Характеристика биологической активности экзополисахаридов бактерий рода Lactobacillus и перспективы их использования 03. 02. 03 микробиология
| Вид материала | Автореферат |
- Программа вступительного экзамена в аспирантуру по специальной дисциплине 06. 02., 270.79kb.
- Программа кандидатского экзамена по специальности 03. 00. 07 Микробиология (биологические, 146.66kb.
- Контрольная работа по дисциплине Микробиология По теме Общая и специальная микробиология, 208.97kb.
- Особенности распределения и молекулярная детекция бактерий рода caulobacter озера байкал, 232.61kb.
- Взаимодействие ассоциативных бактерий и растений в зависимости от биотических и абиотических, 576.81kb.
- Каталазная активность углеводородокисляющих бактерий 03. 02. 03 «Микробиология», 250.08kb.
- Тесты по микробиологии, 156.97kb.
- Исследование возрастных особенностей моторики показывает исключительное значение двигательной, 36.84kb.
- Разнообразие аэробных и факультативно-анаэробных органотрофных бактерий содово-соленых, 515.52kb.
- Нп «сибирская ассоциация консультантов», 66.07kb.
На правах рукописи
Правдивцева Мария Ивановна
Характеристика биологической активности
экзополисахаридов бактерий рода Lactobacillus
и перспективы их использования
03.02.03 – микробиология
АВТОРЕФЕРАТ
на соискание ученой степени
кандидата биологических наук
Саратов – 2012
Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном
образовательном учреждении высшего профессионального образования
«Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова»
Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор
Карпунина Лидия Владимировна
Официальные оппоненты:
Швиденко Инна Григорьевна
доктор медицинских наук, профессор
ГБОУ ВПО Саратовский государственный медицинский университет
им. В.И.Разумовского
профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии
Ксенофонтова Оксана Юрьевна
кандидат биологических наук, доцент
ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный университет
им. Н.Г. Чернышевского»
доцент кафедры микробиологии и физиологии растений
Ведущая организация: ФГБОУ ВПО “Ульяновский государственный университет”
Защита диссертации состоится « » июня 2012 года в 00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.061.04 при ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова» (410005, Саратов, ул. Соколовая, 335, диссертационный зал).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ».
Автореферат разослан « » мая 2012 г.
Отзывы на автореферат направлять по адресу: 410012, г. Саратов, Театральная пл., 1, ФГБОУ ВПО «Саратовский ГАУ», ученому секретарю диссертационного совета.
Ученый секретарь диссертационного совета
доктор биологических наук, профессор Л.В. Карпунина
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Среди самых распространенных биополимеров в природе особое место занимают полисахариды (гликаны) различного происхождения: животного, растительного, микробного (Zhang, Bishop, Kupferle, 1998; Flemming, Wingender, 2001). Данные биополимеры многообразны по строению, локализации в клетках, по своим физико-химическим и биологическим свойствам. Особенно разнообразны полисахариды, синтезируемые микроорганизмами. Микробные экзополисахариды являются объектом интенсивных исследований вследствие их важного значения в строении и метаболизме микроорганизмов. К настоящему времени известно достаточно много микроорганизмов, способных продуцировать экзополисахариды. Среди бактериальных экзополисахаридов значительное внимание уделяется экзополисахаридам молочнокислых бактерий (Sandford, Cottrell, Pettitt, 1984; Sikkema, Oba, 1998; Degeest, Vaningelgem, Vuyst, 2001; Korakli et al., 2001; Bergmaier, Champagne, Lacroix, 2003; Champagne, Gardner, Lacroix, 2007; Полукаров, 2009 и др.). В то же время роль их в живых организмах не является до конца известной. Для обоснования применения экзополисахаридов молочнокислых бактерий в медико-биологической практике, ветеринарии, пищевой промышленности необходимы знания об их биологической активности. В связи с этим исследования, посвященные изучению биологической активности экзополисахаридов молочнокислых бактерий рода Lactobacillus различных штаммов, являются актуальными и могут иметь значительный научный интерес и прикладное значение.
Цель работы – характеристика биологической активности экзополисахаридов молочнокислых бактерий рода Lactobacillus – лаксаранов 1596, 1936, Z и обоснование их практического применения.
Задачи исследований:
1. Оценить токсичность экзополисахаридов L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596 (лаксаран 1596), L. delbrueckii B-1936 (лаксаран 1936) и L. delbrueckii ssp. bulgaricus (лаксаран Z) на биотест-объектах Colpoda steinii.
2. Выявить влияние лаксаранов 1596, 1936 и Z на микрофлору толстого кишечника крыс в норме и при различных видах стресса (иммобилизационный, холодовой и этаноловый).
3. Оценить влияние лаксаранов 1596, 1936 и Z на фагоцитарную активность макрофагов белых мышей при фагоцитозе S. aureus 209-P.
4. Исследовать продукцию цитокинов альвеолярными и перитонеальными макрофагами экспериментальных животных в процессе фагоцитоза in vitro S. aureus 209-Р на фоне действия in vivo лаксаранов 1596, 1936 и Z.
5. Оценить ранозаживляющие свойства лаксаранов 1596, 1936, Z и пленок, созданных на их основе.
6. Исследовать антимикробную активность лаксаранов 1596, 1936 и Z в отношении некоторой сапрофитной микрофлоры (Escherichia coli 01, Staphylococcus aureus 209-P, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27533, Candida albicans 130).
7. Изучить влияние добавок лаксаранов 1596, 1936 и Z на структурно-механические, физико-химические, микробиологические и органолептические свойства сыровяленой колбасы «Русич».
Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование биологической активности экзополисахаридов L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596 (лаксаран 1596), L. delbrueckii B-1936 (лаксаран 1936) и L. delbrueckii ssp. bulgaricus (лаксаран Z). На биотест-объектах C.steinii показано отсутствие их токсичности в концентрации 0, 06 г/кг. Установлена способность лаксаранов 1596, 1936, Z нормализовать кишечную микрофлору в условиях стресса; стимулировать рост некоторых молочнокислых бактерий и подавлять рост энтеропатогенной кишечной палочки и стафилококков в толстом кишечнике при иммобилизационном, холодовом и этаноловом стрессах. Впервые показано in vitro, что введение лаксаранов 1596, 1936, Z in vivo в организм мышей способствует увеличению числа активных макрофагов и завершению процесса фагоцитоза. Введение лаксаранов 1596, 1936 и Z в организм мышей стимулирует синтез провоспалительных цитокинов в разное время процесса фагоцитоза S. aureus 209-P (30 мин, 1 ч, 6 ч). Выявлена способность лаксаранов ускорять заживление ранений резаного типа у крыс. В условиях in vitro исследована антимикробная активность лаксаранов 1596, 1936, Z в отношении некоторой сапрофитной микрофлоры (Escherichia coli 01, Staphylococcus aureus 209-P, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27533, Candida albicans 130). Показано, что лаксараны 1596, 1936, Z в количестве 0,06 г на 1 кг сырья улучшают структурно-механические, физико-химические, микробиологические и органолептические свойства сыровяленой колбасы.
Практическая значимость. Выявленная способность нетоксичных экзополисахаридов L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596 (лаксаран 1596), L. delbrueckii B-1936 (лаксаран 1936) и L. delbrueckii ssp. bulgaricus (лаксаран Z) стимулировать рост некоторых молочнокислых бактерий и подавлять рост энтеропатогенной кишечной палочки и стафилококков в толстом кишечнике при иммобилизационном, холодовом и этаноловом стрессах, регулировать активность факторов естественной резистентности, ускорять заживление ранений, оказывать антимикробную активность, открывает перспективы их использования в экспериментальной биологии, фармацевтической и ветеринарной практике. Способность лаксаранов улучшать структурно-механические, физико-химические, микробиологические и органолептические свойства сыровяленых колбас, открывает возможность их использования в пищевой промышленности. Проведены эксперименты по изготовлению сыровяленых колбас с использованием лаксаранов 1596, 1936, Z в учебно-научном производственном цехе-лаборатории мяса и мясных продуктов СГАУ им. Н.И. Вавилова, что подтверждено актом производственных испытаний. Результаты диссертационной работы используются в учебном процессе при чтении лекций по микробиологии в ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова».
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Экзополисахариды L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596, L. delbrueckii B-1936 и L. delbrueckii ssp. bulgaricus не являются токсичными в концентрации 0,06 г/кг.
2. Экзополисахариды L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596, L. delbrueckii B-1936 и L. delbrueckii ssp. bulgaricus стимулируют рост некоторых молочнокислых бактерий и подавляют количество энтеропатогенной кишечной палочки и стафилококков в толстом кишечнике в условиях иммобилизационного, холодового, этанолового стрессов.
3. Экзополисахариды L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596, L. delbrueckii В-1936 и L. delbrueckii ssp. bulgaricus в концентрации 0,006 г/мл, стимулируют фагоцитарную активность макрофагов белых мышей и влияют на продукцию основных провоспалительных цитокинов ИЛ-1α и ФНО-α перитонеальными и альвеолярными макрофагами, способствуя активации факторов естественной резистентности.
4. Экзополисахариды L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596, L. delbrueckii В-1936 и L. delbrueckii ssp. bulgaricus приводят к более быстрому заживлению ранений резаного типа у экспериментальных животных (крыс), в большей степени лаксаран Z; проявляют in vitro антимикробную активность в отношении некоторой сапрофитной микрофлоры (E. coli 01, S. aureus 209-P, P. aeruginosa АТСС 27533 и C. albicans 130).
5. Экзополисахариды L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596, L. delbrueckii В-1936 и L. delbrueckii ssp. bulgaricus при добавлении в рецептуру сыровяленых колбас (0,06 г на 1 кг сырья) улучшают их структурно-механические, физико-химические, микробиологические и органолептические свойства.
Работа выполнена на кафедре микробиологии вирусологии и иммунологии ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» в рамках научно-исследовательской темы: «Роль биологически активных веществ (лектины, экзополисахариды) в регуляции метаболизма про- и эукариот».
Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на: Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 90-летию факультета (института) ветеринарной медицины (Саратов, 2009); Международной научно-практической конференции «Вавиловские чтения – 2009» (Саратов, 2009); профессорско-преподавательской конференции по итогам научно-исследовательской работы (Саратов, 2011); научной Международной конференции «Приоритетные направления развития науки, технологий и техники» (Шарм – Эль – Шейх, 2009); V общероссийской научной конференции «Актуальные вопросы науки и образования» (Москва, 2009); научной Международной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования» (Рио-де-Жанейро, 2009); IV Всероссийской школе-конференции «Химия и биохимия углеводов» (Саратов, 2011); Научно-практическом семинаре с международным участием «Настоящее и будущее биотехнологии в решении проблем экологии, медицины, сельского, лесного хозяйства и промышленности» (Ульяновск, 2011); Всероссийском симпозиуме с международным участием «Биологически активные вещества микроорганизмов: прошлое, настоящее, будущее» (Москва, 2011); конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов по итогам научно-исследовательской, учебно-методической и воспитательной работы (Саратов, 2012).
Личный вклад соискателя состоит в подготовке и проведении экспериментальных исследований на всех этапах диссертационной работы, интерпретации полученных результатов, участии в подготовке публикаций.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 17 работ, из них 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, двух глав: обзора литературы и собственных исследований, включающей объект и методы исследований, результаты исследований и их обсуждение, а также заключения, выводов и списка используемых литературных источников и приложений. Работа изложена на 136 страницах, содержит 22 таблиц, 17 рисунков. Список использованных литературных источников включает 185 наименований, в том числе 82 зарубежных.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объект, материалы и методы исследований
В работе использовали экзополисахариды Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596 (лаксаран 1596), L. delbrueckii B-1936 (лаксаран 1936) и L. delbrueckii ssp. bulgaricus (лаксаран Z), выделенные по методу А. Welman (2003) в модификации Е.В. Полукарова (2009).
Культуры L. delbrueckii subsp. delbrueckii B-1596 и L. delbrueckii B-1936 были получены из Российской коллекции микроорганизмов (г. Пущино-на-Оке); L. delbrueckii ssp. bulgaricus – из сухого порошка лиофилизированной бактериальной закваски болгарских палочек, используемую в России для производства йогуртов (Государственное унитарное предприятие производственно - экспериментальный завод РАСХН, г. Москва). В работе также использовали бактерии Escherichia coli 01, Staphylococcus aureus 209-P, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27533, полученные из коллекции бактериальных культур кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии; инфузории Colpoda steinii, полученные из музея культур кафедры физиологии, экологии и биологии ФГБОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университета им. Н.И. Вавилова»; грибы – Candida albicans 130, полученные из музея коллекции культур «Государственный научно-исследовательский ветеринарный институт Россельхозакадемии».
Для выращивания молочнокислых бактерий использовали среду А. Welman с соавт. (2003), которая состояла из (г/л): лактозы – 20,0; дрожжевого экстракта – 5,0; гидролизата казеина – 20,0; K2HPO4 – 2,0; MgSO4·7H2O – 0,1; MnSO4·4H2O – 0,05; цитрата аммония – 2,0; ацетата натрия – 5,0; твин-80 – 1,0 мл/л и гидролизованное молоко; для стафилококков – желточно-солевой агар, для эшерихий – Эндо (Голубева, 1985), для псевдомонад – Плоскирева, для сальмонелл – Висмут-сульфит агар, для грибов – Сабуро (Лабинская, 1978).
Определение токсичности проводили по стандартной экспресс-методике определения общей токсичности с использованием простейших в качестве биотест-объектов C. steinii (Виноходов, 1995; Виноходов, Пожаров, 2006).
В работе использовали самцов белых нелинейных мышей со средней массой тела 21 г, а также самок беспородных белых крыс со средней массой 210 г. Экспериментальные исследования выполнены в соответствии с требованиями Федерального закона от 01.01.1997 г. «О защите животных от жестокого обращения» и положениями Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 18.03.1986 г). Всех животных содержали в стандартных условиях вивария.
Иммобилизационный стресс моделировали путем фиксирования животных (крыс) на спине с использованием мягкой лигатуры в течение 10 минут, холодовой стресс – путем помещения крыс на лед на 10 минут; этаноловый стресс с помощью зонда вводили 1 мл 25 % раствора этилового спирта в желудок крыс.
Альвеолярные макрофаги (АМФ) выделяли из лёгких, а перитонеальные (ПМФ) из брюшной полости мышей по общепринятым методикам (Кондратьева, Воробьёва, Буракова, 2001). Активность процесса фагоцитоза, индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) и индекс активации киллинга (ИАК) вычисляли по общепринятым методикам (Клаус, 1990; Кондратьева, Самуилова, 2001) в условиях in vitro.
Провоспалительные цитокины ИЛ-1α и ФНО-α определяли с помощью иммуноферментных моноклональных тест-систем (производство ООО «Цитокин», г. Санкт-Петербург).
Ранозаживляющие свойства лаксаранов и плёнок, созданных на основе лаксаранов, определяли на модели резаных ран самок белых беспородных крыс. Животные были поделены на группы: контрольные животные, ранения которых не обрабатывали и опытные животные, которым на ранение наносили 50 мкл лаксарана 1596, либо лаксарана 1936, либо Z (0,06 г/кг). Животных контрольной и опытных групп в первые сутки эксперимента фиксировали на специальных планшетах и под эфирным наркозом в межлопаточной области наносили с помощью скальпеля параллельные резаные линейные раны спины длиной до 1 см (Брайловская, 2009).
Антимикробную активность лаксаранов 1596, 1936, Z и плёнок, приготовленных на основе данных лаксаранов, изучали методом диффузии в агар (Лабинская, 1978).
Сыровяленые колбасы изготовляли по рецептуре (Рогов, 2000). В сыровяленых колбасах определяли содержание массовой доли влаги, массовую долю связанной влаги (ВСС) (ГОСТ 51479-99), активную кислотность (рН) (ГОСТ 51478-99), активность воды (ав) (Алейников, 2007), проводили определение массы продукта на лабораторных весах марки CAS CBX, органолептическую оценку (ГОСТ 9959-91), определение качественного и количественного состава микрофлоры (Лабинская, 1978; Берджи, 1997; Артемьева, 2002).
Статистический анализ результатов проводили по стандартным методикам (Воробьев, Елсуков, 1989). Использовали параметрический t-критерий Стъюдента, достоверными считали различия при вероятности ошибки р0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Оценка токсичности лаксаранов на биотест-объекте Colpoda steinii
Биоанализ токсичности лаксаранов 1596, 1936 и Z в концентрации 0,06 г/кг проводили, используя в качестве индикаторного организма инфузории – C.steinii. При микроскопировании простейших в контрольной группе наблюдали, что их количество (30 особей) на протяжении всего времени эксперимента (15 минут) не изменялось. Движение инфузорий было равномерным, передвигались они со скоростью 2 мм/с, морфология их не изменялась. При добавлении лаксарана 1596 и 1936 (в концентрации 0,06 г/кг) к взвеси инфузорий в первые минуты наблюдали нарушение координации движения инфузорий, они начинали двигаться быстрее (2,5 мм/с), через 10 мин движение простейших приходило в норму и в дальнейшем их поведение не отличалось от движения и скорости инфузорий в контроле. При добавлении лаксарана Z к простейшим в такой же концентрации было замечено, что инфузории двигались медленнее (1,5 мм/с), чем в группах с лаксаранами 1596 и 1936.. При этом инфузории сохраняли жизнеспособность, морфология их не изменялась, только движение ресничек было замедлено в первые минуты эксперимента, через 5 минут их поведение не отличалось от поведения инфузорий в контрольной группе.
Таким образом, так как гибели инфузорий по истечении 15 минут не происходило и все они сохраняли свою подвижность, все исследуемые лаксараны, согласно ГОСТ 13496.7 – 97, можно отнести к нетоксичным соединениям.
Изучение влияния лаксаранов на микрофлору толстого кишечника крыс в норме и при различных видах стресса
Изучали влияние лаксаранов на микрофлору толстого кишечника крыс при ректальном введении 200 мкл лаксаранов в норме и при различных видах стресса (иммобилизационный, холодовой, этаноловый) (табл. 3-5).
Таблица 3 – Влияние лаксарана 1596 и действие различных видов стресса
на микрофлору толстого кишечника крыс
-
Характер
воздействия
Количество клеток
М ± m
105, КОЕ/г
103, КОЕ/г
молочнокислые бактерии
кишечная палочка
стафилококки
интактная группа
3,90 ± 0,21
1,05 ± 0,20
1,50 ± 0,24
контрольная
группа
3,15 ± 0,21
0,80 ± 0,21
1,20 ± 0,20
лаксаран 1596
2,70 ± 0,19
0,30 ± 0,11°
0,92 ± 0,22
иммобилизационный стресс (10 мин)
0,60 ± 0,20°
0,30 ± 0,21°
2,85 ± 0,22°
холодовой стресс
(10 мин)
2,10 ± 0,12°
2,10 ± 0,10°
0,45 ± 0,12°
этаноловый стресс (10 мин)
2,15±0,10°
1,80 ± 0,11°
0,75 ± 0,22°
лаксаран 1596 + иммобилизационный стресс (10 мин)
1,75 ± 0,21° Δ*
0,15 ± 0,12° Δ*
0,85 ± 0,11*
лаксаран 1596 + холодовой стресс (10мин)
3,15 ± 0,23◊
0,65 ± 0,11 Δ◊
0,52 ± 0,13°
лаксаран 1596 + этаноловый стресс (10 мин)
2,10 ± 0,22°
0,53 ± 0,23•
0,63 ± 0,20°
Примечание: ° − P< 0,05 относительно контрольной группы;
Δ − Р< 0,05 относительно лаксарана 1596;
*− P< 0,05 относительно иммобилизационного стресса;
◊ − P< 0,05 относительно холодового стресса;
• − P< 0,05 относительно этанолового стресса.
В ходе проведенных экспериментов было установлено, что в интактной группе животных, которым ничего не вводили, количество молочнокислых бактерий, кишечной палочки, стафилококков практически не отличалось от количества бактерий контрольной группы животных (вводили ректально 200 мкл стерильной дистиллированной воды). Поэтому дальнейшие сравнения производили с показателями животных контрольной группы. В группах животных после иммобилизационного, холодового и этанолового стрессов, было отмечено понижение количества молочнокислых бактерий в 5,2; 1,5 и 1,4 раза, соответственно. Воздействие иммобилизационного стресса способствовало уменьшению количества кишечной палочки до 0,30·105 КОЕ/г, при действии холодового и этанолового стрессов наблюдали увеличение количества кишечной палочки в 2,6 раза и 2,3 раза, относительно контрольной группы животных. Различные модели стресса оказывали влияние и на количество стафилококков. При действии иммобилизационного стресса количество стафилококков увеличилось в 2,4 раза относительно контрольной группы животных (табл. 3).
Таблица 4 – Влияние лаксарана 1936 и действие различных видов стресса
на микрофлору толстого кишечника крыс
-
Характер
воздействия
Количество клеток
М ± m
105, КОЕ/г
103, КОЕ/г
молочнокислые бактерии
кишечная палочка
стафилококки
контрольная группа
3,15 ± 0,21
0,80 ± 0,21
1,20 ± 0,20
лаксаран 1936
3,70 ± 0,32
0,45 ± 0,11
0,30 ± 0,12°
иммобилизационный стресс (10 мин)
0,60 ± 0,20°
0,30 ± 0,21°
2,85 ± 0,22°
холодовой стресс
(10 мин)
2,10 ± 0,12°
2,10 ± 0,10°
0,45 ± 0,12°
этаноловый стресс (10 мин)
2,15±0,10°
1,80 ± 0,11°
0,75 ± 0,22°
лаксаран 1936+ иммобилизационный стресс (10 мин)
0,30 ± 0,21° Δ*
0,45 ± 0,21
0,85 ± 0,11 Δ*
лаксаран 1936 + холодовой стресс (10мин)
6,75 ± 0,13° Δ◊
0,11 ± 0,10° Δ◊
0,21 ± 0,10°
лаксаран 1936 + этаноловый стресс (10 мин)
3,15 ± 0,24•
0,15 ± 0,12°•
0,45 ± 0,12°
Примечание:
° − P< 0,05 относительно контрольной группы;
Δ − Р< 0,05 относительно лаксарана 1936;
*− P< 0,05 относительно иммобилизационного стресса;
◊ − P< 0,05 относительно холодового стресса;
• − P< 0,05 относительно этанолового стресса.
Таким образом, как свидетельствуют проведенные исследования, лаксараны способны в организме животных увеличивать количество молочнокислых бактерий и уменьшать количество условно-патогенной микрофлоры (кишечной палочки и стафилококков при всех рассмотренных видах стрессов), т.е. выполнять роль пребиотиков. Возможно, лаксараны могут выполнять питательную функцию для других бактерий, что является характерным для многих полисахаридов (Гринберг, 1980). Как показывают данные, приведенные в таблицах 3 – 5, лаксараны способны нормализовать микрофлору толстого кишечника крыс в условиях стресса в организме животных.
Таблица 5 – Влияние лаксарана Z и действие различных видов стресса
на микрофлору толстого кишечника крыс
-
Характер
воздействия
Количество клеток
М ± m
105, КОЕ/г
103, КОЕ/г
молочнокислые бактерии
кишечная палочка
стафилококки
контрольная группа
3,15 ± 0,21
0,80 ± 0,21
1,20 ± 0,20
лаксаран Z
4,12 ± 0,11°
0,15 ± 0,21°
0,45 ± 0,11°
иммобилизационный стресс (10 мин)
0,60 ± 0,20°
0,30 ± 0,21°
2,85 ± 0,22°
холодовой стресс
(10 мин)
2,10 ± 0,12°
2,10 ± 0,10°
0,45 ± 0,12°
этаноловый стресс (10 мин)
2,15±0,10°
1,80 ± 0,11°
0,75 ± 0,22°
лаксаран Z + иммобилизационный стресс (10 мин)
2,52 ± 0,21° Δ*
0,45 ± 0,14 Δ
0,42 ± 0,11°*
лаксаран Z + холодовой стресс (10мин)
2,40 ± 0,17° Δ
0,75 ± 0,14 Δ◊
0,33 ± 0,15°
лаксаран Z + этаноловый стресс (10 мин)
2,20 ± 0,12° Δ
0,51 ± 0,11 Δ •
0,31 ± 0,13°
Примечание:
° − P< 0,05 относительно контрольной группы;
Δ − Р< 0,05 относительно лаксарана Z;
*− P< 0,05 относительно иммобилизационного стресса;
◊ − P< 0,05 относительно холодового стресса;
• − P< 0,05 относительно этанолового стресса.