Волощенко О. И., Медяник И. А
Вид материала | Документы |
- Л. А. Медяник, заместитель директора по учебно воспитательной работе Макеевская общеобразовательная, 180.24kb.
- Волощенко Людмила Ивановна конспект, 18.55kb.
- Менеджмента качества в современном университете, 4790.57kb.
Продолжение
| Концентрация | | | | Процент | | |
| раствора, % | | Увеличение | Время | уменьшения | Процент вос- | |
Наименование CMC | | | Эффект действия | рН кожи после мытья | восстановления рН ко- | количества липидов ко- | становления |
| | | | | | | липидов ко- |
| испы- | реко- | на кожу | рук | жи, ч | жи после | жи рук че- |
| туемого | мендуемого | | | | мытья рук | рез 4 ч |
Моющая паста «Био» с протосубтили- | | | | | | | |
ном ГIOХ (1 г CMC-1000 ед/г) | 2 | 2 | » | 0,8 | 2 | 75,0 | 50,0 |
СМП «Биос» с протосубтилином и | | | | | | | |
стабилизатор лизин | 2 | 2 | » | — | — | 77,0 | 40,0 |
и стабилизатор казеин | 2 | 2 | » | — | — | 53,0 | 80,0 |
СМП «Биос» с протосубтилином | | | | | | | |
ГIOХ+лизин+СаСl2 | 2 | 2 | » | — | — | 25,0 | 30,0 |
СМП «Биос» с протосубтилином+ка-зеин + СаСl2 Паста «Био-миг» на метаупоне и про- | | 9 | | — | — | 25,0 | 80,0 |
| | | Нет раз- | | | | |
тосубтилине | 2 | 1,0 | дражения | — | — | 48,3 | 67,3 |
Паста «Био-миг» с протосубтилином и | 2 | 1,0 | | | | | |
казеином | 2 | 2 | » | — | — | 50,0 | 81,8 |
СМП (с протосубтилином, алкил- | 2 | 2 | | | | | |
сульфонатом) — 1 в. | 0,8 | 0,2 | » | 1,0 | 1,0 | 61,0 | 78,3 |
» — 2 в. | 0,8 | 0,2 | » | 1,5 | 1.0 | 39,6 | 73,4 |
Протосубтилин ГIOХ | 0,4 | 0,2 | » | — | — | 65,7 | 98,6 |
» ГЗХ | 0,8 | 0,2 | Раздраже- | | | | |
| | | ние | 0,9 | 2,0 | 49,7 | 73,7 |
Французская протеиназа | 0,4 | 0,2 | Нет раз- | | | | |
| 0,8 | 0,2 | дражения | 0,5 | 1,5 | 68,4 | 78,0 |
Болгарская » | . 0,4 | 0,2 | | | | | |
| | | | 1,0 | 1,0 | 50,0 | 87,0 |
Б-74 | 0,8 | 0,2 | » | 0,9 | 1,5 | 45,4 | 80,6 |
Амилосубтилин ГIOХ | 0,8 | 0,2 | Раздраже- | | | | |
| | | ние | 0,6 - | 2,0 | 30,5 | 105,0 |
По мнению авторов, наряду с этим происходят предденатурационные изменения белков кожи, что указывает на взаимодействие ПАВ со структурными и функциональными ее элементами. Очевидно, ПАВ вступают в связь с белковой молекулой, цепь которой развертывается, и тем самым высвобождаются свободные функциональные группы. С последними молекулы ПАВ вступают в связь, что ведет к образованию сложных комплексов.
Способность белков кожи претерпевать обратимые изменения после воздействия CMC является основой восстановления исходного функционального ее состояния. В противном случае более выраженная степень денатурационных изменений белковой молекулы, которая носит частично необратимый характер, по-видимому, может быть основой развития дерматитов разной степени. Последнее совпадает с повышением рН и уменьшением количества липидов на коже рук.
Доказательством предденатурационных изменений белков крови и тканей различных органов после нанесения на кожу CMC или отдельных ПАВ являются данные о кинетике термостойкости белков сыворотки крови и сорбционных свойствах тканей органов.
Изменения времени термостойкости белков сыворотки крови и симметрия сорбционных свойств тканей органов животных имеют обратимый процесс. Они характеризуют уровень адаптационно-компенсаторных реакций организма на действие CMC. При возникновении асимметрии сорбционных свойств белков тканей парных органов наступает новый уровень этих реакций, ведущий к проявлению отрицательного действия CMC на организм. Такое CMC не может быть рекомендовано для применения в быту.
О. И. Волощенко, Ю. А. Карпенко и соавторы (1974), учитывая, что функциональные изменения белков кожи тесно связаны с проявлением ферментативной активности, функцией нуклеиновых кислот и других соединений, провели гистохимический анализ влияния CMC на функцию внутренних органов. Результаты этих исследований показали, что после перорального введения крысам токсических Доз CMC («Рось-71» и CMC с отбеливающим эффектом) и ПАВ (синтамид-5 и первичный алкилсульфат натрия) наблюдается уменьшение количества РНК, ДНК и увеличение гликогена в сердечной мышечной ткани, печени, легких, Одновременно отмечается изменение субстанции Ниссля в клетках головного мозга. При этом происходит взаимодействие ПАВ с липидно-белковыми мембранами. Проникая через них в различные структурные элементы клетки, ПАВ вызывают глубокие нарушения ее структурных и функциональных элементов. Изучая эти молекулярные изменения, Можно более точно установить уровень предельно допустимых концентраций или вредности того или иного химического агента во внешней среде.
Разработка новых рецептур CMC должна быть направлена на подбор таких бинарных, тройных и других смесей ПАВ, которые при наличии высокой моющей способности CMC не вызывали бы резкого обезжиривания кожи и денатурации ее белков.
Французская щелочная протеиназа (протеолитическая активность 170 000 ед/г). В острых опытах на белых крысах после одноразового нанесения на кожу передней стенки живота раствора французской щелочной протеиназы установлено, что ее абсолютно смертельная доза составляет 6,4 г/кг, среднесмертельная доза — 3,19 г/кг массы. Клиническая картина интоксикации животных после каждой аппликации раствора проявлялась отсутствием аппетита, снижением массы, адинамией. Гибель части животных наступала через 2—3 дня после начала острого опыта. Результаты этих исследований показали, что по сравнению с контролем морфологический состав периферической крови белых крыс колебался на уровне тех же величин, за исключением достоверного повышения содержания гемоглобина. При некоторых дозах раствора (3,2, 4,8, 6,4 г/кг), наносимого на кожу животных, на 2-й день опыта отмечено повышение количества- белка и холестерина в сыворотке крови.
После аппликации на кожу белых крыс французской щелочной протеиназы в дозе 3,2 г/кг наблюдались некоторые изменения количества АТФ, РНК, ДНК в тканях печени, почек, мозга, кожи. Учитывая, что в раствор CMC фермент вводится в количестве 1 г, а в рабочем растворе CMC составляет 0,1 %, то обнаруженные изменения некоторых показателей указывают на недопустимость завышения концентрации фермента выше 0,1 %. После ежедневного нанесения в течение 3 мес на кожу гвинейских свинок 1 мл 0,4 % раствора французской щелочной протеиназы (в 4 раза выше рекомендуемой дозы), раздражающее и аллергизирующее действие на кожу не наблюдается. При этом морфологический состав периферической крови животных претерпевает незначительные изменения по сравнению с контролем. Отмечено статистически достоверное увеличение содержания холинэстеразы в крови — с 647 ммоль/г-л (контроль) до 857 ммоль/г-л (опыт). По сравнению с контролем повышались содержание холестерина в сыворотке крови (в 1,4 раза), активность каталазы крови и аланиновой трансаминазы (в 2 раза). Однако эти изменения (Р>0,05) колебались в пределах физиологических величин, что свидетельствует об адаптационных реакциях организма. Мытье рук испытуемыми лицами в течение 20 мин на . протяжений 1 мес в 0,4 % или 0,8 % растворе французской щелочной протеиназы не вызывало раздражения и сенсибилизации кожи кистей и предплечий. При этом рН кожи рук повышалась на 0,6 единиц по сравнению с фоном и через 1 ч после прекращения контакта с раствором фермента достигала первоначальных величин. Содержание общих липидов уменьшалось на 68,4 % по сравнению с фоном (после работы с 0,4 % раствором). Через 2 ч после прекращения мытья рук оно восстанавливалось до 80 % исходного уровня. Однако на протяжении последующих 2 ч снова определялось более низкое количество липидов кожи рук (53— 49 % исходных величин).
После контакта кожи рук с 0,8 % раствором фермента количество липидов в течение 4 ч составляло 80 % фона. Через 36 ч после контакта кожи рук с 0,4 % раствором энзима содержание аминокислот на ее поверхности было ниже (0,033 мг/см2), чем до эксперимента (0,068 мг/см2; Р<0,01); 0,8% раствор этого энзима вызывал их увеличение с 0,037 мг/см2 (фон) до 0,049 мг/см2. На основании проведенных исследований установлено, что французская щелочная протеиназа может быть введена в состав энзимо-содержащих CMC в 1 % концентрации.
Болгарская щелочная протеиназа АПБ-74 (ПС-80000 ед/г). После одноразового нанесения на кожу белых крыс растворов болгарской щелочной протеиназы в дозах 4, 8, 12, 16 г/кг развивался некроз участков кожи, отмечались адинамия животных, отсутствие аппетита, снижение массы. Гибель крыс наступала в разное время, в основном в течение первых 2 сут после начала опыта. При этом ЛД50 этого фермента для белых крыс превышала 16 г/кг.
По данным острого опыта, среднесмертельная доза (ЛД50) для белых крыс после одноразового введения в желудок водного раствора болгарской протеиназы АПБ-74 колебалась от 7,2 г/кг до 9,0 г/кг. При дозах выше 12 г/кг наблюдались цианоз носа, взъерошенная шерсть, односторонняя контрактура мышц шеи, некоторая заторможенность; на 2—3-й сутки отмечалась гибель животных. Изменений в составе периферической крови (количество эритроцитов, лейкоцитов, содержание гемоглобина.00, лейкоформула) не наблюдалось. Однако определялся некоторый лейкоцитоз. Выявление холестерина в сыворотке крови показало следующие закономерности в зависимости от Дозы введенного фермента: содержание холестерина на 2-й и 8-й дни опыта повышалось по сравнению с контролем в 1,5—2 раза при дозах 4, 8, 12 г/кг, при дозе 16 г/кг отмечалось статистически недостоверное понижение его (с 1,6 ммоль/л до 0,98 ммоль/л) на 8-й день эксперимента.
Содержание общего белка в сыворотке крови при дозах фермента 4 г/кг и 8 г/кг изменялось в пределах величин контроля; при дозах 12 г/кг и 16 г/кг оно соответственно уменьшалось с 6,980 % до 4,8 % и 4,6 % (Р>0,01). На 8-й день опыта наблюдалось пониженное количество общего белка в сыворотке крови на уровне этих же величин. Эти данные указывают на угнетение белковообразовательной функции печени.
Наряду с этим отмечаются некоторые изменения содержания РНК и ДНК в тканях органов. Так, при дозах 8,12,16 г/кг фермента уменьшается количество РНК в коже, мозговой ткани. Определяется тенденция к повышению количества РНК в печени и почках. Содержание ДНК в органах колеблется на уровне величин контроля, однако при дозе 12 г/кг наблюдается статистически достоверное повышение уровня ДНК в. печени. Количество аспарагиновой трансаминазы в сыворотке крови при дозах от 2 г/кг до 9 г/кг находится на уровне величин контроля (100 ммоль/ч-л), а при более высоких дозах (12—16 г/кг) повышается в 1,5—2 раза (160—182 ммоль/ч-л). Такое явление указывает на усиление ферментативной функции печени.Во время 20-минутного контакта рук испытуемых с 0,4 % водным раствором болгарской щелочной протеиназы АПБ-74 (в 4 раза превышавшую рекомендуемую концентрацию для введения CMC) раздражающего и сенсибилизирующего действия на кожу не наблюдалось.
После ежедневного нанесения в течение 1 мес на кожу гвинейских свинок 1 мл 0,8 % раствора (в 4 раза выше рекомендуемой) болгарской щелочной протеиназы АПБ-74 местнораздражающего и аллергизирующего действия не отмечалось. Выявлялась тенденция к снижению количества эозинофильных гранулоцитов от 1,2 % до 0,6 % (Р<0,05). Остальные показатели морфологического состава периферической крови животных колебались на уровне контроля. Определялось статистически достоверное (Р<0,05) увеличение содержания холестерина в сыворотке крови (контроль 2,8 ммоль/л, опыт —4,08 ммоль/л). Несколько повышалась активность каталазы (с 4,47 до 5,62) и холинэстеразы крови (с 647,3 ммоль/ч-л до 729 ммоль/ч-л), трансаминаз сыворотки крови (аланиновой с 4,8 ммоль/ч-л до 8,0 ммоль/ч-л и аспарагиновой с 12,84 ммоль/ч-л до 15,74 ммоль/ч-л), однако эти изменения были недостоверны. рН кожи рук и предплечий при этом увеличивалась на 1 и через 45—60 мин восстанавливалась до исходного уровня, то есть быстрее на час, чем после работы с растворами обычных CMC. Количество общих липидов в этих условиях уменьшалось на 50 % и через 4 ч было исходным. Содержание аминокислот на коже рук после работы с 0,4 % раствором этого фермента через 36 ч увеличивалось с 0,010 мг/см2 (фон) до 0,102 мг/см2; с 0,8 % раствором исследуемого фермента соответственно составило 0,054 мг/см2 и 0,036/см2.
Таким образом, более низкие концентрации болгарской щелочной протеиназы АПБ-74 вызывают распад белков кожи, одновременно усиливая их синтез. Высокие концентрации ее усиливают этот процесс значительнее, подавляя синтез белков кожи, в связи с чем через 36 ч не наблюдается восстановление аминокислот до исходного уровня. Болгарская щелочная протеиназа АПБ-74 в указанной активности может быть рекомендована для введения в состав CMC в 2 % концентрации.
При сравнении токсичности болгарской щелочной протеиназы АПБ-74 и французской щелочной протеиназы установлено, что ЛД100 и ЛД50 первого препарата несколько выше, чем второго. Такое явление, по-видимому, обусловлено разной протеолитической активностью ферментов (у второго препарата она выше). Оба фермента после одноразовой аппликации вызвали статистически достоверное (Р<0,01) повышение содержания гемоглобина в крови, общего белка и холестерина (Р<0,05) в сыворотке крови животных. Указанные изменения биохимических показателей выявлялись также после нанесения на кожу живот-•ных французской щелочной протеиназы в меньшей дозе (4,2 г/кг), что свидетельствует о более высокой токсичности данного препарата.
В хроническом эксперименте (3 и 6 мес) изучались колебания показателей обменных процессов. Установлено, что они не выходили за пределы физиологической нормы под воздействием болгарской (0,8 % раствор) и французской (0,4 %) щелочных протеиназ при равной активности, но дальнейшее повышение содержания указанных протеолитических энзимов в рецептурах CMC недопустимо.
Амилосубтилин ГIOХ (ДС — 3 000 ед/г). После ежедневного нанесения в течение 45 дней на кожу гвинейских свинок 0,5 мл 0,8 % раствора (в 4 раза выше рекомендуемой дозы) амилосубтилина ГIOХ раздражающего и сенсибилизирующего действия не наблюдалось. В период изучения раздражающего действия препарата отмечалось некоторое усиление активности холинэстеразы, каталазы, пероксидазы крови, повышение количества холестерина и белка сыворотки крови, сахара крови. Сенсибилизирующее действие проявлялось увеличением активности холинэстеразы, уменьшением активности каталазы крови (Р<СО,О5), аспарагиновой трансаминазы (Р<0,05), количества холестерина в сыворотке крови. Эти изменения биохимических показателей указывают на напряжение функций печени.
При контакте с 0,2 % и 0,8 % растворами амилосубтилина ГIOХ испытуемые жаловались на зуд, жжение кожи рук, «шероховатость» ногтей, боль в царапинах, ранках. После контакта с 0,8 % раствором наблюдалось резкое покраснение кожи рук (в течение 2 сут), бледно-розовые узелки (в течение 3 сут). Содержание липидов снижалось и через 4 ч восстанавливалось.
На основании проведенных экспериментов установлено, что энзим амилосубтилин ГIOХ в указанной активности может быть введен в состав CMC не выше чем в 1,5 % концентрации.
CMC «Ока» с гранулированной щелочной французской протеиназой (ПС 1 г CMC —1000 ед/г). В острых опытах установлено, что CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой относится к классу малотоксичных веществ. При однократном введении в желудок крыс водного раствора этого вещества ЛД100 составила 10 г/кг массы животного; ЛД50 — 8,13 г/кг. При одноразовом накожном нанесении ЛД100 превышала 35,4 г/кг, ЛД50 — 25,88 г/кг. В хроническом эксперименте после ежедневного нанесения на кожу гвинейских свинок 2 % раствора этого CMC не отмечалось раздражающего и сенсибилизирующего действия. Морфологический состав периферической крови животных существенно не изменился. Количество холестерина, активность аспарагиновой и аланиновой трансаминаз, содержание белка в сыворотке крови, индексы каталазы и пероксидазы крови морских свинок оставались на уровне контроля.
После контакта испытуемых с 1 % и 2 % растворами CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой в течение 20 мин на протяжении 1 мес раздражающего и сенсибилизирующего действия препарата не обнаруживалось. Наблюдалось увеличение рН кожи на 0,8—1,1 единицы и через 90 мин возвращение к исходному уровню.
При работе с 1 % раствором CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой количество липидов кожи рук снизилось на 43,5 %и через 4 ч составляло 70,3 % исходного фона. При контакте с 2 % раствором этого же вещества их содержание уменьшалось на 60 % и через 4 ч достигало только 59,7 % исходного уровня. Следовательно, более высокие концентрации этого моющего средства вызывают длительное обезжиривание кожи.
Количество аминокислот на коже рук при воздействии 1 % раствора через 36 ч соответствовало 0,038 мг/см2 (при фоне 0,020 мг/см2) и после работы с 2 % раствором достигло 0,056 мг/см2 (при фоне 0,036 мг/см2), то есть отмечались деструктивные явления белков кожи рук в течение длительного времени. Очевидно, низкая и продолжительная регенерация липидов, а также усиленный распад белков под влиянием 2 % раствора CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой обусловлены высокой протеолитической активностью фермента. Таким образом, применение CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой должно быть строго регламентировано и рекомендовано к использованию в быту не чаще 1 раза в неделю при условии, что рабочая его кон центрация не будет превышать 1 %, что должно быть указано на этикетке товарной единицы.
CMC «Ока» с гранулированной болгарской щелочной протеиназой (1 г CMC — 1000 ед/г). После одноразового введения в желудок белым крысам раствора этого препарата ЛД100 составляла 8,1 г/кг, ЛД50 — 4,25 г/кг. CMC «Ока» с гранулированной болгарской щелочной протеиназой относится к малотоксичным веществам.
После ежедневного нанесения в течение 3 мес на кожу гвинейских свинок 0,5 мл 2 % раствора исследуемого CMC с ферментом раздражающего и сенсибилизирующего действия препарата не отмечалось. Изучение биохимических показателей крови (содержание общего белка, активность трансаминазы, количество холестерина в сыворотке крови, индексы каталазы и пероксидазы крови), а также морфологического состава периферической крови животных показало незначительное изменение физиологических показателей. Исследование 1 % и 2 % растворов CMC «Ока» с болгарской щелочной протеиназой проводилось на протяжении 30 дней в течение 20 мин на людях-добровольцах. При этом не отмечалось раздражающего действия препарата на кожу рук. Однако у отдельных лиц с повышенной чувствительностью наблюдались видимые клинические изменения: стянутость, шероховатость, сухость кожи рук. Эти явления усиливались при повторном контакте с раствором данного препарата. После контакта с 1—2 % раствором рН кожи рук увеличивалась на 1—1,4 единицы по сравнению с фоном и достигала исходных величин через 90 мин. Содержание липидов уменьшалось на 66,7 % по сравнению с фоном или на 41,1 % после контакта с 2 % раствором этого же средства. Через 4 ч после прекращения работы с этим препаратом не наблюдается полной регенерации липидов кожи, то есть отмечается ее длительное обезжиривание. Количество аминокислот в этих условиях восстанавливалось через 36 ч.
Следовательно, CMC «Ока» с болгарской щелочной протеиназой может быть допущено к использованию в быту при условии, что концентрация рабочего раствора препарата, применяемого 1 раз в неделю, не будет превышать 1 %.
Исследования, проведенные по выявлению остаточных количеств ПАВ на коже рук испытуемых после применения энзимосодержащих CMC показали, что присутствие протеолитических ферментов в их рецептуре не препятствует накоплению анионных ПАВ на коже. Так, количество анионных веществ на коже колебалось в пределах 2,04—5,3 мкг/см2.
При сопоставлении острой токсичности двух рецептур CMC «Ока» установлено, что препараты, включающие болгарскую щелочную протеиназу, менее токсичны при пероральном и кожном пути поступления в организм, чем CMC, в рецептуру которых входит французский протеолитический энзим. Сравнивая данные о колебаниях различных биохимических показателей крови подопытных животных после многократного нанесения отдельных протеолитических ферментов и 2 % растворов CMC «Ока» на их основе, можно отметить, что они находились на уровне физиологической нормы. Более высокие (2 %) концентрации раствора CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой, очевидно, вызывают распад белков кожи в течение длительного времени после прекращения контакта с исследуемым раствором. Возможно, низкая и продолжительная регенерация липидов, а также усиленный распад белков под влиянием 2 % раствора CMC «Ока» с французской щелочной протеиназой обусловлены более высокой протеолитической активностью фермента, а также сочетанием ПАВ, входящих в состав CMC. В этом случае наблюдается синергическое действие ПАВ и ферментов на функциональное состояние кожи, хотя точки приложения их влияния на субстрат могут быть различны. Очевидно, протеолитические ферменты взаимодействуют с белковыми компонентами биомембран, создавая условия для связи ПАВ с функциональными группами белка и липидами мембран, вследствие чего наступает гиперхолестеринемия. Следовательно, французской щелочной протеиназы в рецептуре CMC должно содержаться в 2 раза меньше, чем болгарской (с учетом их различной активности).
Пастообразное CMC «Биофлорапон» (1 г CMC — 1000 ед/г). У белых крыс, получавших перорально большие дозы моющей пасты «Биофлорапон» (10—12 г/кг), в первые 10мин после введения препарата наблюдалось резкое возбуждение, затем торможение двигательной активности, через сутки животные погибли. У крыс, получавших пасту в дозе 8 г/кг, отмечалась следующая картина отравления: цианоз носа, взъерошенная шерсть, заторможенность. Гибель наступала в течение первых 2 сут. После одноразового введения в желудок белым крысам раствора этого препарата ЛД100 составляла 8 г/кг, ЛД50 —6 г/кг. При одноразовом нанесении на кожу моющей пасты в разных дозах (4, 7,7, 12,8, 17,1, 15 г/кг) на 3-й день опыта наблюдается облысение животных,.резкая гиперемия,-шероховатость кожи. Животные адинамичны, вялы, теряют массу.
После ежедневного нанесения в течение 3 мес на кожу гвинейских свинок 0,5 мл 2 % раствора энзимосодержа-щего CMC не отмечается раздражающего и Сенсибилизирующего действия. При этом усиливается активность каталазы с 8,5 до 11,86 (Р<0,01) на протяжении всего времени испытания препарата. В период изучения возможного раздражающего действия этого средства на кожу увеличивается активность аланиновой (с 42,6 ммоль/ч-л до 174,6 ммоль/ч-л; Р>0,01) и аспарагиновой (с 37 ммоль/ч-л до 106 ммоль/ч-л; Р>0,01) трансаминаз. Во второй период опыта (изучение сенсибилизирующего действия) активность "аланиновой трансаминазы падает с 34,4 ммоль/ч-л до 21,6 ммоль/ч-л; Р<0,01). Содержание РНК и ДНК в коже, а также морфологический состав крови животных изменялись незначительно. .
Исследование 0,2 % и 2 % растворов моющей пасты «Биофлорапон» проводилось на протяжении 30 дней в течение 20 мин на людях-добровольцах. При этом раздражающего и сенсибилизирующего действия препарата на кожу рук не отмечалось. Активная реакция кожи рук после контакта с растворами оставалась на уровне фоновой (6,0). Содержание липидов после работы с 0,2 % раствором резко снижалось и составляло 29 % фоновой величины (Р<0,05). Через 2 ч после прекращения работы с раствором оно повышалось до 62 %, а через 3—4 ч колебалось на уровне 43—44 % по сравнению с исходным уровнем, то есть отмечалось длительное обезжиривание рук. Количество аминокислот через 48 ч после прекращения контакта кожи с препаратом резко увеличивалось и составляло 0,103 мг/см2 (фон 0,059 мг/см2; Р<0,05). Возможно, наблюдается интенсивный распад белков под воздействием химических веществ, входящих в состав композиции энзимсодержащего CMC.
После 20-минутного контакта кожи рук с 2 % раствором исследуемого моющего средства содержание общих липидов кожи кистей и предплечий испытуемых уменьшалось до 56 % по сравнению с фоном и находилось на этом уровне в течение 3 ч после прекращения работы с раствором. Через 4 ч оно составляло 68,4 % фоновой величины. Количество аминокислот в этих условиях через 48 ч было исходным.
На основании проведенных экспериментов можно сделать заключение, что энзимосодержащее средство «Био-флорапон» отвечает гигиеническим требованиям, предъявляемым к этим препаратам, и может быть рекомендовано к применению в быту. После его использования необходимо применять крем для рук.
Моющая паста с энзимом «Био». После одноразового перорального введения белым крысам раствора пастообразного моющего раствора с энзимами ЛД100 составляет 7,5 г/кг, ЛД50 — 3,5 г/кг. Моющая паста с энзимом «Био» относится к малотоксичным веществам.
Ежедневное нанесение в течение 30 дней на кожу гвинеских свинок 2 % раствора этого препарата не вызывает раздражающего и сенсибилизирующего влияния. Изучение физико-химических свойств (относительная плотность крови, сыворотки, содержание общего белка, гемоглобина, величина гематокрита) крови в этих условиях опыта показало, что они изменялись в пределах величин контроля. Однако время термостойкости белков сыворотки крови удлиняется в 3 раза по сравнению с контролем, что указывает на замедление их денатурационных свойств и свидетельствует о развитии положительных защитных адаптационных реакций организма. Уровень сахара, активность холинэстеразы в крови, щелочной фосфатазы, количество холестерина в сыворотке крови животных после аппликации 2 % раствора исследуемой энзимосодержащей моющей пасты «Био» изменяются в пределах величин контроля. Данные этих опытов указывают на отсутствие изменений гликогенсинтезирующей, ферментативной функций печени, а также липидного обмена.
После 20-минутного контакта кожи рук испытуемых на протяжении 30 дней с 2 % раствором пастообразного моющего средства с энзимами «Био» незначительно повышается рН кожи (на 0,8 единицы), но через 2 ч она восстанавливается до первоначальной величины. Количество общих липидов уменьшается на 75 % по сравнению с фоном и через 4 ч после окончания работы с раствором этого препарата достигает 50 % исходного уровня, то есть отмечается обезжиривание кожи рук. В связи с этим после работы с растворами пастообразного средства «Био» необходимо применять крем для рук.
Таким образом, синтетическое пастообразное средство «Био» отвечает гигиеническим требованиям, предъявляемых, к энзимсодержащим CMC, и может быть рекомендовано для использования в быту.
Порошок стиральный синтетический со стабилизаторами протеолитических энзимов «Биос». Исследовались 4 варианта моющего средства «Биос»: 1-й вариант со стабилизатором ферментов лизином, 2-й вариант — со стабилизатором казеином, 3-й и 4-й варианты имели соответственно те же стабилизаторы с наличием кальция хлорида. Результаты исследований показали, что ежедневное нанесение на кожу гвинейских свинок в течение 35 дней 0,5 мл 2 % растворов одного из вариантов препарата не вызывают раздражающего и сенсибилизирующего действия. Биохимические показатели крови животных (содержание сахара, каталазы и пероксидазы, общих и свободных SH-групп в крови, содержание холестерина, общего белка и активности аспарагиновой трансаминазы в сыворотке), а также ее морфологический состав изменялись в пределах величин контроля. Однако активность холинэстеразы крови достоверно (Р<0,05) изменялась на протяжении всего времени эксперимента под влиянием всех вариантов препарата. Отмечалось также достоверное повышение активности аспарагиновой трансаминазы в сыворотке крови и количества РНК в почках на раздражающее действие «Биос» — 1-й вариант (стабилизатор энзимов — лизин) и количества сахара в крови, а также ДНК в печени и РНК в почках в тот же период эксперимента под влиянием «Биос» — 2-й вариант (стабилизатор энзимов — казеин).

П

Моющее средство «Биос» с теми же ферментами, но стабилизаторы с кальция хлоридом (3-й и 4-й варианты) вызывает незначительное обезжиривание кожи рук, которое Сменяется фазовыми изменениями содержания липидов (рис. 7).
С

Паста моющая синтетическая быстрорастворимая с энзимами. После ежедневной аппликации 0,5 мл 2 % раствора гвинейским свинкам в течение 45 дней местнораздражающего и сенсибилизирующего действия препарата не выявлено. Состав крови, интенсивность углеводного, белкового, липидного обмена, уровень окислительно-восстановительных процессов, активность некоторых ферментов изменялись в пределах величин
контроля.
После многократных 20-минутных контактов в течение 1 мес кожи рук с 2 % растворами моющей пасты не наблюдалось раздражающего и сенсибилизирующего действий. Функциональное состояние (рН, количество липидов и аминокислот) кожи изменялось в пределах величин, наблюдаемых при работе с другими энзимсодержащими CMC.
Следовательно, паста моющая синтетическая быстрорастворимая с энзимами отвечает гигиеническим требованиям, предъявляемым к CMC с ферментами, и может быть рекомендована для использования в быту.
Пастообразное быстрорастворимое средство «Био-миг». Мытье рук в 2 % растворе моющей пасты «Био-миг» (1-й или 2-й вариант) через день в течение 1 мес не вызывает раздражающего и сенсибилизирующего действия. Содержание липидов кожи рук после контакта с 2 °/о раствором моющей пасты «Био-миг» — 1-й вариант составляло 51,7 %, через 2 ч — 55,6 %, через 3—4 ч — 80 % . Количество липи-дов кожи рук после контакта с 2 % раствором «Био-миг» — 2-й вариант соответствовало 50%, через 2 ч —66,6%, через 4 ч —82 %.
Проведенные исследования позволяют рекомендовать моющую быстрорастворимую пасту «Био-миг» — 1-й и 2-й варианты для использования в быту.
ВНИИхимпроект создал новое порошкообразное моющее средство с протеолитическими энзимами, получаемое методом напыления жидких компонентов на твердые в аппарате виброкипящего слоя (ВК.С). Это средство отличается от препарата «Биос» содержанием основных компонентов в композиции. После 20-минутного контакта кожи рук с 2 %. раствором моющего средства каждого из 2 вариантов в отдельности в течение 1 мес не наблюдалось ее видимых клинических изменений. Определение рН кожи рук испытуемых до, после контакта с раствором и через различные промежутки времени после работы с указанным раствором показало, что величина активной реакции кожи увеличивалась на 1 и восстанавливалась к исходному уровню через 1,5 ч (1-й вариант) или через 1 ч (2-й вариант). Содержание общих липидов изменялось следующим образом: 1-й вариант средства — фон—-100 %, после контакта с раствором — 39,13 %, через 3 ч — 67,4 °/о, через 4 ч — 78,26 %; 2-й вариант соответственно — 100, 40,4, 68,8, 73,4 %. На 2-й день испытания препарата отмечался тот же фон содержания липидов на коже, что в 1-й день ее контакта с моющим раствором. Таким образом, через 4 ч после мытья рук в моющем растворе этого средства происходит регенерация липидов на 4/5 (1-й вариант) или 3/4 (2-й вариант) по сравнению с исходным уровнем. На основании полученных результатов этот препарат был рекомендован для использования в быту.