Geum.ru

Фундаментальные аспекты создания на основе минерала бишофит магний-содержащих лекарственных средств 14. 00. 25 фармакология, клиническая фармакология

Вид материалаАвтореферат
Подобный материал:
1   2   3   4   5
Результаты исследований и их обсуждение

Сравнительная скорость компенсации дефицита магния органическими и неорганическими солями магния

В результате проведенных исследований было показано, что содержание животных на безмагниевой диете сопровождалось изменением внешнего вида и ряда интегральных показателей. Так, в группе животных, получавших диету, наблюдалось потускнение шерстного покрова, гиперемия открытых участков тела (ушных раковин, хвоста и лап), отмечалась гибель животных. При анализе динамики веса животных, получавших диету, не содержащую магний, было показано статистически значимое снижение массы тела. При этом к 7 неделе наблюдалось максимальное снижение веса в среднем с 289,6±18,2 гр. в контрольной группе до 208,5±12,0 гр. в группе магнийдефицитных животных.

У крыс, находящихся на безмагниевой диете, к концу 8 недели наблюдалось достоверное снижение уровня магния в эритроцитах в среднем на 57% (с 2,07±0,02 до 0,89±0,03 мМ/л) и в плазме – в среднем на 47% (с 1,27±0,03 до 0,67±0,03 мМ/л), по отношению к группе интактных крыс.

При введении магниевых солей отмечалось восстановление уровня магния, как в плазме, так и эритроцитах животных.

Наиболее значимым с диагностической точки зрения является содержание магния в эритроцитах. Достоверные отличия по величине компенсации дефицита магния в эритроцитах между различными группами животных наблюдались в основном к 6 дню введения солей магния. При этом в группу лидера по компенсации дефицита магния в эритроцитах входили животные, получавшие Mg L-аспарагинат (величина компенсации дефицита – 84,87±4,92%) и Mg хлорид (69,20±5,99%).

Отличия от группы Mg L-аспарагината по уровню магния в эритроцитах были достоверными для групп Mg L-глутамата, Mg цитрата, Mg сукцината, Mg гидрофосфата, Mg карбоната, Mg силиката, Mg оксида, Mg сульфата и препарата сравнения магнерота. Группа Mg хлорида статистически значимо превосходила Mg лактат, Mg сукцинат, Mg карбонат, Mg силикат, Mg сульфат и магнерот (рис. 1).

Рисунок 1. Влияние солей магния (50 мг элементарного Mg на кг веса животного) на величину компенсации дефицита магния (Х) в эритроцитах животных в условиях алиментарной гипомагнезиемии, %.

Обозначения: по оси ординат – изменение процента компенсирования дефицита магния (Х) в эритроцитах животных (%); по оси абсцисс – исследуемые группы животных. Вертикальные штрихи – стандартная ошибка средней величины. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программы Statistiсa 6,0 с использованием однофакторного дисперсионного анализа и критерия Scheffé; * –отличие от интактной группы животных; ** – отличие от группы животных получавших магнийдефицитную диету; § – отличие от группы животных, получавших Mg L-аспарагинат; # –отличие от группы животных, получавших Mg хлорид, при р<0,05.


В эритроцитах сроки полной компенсации дефицита магния для групп животных, получавших Mg L-аспарагинат и магне В6, составляли 11 суток введения препаратов, для группы Mg хлорида – 16 суток, Mg DL-аспарагината – 18 суток, Mg D-аспарагината – 24 сутки (табл. 1).

Согласно современным представлениям о стереоспецифичности, в организме человека более активно могут усваиваться и вовлекаться в биохимические процессы L-изомеры аминокислот [D'Aniello A. et al., 1993; Nagata Y. et al., 1989]. Для оценки сравнительной биодоступности солей магния различных стереоизомеров аспарагиновой и глутаминовой кислот была изучена скорость компенсации дефицита магния в условиях алиментарной и фуросемидной гипомагнезиемии.

В настоящем исследовании к 13 дню введения солей величина компенсации алиментарного дефицита магния (Х) в эритроцитах для группы животных, получавших Mg L-аспарагинат, составила 112,14±11,23%. Группы Mg DL- и D-аспарагината по данному показателю статистически незначимо отставали от группы лидера на 16,84% и 24,32% соответственно. Группа Mg L-глутамата по величине компенсации дефицита магния [93,43±4,94%] недостоверно превосходила Mg DL-глутамат на 3,74%.


Таблица 1. Усредненные сроки компенсации (сутки) уровня магния в плазме и эритроцитах в группах животных, получавших соли магния и магнийсодержащие препараты (50 мг элементарного Mg на кг веса животного), в условиях алиментарной гипомагнезиемии (рассчитанные методом регрессионного анализа)

Изучаемый препарат
50%-ный уровень компенсации, сутки
100%-ный уровень компенсации, сутки

Плазма
Эритроциты
Плазма
Эритроциты

Mg L-аспарагинат с витамином В6
1,06

(0,79÷1,43)
0,66

(0,51÷0,86)
2,80

(2,08÷3,78)
4,35

(3,35÷5,65)

Mg L-аспарагинат
1,99

(1,57÷2,51)
2,42

(2,26÷2,58)
4,52

(3,58÷5,72)
10,40

(9,75÷11,10)

Mg L-аспарагинат, таб
1,53

(1,22÷1,93)
2,90

(2,26÷3,71)
13,49

(10,73÷16,95)
14,72

(11,49÷18,84)

Mg DL-аспарагинат
3,60

(2,31÷5,61)
3,48

(3,14÷3,86)
8,32

(5,34÷12,97)
17,51

(15,81÷19,39)

Mg D-аспарагинат
3,37

(2,25÷5,05)
4,95

(3,74÷6,53)
8,52

(5,69÷12,72)
23,18

(17,55÷30,62)

Mg L-глутамат
3,56

(2,55÷4,99)
5,81

(5,29÷6,38)
9,14

(6,53÷12,78)
16,37

(14,90÷17,97)

Mg DL-глутамат
4,45

(3,11÷6,38)
4,19

(3,02÷5,81)
9,73

(6,79÷13,94)
23,25

(16,76÷32,18)

Mg DL-пироглутамат
4,45

(2,75÷7,21)
4,76

(3,45÷6,57)
10,86

(6,71÷17,59)
16,28

(11,80÷22,47)

Mg глицинат
4,62

(3,51÷6,07)
4,71

(4,05÷5,47)
9,10

(6,93÷11,96)
22,93

(19,73÷26,66)

Mg цитрат
4,93

(2,82÷8,62)
5,23

(4,00÷6,86)
11,45

(6,55÷20,03)
21,18

(16,18÷27,74)

Mg лактат
4,32

(3,07÷6,07)
6,35

(4,92÷8,20)
12,89

(9,17÷18,10)
25,32

(19,61÷32,69)

Mg сукцинат
4,40

(2,97÷6,53)
6,56

(4,74÷9,08)
14,61

(9,86÷21,65)
26,10

(18,87÷36,11)


Продолжение таблицы 1

Изучаемый препарат
50%-ный уровень компенсации, сутки
100%-ный уровень компенсации, сутки

Плазма
Эритроциты
Плазма
Эритроциты

Mg тауринат
0,70

(0,67÷0,73)
2,39

(1,95÷2,92)
10,35

(9,91÷10,80)
17,37

(14,21÷21,23)

Mg хлорид с витамином В6
0,81

(0,63÷1,02)
0,44

(0,36÷0,55)
2,33

(1,84÷2,96)
4,10

(3,29÷5,11)

Mg хлорид
2,72

(2,07÷3,57)
3,58

(2,14÷4,08)
7,71

(5,87÷10,12)
15,21

(13,36÷17,32)

Mg нитрат
1,62

(1,35÷1,96)
4,54

(4,18÷4,93)
9,50

(7,90÷11,42)
30,20

(27,81÷32,80)

Mg тиосульфат
2,21

(1,86÷2,62)
4,90

(4,57÷5,25)
12,08

(10,18÷14,33)
34,26

(32,00÷36,69)

Mg гидрофосфат
3,54

(2,94÷4,26)
6,87

(6,72÷7,01)
19,29

(16,02÷23,24)
45,01

(44,06÷45,98)

Mg карбонат
5,48

(4,6÷6,53)
9,56

(7,86÷11,62)
30,86

(25,91÷36,76)
103,42

(85,05÷125,76)

Mg силикат
34,87

(31,8÷38,26)
38,5

(27,57÷53,78)
737,62

(672,42÷809,15)
519,13

(371,67÷725,11)

Mg оксид
2,16

(1,32÷3,56)
6,35

(4,83÷8,35)
52,11

(31,67÷85,73)
50,18

(38,15÷66,02)

Mg сульфат
3,26

(2,44÷4,36)
7,00

(5,40÷9,08)
16,75

(12,52÷22,42)
23,68

(18,28÷30,68)

Магне В6
1,74

(1,48÷2,06)
2,26

(1,92÷2,66)
6,28

(5,32÷7,41)
10,47

(8,89÷12,33)

Аспаркам
3,27

(2,11÷5,07)
3,90

(2,67÷5,69)
8,74

(5,64÷13,55)
16,58

(11,37÷24,18)

Магнерот
3,63

(2,08÷6,31)
5,79

(4,24÷7,90)
12,82

(7,37÷22,32)
17,80

(13,05÷24,29)


Исходя из полученных данных, можно сделать вывод о более высокой биодоступности комплекса магния с L-стереоизомером аспарагиновой кислоты, по сравнению с DL и D-стереоизомерами.

Существует мнение [Durlach J. 1969, 1994, 2000], что витамин В6 ускоряет проникновение магния внутрь клетки и является необходимым для его внутриклеточной кумуляции. Поэтому на следующем этапе исследования было изучено влияние витамина В6 на величину биодоступности наиболее активных солей магния (Mg L-аспарагината и Mg хлорида) в условиях гипомагнезиемии.

На модели алиментарной гипомагнезиемии было показано, что к 9 дню введения солей уровень компенсации дефицита магния (Х) в эритроцитах для группы животных, получавших Mg L-аспарагинат в комбинации с витамином В6, составил 117,07±3,25%. При этом группа Mg L-аспарагината по данным показателям статистически незначимо отставала от Mg L-аспарагината в комбинации с витамином В6 – на 26,02%.

Для Mg хлорида в комбинации с витамином В6 к 9 дню введения уровень магния в эритроцитах восстановился на 114,36±3,19%. Отставание по данному показателю для группы Mg хлорида было достоверным на 35,17%.

Для группы Mg лактата с витамином В6 (магне В6) величина компенсации магниевого дефицита составила 97,97±4,72%. При этом у животных, получавших Mg лактат, уровень компенсации дефицита магния недостоверно был ниже на 35,0%.

Рассчитанные методом регрессионного анализа, сроки полной компенсации алиментарного дефицита магния в эритроцитах для группы животных, получавших Mg L-аспарагинат и Mg хлорид в комбинациях с витамином В6, соответствовали 5 суткам, магне В6 и Mg L-аспарагинат – 11 суткам, Mg хлорид – 16 суткам, Mg лактат – 26 суткам введения препаратов (табл. 1).

Таким образом, исследуемые соли и препараты магния в условиях перорального введения приводили к компенсации алиментарной гипомагнезиемии. Лидерами по скорости компенсации дефицита магния были Mg L-аспарагинат и Mg хлорид. Комплекс магния с L-стереоизомером аспарагиновой кислоты обладает более высокой биодоступностью, по сравнению с DL и D-стереоизомерами. Витамин В6 в комбинациях с Mg L-аспарагинатом, Mg хлоридом и Mg лактатом повышает скорость компенсации дефицита магния в организме в условиях гипомагнезиемии. При этом комбинации Mg L-аспарагината с витамином В6 и Mg хлорида с витамином В6 по данному показателю превосходили или были сопоставимы с препаратом сравнения магне В6 (Mg лактат в комбинации с витамином В6). Аналогичная закономерность была получена на модели фуросемидной интоксикации.

Магний в патогенезе психоэмоциональных нарушений

Предполагается, что нарушение баланса магния в организме вносит определенный вклад в патогенез многих психических заболеваний [Grimaldi B.L., 2002; Murck H., 2002]. Дефицит магния тесно взаимосвязан с депрессией [Rasmussen H.H. et al., 1989]. Показано также, что существует взаимосвязь между уровнем магния, повышением соотношения Ca:Mg [Levine J. et al., 1999] в спинномозговой жидкости и суицидальным поведением [Banki C.M. et al., 1985]. Низкий уровень магния и высокий – кальция был зафиксирован в неокортексе больных депрессией [Basarsky T.A. et al., 1998]. С другой стороны, у пациентов с синдромом хронической усталости и предменструальным синдромом в результате приема препаратов магния улучшалось настроение [Cox I.M. et al., 1991]. Более того, после терапии магнием наблюдается стабилизация настроения у пациентов с биполярными расстройствами [Chouinard G. et al., 1990]. Одним из механизмов действия трициклических антидепрессантов является блокада потенциал-зависимых кальциевых каналов, снижение концентрации внутриклеточного кальция и повышение – магния [Lavioe P.A. et al., 1990].

Singewald N. и Sinner C. [2004] установили, что дефицит магния вызывает депрессивно-подобное поведение, что, по их мнению, можно использовать для оценки антидепрессантной и анксиолитической активности новых соединений. В экспериментах, проведенных Fromm L. с соавт. [2004], магния сульфата при внутривенном введении крысам с травматическим повреждением головного мозга предупреждал в последующем развитие депрессии. Согласно литературным данным [Eby G.A., Eby K.L., 2006], магний в виде таурината и глицината уже в течение 7 дней приводит к регрессии симптомов большой депрессии.

Результаты наших исследований подтверждают данные других авторов [Singewald N., Sinner C., 2004] о формировании депрессивно-подобного и тревожного поведения при дефиците магния. Так, в ходе наших экспериментов было показано, что дефицит магния приводит к достоверному снижению горизонтальной, вертикальной и поисковой активности в тесте открытое поле, уменьшению числа посещений и времени пребывания в открытых рукавах крестообразного лабиринта, увеличению времени пассивного плавания в тесте Порсольта.

После перорального введения изучаемых солей произошла компенсация дефицита магния в плазме крови и эритроцитах, которая сопровождалась снижением тревожности и регрессией проявлений депрессии. В тесте «открытое поле» наибольшую горизонтальную активность продемонстрировали крысы, получавшие Mg L-аспарагинат и Mg хлорид в комбинациях с витамином В6 и магне В6. В данных группах этот показатель статистически значимо превосходил горизонтальную активность в 2,7 (р<0,001), 2,6 (р<0,001) и 2,4 раза (р<0,001) соответственно, по сравнению с магний-дефицитными животными. При этом Mg L-аспарагинат и Mg хлорид в комбинациях с витамином В6 достоверно отличались как от Mg L-аспарагината, так и Mg хлорида. Уровень горизонтальной активности в группе, получавшей Mg сульфат, был статистически значимо ниже, чем в группах, получавших другие соли магния. Аналогичным образом происходило восстановление вертикальной активности.

Соли магния, вводимые магнийдефицитным животным, приводили к увеличению поисковой активности. Наибольшее число заглядываний в отверстия было зафиксировано у крыс, которые получали Mg L-аспарагинат и Mg хлорид в комбинациях с витамином В6. Для этих групп этот показатель был выше, чем у диеты на в 3,8 (р<0,001) и 3,7 раза (р<0,001) соответственно. Данные соли статистически значимо превосходили остальные соединения магния.

Частота актов груминга, которая является критерием комфортного поведения животных в незнакомой обстановке [Калуев А.В., 1998], возрастала после курса лечения солями магния. В группах Mg L-аспарагината в комбинации с витамином В6 и магне В6 этот показатель был максимальным (7,55±0,41 и 5,67±0,47 соответственно). При этом Mg L-аспарагинат в комбинации с витамином В6 и Mg L-аспарагинат, достоверно превосходили оба препарата сравнения, а Mg хлорид в комбинации с витамином В6 и Mg хлорид были статистически значимо эффективнее Mg сульфата.

Животные, получавшие соли магния, чаще, чем магнийдефицитные, выходили в центр «открытого поля». Лидерами по этому показателю были Mg L-аспарагинат и Mg хлорид, комбинированные с пиридоксином (4,27±0,35 и 4,22±0,49 выходов в центр установки соответственно). При этом были выявлены значимые отличия от группы животных, получавших Mg сульфат, наименее эффективного соединения среди изучаемых солей магния.

В тесте «крестообразный лабиринт» сокращался латентный период пребывания в центре у животных, получавших соли магния. Этот показатель отличался на 59,8% (р<0,01) и 57,9% (р<0,01) для групп Mg L-аспарагината и Mg хлорида в комбинациях с пиридоксином, на 47,9% (р<0,05) для магне В6 и 55% (р<0,05) для Mg сульфата по сравнению с аналогичным периодом для диеты. Латентный период до выглядывания из темного отсека после введения солей магния также восстанавливался. Лидерами по влиянию на данный параметр были Mg L-аспарагинат и Mg хлорид в комбинациях с витамином В6 и магне В6. Увеличивалось число посещений темных и светлых отсеков. Удлинялось время пребывания в светлых рукавах лабиринта, особенно в группах солей, комбинированных с пиридоксином. Время нахождения в темных рукавах не изменялось. Количество болюсов уменьшалось, но недостоверно.

В тесте вынужденного плавания увеличивался латентный период до первого эпизода пассивной иммобилизации. Лидерами по этому показателю являлись Mg L-аспарагинат и Mg хлорид в комбинациях с витамином В6, которые превосходили группу дефицита на 98,9 и 100,9% соответственно Данные соли отличались от Mg L-аспарагината, Mg сульфата, а Mg L-аспарагинат в комбинации с витамином В6 – еще и от Mg хлорида. При этом все обозначенные соли и комбинации статистически значимо превосходили Mg сульфат. По сравнению с группой диеты, уменьшалась общая продолжительность периодов пассивной иммобилизации (для группы-лидера магне В6 – на 39,5%), которая характеризует степень депрессивности животных. Обратно пропорционально укорочению периода пассивной иммобилизации увеличивался период активного избегания.

В целом