорида натрия (5%). Правый глаз был контрольным, левый - опытным.

Эффективность моделирования миопической болезни определялась в соответствии с динамикой клинической рефракции опытного глаза по сравнению с контрольным. Усиление клинической рефракции до 1,0 дптр расценивали как положительный эффект, а отсутствие динамики – как отрицательный эффект.

В качестве основной модели экспериментальной миопической болезни использовали модифицированную нами методику ферментативного протеолиза О.П. Панкова, О.С. Комарова (1990). Эксперименты выполнены на 6 кроликах-самцах породы «шиншилла» с исходной массой тела 2,0 - 2,5 кг. В зону экватора левого глаза экспериментальных животных под конъюнктиву вводили 1 мл раствора лонгидазы 3000 МЕ (1 раз в 3 дня) в сочетании с ежедневным введением гипертонического раствора хлорида натрия (5%). В течение 10 мес. на данной группе были изучены закономерности изменения анатомо-оптических параметров глаз, а через 10 мес. и гемодинамические показатели контрольных и опытных глаз.

В качестве модели хронического воспаления в желудке использовали экспериментальную модель хронической ацетилсалициловой язвы (Оболенцева Т.В. с соавт., 1974). Эксперименты выполнены на группе кроликов с моделированной миопической болезнью (6 кроликов). В контрольную группу вошли 3 кролика. Животным контрольной группы под наркозом внутрижелудочно вводили физиологический раствор. Животным опытной группы через зонд вводили ацетилсалициловую кислоту в дозе 200 мг/кг массы тела 2 раза в сутки. Зонд использовали адекватного диаметра с меткой, соответствующей положению кончика зонда в желудке. Через 10 дней после второго введения ацетилсалициловой кислоты животных выводили из эксперимента, извлекали желудок и фотографировали его, подсчитывали количество язв, а площадь повреждений оценивали с помощью бинокулярной лупы с окуляр-микрометром.

В работе применяли следующие методики исследования.

Эхобиометрические исследования осуществляли на аппарате «Ultrasonic Biometer Model 820» (США). Измеряли длину переднезадней оси глаза и вертикальный диаметр.

Клиническую рефракцию и преломляющую силу роговицы определяли с помощью авторефрактометра «Mirae Optics (Charops) MRK-2000» (Япония).

Исследование центральной толщины роговицы выполнялось с использованием ультразвукового пахиметра «Ultrasonic pachymeter» (США).

Оценка состояния микроциркуляции в ресничном теле и тканях желудка кроликов проводилась при помощи контактной лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) на анализаторе ЛАКК-02 (НПП «ЛАЗМА», НПО «Биофизика», Москва) с использованием гелий-неонового датчика длиной волны 0,63 мкм. Зондируемый объем ткани в исследовании составлял до 1 мм³ (Крупаткин А.И., Сидоров В.В., 2005). Оценивали показатель микроциркуляции или перфузии крови (ПМ), а также изучали амплитудно-частотные характеристики микроциркуляции. Количественно оценивались амплитуды: эндотелиальной активности (А_э), обусловленной функционированием эндотелия (выбросом вазодилататора NO); нейрогенной активности (А_н), отражающей нейрогенную регуляцию прекапиллярных микрососудов (артериол); миогенной активности (А_м) отражающей активность гладкомышечных клеток стенки прекапиллярных сфинктеров; дыхательных колебаний (А_д) характеризующих венулярный отток по венулам; кардиоритма в диапазоне 50 - 180 колебаний/мин (А_с), характеризующего величину притока артериальной крови по артериолам. Рассчитывались также нейрогенный (НТ) и миогенный тонусы (МТ).

Микрогемодинамику желудка и ресничного тела у животных с моделированной сочетанной патологией изучали под общей анестезией. Применяли двухкомпонентный наркоз: для премедикации вводили 2% раствор ксилозина гидрохлорида (рометар). Через 10 - 15 мин. внутривенно в краевую вену уха вводили золетил-50 в дозе 6,6 мгкг массы тела. Для исследования микроциркуляции вскрывали брюшную полость и устанавливали зонд на стенку фундальной части желудка. В течение всего эксперимента желудок был защищен от высыхания и действия света, поддерживалась постоянная температура животных. Замеры проводились в течение 5 мин.

При записи допплерограммы с ресничного тела датчик устанавливался на глазное яблоко (область проекции ресничного тела) при максимальном открытии глазной щели.

Кролики с моделированной сочетанной патологией (миопическая болезнь, сочетающаяся с хроническим воспалением желудка) подвергались воздействию импульсным низкочастотным электромагнитным полем на область головы животных в течение 10 дней, дистанционно, через излучатель, расположенный на расстоянии 20 - 30 см от глаз, и напряженностью поля в зоне воздействия 1 - 2 мВ/см². Частота следования импульсов ежедневно менялась как 40 - 60 - 80 - 60 - 40 - 60 – 80 - 60 - 40 - 60 Гц. Воздействие производилось ежедневно в течение 9 мин.

Морфологические исследования комплекса тканей глазного яблока (склера, ресничное тело, радужка, сосудистая оболочка, сетчатка) животных с моделированной миопической болезнью проводились традиционными гистологическими методами и с помощью трансмиссионного электронного микроскопа «JEM - 100» (Япония), совместно с доцентом кафедры гистологии лечебного факультета канд. биол. наук А.А. Древалем и доцентом кафедры морфологии медико-биологического факультета РГМУ канд. биол. наук Г.В. Ставицкой. Материалом для исследования с помощью трансмиссионной электронной микроскопии явились также образцы склеры опытных и контрольных глаз после курса воздействия ИНЭМП на область головы животных.


^ Клинические исследования


Материалы и методы исследования

В клиническое исследование были включены 136 детей, находившихся на диспансерном учете у гастроэнтеролога и офтальмолога с диагнозом близорукость приобретенная, прогрессирующая, сочетающаяся с хроническим гастродуоденитом. Гастродуоденит был верифицирован на основании общепринятых диагностических методов, в том числе УЗИ органов брюшной полости и эндоскопии, длительность заболевания - не менее 2 лет.

Все дети были разделены на две группы. Основная группа состояла из 73 детей (146 глаз) с близорукостью низкой (0,5 - 3,0 дптр), средней (3,25 - 6,0 дптр) и высокой (6,25 - 8,0 дптр) величины. Технология лечения пациентов основной группы включала диетотерапию (стол 5), ингибитор протонной помпы (омепразол), антацидные препараты (маалокс, алмагель, фосфалюгель) и дополнительно применялась ИТ.

Дети контрольной группы были идентичны пациентам из основной группы по возрасту и величине близорукости, сочетающейся с экстраокулярной патологией в виде хронического гастродуоденита. Несмотря на рекомендации эти дети в течение 2,5 - 3-х лет не применяли никакого специального лечения глаз, а только базисную терапию хронического гастродуоденита.

Отбор больных проводился из числа пациентов, находившихся под наблюдением в Детской городской поликлинике № 103 (главный врач - А.А. Жарких) и в офтальмологическом кабинете Центра образования №109 (директор - доктор пед. наук, член-корр. РАО Е.А. Ямбург) ЮЗАО г. Москвы. Близорукость, сочетающуюся с хроническим гастродуоденитом, рассматривали как патологию, ассоциированную с синдромом ДСТ, на основании наличия у детей внешних фенотипи­ческих признаков дисплазии соединительной ткани, выявленных при анализе данных анамнеза жизни, за­болеваний ребенка, а также оценки клинического состояния ребенка и осмотра с помощью комплекса специальных методов исследования (Beighton P., Horan F.T., 1970; Нечаева Г.И., Викторова И.А., 2007; Воронцов И.М., Мазурин А.В., 2009).

Выявление внутренних фенотипи­ческих признаков ДСТ сердца и желудочно-кишечного тракта у детей проводи­лось совместно с врачом отделения функциональной диагностики ГУ РДКБ Росздрава к.м.н. М.А. Швецовой. Изучение соединительно-тканных структур сердца, клапанных регургитаций, малых аномалий сердца проводилось в В-режиме с использованием цветного картирования, переменного и постоянного допплера на УЗ-аппарате «Voluson 730 Expert» (США) секторальным датчиком при частоте излучения 2 - 5 МГц. Ультразвуковое исследование (УЗИ) органов брюшной полости проводилось натощак и с нагрузочными пробами на УЗ-аппарате «Voluson 730 Expert» (США) конвексным датчиком при частоте излучения 2 - 7 МГц.

Офтальмологические исследования выполнены с использованием современной диагностической аппаратуры с помощью принятых в офтальмологии методик. Офтальмологическое обследование состояло из визометрии, офтальмоскопии, биомикроскопии (щелевая лампа SL-30 фирмы «Opton», Германия), авторефрактометрии (авторефрактометр «Mirae Optics Charops MRK-2000», Япония) и скиаскопии, эхобиометрии (эхоофтальмобиометр «Ultrasonic Biometer Model 820», США). Эхобиометрия включала измерение переднезаднего размера глаза (ПЗО), глубины передней камеры, толщины хрусталика. Определение запаса относительной аккомодации осуществлялось по методике Э.С. Аветисова (1976).


^ Метод лечения

Лечение близорукости, сочетающейся с экстраокулярной патологией в виде хронического гастродуоденита, осуществили 73 пациентам по разработанной нами технологии, включающей проведение консервативной терапии хронического гастродуоденита и дополнительное дистанционное воздействие импульсным низкочастотным электромагнитным полем. Использовали отечественный аппарат «ИНФИТА», являющийся электромагнитным физиотерапевтическим аппаратом, предназначенным для применения в физиотерапевтических отделениях (кабинетах) лечебно-профилактических медицинских учреждений (Маркаров Г.С., 2008).

Воздействие импульсным низкочастотным электромагнитным полем на область головы осуществлялось через излучатель, расположенный на расстоянии 20 - 30 см от глаз больного, и напряженностью поля в зоне воздействия 1-2 мВ/см², с ежедневной экспозицией поля на одной частоте не менее 9 минут, в течение 10 дней, при этом частота следования импульсов ежедневно менялась как 40 - 60 - 80 - 60 - 40 - 60 - 80 - 60 - 40 - 60 Гц.

Статистическая обработка данных экспериментальных и клинических исследований выполнялась по статистическим алгоритмам с применением лицензионных программных средств Microsoft, входящих в состав пакета программ «Office 2003» и программы статистической обработки «Statistica 6.0». Определяли: М - среднюю арифметическую; m - ошибку средней арифметической; min - max – доверительный интервал для генеральной средней; р - коэффициент достоверности, проводилось также непараметрическое сравнение по критерию Стьюдента. Достоверной считалась разница средних величин при р < 0,05 (95% уровень значимости) и при р < 0,01 (99% уровень значимости).


^ РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ


Результаты экспериментальных исследований

Сравнительные результаты экспериментальных исследований на основе ферментного протеолиза показали, что наиболее эффективным для моделирования миопической болезни является способ, основанный на ферментативном расщеплении коллагена в сочетании с методом, периодически повышающим ВГД. Подконъюнктивальные инъекции препарата «Лонгидаза» 3000 МЕ в сочетании с введением гипертонического раствора хлорида натрия (5%) способствуют возникновению дистрофической формы близорукости - миопической болезни с клиническими и морфологическими признаками, характерными для этого процесса. Разработанный нами сочетанный метод моделирования миопической болезни позволил получить средний рефракционный эффект через 10 мес., составляющий -3,75 ± 0,22 дптр.

Результаты изучения закономерностей изменения анатомо-оптических параметров глаз животных при моделировании миопической болезни выявили, наряду с усилением клинической рефракции, истончение роговицы и усиление ее преломляющей силы в вертикальном меридиане, форма глаза от сжатого эллипсоида трансформировалась в шаровидную, а затем приобрела характер вытянутого эллипсоида.

При биомикроскопии глаз животных с миопической болезнью выявлялись дистрофические изменения в радужке в виде стушеванности рисунка, с вымыванием пигмента, а также мидриазом зрачка. Как показали проведенные исследования, при формировании миопической рефракции увеличение размера глазного яблока происходит первоначально по экватору, и только потом, при сформированной миопической рефракции наблюдается преимущественная деформация глазного яблока в заднем полушарии, что согласуется и с литературными данными (Иомдина Е.Н., 2000).

Для выяснения сходства экспериментальной модели миопической болезни со своим клиническим оригиналом по основным звеньям патогенеза, а также для уточнения их особенностей нами изучена микрогемодинамика в ресничном теле и морфологические нарушения в тканях глазного яблока, поскольку многие авторы указывают на значение этих факторов в развитии близорукости (Волколакова Р.Ю., 1980; Аветисов С.Э., 1999; Тарутта Е.П., Иомдина Е.Н., 2001).

На экспериментальной модели миопической болезни прижизненными неинвазивными исследованиями микроциркуляции установлено статистически значимое повышение периферического мышечного сопротивления артериол (табл. 2).

Таблица 2.

Показатели амплитуды частот в микроциркуляторном русле ресничного тела экспериментальных животных при моделировании миопической болезни и естественной (физиологической) клинической рефракции

Показатели амплитуды частот	Клиническая рефракция глаз животных
(А), пф.ед.	миопия	гиперметропия
Аэ	0,32 ± 0,05	0,36 ± 0,02
Ан	0,44 ± 0,04*	0,53 ± 0,05
Ам	0,49 ± 0,02*	0,61 ± 0,04
Ад	0,62 ± 0,1	0,59 ± 0,05
Ас	0,37 ± 0,07	0,38 ± 0,04

Примечание: А_э – амплитуда эндотелиальных колебаний; А_н – амплитуда нейрогенных колебаний; А_м - амплитуда миогенных колебаний; А_д – амплитуда дыхательной волны; А_с – амплитуда пульсовой волны; *р<0,05 по сравнению с показателем рефракции глаз с гиперметропией.


Электронно-микроскопическими исследованиями склеры глаз кроликов с миопической болезнью установлено, что значительным изменениям подвергается ультраструктурная организация коллагеновых волокон: они истончаются, нарушается естественных ход волокнистых структур, наблюдаются процессы деструктуризации фибрилл, вплоть до зернистого распада. Серьезные изменения на данной модели происходят в микроскопическом строении эластического волокна: наблюдается утолщение гомогенной части с одновременным разрушением микрофибриллярной обертки (фибриллинов). Нарушения в структуре волокнистых компонентов склеры происходят на фоне увеличения содержания аморфного основного вещества ткани.

Полученные нами морфологические данные свидетельствуют о преобладании среди клеток склеры глаз с миопической болезнью функционально активных фибробластов. При этом особенности микроскопической организации синтетического и митохондриального аппаратов части клеток отражают напряженность пластических процессов и, как следствие, присутствие в склере клеток с дистрофически-деструктивными изменениями ультраструктуры, а также клеточных форм с бесструктурными зонами. В склере глаз с миопической болезнью выявлено отсутствие клеток, ультраструктура которых свидетельствовала бы о высоком уровне энергетических и пластических процессов, протекающих в клетках. Очевидно, несмотря на активацию фибробластов склеры при миопической болезни и усиление биосинтеза коллагена, происходит истощение компенсаторно-приспособительных возможностей склеры, усиливающее деструктивные изменения в ней и приводящее к растяжению глазного яблока в заднем полушарии. Данное предположение находит подтверждение в ранее выполненных исследованиях (Волколакова Р.Ю., 1980).

Целью следующего этапа экспериментальных исследований явилось воспроизведение хронической патологии желудка. При выборе модели хронической патологии желудка мы исходили из определенных требований. Модель должна была включать истинно хроническое поражение желудка, быть технически простой, хорошо поддаваться стандартизации и легко воспроизводиться на лабораторных животных.

Из множества моделей экспериментальной хронической патологии желудка, описанных в литературе, была выбрана модель ацетилсалициловой язвы (Оболенцева Т.В. с соавт., 1974). Она позволяет получить хроническую патологию желудка, весьма сходную с дефектом аналогичного органа у человека.

Модель ацетилсалициловой язвы желудка была воспроизведена у животных с экспериментальной миопической болезнью. Исследования макропрепаратов желудка опытных животных на воспроизведенной модели подтвердили, что через 10 дней после индукции хронического воспаления, вызванного введением в желудок ацетилсалициловой кислоты, сохраняются признаки умеренной гиперемии, отечности, множественные точечные кровоизлияния, наблюдается нарушение целостности слизистой оболочки желудка в виде многочисленных язв (8,14 ± 1,15). Средняя величина площади язвенных дефектов в опытной группе животных составила 0,38 ± 0,09 см².У животных контрольной группы слизистая желудка была спокойной, язвы отсутствовали. На данной модели также продемонстрировано важное значение нарушений микроциркуляции в развитии нарушений целостности слизистой оболочки желудка.

Изучение на модели сочетанных заболеваний структур глазного яблока, относящихся к гематоофтальмическому барьеру подтвердило данные как о нарушении проницаемости стенки сосудов радужки глаза, так и о тканевой проницаемости. С помощью электронно-микроскопического метода выявлена структурная перестройка органелл эндотелиальных клеток капилляров радужки в виде расширения перинуклеарного пространства и профилей гранулярной эндоплазматической сети, деструкции митохондрий. Для расширенных сосудов радужки характерно увеличение пиноцитозных пузырьков в цитоплазме, наличие цитоплазматических выростов, разрыхление базальной мембраны с истончением в отдельных участках.

В глазах кроликов с моделью сочетанных заболеваний в цитоплазме эпителиальных клеток радужки обнаружены признаки дистрофического процесса: набухание митохондрий, появление в них гранул, вакуолей, практически полное разрушение крист, расширение цистерн эндоплазматического ретикулума, расширение перинуклеарного пространства. Рыхлая волокнистая соединительная ткань радужки практически лишена пигментных клеток. Наблюдается минимальная плотность между коллагеновыми волокнами.

Можно предположить, что нарушение проницаемости гематоофтальмического барьера является одним из важных звеньев в цепи явлений, приводящих к развитию дистрофических изменений в тканях глаза животных с экспериментальной миопической болезнью.

Полученные экспериментальные данные явились основой для экспериментальной разработки патогенетически ориентированного нового метода лечения сочетанных заболеваний.

Из общей патологии известно, что нормализация структуры и функции дистрофически измененной клетки обеспечивается компенсаторно-приспособительными процессами. Данные процессы проходят в своем развитии 3 фазы: становления, закрепления, истощения (Серов В.В., Струков А.И., 1993). Напряжение компенсаторно-приспособительных процессов и тем более усиление функциональных и адаптационных возможностей склеры не может быть полноценно реализовано в условиях дефицита питательных веществ и, более того, само по себе может быть причиной их истощения. Исходя из этого, очевидна целесообразность такого лечения сочетанных заболеваний, которое направлено, с одной стороны, на активацию компенсаторно-приспособительных процессов в различных патологически измененных тканях и, с другой, на устранение диспропорции между необходимым количеством питательных веществ и тем, которое поступает к интенсивно функционирующим тканям.

В связи с этим для осуществления активации компенсаторно-приспособительных процессов в склере, изменения микроциркуляции в тканях глазного яблока и желудка, было предложено использование в лечении сочетанных заболеваний импульсного низкочастотного электромагнитного поля (инфитатерапия). Реализация терапевтического эффекта при дистанционном воздействии ИНЭМП происходит за счет регуляции функций корково-подкорковых структур головного мозга, что подтверждается нормализацией продукции гормонов, деятельности эндорфинной и иммунной систем, а также обмена нейромедиаторов и нейротрансмиттеров (Маркаров Г.С., 2008). При правильном выборе ритма и параметров импульсного низкочастотного электромагнитного поля возможно достичь резонансного влияния, позволяющего при малой интенсивности воздействия значительно изменять функцию органа или системы (Сапожников Я.М., 1997). Экспериментальными исследованиями определены частоты, создающие оптимальные условия для органотипической регенерации склеры (Демидова М.Ю., 2009). Исходя из этого, был проведен сравнительный морфологический анализ склеры здоровых глаз кроликов и глаз с экспериментальной миопической болезнью, сочетающейся с экстраокулярной патологией после применения импульсного низкочастотного электромагнитного поля с ежедневно изменяемой частотой следования импульсов (от 40 до 80 Гц) в течение 10 дней.

Анализ продемонстрировал морфологические признаки компенсаторно-приспособительных процессов. Внутриклеточные перестройки клеток фибробластического дифферона сформировали структурную основу адаптационных реакций соединительной ткани на данные экспериментальные условия. Установлено сходство и различия в субпопуляционных перестройках внутри дифферона фибробластов (табл. 3).

Общими закономерностями ультраструктурных изменений склеры после курса применения ИНЭМП явились: активизация синтетических процессов в фиброцитах; увеличение количества фибробластов с ультраструктурными признаками активного синтеза коллагена; клазмоцитоз у различных клеточных типов склеры; образование регенерата коллагеновой сети, не вовлеченной в воспалительный процесс.

Сравнительными прижизненными исследованиями состояния микроциркуляции крови после курса применения ИНЭМП как в здоровых глазах кроликов, так и глазах с экспериментальной миопической болезнью, сочетающейся с экстраокулярной патологией установлено статистически значимое увеличение среднего значения показателя перфузии (М) (табл. 4). Аналогичная закономерность наблюдалась в тканях как здорового желудка, так и желудка с моделью хронического воспаления (табл. 5).

Таблица 3.

Различия в субпопуляционных перестройках внутри дифферона фибробластов

Критерии	Здоровые глаза	Глаза с экспериментальной миопией
Популяционный состав склеры	Присутствие активных клеточных форм с бесструктурными зонами	Присутствие активных клеточных форм на фоне разрушенных клеток
Функциональная активность клеточного состава склеры	1. Реакция «спокойной» активации 2. Реакция повышенной активации синтетических процессов	1. Реакция повышенной активации синтетических процессов 2. Дистрофически-деструктивные изменения клеточных форм

Детальный анализ функционирования микроциркуляторного русла ресничного тела здоровых глаз экспериментальных животных проведенный с помощью амплитудно-частотного анализа колебаний кровотока показал, что амплитуда миогенных колебаний (А_м) после курса воздействия на область головы импульсным низкочастотным электромагнитным полем увеличилась с 0,61 ± 0,04 пф.ед. до 1,38 ± 0,09 пф.ед. (р < 0,05).

Таблица 4.

Показатель базального кровотока в ресничном теле экспериментальных животных после курса (10 дней) воздействия на область головы ИНЭМП

Срок	Показатель базального кровотока М (пф.ед.)
наблюдения	Здоровые глаза	Модель сочетанной патологии
До воздействия	20,32 ± 0,54	14,94 ± 1,15
После курса воздействия	34,60 ± 0,14*	21,15 ± 1,35*

Примечание: М - показатель микроциркуляции; *р < 0,05 по сравнению с показателем до воздействия

Таблица 5.

Показатель базального кровотока в желудке экспериментальных животных после курса (10 дней) воздействия на область головы ИНЭМП

Срок	Показатели базального кровотока М (пф.ед.)
наблюдения	Здоровый желудок	Модель сочетанной патологии
До воздействия	41,27 ± 2,62	14,47 ± 2,29
После курса воздействия	53,14 ± 1,78*	28,74 ± 2,65*

Примечание: М- показатель микроциркуляции; *р < 0,05 по сравнению с показателем до воздействия.

В глазах животных с миопической болезнью, сочетающейся с экстраокулярной патологией, амплитуда миогенных колебаний также статистически значимо увеличилась с 0,48 ± 0,04 пф.ед. до 0,61 ± 0,05 пф.ед. (р < 0,05). Данный факт свидетельствует о снижении периферического мышечного сопротивления артериол (вход микроциркуляторного русла) и, следовательно, об увеличении нутритивного кровотока по артериоловенулярному шунту. Сказанное подтверждает статистически значимое увеличение амплитуды нейрогенных колебаний (А_н) в здоровых глазах (р < 0,05) и тенденцию к увеличению в глазах животных с миопической болезнью, сочетающейся с экстраокулярной патологией. Амплитуда эндотелиальных колебаний, обусловленная функционированием эндотелия и выбросом им вазодилятатора оксида азота (NO), статистически значимо увеличилась с 0,36 ± 0,03 до 1,57 ± 0,04 пф.ед. (р < 0,05) в здоровых глазах и наметилась тенденция к увеличению в глазах животных с миопической болезнью, сочетающейся с экстраокулярной патологией.

Аналогичная закономерность амплитуды миогенных колебаний (А_м ) и нейрогенных колебаний (А_н) наблюдалась как в тканях здорового желудка, так и желудка с моделью хронического воспаления. Различия наблюдались лишь в степени выраженности усиления кровотока. Возможно, положительная динамика в состоянии микроциркуляции крови после курса применения ИНЭМП как в тканях глаза, так и желудка связана со снижением агрегации тромбоцитов и активированием фибринолиза (Евсегнеева И.В., 2001).

Проведенные экспериментальные исследования послужили основой для применения импульсного низкочастотного электромагнитного поля в клинической практике для лечения детей с сочетанной патологией, ассоциированной с недифференцированной дисплазией соединительной ткани.


^ РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ


Клинико-функциональные результаты лечения

Процедуры ИТ дети переносили легко, какие-либо побочные реакции во время использования ИНЭМП не наблюдались. Острота зрения без коррекции после курса применения ИТ в группе детей с низкой и средней величиной близорукости, сочетающейся с хроническим гастродуоденитом, увеличилась в среднем на (0,19 ± 0,01) в 55,6% и 41,7% случаев соответственно, В группе детей с высокой величиной близорукости, сочетающейся с хроническим гастродуоденитом, увеличения некорригированной остроты зрения чаще всего не наблюдалось. Наблюдаемое повышение остроты зрения, вероятно, можно объяснить результатами экспериментальных исследований, показавших усиление кровотока в микроциркуляторном русле ресничного тела без развития в нем застойных явлений и улучшением аккомодационной способности ресничной мышцы за счет увеличения положительной части запаса относительной аккомодации (табл. 6).

Курс применения ИТ вызывает улучшение функционального состояния ресничной мышцы как в группе детей с низкой, так и средней величиной близорукости. Положительная часть запаса относительной аккомодации в группе детей с низкой величиной близорукости, сочетающейся с хроническим гастродуоденитом, увеличилась с - 2,57 ± 0,39 до - 6,01 ± 0,54 дптр в 92,3% случаев (р < 0,05). При средней величине близорукости положительная часть запаса относительной аккомодации увеличилась в 85,7% случаев с - 1,75 ± 0,29 дптр до - 3,09 ± 0,42 дптр (р < 0,05). При высокой величине близорукости положительная часть запаса относительной аккомодации увеличилась только в 44,1%, случаев однако статистически значимой разницы не выявлено (р > 0,05). Отрицательная часть запаса относительной аккомодации во всех группах оставалась без статистически значимых изменений.

Таблица 6.

Изменение запаса относительной аккомодации у детей основной группы после 10 дневного курса применения ИТ

Величина	Число глаз	Среднее
миопии, дптр	всего	Положительная часть ЗОА	значение	p
		повысилась	не изменилась	до лечения	после лечения
0,5 - 3,0	64	92,3%	7,7%	-2,57 ± 0,39	-6,01 ±0,54	< 0,05
3,25 - 6,0	48	85,7%	14,3%	-1,75 ± 0,29	-3,09 ± 0,42	< 0,05
6,25 - 8,0	34	44,1%	55,9%	-0,75 ± 0,29	-1,24 ± 0,31	> 0,05

При анализе клинической рефракции у детей основной группы прошедших 10 -дневный курс ИТ не обнаружены статистически значимые изменения.

Обращает на себя внимание тот факт, что после 10-дневного курса ИТ значительно чаще (66,7 %) наблюдалось уменьшение переднезаднего размера глазного яблока в среднем на 0,31 мм в группе детей с низкой величиной близорукости. В этих же глазах на выявлено увеличение толщины хрусталика в среднем на 0,15 мм (с 3,55  0,02 мм до 3,60  0,1 мм) и уменьшение глубины передней камеры в среднем на 0,25 мм. Различия в толщине хрусталика были статистически достоверны (р < 0,05).

В группе детей со средней величиной близорукости уменьшение переднезаднего размера глазного яблока наблюдалось в 54% случаев, а увеличение - в 15%. Отсутствовали изменения в 31% случаев. В группе детей с высокой близорукостью изменения переднезаднего размера глазного яблока практически отсутствовали.

Таким образом, результаты лечения сочетанных заболеваний у детей, ассоциированных с недифференцированной дисплазией соединительной ткани, отражают эффективность применения ИТ при низкой и средней величине близорукости. Эффективность лечения обусловлена воздействием на одно из патогенетических звеньев развивающейся близорукости.

Отдаленные результаты, прослеженные в сроки от 2,5 до 3 лет, показали, что, несмотря на отсутствие статистически значимых изменений статической рефракции у детей как основной, так и контрольной группы, стабилизация статической рефракции к концу периода наблюдения в группе детей с близорукостью низкой величины, сочетающейся с экстраокулярной патологией, отмечена в 32 (69,6 ± 13,2%) глазах, а ее усиление - в 14 (30,4 ± 13,2%) глазах. Различия статистически значимые (р < 0,001). В группе детей с близорукостью средней величины стабилизация статической рефракции наблюдалась на 22 глазах (55.0%), а с близорукостью высокой величины только в 7 глазах (43,8%) (табл. 7). Однако различия статистически не значимые (р < 0,05).

Таблица 7.

Состояние статической рефракции у детей основной группы, регулярно проходивших курсы лечения ИНЭМП, через 2,5 - 3 года

Величина	Число глаз	р
миопии, дптр	Всего	Статическая рефракция
		увеличение	стабилизация
0,5 - 3,0	46	14 (30,4%)	32 (69,6%)	< 0,001
3,25 - 6,0	40	18 (45,0%)	22 (55,0%)	> 0,05
6,25 - 8,0	16	9 (56,2%)	7 (43,8%)	> 0,05

В контрольной группе стабилизацию близорукости по состоянию статической рефракции наблюдали в 29,8% случаев.

Оценка эффективности лечения детей с близорукостью, сочетающейся с экстраокулярной патологией, проведенная по средним градиентам прогрессирования близорукости, показала, что средний градиент прогрессирования близорукости у детей из основной группы составил 0,32 дптр/год, а у детей контрольной группы - 0,64 дптр/год, т.е. средний градиент прогрессирования в основной группе в 2 раза меньше градиента прогрессирования контрольной группы.

Оценка результатов лечения у 43 детей, регулярно проходивших курсы лечения импульсным низкочастотным электромагнитным полем, и 37 детей контрольной группы проводилась и по частоте рецидивов гастродуоденита в сроки 12 и 24 мес.

Через 12 мес. в контрольной группе детей, получавших только консервативную терапию хронического гастродуоденита, рецидивы заболевания наблюдались у 15 человек (40,5%), а в группе детей, регулярно проходивших курсы лечения импульсным низкочастотным электромагнитным полем в сочетании с консервативной терапией хронического гастродуоденита, рецидивы наблюдались только у 11 человек (25,6%). Спустя 24 мес. вышеописанная закономерность сохранялась (табл. 8).

Таблица 8.

Частота рецидивов гастродуоденита у детей регулярно проходивших курсы лечения импульсным низкочастотным электромагнитным полем в отдаленные сроки

Исследуемые	Число детей
группы	12 мес.	24 мес.
	абс.	%	абс.	%
Основная	11	25,6	9	20,9
Контрольная	15	40,5	14	37,8

Руководствуясь пониманием единства организма как неразрывного целого, современное представление о cочетанных заболеваниях, объединенных недифференцированной дисплазией соединительной ткани требует системного подхода к их лечению. Мы рассматриваем cочетанные заболевания, объединенные недифференцированной дисплазией соединительной ткани, как системный процесс, формирующий структурно-функциональные изменения тканей и органов организма. Поэтому мы полагаем, что включение в разрабатываемую технологию лечения прогрессирующей близорукости, сочетающейся с экстраокулярной патологией в виде хронического гастродуоденита, импульсного низкочастотного электромагнитного поля позволяет через оптико-таламо- и гипоталамо-гипофизарную систему за счет регуляции подкорково-кортикальных биоэлектрических процессов, обмена нейромедиаторов эндорфинной и иммунной систем, гормональной деятельности эндокринных желез, улучшения нейро- и общей гемодинамики нормализовать микроциркуляцию и метаболизм соединительной ткани как в желудочно-кишечном тракте, так и в тканях глаза. Это позволяет сохранить на продолжительный период уровень компенсации у больных с сочетанными заболеваниями, ассоциированными с синдромом НДСТ.

Таким образом, инфитатерапию следует рассматривать как эффективный способ лечения прогрессирующей близорукости слабой и средней величины, сочетающейся с экстраокулярной патологией в виде хронического гастродуоденита. Эффективность метода сохраняется в течение 2,5 - 3 месяцев, что требует проведения повторных курсов лечения с периодичностью 4 - 5 раз в год. Клиническая эффективность применения инфитатерапии у детей с близорукостью, сочетающейся с экстраокулярной патологией, заключается и в сокращении частоты рецидивов хронического гастродуоденита.


ВЫВОДЫ


1. Сочетанное введение экспериментальным животным под конъюнктиву глаза протеолитического фермента (лонгидаза 3000 МЕ) пролонгированного действия с гипертоническим раствором хлорида натрия (5%) и ацетилсалициловой кислоты в желудок в дозе 200 мг/кг массы тела позволяет получить устойчивую модель дистрофической формы близорукости, сочетающейся с экстраокулярной патологией в виде хронического гастрита.

2. На экспериментальной модели миопической болезни установлено, что формирование миопической рефракции сопровождается первоначальным растяжением глазного яблока как в переднезаднем, так и вертикальном направлениях, с последующим преобладанием переднезаднего размера глазного яблока. Наблюдается также уменьшение центральной толщины роговицы, усиление преломляющей силы роговицы в вертикальном меридиане, форма глаза от сжатого эллипсоида трансформируется в шаровидную, а затем приобретает характер вытянутого эллипсоида.

3. Экспериментально, с помощью морфологических критериев оценки, на модели сочетанных заболеваний установлено нарушение проницаемости гематоофтальмического барьера. Наблюдается структурная перестройка органелл эндотелиальных клеток капилляров радужки в виде расширения перинуклеарного пространства и профилей гранулярной эндоплазматической сети, деструкции митохондрий. Для расширенных сосудов радужки характерно увеличение пиноцитозных пузырьков в цитоплазме, наличие цитоплазматических выростов, разрыхление базальной мембраны с истончением в отдельных участках.

4. На модели сочетанных заболеваний показано, что при воздействии импульсным низкочастотным электромагнитным полем наблюдаются ультраструктурные изменения в соединительной ткани в виде активизации синтетических процессов в фиброцитах, увеличения количества фибробластов с ультраструктурными признаками активного синтеза коллагена, появления клазмоцитоза у различных клеточных типов склеры и образование регенерата коллагеновой сети.

5. С помощью лазерной допплеровской флоуметрии на модели сочетанных заболеваний доказано влияние курсового воздействия импульсным низкочастотным электромагнитным полем на микроциркуляцию ресничного тела и желудка. Установлен прирост кровенаполнения в микроциркуляторное русло ресничного тела и желудка, выражающийся в достоверном увеличении показателя перфузии (М), амплитуды миогенных колебаний (А_м), и тенденция к увеличению амплитуды нейрогенных и эндотелиальных колебаний колебаний (А_н).

6. Экспериментально-клиническими исследованиями обосновано применение инфитатерапии при сочетанных заболеваниях у детей, ассоциированных с недифференцированной дисплазией соединительной ткани.

7. Применение ИТ у детей с сочетанными заболеваниями, ассоциированными с недифференцированной дисплазией соединительной ткани, уменьшает частоту обострений гастродуоденита до 25,6%, сопровождается повышением остроты зрения при низкой величине близорукости в среднем на 0,19 ± 0,01 в 55,6% случаев и в 41,7% случаев при средней величине, запаса относительной аккомодации в 85,7% - 92,3% случаев, снижает годовой градиент прогрессирования близорукости до 0,34 диоптрий в год.


^ ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ


При лечении детей с сочетанными заболеваниями, ассоциированными с недифференцированной дисплазией соединительной ткани (близорукостью низкой и средней величины, сочетающейся с экстраокулярной патологией в виде хронического гастродуоденита), рекомендуется применение инфитатерапии включающей воздействие импульсным низкочастотным электромагнитным полем (аппарат ИНФИТА) на область головы через излучатель, расположенный на расстоянии 20-30 см от глаз больного, и напряженностью поля в зоне воздействия 1-2 мВ/см², с ежедневной экспозицией поля на одной частоте не менее 9 минут, в течение 10 дней, при этом частота следования импульсов ежедневно меняется как 40 - 60 - 80 - 60 - 40 - 60 - 80 - 60 - 40 - 60 Гц.

Применение ИТ нецелесообразно в качестве самостоятельного метода лечения детей с сочетанными заболеваниями в случаях наличия близорукости высокой величины и тяжело протекающего синдрома недифференцированной дисплазии соединительной ткани.