Биотехнологическими методами
| Вид материала | Автореферат |
- Научные основы технологий хлеба с использованием ржаной муки на заквасках с улучшенными, 1053.55kb.
- Методи розв’язування нелінійних рівнянь та методи розв’язання систем лінійних алгебраїчних, 17.77kb.
- Робота з дітьми «групи ризику», 25.32kb.
- Определение твердости металлов, 1651.38kb.
- Владеет методами количественного анализа и моделирования, теоретического и экспериментального, 503.28kb.
- Рабочая программа согласовано зав кафедрой «Менеджмент качества» сф ргуитп в. А. Исаев, 106.05kb.
- Рекомендации от Цветкова Сергея Ивановича по лечению рака, народными методами, 92.03kb.
- Ки, полученных методами затратного, сравнительного и доходного подходов сталкивается, 101.07kb.
- Вклад е. Г. Дудникова в теорию и практику автоматического управления, 90.64kb.
- Ческими методами, применяемыми при анализе экономических процессов, их взаимосвязей,, 142.16kb.
На правах рукописи
АНГАНОВ
ВЯЧЕСЛАВ ВЛАДИМИРОВИЧ
ИНТЕНСИФИКАЦИЯ ВОСПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ
ФУНКЦИИ У КОРОВ В ПОСЛЕРОДОВОЙ ПЕРИОД
БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
06.02.01. – Разведение, селекция, генетика и воспроизводство
сельскохозяйственных животных
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата сельскохозяйственных наук
Улан-Удэ - 2009
Работа выполнена при кафедре акушерства, гинекологии и биотехники репродукции животных Федерального государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова».
^ Научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Муруев Анатолий Владимирович
Официальные оппоненты: доктор сельскохозяйственных наук,
профессор Лумбунов Сергей Гомбоевич
кандидат сельскохозяйственных наук,
доцент Мункуев Владимир Чимитович
^ Ведущая организация:
ГНУ Забайкальский научно-исследовательский институт сельского хозяйства СО Россельхозакадемии
Защита диссертации состоится « 30 »_апреля 2009 г. в 1000 часов
на заседании диссертационного совета ДМ 220.006.02 при ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова» по адресу: Республика Бурятия, 670024, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина, 8, БГСХА, тел. (3012)44-21-33, e-mail: bgsha@bgsha.ru.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им. В.Р. Филиппова»
Автореферат разослан «____» _марта 2009г.
Ученый секретарь диссертационного совета,
доктор сельскохозяйственных наук, доцент ______ Гармаев Д.Ц
^ 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Интенсивное ведение современного животноводства должно обеспечивать устойчивый рост производства молока, мяса и другой качественной, экологически чистой и безопасной животноводческой продукции и, тем самым, должно способствовать улучшению социального положения и качества жизни населения России.
В связи с вышеизложенным воспроизводство крупного рогатого скота в технологии ведения животноводства и производства животноводческой продукции представляет собой сложный биологический процесс, так как этому виду животных генетически свойственны одноплодие, длительный период репродуктивного цикла, низкие темпы размножения и риск возникновения бесплодия (Тарасевич А.Ю., 1934; Шипилов В.С., 1961; Заянчковский И.Ф., 1962; Ильинский Е.В., 1972; Валюшкин К.Д, 1974-1988; Мисайлов В.Д., 1976; Кононов Г.А., 1979; S. Heinzetal, 1986; Завертяев Б.П., 1989; Турков В.Г., 1996; Муруев А.В., 1998 и другие.). Поэтому интенсивное воспроизводство животных должно основываться на использовании прогрессивных биотехнологических методов воспроизводства животных, особенно высокопродуктивных. Актуальность этой проблемы еще более возросла с переходом данной отрасли животноводства на рыночные отношения. Достижение оптимального регулирования воспроизводительной функции и иммунологической реактивности организма в послеродовом периоде самок сельскохозяйственных животных, по мнению многих ученых, становится возможным за счет гормонального контроля, особенно с открытием и химическим синтезом простагландинов и гонадолиберинов. Их применение, наряду с гонадотропинами, обеспечивает индукцию полноценной стадии возбуждения полового цикла, синхронизацию овуляции, своевременное осеменение и результативное оплодотворение животных, сокращение продолжительности бесплодия и межотельного интервала, что является одним из биотехнологических методов интенсификации воспроизводства животных. Известно, что иммунобиологическая реактивность организма у самок заметно варьирует в зависимости от их физиологического состояния, связанного с воспроизводительной функцией (Сысоев А.А, 1978; Семенюта А.Т, 1981; Селиванова А.В, 1984; Денисенко В.Н, 1987; Гугушвили Н.Н, 2000 и другие). Изучение иммунобиологической реактивности организма животных в различные стадии их репродуктивной деятельности позволяет выявить критические периоды с целью своевременного корректирования иммунологического статуса организма животного.
Однако, многолетний опыт применения иммуномодуляторов и гормональных биологически активных препаратов для контроля воспроизводительной функции животных свидетельствует, что положительные результаты могут быть достигнуты только при обоснованном и рациональном их использовании. Поэтому изучение биологических свойств иммуномодуляторов, гормональных и биологически активных препаратов, а также выявление показаний и изыскание более рациональных путей их применения, продолжает оставаться актуальной задачей для науки и практики.
^ Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является разработка рациональных методов контроля репродуктивной функции маточного поголовья крупного рогатого скота с использованием гормональных препаратов и коррекции иммунологической реактивности организма животных.
Для реализации намеченной цели были поставлены следующие задачи:
- изучить функцию органов размножения животных при воздействии на них иммуномодулятора;
- установить влияние иммуномодулятора на воспроизводительную функцию животных в послеродовом периоде;
- определить эффективность и влияние гормональных и биологически активных препаратов на воспроизводительную функцию животных.
^ Научная новизна. Определена эффективность биотехнологических методов на воспроизводительную функцию коров в условиях традиционно сложившихся технологий ведения животноводства. Работа дополняет новыми исследованиями в области воспроизводительной функции организма животных. Представлены новые сведения по эффективности применения гормональных биологически активных препаратов и влияние иммуномодулятора на иммунологическую реактивность организма коров в послеродовом периоде.
^ Практическая значимость работы. Предложены производству методы индукции половой цикличности с применением гормональных биологически активных препаратов и влияние иммуномодулятора на организм животных для повышения воспроизводительной и иммунной функции, оплодотворяемости коров и телок, сокращения дней бесплодия и межотельного интервала. Определены оптимальные дозы и рациональные сроки их применения.
^ Апробация работы. Основные положения диссертации доложены, обсуждены и одобрены на: 1-ой международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья с/х животных», г. Ставрополь, 2001; Международной научно-практической конференции «Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных», посвященной 90-летию профессора В.Р. Филиппова. БГСХА, Улан-Удэ, 2003; -Материалы конференции молодых ученых Сибирского Федерального округа «Научное обеспечение устойчивого развития АПК в Сибири», г. Улан-Удэ, 2004; -Материалы ежегодной научно-практической конференции «Наука, образование, новые технологии», г. Улан-Удэ 2004; -7-й Международной научно-практической конференции (Улан-Батор, 19-23 июля 2004 г.) «Сельскохозяйственная наука АПК Сибири, Монголии, Казахстана и Кыргызстана», г. Новосибирск, 2004.
^ Внедрение результатов научных исследований. Материалы диссертационной работы внедрены и используются в ФГУП «Учебно-опытное хозяйство «Байкал», ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова», ОПХ «Байкальское» ГНУ «Бурятский НИИСХ СО РАСХН», при чтении лекций и проведении лабораторно-практических занятий на кафедре «акушерства и биотехники репродукции животных» для студентов факультета ветеринарной медицины и технологического факультета ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова».
Публикации. Основные научные результаты, включенные в диссертацию, отражены и опубликованы в 7 научных статьях.
^ Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 133 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практические предложения, список использованной литературы и приложения. Работа иллюстрирована 24 таблицами, 2 рисунками. Список литературы включает 264 источника отечественной и зарубежной литературы.
^ Основные положения, выносимые на защиту:
1. Влияние препарата «Полирибонат» на показатели иммунобиологической реактивности, проявление половой цикличности и оплодотворяемость коров.
2. Влияние препаратов «Нитамин» и «Полирибонат» на показатели обмена веществ, иммунобиологической реактивности, характер течения родов и послеродового периода у коров.
3. Эффективность применения биотехнологических методов стимуляции половой функции у коров на фоне коррекции неспецифической резистентности организма в послеродовой период.
4. Влияние гормональных и биологических активных препаратов при индукции половой цикличности у коров и телок в послеродовом периоде и клиническое обоснование.
^ 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
Научно-экспериментальная работа выполнялась в ФГОУ ВПО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В. Р. Филиппова» и в условиях молочно-товарной фермы ФГУП «Учебно-опытное хозяйство «Байкал»» ФГОУ ВПО «Бурятская ГСХА им. В.Р. Филиппова». В опытах были использованы коровы симментальской породы в возрасте от 3 до 7 лет, массой тела 450-500 кг, среднегодовой молочной продуктивностью 3400-3500 кг.
Схема экспериментальных исследований приведена на рисунке 1.
Исследования проб крови на показатели иммунного статуса были проведены в лаборатории клинической иммунологии Республиканской клинической больницы им. Н. Семашко (г. Улан-Удэ). Забор проб крови от животных проводили на 1-2 и 15-16 дни после осеменения. В сыворотке и цельной крови животных определяли показатели, характеризующие уровень иммунобиологической реактивности, для определения которых были выбраны следующие методы исследования: количество лейкоцитов – методом подсчета в камере Горяева, лейкограмму крови – в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
4 опытные группы. Полирибонат инъецировали в дозе 0,1 мг/кг массы. 1 гр. на 1-3 день после осеменения; 2 гр. на 11-13 день после осеменения; 3 гр. на 1-3 и 11-13 день после осеменения; 4 гр. препарат не назначали.
Рис.1 Схема экспериментальных исследований
Влияние иммуномодулятора полирибоната на уровень иммунобиологической реактивности и оплодотворяемость коров
Влияние полирибоната (доза 0,1 мг/кг) при однократном назначении на 1-2 день после осеменения. 2 гр. (опытная и контрольная).
Исследование иммунологических показателей крови оплодотворившихся и неоплодотворившихся животных на 1-2 и 15-16 день после осеменения
Применение полирибоната (доза 0,1 мг/кг) после отела на 30-35 день. 2 гр. (опытная и контрольная).
Сроки проявления половой
цикличности
Результативность осеменения
Повышение воспроизводительной функции коров при комплексном применении препаратов «Нитамин» и «Полирибонат»
2 гр. стельных животных (опытная и контрольная). В течении сухостойного периода инъецировали «Нитамин» (доза 0,2 мл на 10 кг массы) 2 раза в месяц с интервалом 10 дней. Опытной группе за 14 дней до отела инъецировали полирибонат (доза 0,1 мг/кг).
Течение родов
Срок отделения последа
Количество задержаний последа
Течение послеродового периода, показатели воспроизводительной функции
Искусственное осеменение животных
Биохимические, и иммунологические показатели крови проводили перед введением препаратов и перед родами
Сроки нормализации функции матки
Диагностика беременности
Показатели репродуктивной функции
Гормональная стимуляция стадии эструса полового цикла на фоне коррекции иммунобиологической реактивности организма коров
| День обработки | Препараты | |||
полирибонат | нитамин | эстрофан | сурфагон | |
| 1-й | опытная | |||
| 5 мл | 10 мл | 2 мл | - | |
| 7-й | - | 10 мл | - | - |
| 14-й | - | 10 мл | - | - |
| 1 час до и/о. | - | - | - | 5 мл |
| 1-й | контрольная | |||
| - | - | 2 мл | - | |
Сроки проявления половой цикличности
Функциональная активность яичников
Результативность осеменения
-
Показатель
Дозы применения препаратов
Дни после отела
Группа
Препарат
1
8
9
10
11
14 день
за час до иск-го осеменения
I
Нитамин
10 мл
10 мл
-
-
-
-
ФСГ-супер
-
1мл
1 мл
1 мл
1 мл
-
Эстрофан
-
-
-
-
2мл
-
Сурфагон
-
-
-
-
-
5 мл
II
Нитамин
10 мл
10 мл
-
-
-
-
Фагоцитарную активность лейкоцитов (нейтрофилов) определяли при помощи опсоно-фагоцитарной реакции описанной Ш.А. Мкртчян (1981), с использованием двухмиллиардной взвеси суточной культуры Staphylococcus aureus (штамм № 209). Содержание циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови определяли методом осаждения иммунных комплексов в 3,75 %-ном растворе полиэтиленгликоля-6000 (пэг) (производство Германия) по Ю.А. Гриневич и А.Н. Алферовой (1981); 4) относительное и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов, Т- хелперов, Т-супрессоров определяли по методу постановки непрямой реакции поверхностной иммунофлюоресценции (РИФ).
Биохимические исследования крови проводили у животных опытной и контрольной групп перед введением препаратов и перед родами. Исследования концентрации фосфора, кальция, сахара, общего белка, резервной щелочности, каротина проводили по общепринятым методикам в Республиканской научно-производственной ветеринарной лаборатории (РНПВЛ).
По мере проявления животными клинических признаков стадии эструса и выявления у них половой охоты проводили искусственное осеменение двукратно с интервалом 12 часов
^ Обработка результатов исследований. Полученный экспериментальный материал обработали методом вариационной статистики с использованием таблицы Стьюдента с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±m), критерия Стьюдента (t) и уровня доверительной вероятности (Р) (Плохинский Н.А. 1970, Лакин Г.Ф. 1990).
^ 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Влияние иммуномодулятора «Полирибонат» на уровень
иммунобиологической реактивности и оплодотворяемость коров
Результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что использованные нами схемы применения иммуномодулятора не только не оказывают положительного влияния на воспроизводительную функцию коров, но и ведут к незначительному снижению их оплодотворяемости. В частности, после учитываемого осеменения беременность наступила у 64,7% коров контрольной группы, а в опытной группе при применении полирибоната на 1-3 день после осеменения – у 53,8%, на 11-13 день – у 46,1% и при двукратном применении препарата с 10-дневным интервалом – у 41,6% коров (табл. 1).
Таблица 1 - Влияние препарата «Полирибонат» на оплодотворяемость коров в зависимости от времени введения
| Показатели | Группы животных | ||||
| 1 | 2 | 3 | Контр. | ||
| Время введения препарата после осеменения (дни) | 1-2 | 3 | 11-13 | 1-3 и 11-13 | - |
| Количество животных | 6 | 7 | 13 | 12 | 17 |
| Процент стельности % | 83,3 | 28,5 | 46,1 | 41,6 | 64,7 |
После применения иммуномодулятора «Полирибонат» на 1-2 день после осеменения оплодотворяемость коров в опытной группе составила 83,3% или в 1,28 раз выше, чем в контрольной группе (64,7%). Таким образом, можно предположить, что применение биологически активных препаратов, стимулирующих иммунную систему коров в период осеменения (на 1-2 день после осеменения), по всей видимости, приводит к повышению активности иммунной системы материнского организма. Это способствует распознаванию антигенов плода материнским организмом и адекватному иммунному ответу на них со стороны матери, приводящих к формированию и развитию беременности. По нашим предположениям, стимуляция иммунной системы матери в период имплантации зиготы (которому при нормальном развитии беременности свойственно снижение уровня неспецифической резистентности) приводит к усилению иммунного ответа материнского организма на антигены плода и, вследствие этого, к неполноценному течению имплантации и отторжению развивающегося зародыша. Полученные результаты показали, что уровень лейкоцитов у животных обеих групп оставался практически без изменений на 15-16 день после осеменения, по сравнению с 1-2 днем после осеменения. При применении «Полирибоната» отмечено повышение содержания лимфоцитов на 2,8 % (с 56,9 до 58,5 %), а в контрольной группе на 1,6 % (с 56,9 до 57,8 %). Увеличение числа лимфоцитов указывает на развитие иммунобиологической защитной реакции организма матки на антигены эмбриона. Одновременно отмечено снижение числа Т–лимфоцитов на 5,6 % против 1,4 % в контроле, и уменьшение уровня Т–хелперов на 10,6 % (с 24,9 % до 22,5 %), по сравнению с контролем – на 7,7 % (с 24,9 до 23,1 %), а уровень Т–супрессоров соответственно возрастает на 18,6 % (с 12,9 до 15,3 %), в контроле их уровень возрос на 3,1 % (с 12,9 до 13,3 %). Наряду с этим происходит изменение активности и В–системы иммунитета. На 15-16 день идет ее активизация, на что указывает резкое увеличение числа В–лимфоцитов на 29,8 % (с 23,5 до 30,5 %), а в контроле на 16,2 % (с 23,5 до 27,3 %). Отмечены также колебания в динамике фагоцитарной активности нейтрофилов крови. Происходит резкое снижение на 6,2 % (с 51,1 до 48,1 %), против контроля 2,6 % (с 51,1 до 49,8 %). Концентрация циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) также подвергается незначительному изменению. Уровень ЦИК на 15-16 день исследования по сравнению с 1-2 днем после осеменения понижался на 1,9 % (с 114,6 до 112,5 %), против снижения в контроле на 0,7 % (с 114,6 до 113,8 %).
Таким образом, инъекции «Полирибоната» оказывают выраженное влияние на уровень иммунобиологической реактивности оплодотворившихся коров. Однако в крови коров опытной группы снизилась концентрация ЦИК, уменьшение было незначительным, что подтверждают литературные данные о наличии во время беременности всего спектра иммунных реакций (иммуностимулирующих, иммуносупрессорных, иммуномодулирующих). Стимуляция иммунной системы материнского организма «Полирибонат» в период осеменения способствует более полноценному распознаванию антигенов плода и выработке на них адекватного иммунного ответа. Данные изменения в опытной группе, по всей видимости, определяют более высокий уровень иммунобиологической реактивности при последующем осеменении и, следовательно, более высокую его результативность, что подтверждается нижеприведенными данными клинического наблюдения за животными.
Результаты клинических наблюдений за коровами подтвердили наши предположения и данные, полученные в первой серии опытов. Так, применение «Полирибоната» на 1-2 день после осеменения привело к повышению оплодотворяемости животных в 1,3 раза (65 % в опытной группе против 50 % в контрольной). Кроме того, 85,7 % оставшихся бесплодными коров в опытной группе проявили половую охоту спустя 14-28 дней после учитываемого осеменения, а в контрольной группе таких животных было в 1,29 раз меньше (66,6 %), что дает основание косвенно предположить участие иммунологических механизмов в проявлении половой цикличности у коров.
При наблюдении за подопытными животными было установлено, что применение препарата спустя 30-35 дней после отела (в период, предшествующий осеменению), также благоприятно отразилось на показателях воспроизводительной способности коров (табл. 2).
Таблица 2 - Эффективность применения препарата «Полирибонат»
спустя 30-35 дней после отела
| Показатели | Группы животных | |
| опытная | контроль | |
| Продолжительность периода от отела до первого осеменения, дней | 70,1 + 4,9 | 88,3 + 13,5 |
| Сервис-период, дней | 93,0 + 11,1 | 104,7 + 13,5 |
| Индекс-осеменения | 1,50 | 1,67 |
Анализ данных показал, что у коров опытной группы по сравнению с животными контрольной группы отмечалось снижение периода от отела до первого осеменения на 18,7 дня, сервис-периода - на 11,7 дней, индекса-осеменения - на 8,5 % (1,50 против 1,67). Коэффициент воспроизводительной способности опытной группы составил 1,03 против1,07 в контрольной.
Таким образом, применение «Полирибоната» в период, предшествующий осеменению, по всей видимости, не только стимулирует проявление половой цикличности у коров после отела, но и создает благоприятные условия для оплодотворения, формирования и развития зародыша.
^ 3.2. Повышение воспроизводительной функции коров при
комплексном применении препаратов «Нитамин» и «Полирибонат».
Для контроля биохимических и иммунологических показателей у животных опытной и контрольной групп проводили исследования крови перед введением препаратов и перед родами. При анализе результатов исследования биохимических показателей крови у животных опытной группы наблюдалось увеличение уровня кальция на 0,98 % (с 10,15 до 10,25 мг/%) и снижение уровня фосфора в сыворотке крови на 10,04 % (с 5,48 до 4,98 мкг/ %), но их соотношение остается в норме (2:1). Увеличилась концентрация сахара в крови животных на 2,89 % (с 40,2 до 41,4 мг/%), уровень резервной щелочности - на 8,24% (с 46,8 до 51 об%СО2), что соответствует норме. Статистически достоверно повысилось содержание каротина в крови на 12,02 % (с 0,322 до 0,366 мг/%).
У коров контрольной группы незначительно увеличился уровень кальция на 1,94 % (с 10,10 до 10,30), и снизилось содержание фосфора в сыворотке крови на 6,06 % (с 5,60 до 5,28). При этом их соотношение не изменилось и составило 1,9:1. Содержание каротина в крови составило 0,327 мг %, что ниже нормы.
Одним из важных механизмов организма животных, вовлеченных в сохранение плода, является иммунная система матери. Однако в настоящее время иммунный статус животных с физиологической и осложненной беременностью изучен недостаточно, что затрудняет оценку полученных результатов (табл. 3).
Анализируя полученные данные, необходимо учитывать, что иммунологический статус перед родами изменяется. Известно, что это связано с резким изменением гормонального статуса. Имеется значительное количество работ, показывающих отрицательную корреляцию между уровнем стероидных гормонов и количеством Т-лимфоцитов.
Полученные результаты показывают, что в крови животных обеих групп перед родами повысилось содержание лейкоцитов: в контрольной группе на 7,56% (с 5,75 до 6,22), а в опытной группе повышение было более выраженным и составило 18,4% (с 5,62 до 6,89, Р<0,05). Процентное содержание в крови коров опытной группы Т-лимфоцитов составило 30,3%, что ниже на достоверно значимую величину против 37,6% (Р< 0,001) в контроле, в то же время у них отмечено более высокое содержание Т-хелперов (23,2%, Р<0,001), против (19,3%, Р<0,001) в контроле. При исследовании фагоцитоза достоверных отличий от исходных показателей и между группами животных не выявлено.
Таблица 3 - Показатели иммунологического статуса коров
| Показатели | группа | Исходные показатели | Через 10 дней | Р< |
| Лейкоциты, тыс./мкл | опытная | 5,62±0,34 | 6,89±0,40 | 0,05 |
| контр. | 5,75±0,38 | 6,22±0,34 | - | |
| Лимфоциты, тыс./мкл | опытная | 3,54±0,19 | 3,36±0,18 | - |
| контр. | 3,72±0,16 | 3,11±0,15 | 0,01 | |
| Т – лимфоциты, % | опытная | 29,1±0,39 | 30,3±0,54 | - |
| контр. | 28,3±0,60 | 37,6±0,76 | 0,001 | |
| Т – хелперы, % | опытная | 43,2±0,52 | 23,2±0,60 | 0,001 |
| контр. | 46,6±0,34 | 19,3±0,73 | 0,001 | |
| Т – супрессоры, % | опытная | 38,3±0,36 | 28,1±0,41 | 0,001 |
| контр. | 41,1±0,68 | 34,8±1,04 | 0,001 | |
| В – лимфоциты, % | опытная | 32,6±0,61 | 33,5±0,90 | - |
| контр. | 39,3±0,51 | 26,6±0,69 | 0,001 | |
| Фагоцитоз, % | опытная | 41,3±0,41 | 35,3±0,36 | 0,001 |
| контр. | 37,3±0,44 | 36,6±0,54 | - |
Таким образом, полученные результаты показывают, что после комплексного применения «Нитамина» и «Полирибоната» в крови животных удалось сохранить соотношение кальция к фосфору и уровень сахара в пределах нормы, увеличить содержание каротина в крови, что существенно повлияло на иммунную систему организма животных подопытных животных. Однако, для определения направленности этого влияния недостаточно полученных данных, требуются дальнейшие исследования. Выяснение основных механизмов иммунорегуляции, действующих при беременности, может оказать существенную помощь в разработке мероприятий, направленных на снижение частоты пре- и перинатальных потерь приплода, а также позволит определить подходы к обоснованной коррекции нарушений в иммунорегуляторном звене при патологии беременности.
Результаты изучения течения родов и послеродового периода у коров опытной и контрольной групп показали, что у коров опытной группы срок выведения последа составил 5,06 часов, что достоверно ниже по сравнению с контрольной группой (7,46 часов). В этой группе отмечалось меньшее количество задержаний последа; при этом отмечено, что задержавшиеся последы у опытных коров отделялись легче. Задержание последа в контрольной группе отмечено в 16,66 % случаев, что соответствует средним данным по стаду. В опытной группе патологию наблюдали лишь у 8,33% (табл. 4).
Таблица 4 - Течение родов и послеродового периода у коров
| Показатели | Опытная группа | Контрольная группа |
| Срок выведения последа, час | 5,06±0,32 | 7,46±0,68 |
| Задержаний последа, % | 8,33 | 16,66 |
| Послеродовая патология, % | 25,00 | 41,66 |
В опытной группе субинволюция матки и острые послеродовые эндометриты зарегистрированы у 25% животных. В контрольной группе послеродовая патология отмечалась в 2 раза чаще.
Снижение количества животных с патологическим течением родов и послеродового периода вело к повышению количественных показателей репродуктивной функции по группе в среднем.
У коров, которым вводился препарат «Полирибонат», оплодотворяемость от первого осеменения была выше в 1,4 раза по сравнению с контрольными животными, индекс осеменения был ниже на 0,18; сервис-период – короче на 14,11 дня (табл. 5). Коэффициент воспроизводительной способности опытной группы составил 0,96 против1,01 в контрольной.
Таблица 5 - Показатели воспроизводительной функции коров
| Показатели | Контрольная группа | Опытная группа |
| Оплодотворяемость от 1-го осеменения, % | 41,6 | 58,3 |
| Общая оплодотворяемость, % | 83,33 | 91,66 |
| Индекс-осеменения | 1,86±0,22 | 1,68±0,14 |
| Сервис-период, дн. | 82,35±3,16 | 68,24±3,33 |
Полученные результаты наших исследований показывают, что комплексное применение водорастворимого комплекса витаминов «Нитамин» и иммунодулятора «Полирибонат» нормализует у них обмен веществ, улучшает функцию фетоплацентарной системы, повышает иммунобиологическую резистентность организма коров, за счет этого снижается количество задержаний последа, послеродовых заболеваний матки, повышаются показатели репродуктивной функции.
^ 3.3. Гормональная стимуляция стадии эструса полового цикла на фоне коррекции иммунобиологической реактивности организма коров
По результатам исследований установлено, что в опытной группе стадию эструса полового цикла проявили 81,8 % коров в течение 96-часового наблюдения после введения препарата. Причем у 36,4 % коров стадия эструса полового цикла проявилась через 24 часа после введения препарата «Эстрофан», у 27,3 % коров - в течение 48-часового периода, у 9,1 % животных - в течение 72 часов, у 9,1 % - в течение 96-часового периода после инъекции данного препарата и 27,3 % коров клинические признаки стадии эструса полового цикла не проявили в течение 96 часов после инъекции препарата. По-видимому, у этих животных желтое тело яичников находилось в стадии угасания (регрессии) и не подвергалось лютеолитическому воздействию препарата «Эстрофан». Всех коров, проявивших клинические признаки стадии эструса полового цикла, осеменяли искусственно по общепринятой методике. Общая оплодотворяемость составила 88,8 %. Сервис-период по группе составил 43,1 дня, а индекс-осеменения - 1,7, что является хорошим показателем, характеризующим оптимальный уровень воспроизводства стада. Коэффициент воспроизводительной способности опытной группы составил 0,89 (табл. 6).
Таблица 6 - Влияние биологически активных веществ и иммуностимулятора на результаты стимуляции и синхронизации стадии эструса полового цикла у коров
| Периоды исследования | Группы | ||
| опытная | контрольная | ||
| Обработано голов | 11 | 11 | |
| Проявили стадию эструса | 81,8 | 54,5 | |
| Не проявили стадию эструса | 27,2 | 45,5 | |
| Общая оплодотворяемость | 88,8 | 50,0 | |
| Проявили стадию эструса после введения препарата «Эстрофан» | 24 часа | 36,4 | - |
| 48 часов | 27,2 | 27,2 | |
| 72 часа | 9,1 | 9,1 | |
| 96 часов | 9,1 | 18,2 | |
| Сервис-период | 43,1 ± 4,46 | 58,3 ± 6,26 | |
| Индекс-осеменения | 1,7 ± 0,10 | 2,4 ± 0,30 | |
В контрольной группе животных после инъекции препарата «Эстрофан» в течение 96-часового наблюдения проявили стадию эструса полового цикла только 54,5% коров. Из них в течение 24-часового периода стадию эструса не проявила ни одна корова, через 48 часов после инъекции проявили стадию эструса 27,2% животных, через 72 часа после инъекции - 9,1% и через 96 часов - 18,2%. Общая оплодотворяемость составила 50,0%, сервис-период 58,3± 6,26 дня, а индекс-осеменения 2,4±0,30. Коэффициент воспроизводительной способности контрольной группы составил 0,93.
Наиболее высокие показатели по стимуляции стадии эструса и воспроизводительных функций были у коров опытной группы. Более 81,8 % животных проявили признаки эструса. Общая оплодотворяемость в группе достигала 88,8 %.
Введение лишь одного препарата «Эстрофан» вызывало эстральное
состояние только у 54,5 % животных. Общая оплодотворяемость равнялась 50,0 %.
Препарат «Эстрофан» - синтетический аналог простагландина F2-альфа, является достаточно эффективным препаратом для синхронизации и стимуляции половой охоты и овуляторного процесса у коров в комплексе с иммуномодулятором «Полирибонат» и водорастворимым комплексом витаминов «Нитамин», а также синтетическим аналогом рилизинг-гормона «Сурфагон».
Применение препарата «Полирибонат» в период, предшествующий осеменению (30-35 день после отела), позволяет сократить срок от отела до первого осеменения. Стимуляция иммунной системы материнского организма в период осеменения обеспечивает повышение оплодотворяемости коров, что, по всей видимости, связано с повышением сенсибилизации материнского организма к антигенам зародыша и адекватному иммунному ответу на них, приводящих к формированию и развитию беременности
Инъекция препарата «Сурфагон» в дозе 25 мкг за час до искусственного осеменения обуславливает повышение оплодотворяемости коров опытной группы. Считаем, что данный препарат стимулирует возрастание концентрации в крови лютеинизирующего гормона, тем самым происходит качественная овуляция зрелого фолликула и выход полноценной яйцеклетки в оптимальные сроки при искусственном осеменении.
Таким образом, искусственное стимулирование стадии эструса полового цикла и овуляции зрелого фолликула активизирует половой цикл и овуляторную реакцию яичников в оптимальные физиологические сроки и, тем самым, обуславливает сокращение сервис-периода и индекса-осеменения у коров опытной группы. Более того, как свидетельствуют наши наблюдения, без применения необходимых стимулирующих гормональных, иммуностимулирующих и других биологически активных препаратов, нельзя добиться желаемых результатов в осеменении, особенно после родов, а также у длительно не приходящих в половую охоту и многократно осеменяющихся коров.
^ 3.4. Стимуляция половой функции коров препаратом «ФСГ-супер» в послеродовой период.
Применение биотехнологических методов имеет важные преимущества при интенсификации воспроизводства стада. При этом отпадает необходимость ежедневного контроля за половой охотой и овуляцией, представляется возможность планировать сроки осеменения и получение приплода, что является необходимой предпосылкой для ритмичного производства животноводческой продукции, облегчается организация искусственного осеменения и существенно сокращаются затраты труда на его проведение, более рационально используются животноводческие помещения. Для этой цели были предложены эффективные гормональные средства для стимуляции половой функции. Наиболее стабильные результаты получены путем экзогенного применения гормонов гипоталамуса и гипофиза, половых гормонов, простагландинов и других биологически активных препаратов.
Результаты экспериментальных исследований по стимуляции репродуктивной системы в послеродовой период у коров экзогенным гонадотропным препаратом «ФСГ-супер» в комплексе с биологически активными веществами приведены в таблице 7.
Анализ данных показывает, что введение препарата «ФСГ-супер» в дозе 1 тыс. ИЕ в опытной группе повышает оплодотворяемость и плодовитость коров. Сервис-период в опытной группе составил 35,56±2,86 дней, а в контрольной группе 68,6±3,78 дней. Индекс-осеменения у коров опытной группы - 1,7±0,16, контрольной -2,6±0,52 соответственно. Коэффициент воспроизводительной способности опытной группы составил 0,87 против контроля 0,96.
Экзогенное введение подопытным животным препарата «ФСГ-супер» должно дать определенный стартовый толчок росту и развитию примордиальных фолликулов и секреции ими эстрогенов. Эстрогены при этом накапливаются в фолликулярной жидкости.
Внутримышечное введение препарата «ФСГ-супер» не оказывало отрицательного действия на общее клиническое состояние животных. Показатели клинического статуса (пульс, дыхание и температура тела), морфологии и биохимии крови подопытных животных находились в пределах физиологической нормы.
До введения препарата «ФСГ-супер» у подопытных животных количество пульсовых ударов сердца составляло 60,05±1,18 в минуту. В первый день инъекции указанного препарата и также на второй день заметных отклонений от физиологической нормы не отмечалось. Количество дыхательных движений у подопытных животных до и после инъекции препарата «ФСГ-супер» существенных изменений не претерпевало.
Таблица 7 - Показатели воспроизводительной способности коров при введении препарата «ФСГ-супер»
| Показатели | Группа животных | |
| Опыт | Контроль | |
| Количество животных | 10 | 12 |
| Оплодотворились Число % | 9 90 | 8 66,6 |
| Из них двоен | 4 | - |
| Сервис-период X ± Sx | 35,5±2,86*** | 69,6±3,78 |
| Индекс-осеменения | 1,7±0,16** | 2,6±0,42 |
Примечание: ***- Р<0,001; **- Р <0,01;- достоверность разницы между средними показателями опытной и контрольной групп.
Концентрация общего белка в сыворотке крови подопытных животных на протяжении всего периода исследования находилась в незначительно низких пределах по сравнению с уровнем физиологической нормы.
Концентрация сахара в крови подопытных животных на протяжении всего периода исследования находилась в физиологических пределах.
Таким образом, результаты клинико-гематологических и биохимических исследований крови коров показали отсутствие каких-либо физиологических отклонений в организме подопытных животных под воздействием препарата «ФСГ-супер».
Расчет экономической эффективности применения гормональных и биологически активных препаратов для стимуляции и синхронизации стадии эструса полового цикла и повышения оплодотворяемости коров, повышения иммунобиологической резистентности организма и активизации репродуктивной функции коров в послеродовой период с использованием препаратов «Эстрофан», «Сурфагон», «ФСГ-супер», «Нитамин» и «Полирибонат» проведен по формуле И.И. Юрова, 2001.
Таблица 8 - Экономическая эффективность применения препаратов
| Показатели | Сумма, руб. |
| Экономический эффект при лечении на 1 рубль затрат | 16,95 |
| Экономический эффект применения препарата «Полирибонат» на 1 рубль затрат | 3,2 |
| Экономическая эффективность применения препаратов «ФСГ-супер», «Эстрофан», «Сурфагон» и «Нитамин» на 1 рубль затрат | 1,17 |
| Экономическая эффективность применения препаратов «Эстрофан», «Сурфагон» и «Нитамин» на 1 рубль затрат | 1,51 |
Экономический эффект, полученный в результате применения препарата «Полирибонат», составил 6723,45 руб., а предотвращенный ущерб - 8823,45 руб.
Таким образом, активизация половой функции коров биотехнологическими методами в послеродовой период существенно сокращает продолжительность сервис-периода и уменьшает индекс осеменения у коров опытной группы, тем самым способствуя интенсификации воспроизводства крупного рогатого скота. А применение экзогенного гонадотропного препарата «ФСГ-супер» в комплексе с биологически активными веществами повышает плодовитость коров, жизнеспособность телят, не оказывая отрицательного воздействия на их организм.
ВЫВОДЫ
1. Внутримышечные инъекции коровам в первые два дня после осеменения препаратом «Полирибонат» в дозе 5 мл оказывает выраженное влияние на уровень их неспецифической резистентности, повышая количество лимфоцитов на 2,8 %, В–лимфоцитов на 29,8 %, Т–супрессоров на 18,6 %, снижая содержание Т–лимфоцитов на 5,6 %, Т–хелперов на 10,6 %, фагоцитарной активности нейтрофилов крови на 6,2 %, ЦИК на 1,9 %, и вызывая незначительные изменения в содержании лейкоцитов. При этом оплодотворяемость опытных животных в 1,28 (83,3%) раз выше, чем в контрольной группе (64,7 %).
2. Применение препарата «Полирибонат» на 30-35 день после отела позволяет сократить срок от отела до первого осеменения на 18,7 дня (70,1±4,9 против 88,3±13,5), продолжительность бесплодия на 11,7 дней, снизить индекс осеменения на 8,5 % (1,50 против 1,67).
3. Экономический эффект на 1 рубль затрат при применении препарата «Полирибонат» составил 4,51 рубля.
4. Назначение коровам в последние 3-4 недели беременности препаратов «Нитамин» и «Полирибонат» способствует нормализации процессов обмена веществ (позволяет сохранить соотношение кальция и фосфора, поддерживать уровень сахара в пределах нормы, увеличить содержание каротина в крови), повышению уровня иммунобиологической реактивности организма.
5. У коров, которым вводился препарат «Полирибонат» за 14 дней до отела и сразу после родов, оплодотворяемость от первого осеменения была выше в 1,4 раза по сравнению с контрольными животными; индекс осеменения был ниже на 0,18; сервис-период – короче на 14,11 дня.
6. Разработан биотехнологический метод гормональной стимуляции половой охоты препаратами «Эстрофан» и «Сурфагон» на фоне иммунокоррекции «Полирибонатом». Применение препаратов стимулирует стадию эструса у 81,8 % животных и повышает оплодотворяемость до 88,8 %.
7. Экономический эффект на 1 рубль затрат при применении препаратов «Эстрофан», «Сурфагон» и «Нитамин» составил 1,55рубль,
8. Введение препарата «ФСГ-супер» не оказывало отрицательного действия на клинический статус, морфологию и биохимию сыворотки крови подопытных животных, а активизация половой функции коров в послеродовой период существенно сокращала продолжительность сервис-периода и индекс-осеменения у подопытных коров
9. Введение препарата «ФСГ-супер» повышает оплодотворяемость животных на 90%; сервис-период в опытной группе составил 35,5±2,86 дней, а в контрольной группе 68,6±3,78 дней. Индекс-осеменения у коров опытной группы - 1,7±0,16, контрольной - 2,6±0,52 соответственно. Коэффициент воспроизводительной способности опытной группы составил 0,87 против 0,96 в контроле.
10. Экономический эффект на 1 рубль затрат при применении препаратов «ФСГ-супер», Эстрофан», «Сурфагон» и «Нитамин» составил 1,20 рублей.
^ ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Для коррекции иммунобиологической реактивности и повышения оплодотворяемости коров в день осеменения рекомендуем применять препарат «Полирибонат» однократно в дозе 5,0 мл (50 мг), внутримышечно.
2. Для активизации половой функции коров с завершенной инволюцией половых органов, длительно не проявляющих половой цикличности в течение 30-35 дней после родов, создания адекватных условий иммунотрофического взаимодействия материнского организма с зародышем, использовать препарат «Полирибонат» однократно внутримышечно в дозе 0,1мг/кг.
3. Для нормализации обмена веществ и иммунобиологической реактивности организма, профилактики родовой и послеродовой патологии у коров, рекомендуем в последние 3-4 недели беременности использовать водорастворимый «Нитамин» в дозе 10 мл, 2 раза в месяц с интервалом между введениями 10 дней; дополнительно за 14 дней до предполагаемого отела и сразу после родов препарат «Полирибонат» в дозе 5,0 мл (50 мг).
4. Для повышения оплодотворяемости коров при синхронизации и стимуляции стадии эструса полового цикла, предлагаем вводить препараты «Нитамин» и «Полирибонат» с целью повышения иммунобиологической резистентности организма коров для интенсификации воспроизводства в молочном скотоводстве.
^ СПИСОК РАБОТ,
ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ
1. Муруев А.В. Сохранение генофонда местных пород животных в Республике Бурятия современными биотехнологическими методами / Муруев А.В., Хоженоев Ю.К., Анганов В.В., Амагырова Т.О., Тун Хухэ // Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики, как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья с/х животных: Материалы 1-ой Международной научно-практической конференции. - Ставрополь, 2001. – С. 102-103.
2. Хоженоев Ю.К. Биотехнологический метод интенсификации и регуляции репродуктивной функции у коров в послеродовой период / Хоженоев Ю.К., Муруев А.В., Анганов В.В., Амагырова Т.О., Гармаева Г.Н. // Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных: Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию профессора В.Р.Филиппова. - Улан-Удэ, изд-во БГСХА. - 2003 - С. 86-87.
3. Анганов В.В. Способ повышения оплодотворяемости коров и телок. / Муруев А.В., Хоженоев Ю.К., Амагырова Т.О. // Возрастная физиология и патология сельскохозяйственных животных: Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию профессора В.Р.Филиппова. - Улан-Удэ, изд-во БГСХА. - 2003 - С. 65-66.
4. Амагырова Т.О. Влияние иммунобиологичекой реактивности организма на оплодотворяющую способность коров / Амагырова Т.О., Муруев А.В., Анганов В.В., Хоженоев Ю.К. // Научное обеспечение устойчивого развития АПК в Сибири: Материалы конференции молодых ученых Сибирского Федерального округа. - Улан-Удэ, 2004. – С. 190-193.
5. Амагырова Т.О. Иммунобиологическая резистентность организма коров в послеродовой период после введения препарата «Полирибонат» / Амагырова Т.О., Муруев А.В., Анганов В.В., Хоженоев Ю.К // Наука, образование, новые технологии: Материалы ежегодной научно-практической конференции. - Улан-Удэ, 2004 – С. 81-83.
6. Анганов В.В. Разработка биотехнологического метода коррекции и стимуляции воспроизводительной функции у коров и телок / Анганов В.В., Муруев В.В., Амагырова Т.О. // Сельскохозяйственная наука АПК Сибири, Монголии, Казахстана и Кыргызстан: Материалы международной научно-практической конференции (Улан-Батор, 19-23 июля 2004 г.) - Новосибирск, 2004. - С. 168-170.
7. Анганов В.В. Биотехнологические методы интенсификации воспроизводительной функции крупного рогатого скота / Анганов В.В, Николоаев Б.И., Муруев А.В., Хамируев. Т.Н., Жапов Ж.Н. // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. – 2007. - № 11. – С. 49-51.
Лицензия ЛР №021274 от 26 марта 1998 г.
Подписано в печать 20.3.2009. Бумага офс. №1. Формат 60х84/16.
Усл. печ. л. 1,1 Уч.- изд. л. 1,07. Тираж 100. Заказ № 734
Цена договорная
Издательство ФГОУ ВПО «Бурятская государственная
сельскохозяйственная академия им. В.Р. Филиппова»,
670024, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина, 8