Структурные характеристики железистого и лимфоидного аппаратов двенадцатиперстной кишки человека и в эксперименте у крыс при действии холода и в условиях высокогорья (анатомо-экспериментальное исследование) 14. 03. 01 анатомия человека

Вид материала

Исследование

Содержание Научный консультант Ведущая организация Общая характеристика работы Целью работы Задачи исследования сформулированы следующим образом Научная новизна Практическая значимость Положения, выносимые на защиту Объем и структура диссертации Личный вклад автора. Распределение изученного секционного материала по возрасту Список работ, опубликованных по теме диссертации

Подобный материал:

• Морфофункциональное состояние ободочной кишки и толстокишечных анастомозов при обтурационной, 695.43kb.
• Структурная организация печени и ее регионарных лимфатических узлов при кадмиевой интоксикации, 750.86kb.
• Анатомо-топографические особенности лимфоидных образований прямой кишки человека, 278.63kb.
• Клинико-морфологические аспекты стеноза большого сосочка двенадцатиперстной кишки 14., 262.6kb.
• Морфофункциональные изменения в лимфоидных органах при воздействии экотоксикантов, 865.65kb.
• Патологическая анатомия и дифференциальная диагностика рака большого сосочка двенадцатиперстной, 388.21kb.
• Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки: выбор тактики при кровотечении, 162.13kb.
• Список рекомендуемой литературы. (Эволюция и анатомия нервной системы) Астапова, 10.69kb.
• И. П. Павлова в июне 2011 года Анатомия человека п 15/145/М 69-но михайлов, Сергей, 406.76kb.
• И физиология. Лекции. Оглавление, 3129.02kb.

На правах рукописи


Ибодов Саидмукум Тиллоевич


СТРУКТУРНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЖЕЛЕЗИСТОГО И

ЛИМФОИДНОГО АППАРАТОВ ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ ЧЕЛОВЕКА И В ЭКСПЕРИМЕНТЕ У КРЫС ПРИ ДЕЙСТВИИ ХОЛОДА И В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОГОРЬЯ

(анатомо-экспериментальное исследование)


14.03.01 – анатомия человека


АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

доктора медицинских наук


Новосибирск – 2010

Работа выполнена в Таджикском государственном медицинском университете имени Абуали ибни Сино Министерства здравоохранения Республики Таджикистан и в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Московская медицинская академия имени И. М. Сеченова Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию»


^ Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор Никитюк Дмитрий Борисович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Летягин Андрей Юрьевич

доктор медицинских наук, профессор Шмерлинг Михаил Давыдович

доктор медицинских наук, профессор Горчаков Владимир Николаевич


^ Ведущая организация: Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Алтайский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (г. Барнаул)


Защита состоится «___»________2010 г. в ___ часов на заседании диссертационного совета Д 208.062.05 при Новосибирском государственном медицинском университете (630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52; тел.: (383) 229-10-83)


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Новосибирского государственного медицинского университета (630091, г. Новосибирск, Красный проспект, 52)


Автореферат разослан «___» _________ 2010 г.


Ученый секретарь диссертационного совета

доктор медицинских наук, профессор А. В. Волков

^ Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. Структурные особенности лимфоидных и железистых структур стенок полых внутренних органов находятся в сфере пристального внимания как морфологов (Колесников Л. Л., 2008; Cripps A. W. et al., 1991), так и клиницистов (Василенко В. Х. и др., 1971, 1975). Это связано как со значительной ролью периферических органов иммунной системы и малых желез в процессах жизнедеятельности в условиях нормы и при патологии, так и с высокой структурно-функциональной лабильностью, динамичностью этих образований, что позволяет рассматривать их в качестве своеобразных биологических маркеров (индикаторов) при действии на организм любых факторов, включая патогенные. (Никитюк Д. Б., 1990). Следует отметить, что железы стенок внутренних органов и, в частности, двенадцатиперстной кишки, являются часто «анатомической базой» развития ряда патологических процессов (аденокарциномы, аденомы и др.), оказываются задействованы в патогенезе воспалительной (дуоденит, колит) патологии (Aoki K., Taketo M. М., 2007), имеющей существенное медико-социальное значение. Закономерности патоморфогенеза без знания морфологического статуса структур в норме вряд ли могут быть оценены адекватно. Несмотря на успехи в изучении лимфоидной ткани и малых желез в стенках полых внутренних органов в целом (Сапин М. Р., Этинген Л. Е., 1996), морфогенез этих структур в стенках двенадцатиперстной кишки человека остается почти не выясненным. Ряд работ, посвященных морфологическим характеристикам железистого аппарата двенадцатиперстной кишки, выполнены давно и не опираются на правила доказательной медицины (Ломакина Л. И., 1958, 1970), одни работы выполнены при исследовании патологически измененного материала (Семенов Э. В., 2003), другие (Русскина Л. И., 2003) – охватывают лишь частные вопросы, касающиеся морфогенеза этих структур, не обеспечивая реализации в этом плане комплексного подхода к железам и лимфоидным структурам. До настоящего времени остаются не исследованы вопросы, связанные с макро-микроскопической анатомией, топографией, микросинтопией дуоденальных (Бруннеровых) и кишечных (Либеркюновых) желез, лимфоидных структур в стенках двенадцатиперстеной кишки. Не изучены их количественно-нормативные показатели, региональные отличия, возрастно-половые и индивидуальные особенности, что не способствует разработке профилактических схем, лечебной тактике при разнообразной патологии двенадцатиперстной кишки.

Нет данных и о структурных особенностях лимфоидной ткани и железистого аппарата двенадцатиперстной кишки при ее частичной атрезии (врожденной дуоденальной обструкции) – одной из наиболее частых причин врожденной кишечной непроходимости, (Weber T. R. еt al., 1986), являющейся важной хирургической патологией, требующей ургентного вмешательства (Успенский В. М., 1986; Adrick H. S. еt al., 1986; Kimura K. еt al., 1977;1990). Вместе с тем, доказанным является важнейшая роль этих структур в формировании механизмов местного иммунитета, обеспечивающих защиту стенок внутренних органов (Шварцман Я. С., Хазенсон Я. Б., 1978; Magnusson K. E., Stjernstrom I., 1978).

С другой стороны, существенное научное значение имеют материалы о структурных изменениях железистого аппарата и лимфоидных структур при действии холодового стресса и в условиях высокогорья при адаптации к высотам различного уровня (Xing G. еt al., 2008; Rodrigez-Marroyo J. A. et al., 2008). Данные по этому вопросу в научной литературе отсутствуют, что недопустимо. Все обозначенные выше вопросы требует решения.

^ Целью работы явилось комплексное изучение структурных характеристик и закономерностей морфогенеза лимфоидного и железистого аппаратов двенадцатиперстной кишки человека в норме, при атрезии двенадцатиперстной кишки и в эксперименте у крыс при действии холодового стресса и в условиях высокогорья.


^ Задачи исследования сформулированы следующим образом:

1. Изучить морфологические характеристики, микротопографию и клеточный состав лимфоидных образований двенадцатиперстной кишки человека в постнатальном онтогенезе.
   
2. Исследовать структурные особенности дуоденальных и кишечных желез на протяжении двенадцатиперстной кишки человека в возрастном аспекте.
   
3. Проанализировать половые и индивидуальные особенности строения лимфоидных образований и желез двенадцатиперстной кишки человека в постнатальном онтогенезе.
   
4. Изучить особенности строения лимфоидных образований и желез в различных отделах стенки двенадцатиперстной кишки и при разных топографо-анатомических вариантах.
   
5. Выявить морфологические особенности желез и лимфоидных структур двенадцатиперстной кишки новорожденных детей при ее частичной атрезии.
   
6. Изучить морфологические характеристики дуоденальных, кишечных желез и лимфоидных структур двенадцатиперстной кишки крыс при холодовом стрессе.
   
7. Дать характеристику структурным особенностям желез и лимфоидной ткани двенадцатиперстной кишки крыс в разные сроки в условиях высокогорья.
   

^ Научная новизна исследования определяется тем, что в работе впервые и на адекватно подобранном секционном и экспериментальном материале проведено комплексное изучение морфогенеза лимфоидных и железистых структур двенадцатиперстной кишки, выявлены факторы их формообразования.

В работе представлены данные по анатомии и топографии лимфоидной ткани, кишечных и дуоденальных (Бруннеровых) желез двенадцатиперстной кишки, даны количественно-нормативные характеристики их у людей разного возраста и пола, представлены их индивидуальные варианты.

Исследованы структурные особенности лимфоидной ткани и желез двенадцатиперстной кишки у людей разного возраста. Показано, что к моменту рождения как железы, так и лимфоидные структуры имеют достаточную структурную «зрелость». Выявлена гетерохронность наступления максимального количественного и качественного развития лимфоидных структур и желез двенадцатиперстной кишки. Установлено, что максимального развития лимфоидные структуры двенадцатиперстной кишки достигают к раннему детскому возрасту, когда отмечаются наибольшие размеры лимфоидных узелков (длина, ширина, толщина, площадь на срезе), размеры центров размножения в их составе, абсолютное количество клеток лимфоидного ряда у лимфоидных узелков и диффузной лимфоидной ткани, процентного содержания больших и малых лимфоцитов, клеток с картиной митоза в этом возрасте. Показано, что наибольшего развития железистый аппарат двенадцатиперстной кишки определяется в возрасте 22 – 35 лет, что характеризуется максимальными размерами (длины, ширины, толщины, площади на срезе) у дуоденальных и кишечных желез, высоким содержанием абсорбционных и бокаловидных клеток у кишечных желез.

Выявлен комплекс инволютивных изменений лимфоидных структур и желез двенадцатиперстной кишки, показано, что эти изменения со стороны лимфоидной ткани (уменьшение содержания лимфоидной ткани, исчезновение центров размножения в лимфоидных узелках, снижение активности лимфоцитопролиферативных и активизации деструктивных процессов и др.) и желез (уменьшение их размеров, разрастание стромального компонента, расширение выводных протоков и др.) наиболее выражены у людей пожилого и старческого возрастов. Впервые показано, что у долгожителей, по сравнению с людьми старческого возраста, дальнейшие инволютивные изменения желез и лимфоидной ткани двенадцатиперстной кишки почти не определяются.

В результате исследования впервые доказано наличие проксимодистального градиента в распределении лимфоидных и железистых структур в стенках двенадцатиперстной кишки, проявляющегося вне зависимости от возраста и выражающегося в уменьшении в этом направлении количества лимфоидной ткани (размеров и количества лимфоидных узелков, абсолютного количества клеток лимфоидного ряда в их составе и у диффузной лимфоидной ткани), количества и размеров дуоденальных и кишечных желез и некоторых других структурных показателей.

Впервые морфологически доказаны особенности желез и лимфоидной ткани в зонах постпилорического, перифатерального и двенадцатиперстно-тощекишечного сфинктеров, выражающиеся в увеличении плотности расположения, длины, ширины лимфоидных узелков, площади центра размножения в их составе, количества клеток лимфоидного ряда, а также размеров и плотности расположения дуоденальных желез в сфинктерных зонах кишки. Определено, что эти структурные особенности лимфоидных образований и желез в наибольшей степени выражены в области постпилорического сфинктера, в наименьшей – в зоне двенадцатиперстно-тощекишечного сфинктера. Доказано, что размеры и количество лимфоидных узелков и желез в стенках двенадцатиперстной кишки не связано с ее топографоанатомическим вариантом.

Впервые обнаружены половые различия лимфоидных структур двенадцатиперстной кишки, имеющиеся лишь в репродуктивном периоде (юношеский и 1-й период зрелого возраста), проявляющиеся в наличии более крупных лимфоидных узелков и абсолютного количества клеток лимфоидного ряда в стенках двенадцатиперстной кишки у женщин этого возраста, по сравнению с мужчинами. Показано, что половые структурные различия дуоденальных и кишечных желез на всем протяжении постнатального онтогенеза отсутствуют.

Изучена индивидуальная анатомическая изменчивость дуоденальных и кишечных желез, лимфоидных структур двенадцатиперстной кишки, описаны варианты их структурной организации. Доказано, что уровень индивидуальной изменчивости размеров и количества лимфоидных структур, абсолютного содержания клеток лимфоидного ряда в их составе, размеров начальных отделов желез, площади просвета их выводных протоков (амплитуда вариационного ряда соответствующих показателей) на ранних этапах постнатального онтогенеза выражен меньше, чем в пожилом и старческом возрасте, у долгожителей.

Впервые описаны особенности строения желез и лимфоидных структур двенадцатиперстной кишки у новорожденных детей при ее частичной атрезии, которые определены как их «морфологическая регрессия», выражающаяся в уменьшении размеров лимфоидных структур, нарастании уровня клеточной деструкции в их составе, значительном снижении активности процессов лимфоцитопролиферации, разрастании строму в составе дуоденальных желез, кистозном их расширении и др.

Впервые показана высокая структурная лабильность лимфоидных образований и желез двенадцатиперстной кишки по отношению к действию холода и к условиям высокогорья. Впервые показано, что при холодовом стрессе в стенках двенадцатиперстной кишки крыс происходит уменьшение размеров и количества лимфоидной ткани, дуоденальных и кишечных желез.

Выявлено, что при действии факторов высокогорья наблюдаются 3 этапа периода морфологических изменений лимфоидных структур, дуоденальных и кишечных желез двенадцатиперстной кишки крыс. Продемонстрировано, что на 1-м этапе (до 5-ти суток воздействий) наблюдается уменьшение размеров лимфоидных узелков, их центров размножения, абсолютного количества клеток лимфоидного ряда, но без изменений кооперативных взаимоотношений между разными типами клеток лимфоидного ряда, снижение размеров дуоденальных и кишечных желез. На 2-м этапе (к 15-ти суткам) наблюдается нарастание регрессии со стороны лимфоидных и железистых структур (последующее уменьшение размеров лимфоидных узелков, вплоть до их исчезновения, разрастание стромы в железах). Это сочетается с частичной десквамацией покровного эпителия, деструкцией кишечных ворсинок, расширением венул в слизистой оболочке и подслизистой основе кишки, нарастанием уровня клеточной деструкции в самой лимфоидной ткани. На 3-м этапе (после 15-ти суток) наблюдаются процессы адаптации кишечной стенки, ее желез и лимфоидных структур, включая тенденцию к возвращению к исходному уровню их размерных показателей.

^ Практическая значимость данных определяется их новизной, существенным значением полученной информации, тем, что впервые на основании работы были получены данные о морфологических характеристиках лимфоидных образований и желез стенок двенадцатиперстной кишки у людей разного возраста и пола, при разных топографо-анатомических вариантах этого органа. Эта информация будет способствовать оптимизации понимания патогенеза многих заболеваний двенадцатиперстной кишки, разработке схем рациональной профилактики патологии этого органа, ряда других алиментарно-зависимых заболеваний.

Материалы, характеризующие структурные изменения желез и лимфоидной ткани двенадцатиперстной кишки при действии холода и в условиях высокогорья, не только еще раз подтверждают возможность использования данных структур в качестве биологических маркеров при изучении любых воздействий (включая антропогенные), но и должны учитываться при планировании соответствующих экспедиций, в практике альпинизма.

Материалы исследования должны войти в соответствующий курс лекций по морфологическим и некоторым клиническим дисциплинам, использоваться в учебном процессе при подготовке медиков и биологов.

^ Положения, выносимые на защиту:

1. Морфологические характеристики лимфоидного и железистого аппаратов двенадцатиперстной кишки отличаются значительной вариабельностью, зависят от возраста, характеризуются широкой индивидуальной и региональной изменчивостью. Структурные характеристики лимфоидных образований, в отличии от желез двенадцатиперстной кишки, имеют половые особенности.

2. Максимальное количественное и качественное развитие лимфоидных структур двенадцатиперстной кишки наблюдается в раннем возрасте, а ее дуоденальных и кишечных желез – в 1-м периоде зрелого возраста. Инволюция лимфоидных и железистых структур кишки наиболее выражена у пожилых людей, в старческом возрасте и у долгожителей.

3. Лимфоидные структуры и железы двенадцатиперстной кишки крыс отличаются высокой структурной лабильностью к действию факторов высокогорья и холодового стресса.

Апробация. Материалы диссертации доложены и обсуждены на Республиканской научно-практической конференции «Перспективы развития фундаментальных медицинских наук в Таджикистане» и 56-ой годичной конференции ТГМУ «Перспективы развития семейной медицины в республике Таджикистан» (Душанбе, 2008); на годичной научно-практической конференции молодых учёных и студентов ТГМУ им. Абуали ибни Сино, посвященной 80-летию со дня рождения член.-корр. РАМН, заслуженного деятеля науки Республики Таджикистан, профессора М. Г. Гулямова (Душанбе, 2008); на 57-й годичной научно-практическая конференция с международным участием, посвященной 70-летию образования Таджикского государственного медицинского университета им. Абуали ибни Сино.

Внедрение. Результаты работы использованы в практической деятельности Национального медицинского центра Министерства Здравоохранения Республики Таджикистан, Городской клинической больницы № 3, Городской клинической больницы № 5 (г. Душанбе).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 работ, из них 8 статей – в ведущих научных рецензируемых журналах и изданиях, рекомендуемых ВАК для публикаций материалов докторских диссертаций.

^ Объем и структура диссертации. Работа изложена на 254 страницах компьютерного текста и состоит из введения, описаний материалов и методов исследования, обсуждения полученных результатов, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложений. В диссертацию включены 47 таблиц, 28 рисунков. Список литературы состоит из 301 источника, в том числе 169 авторов СНГ и 132 – дальнего зарубежья.

^ Личный вклад автора. Весь материал, представленный в диссертации, получен, статистически обработан и проанализирован лично автором.

Материал и методы исследования

Исследование одобрено локальным этическим комитетом Таджикского государственного медицинского университета имени Абуали ибни Сино.

В работе изучили железистый аппарат и лимфоидные структуры двенадцатиперстной кишки у людей разного возраста. Макро-микроскопическим методом дуоденальные и кишечные железы были исследованы у 127 человек, лимфоидные узелки – у 126 человек, гистологическим методом железы и лимфоидные структуры этого органа изучены у 127 человек (табл.).

Кроме того, гистологическим методом эти структуры были изучены в 5 случаях при частичной атрезии двенадцатиперстной кишки у новорожденных детей (2 мальчика, 3 девочки); контролем для этой группы наблюдений служили препараты, полученные для гистологических исследований в основной группе (11 случаев) при «классической» (подковообразной) форме двенадцатиперстной кишки.

Взаимосвязь между структурными особенностями желез и лимфоидной ткани и топографо-анатомического варианта двенадцатиперстной кишки изучены в сборной возрастной группе - люди зрелого и пожилого возрастов, где подковообразная форма кишки на секции была отмечена в 29 случаях, U – образная форма – в – 5 случаях и кольцевидная форма – в 6 случаях. Дальнейшее отсутствие структурных различий у желез и лимфоидных образований при разных топографо-анатомических вариантах кишки явилось основанием для объединения фактического материала и увеличения числа наблюдений (табл.).

Таблица

^ Распределение изученного секционного материала по возрасту

Возраст	Методы и объект исследования		Микроскопия
	Макро-микроскопия
	Дуоденальные и кишечные железы	Лимфоидные узелки	Дуоденальные, кишечные железы, лимфоидная ткань
Новорожденные (1 – 10 дней)	8	12	11
Грудной (10 дней – 1 год)	10	12	11
Ранний детский (1 – 3 года) 1-й детский (4 – 7 лет)	9 10	12 10	11 11
2-й детский (мальчики – 8 – 12 лет, девочки – 8 – 11 лет)	10	10	10
Подростковый (муж.– 13 – 16 лет., жен.– 12 – 15 лет)	10	8	9
Юношеский (юноши – 17-21 год, девушки – 16 – 20 лет)	10	8	9
Зрелый, 1-й период (муж.-22 – 35 лет, жен.-21 – 35 лет)	12	11	11
Зрелый, 2-й период (муж.-36 – 60 лет, жен.-56 – 74 года)	14	11	11
Пожилой (муж.-61 – 74 года, жен.-56 – 74 года)	14	11	11
Старческий (75 – 90 лет)	12	11	11
Долгожители (старше 90 лет)	8	10	11

Половые различия желез и лимфоидной ткани двенадцатиперстной кишки анализировались гистологическими методами у новорожденных детей (6 мальчиков, 5 девочек), в раннем детстве (6 мальчиков, 5 девочек), в юношеском возрасте (4 мальчика, 5 девочек), в 1-м периоде зрелого возраста (6 мужчин, 5 женщин), в старческом возрасте (5 мужчин, 6 женщин).

Из 385 случаев в 125 смерть людей наступила от асфиксии (инородными телами, пищевыми массами, утопление), травмами – 223 случая (автотравма, падение с высоты и др.), острых нарушений кровообращения – 37 случаев. В выборку не включены случаи, когда на вскрытии фиксировались заболевания пищеварительного тракта или органов иммунной системы. Материал набирался лично автором в период 2002 – 2008 гг.

Для изучения дуоденальных и кишечных желез в макро-микроскопическом поле видения тотальный препарат двенадцатиперстной кишки (127 случаев) приготавливали согласно Р. Д. Синельникову (1948). Железы двенадцатиперстной кишки окрашивали 0,05 % раствором метиленового синего на водопроводной воде, фиксировали в насыщенном растворе пикриновокислого (молибденовокислого) аммония.

Для изучения в макро-микроскопическом поле видения лимфоидных узелков двенадцатиперстной кишки (126 случаев) использовали методику Т. Нellman (1922).

При изучении половых особенностей желез и лимфоидной ткани анализировали выборочные возрастные группы (табл.): новорожденные (6 наблюдений – мужской пол, 5 – женский), раннее детство (6 – мужской пол, 5 – женский), юношеский возраст (6 – мужской пол, 5 – женский), 1-й период зрелого возраста (6 – мужской пол, 5 – женский) и старческий возраст (6 – мужской пол, 5 – женский). В дальнейшем, в тексте приводятся данные и обсуждаются лишь те параметры, где выявлены половые отличия.

При макро-микроскопических исследованиях изучали количество дуоденальных желёз, длину и ширину начального отдела дуоденальных желез, число кишечных желез на площади 1 кв. мм слизистой оболочки.

Методику получения микропрепаратов во всех случаях стандартизировали. Кусочки двенадцатиперстной кишки в 127 случаях для последующего изготовления срезов получали из задней стенки верхней, нисходящей, горизонтальной и восходящей частей кишки, середина каждой из частей, а также области сфинктеров пилорико-двенадцатиперстного, перифатерального и двенадцатиперстно-тощекишечного переходов; (всего 762 кусочка размерами 1,0 х 0,5 см). Срезы окашивали гематоксилином-эозином по Ван Гизону, азур-2-эозином по Браше, выборочно выполняли ШИК-реакцию и окраску срезов серебром по Гримелиусу.

Помимо этого, железы и лимфоидная ткань была исследована у 6 новорожденных детей (4 мальчика, 2 девочки) при врожденной атрезии двенадцатиперстной кишки.

Помимо этого, микроскопические исследования стенки двенадцатиперстной кишки проводились и у крыс (экспериментальная часть исследования) в условиях острого холодового воздействия (1-я серия опытов) и в условиях высокогорья (2-я серия). В обеих сериях задействовали крыс-самцов линии Вистар, в возрасте 2-х месяцев к началу эксперимента, массой 170 – 220 г. Все экспериментальные работы выполнены с соблюдением правил биоэтики, утвержденных Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для лабораторных или других целей.

Микропрепараты приготавливали из середины проксимальной, средней и дистальной третий двенадцатиперстной кишки, учитывая, что у этих животных именно здесь всегда имеются дуоденальные железы (Яцковский А. Н., Боронихина Т. В., 1987), максимально содержание кишечных желез и лимфоидной ткани (Мирошин Д. В., 2004). Выполнялись указанные ранее окраски.

1-я серия эксперимента (воздействие холодового фактора) включала 48 крыс (и 30 крыс – в контроле). Крысы экспериментальных групп подвергались воздействию при температуре – 16 градусов по Цельсию (холодильник марки Т/25.01.01), контрольная группа содержалась при комнатной температуре. Крысы выводились из эксперимента через 1-е, 3-е, 7-е, 14-е, 21-е и 28-е сутки. Контролем для каждого срока явились 5 крыс, содержащихся в аналогичных условиях (кроме температурных воздействий).

2-я серия эксперимента включала крыс, находящихся в условиях высокогорья (на перевале Анзоб, высота 3379 м над уровнем моря). Предварительную адаптацию крыс к высокогорным условиям не проводили (их помещали туда впервые и одномоментно). Из эксперимента крыс выводили через 1-е, 2-е, 5-е, 10-е, 15-е, 30-е и 60-е сутки (по 8 крыс в каждый срок). Крысы контрольных групп (по 6 для каждого срока) содержались в условиях долины (г. Душанбе, высота 820 м над уровнем моря), декапитировались в те же сроки, что и крысы экспериментальных групп.

При гистологических исследованиях изучали толщину начальных отделов желез (расстоянии между наиболее приближенной и удаленной точками от покровного эпителия), количество начальных частей на срезе начального отдела. Используя окулярную («узловую») сетку изучали долю стромы на срезе начального отдела дуоденальных желез. Изучали площадь начального отдела на срезе, площадь просвета выводного протока дуоденальных желез. Анализировали ширину (поперечник) кишечных желез, их длину, абсолютное количество эпителиоцитов на продольном и поперечном срезах кишечной железы. При оценке их клеточного состава учитывали процентное число бокаловидных, абсорбционных, недифференцированных клеток, клеток Панета; не учитывались эндокринные клетки (ввиду их малочисленности – менее 0,5 %, по С. В. Герману, 1986). У лимфоидной ткани двенадцатиперстной кишки при микроскопии изучали площадь лимфоидных узелков, площадь их центров размножения, абсолютное количество клеток лимфоидного ряда в составе лимфоидных узелков без центров размножения, в центрах размножения, в составе диффузной лимфоидной ткани. Для этого при ув.900х подсчитывали количество клеток на площади одного квадрата (0,082 кв. мм) с пересчетом на 1 кв. мм. Анализировали также при окраске срезов азур-2-эозином процентное число разного типа клеток лимфоидного ряда.

При изучении микропрепаратов при биометрии (площади лимфоидных узелков, центров размножения, толщины начальных отделов желез и др.) использовали ЭВМ IBM 486 SX33 с помощью пакета прикладных программ «Морфолог», работая в среде Windows. Пакет состоял из следующих компонентов: 1. Программа – «Съемка» («AV er Video Commander»). Использовали в системе для получения цифровых фотографий микроструктур при помощи микроскопа МФ11 с установленной на нем видеокамерой С45D с последующей записью полученной информации на жестком диске ПЭВМ в виде файлов. 2. Программа – «Калибровка». Проводили расчет калибровочного коэффициента, чтобы представить цифровую информацию в метрических единицах (мкм – для линейных размеров и т.д.). 3. Программа – «Измерения», для исследования микрообъектов (железы, лимфоидные структуры) и накопления статистической информации о них в виде файлов по каждому объекту измерений. 4. Программа «Статистика». Проводили непосредственную статистическую обработку информации, накоплению в базе данных, полученных при реализации программы «Измерения» путем ввода рассчитанного ранее калибровочного коэффициента. Рассчитывали среднеарифметические значения, их ошибки, достоверность различий; анализировали амплитуду вариационного ряда по каждому изученному признаку.