«Московский зоопарк»
| Вид материала | Автореферат |
- Отчёт муниципального автономного учреждения культуры «пермский зоопарк», 621.28kb.
- Отчёт муниципального автономного учреждения культуры «пермский зоопарк», 628.32kb.
- Отчёт муниципального учреждения культуры «пермский зоопарк», 664.01kb.
- 10 июня 1792 в Париже был создан первый в мире публичный зоопарк, 107.06kb.
- Ялтинский зоопарк "Сказка" открылся в 1995 году и за это время его посетило уже более, 79.87kb.
- Тематическое планирование курса биологии (2часа в неделю, 68 часов) 7 кл на 2011-2012, 142.22kb.
- Широко раскроем ротик, 25.97kb.
- Концепция развития государственного учреждения республиканский зоопарк "Орто-Дойду", 295.52kb.
- «московские каникулы» Для организованных детских групп Москва Кремль – Красная площадь, 257.02kb.
- Московский Центр непрерывного математического образования, 51.2kb.
Таблица 5. Дифференциальный диагноз при ВПГ игуан (N=37, p<0,05)
| Дифференциально-диагностический протокол | Рахит | Остеомаляция | Остеоренальный синдром |
| Половозрастные особенности | Ящерицы до 2 лет | Преимущественно беременные самки | Ящерицы 3,5-6 лет, ♂♂ 59,4%; ♀♀40,6% |
| Этиопатогенез | Алиментарный дефицит кальция, избыток фосфора, отсутствие УФ-В и/или пищевого холекальциферола | Усиленная мобилизация кальция, Д3-независимое нарушение всасывания кальция в кишечнике, гиперфосфатемия | Нарушение секреции и реабсорбции фосфатов, реабсорбции кальция почкой; снижение активности α1-гидроксилазы, нарушение структуры оксипролинов |
| Патогномоничные симптомы | Фиброзная дистрофия мандибулы, рахитические четки, тремор | Размягчение мандибулы, судорожный синдром | Размягчение мандибулы, фасцикуляция подкожных мышц |
| Патоморфологическая характеристика | Нарушение энхондрального окостенения, остеоклазия кортикальной кости, выраженная фиброзная остеодистрофия | Лакунарная резорбция медуллярной кости, незначительная реакция надкостницы, умеренная эктопическая минерализация | Лакунарная резорбция медуллярной кости, выраженная метастатическая минерализация, умеренные фиброзно-дистрофические изменения |
| Биохимический профиль: Кальций (моль/л) Органофосфат (моль/л) Щелочная фосфатаза (ЕД/л) Мочевая кислота (мкмоль/л) | 1,1±1,0 1,4±0,9 243±69 109±80 | 1,2±0,6 2,5±0,7 214±61 196±28 | 1,9±1,3 4,4±2,3 201±79 443±67 |
Таким образом, прижизненно заболевания дифференцируются по патогномоничным симптомам и биохимическому профилю, посмертно – по патоморфологической картине.
На основании анализа литературных данных, зоопарковских рационов, состава 8 видов импортных подкормок для рептилий и клинических комиссионных опытов, нами разработана совместно с ООО «Агроветзащита» и внедрена витаминно-минеральная подкормка «Рептилайф-порошок» и «Рептилайф мультивитаминный комплекс для инъекций» для профилактики ВПГ рептилий.
Опухоли у рептилий регистрируют достаточно редко, в среднем, не более чем у 2% вскрытых животных (Effron et al, 1977; Machotka, 1984; Oros et al, 2001). В связи с этим в обзорных зарубежных публикациях сообщается суммарно не более чем о 300 случаях опухолей (Harshbarger, 1975, 1976, 1980, 1984; Jacobson, 1981; Frye, 1991; Done, 1996). Опухоли рептилий, по данным наших исследований, обладают выраженной биохимической и иммунной специфичностью, и поэтому плохо дифференцируются на гистологическом уровне. Для выявления гистогенеза требуется иммуногистохимическое и электронномикроскопическое исследование. Полученные нами данные о 47 верифицированных случаях опухолей у рептилий, что составляет на 1800 вскрытий 2,6 %, существенно дополняют этот раздел ветеринарной герпетологии и сравнительной онкологии. Ниже (табл. 6) перечислены установленные нами 29 самостоятельных нозологических форм опухолей рептилий, среди которых имеется несколько новых нозологий, ранее не описанных у этих животных.
Таблица 6. Нозологические формы опухолей рептилий, установленные в ходе исследований
| Вид рептилии | Локализация | Тип опухоли |
| Хвостатая гадюка | Подкожно | Липома |
| Шумящая гадюка | Стенка клоаки | Миксома |
| Среднеазиатская кобра | Клоака | Круглоклеточная саркома |
| Тигровый питон | Подкожно | Фиброма |
| Палестинская гадюка | Подкожно | Веретеноклеточная саркома |
| Степная гадюка | Яичник | Папиллярная кистоаденома |
| Сетчатый питон | Голова, позвоночник | Остеосаркома (мелкоклеточный вариант) |
| Рогатая гадюка | Ротовая полость | Злокачественная гемангиоперицитома |
| Сетчатый питон | Стенка тонкой кишки | Ангиофиброма |
| Персидский полоз | Спленопанкреас, щитовидная железа | Недифференцируемая саркома |
| Хвостатая гадюка | Апоневроз, позвоночник | Фибросаркома |
| Тигровый питон | Подчелюстное пространство | Недифференцируемая мукоэпителиальная карцинома |
| Полоз Шренка | Клоака | Аденокарцинома |
| Мексиканский полоз | Толстая кишка | Железистые полипы |
| Маисовый полоз | Подкожно | Липосаркома |
| Африканская древесная гадюка | Спленопанкреас | Низкодифференцированная аденокарцинома |
| Бенгальский варан | Крестцовый отдел позвоночника | Паростальная саркома |
| Зеленая игуана | Нижняя челюсть | Хондросаркома II стадии |
| Мадагаскарский геккон | Яичник | Гигантоклеточная опухоль |
| Зеленая игуана | Гиоидные хрящи | Папиллярный рак щитовидной железы |
| Японский эублефар | Тонкий кишечник, печень | Ворсинчатые полипы |
| Йеменский хамелеон | Подкожная клетчатка | Ганглионейробластома |
| Йеменский хамелеон | Печень, легкое | Папилломатоз |
| Зеленая игуана | Печень, селезенка, почки, миокард | Лимфома |
| Капский варан | Желчный пузырь | Холангиосаркома |
| Тегу | Кожа | Плоскоклеточный рак |
| Балканская черепаха | Легкие, печень, средостение, ЖКТ | Лимфосаркома |
| Среднеазиатская черепаха | Почка | Аденома |
Нами впервые описана ганглионейробластома, локализованная в подкожной клетчатке у йеменского хамелеона. Опухоль состояла из крупных клеток разной формы со светлыми пузыревидными ядрами и четкими ядрышками. Цитоплазма клеток была зернисто-пенистая. Изредка встречались атипичные фигуры митоза. В части клеток выявлялись цитоплазматические отростки, хорошо дифференцируемые при электронной микроскопии (рис.6).
Рис.6. Йеменский хамелеон, ганглионейробластома: электронная ультрамикрофотография опухолевых клеток, окруженных большим количеством тесно расположенных отростков, имеются интердигитарные клеточные контакты (×10 000)
При проведении иммуногистохимической обработки, обнаружена позитивная окраска на хромогранин, на белок S-100, на нейронспецифическую энолазу; негативная окраска на виментин, общий лейкоцитарный белок, CD99 и цитокератин. По данным иммуногистохимии и электронной микроскопии опухоль была классифицирована как ганглионейробластома. За исключением описанного у змей одного случая нейрофибромы и 4 случаев MPNST (злокачественная опухоль периневрия), это первое описание опухоли периферических нервов у ящериц и первое описание опухоли нейроэктодермального генеза у рептилий вообще.
2.2.4 Хирургическая патология.
При разработке принципов общей хирургии рептилий проводили анализ литературных данных (Bennett, 1991; Frye, 1991; Mader, 1996 и др.) и ретроспективную оценку клинических результатов. Выяснено, что на анестезиологический протокол и технику проведения хирургических вмешательств влияют такие анатомо-физиологические особенности рептилий, как гетеротермность, низкий уровень метаболизма, способность к анаэробному дыханию и пролонгированному апноэ, торпидному состоянию, интервентрикулярному шунту вследствие неразвитой межжелудочковой перегородки, особое строение чешуйчатой кожи и генерализованный механизм линьки, отсутствие диафрагмы и хирургического барьера между грудной и брюшной полостью, особый механизм заживления ран и воспалительного ответа, особый тип рассасывания шовных материалов, доминирование грамотрицательной микрофлоры в случае хирургической инфекции, мелкий размер большинства видов (масса тела 37% оперированных рептилий составляла 50-200 г) и др. Нами обнаружено, что на скорость заживления ран позитивно влияет линька, повышение температуры тела и ориентация разреза по аксиальной оси тела или конечности. При оптимальной для вида рептилии температуре гетерофильная инфильтрация сохраняется в зоне раны до 4-6 недель. Соответственно, снятие кожных швов должно проводиться не ранее этого срока. В связи с низкой лизосомальной активностью гетерофилов, кетгуты и другие шовные материалы, рассасывающиеся по механизму фагоцитоза, не подвергаются биодеградации в тканях рептилий в установленные сроки. Для погружных швов мы рекомендуем использовать атравматические нити на основе полигликоля, полилактата или полидиоксанона. Абсорбируемая синтетика рассасывается в тканях рептилий по механизму гидролиза в течение 60-90 дней.
На основании выявленных нами морфо-функциональных особенностей костной ткани ящериц, а именно, в норме бессосудистого характера кортикальной кости, не развитой системы вторичных остеонов, ограниченного формирования трабекул в диафизарной зоне трубчатых костей, пролонгированного периода формирования провизорного каллуса (до 6-8 недель) и оссификации (до 16-24 недель), видоспецифических различий в строении и диаметре медуллярного канала и др., были разработаны принципы хирургического остеосинтеза и техника таких операций, как остеотомия с пластикой нижней челюсти, грудо-поясничная ламинэктомия и корподез, рекомендованы методы консервативного лечения переломов.
Нами исследована проекционная топография внутренних органов у ящериц 3-х основных типов строения: типичного, вытянутого (с каудальным положением сердца и развитой псевдодиафрагмой), с латерально уплощенной формой тела. С учетом анатомических особенностей брюшной стенки нами рекомендованы следующие виды хирургического доступа при целиотомии:
- для игуановых – верхний срединный, левый паракостальный, правый и левый парамедианный доступ;
- для варанов – срединный послепупочный, левый косой парамедианный доступ;
- для хамелеонов – прямой парамедианный, верхний и нижний интеркостальный доступ.
Нами исследованы анатомо-физиологические особенности модифицированного толстого кишечника растительноядных ящериц. Илеоцекальный сфинктер выступает в просвет преддверия – первой изолированной камеры ободочной кишки, от которой вбок отходит крупная полость – слепокишечный вырост, не имеющий цекоколического сфинктра или перегородки, отделяющей его от преддверия. В 2-3 сантиметрах дистальнее располагается циркулярная перегородка, также имеющая сфинктер, и отделяющая преддверие от остальной части ободочной кишки. В проксимальном отделе собственно ободочной кишки, который у голодных игуан занимает почти горизонтальное положение, последовательно расположено 4-6 полулунных перегородок, следующих на расстоянии 1-2 см друг за другом. Их размер уменьшается в дистальном направлении. В процессе заполнения ободочной кишки происходит каудальная ротация илеоцекальной заслонки, отчего проксимальная кишка занимает вертикальное положение и соответствует восходящему колену. Поперечноободочный отдел имеет наибольший диаметр и гладкую стенку с редкими продольными складками, которые при вздутии кишки не определяются. Нисходящее колено ободочной кишки имеет наименьший диаметр и является наиболее мобильным. Спавшаяся кишка характеризуется «сложенным» нисходящим сегментом, который до перехода в прямую кишку имеет форму буквы V. При расправлении кишки этот сегмент также расправляется и занимает характерную позицию с правой стороны брюшной полости. Эти особенности влияют на интерпретацию данных обзорной и контрастной рентгенографии, ультрасонографии, фиброколоноскопии и специфическую технику хирургических вмешательств.
2.2.3 Инфекционные и инвазионные болезни
Болезни бактериальной этиологии. На основании результатов многолетних (1996-2006 гг.) бактериологических исследований нормальной и условно-патогенной микрофлоры кожи, ротовой полости, клоаки и очаговых поражений рептилий, а также анализа антибиотикограмм по показателю МИК90, нами впервые исследована динамика бактериологического статуса в крупной многовидовой ассоциации рептилий на базе Московского зоопарка. По нашим данным в изолятах, взятых от ящериц, в 77,3% культивируются грамотрицательные микроорганизмы, в 20,8% - грамположительные и только в 1,9% случаев изолируются грибы. Микрофлора ротовой полости и клоаки животных, недавно поступивших из природы, отличается. В неволе происходит постепенная колонизация ротовой полости и кожи микрофлорой клоаки. Кроме того, в крупных коллекциях рептилий происходит также селекция «внутрибольничных штаммов», связанная с применением антимикробных препаратов (рис. 7 а,б).
| Рис. 7а, б. Чувствительность основных бактериальных патогенов in vitro к антибиотикам, применяемым для эмпирической терапии рептилий. А. Данные за 1996-2001 г. Б. Данные за 2001-2004 г (AN - амикацин, ENR – энрофлоксацин, GM – гентамицин, IMP – имипенем, PIP – пиперациллин, TIM – тиментин). |
По данным за 1996-2001 гг. в изолятах доминировали P.aeruginosa, St.maltophilia, C.freundi, E.coli и P.vulgaris. Высокую активность в отношении этого «ядра» патогенов in vitro сохраняли только амикацин, энрофлоксацин, гентамицин, имипенем, пиперациллин и тиментин. При этом не менее 75% штаммов St.maltophilia были чувствительны только к энрофлоксацину и имипенему. Тиментин, показавший высокую активность в отношении большинства этих патогенов, обладал, тем не менее, низкой активностью в отношении P.aeruginosa – основного доминирующего у рептилий патогена, выявленного суммарно в 47% изолятов в группе змеи/ящерицы. Таким образом, к 2001 г. свое значение для эмпирической терапии сохраняли только энрофлоксацин и имипенем. В 2001-2004 гг. ситуация изменилась значительным образом. В отношении P.aeruginosa выросли МИК90 амикацина, энрофлоксацина (до 2,5 мкг/мл), имипенема (с 4 до 8 мкг/мл), тобрамицина. Цефоперазон, мезлоциллин, пиперациллин, триметоприм/сульфаметоксазол и тиментин вообще утратили активность. Несколько изменился и состав видов-доминантов. На второе место по частоте встречаемости после P.aeruginosa вышел резистентный патоген, P.fluorescens/putida. Все основные антибиотики, представлявшие первый выбор при эмпирической терапии в 2001 г., показали существенное снижение активности в отношении как раз трех основных патогенов из 7 видов-доминантов. Интересно, что у большинства штаммов доминирующих патогенов вновь обнаружилась неплохая чувствительность к антибиотиками более старых генераций, например, к гентамицину или бисептолу. Такой проблемный патоген, как St. maltophilia, показал высокую чувствительность in vitro к нитрофурантоину, бисептолу, гентамицину и тикарциллину, а P. fluorescens/putida – к цефаперазону, нитрофурантоину и гентамицину.
Таким образом, в настоящий момент эмпирическая антимикробная терапия рептилий должна сменяться специфической, особенно в тех местах, где существует возможность стационарных инфекций – в коллекциях зоопарков, зоомагазинах, зоопитомниках, центрах карантинирования и т.п.
Протозоозы. Одним из самых проблемных заболеваний рептилий в этой группе является криптоспоридиоз (Graczyk, 2004 и др.). По данным наших исследований, у змей ооцисты криптоспоридий C.serpentis выявляются в 7,5% образцов и у ящериц ооцисты C.saurophilum в 5% образцов фекалий, обработанных модифицированной окраской по Цилю-Нильсону (REAGENA, Финляндия). Персистентное носительство у рептилий может протекать бессимптомно и не приводить к развитию манифестного крипоспоридиоза. Для верификации диагноза требуется патоморфологическое исследование биоптата или секционного материала. Анализ гистологических образцов показывает, что у змей заболевание связано с пролиферативными изменениями в желудке и тонком кишечнике и частичной или полной обструкцией просвета ЖКТ, что вызывает регургитацию. Увеличение стенки желудка обусловлено гиперплазией слизистой оболочки и гипертрофией подслизистого слоя (рис. 8).
Рис. 8. Криптоспоридиоз у маисового полоза: желудок, гиперплазия слизистой оболочки, гипертрофия подслизистого слоя, зоны геморрагии (гематоксилин-эозин ×100)
Слизистая отечна, подвержена слизистому набуханию с ненормальным увеличением и расширением продольных складок, покрытых вязкой слизью. Обычны петехии или полосчатые кровоизлияния по границе складки. Криптоспоридии прикреплены к апикальной цитоплазме латеральных и апикальных энтероцитов на границе зоны микроворсинок Собственная кишечная пластинка инфильтрирована гетерофилами, лимфоцитами и макрофагами.
У ящериц и черепах C.saurophilum чаще всего локализован в подвздошной кишке, преимущественно в основании кишечных крипт, что сопровождается их гиперплазией и исчезновением париетальных клеток в слизистой желудка. Клинические проявления заболевания больше связаны с атрофией слизистой оболочки и синдромом мальабсорбции. При внекишечной форме заболевания у ящериц криптоспоридии размером 2,5-5,0 мкм прикреплены к эпителиальной выстилке или свободно располагаются в просвете пораженного органа (собирательных трубок и извитых канальцев почек, протоков слюнных желез, тимпанической полости и т.д.).
Для терапии криптоспоридиоза нами впервые разработана комплексная схема, включающая толтразурил (25 мг/кг, 2-кратно, с интервалом 14 дней), бисептол (30-40 мг/кг, ежедневно, 14 дней), спирамицин (300 мг/кг, ежедневно, 14 дней). Эффективность терапии оценивалась по прекращению выделения ооцист и улучшению клинического состояния животных.
Гельминтозы рептилий в условиях зоопарков определяют до 12-14 % падежа (Васильев Д.Б., 2000). В ходе наших исследований параметры, характеризующие паразитарную ситуацию, такие как общая зараженность, показатели интенс- и экстенсинвазированности, структура зараженности, видовая структура возбудителей гельминтозов, мы объединили под термином «гельминтозный статус». Наши многолетние данные по использованию албендазола в Московском зоопарке показали значительные изменения гельминтозного статуса. Разовый эффект после применения препарата в больших группах животных соответствует ожидаемым результатам: резко снижаются показатели экстенсинвазированности (ЭИ) и интенсинвазированности (ИИ) и полностью элиминируются гельминты, чувствительные к албендазолу. Через 9 месяцев зараженность остается низкой, но намечается тенденция к росту относительной доли зараженности гельминтами с открытым типом развития и подвижной личинкой, несмотря на их хорошую чувствительность к препарату. Через 4 года, несмотря на регулярное применение албендазола по клиническим и лабораторным показаниям, ЭИ практически достигает прежнего уровня, ИИ останавливается на средних значениях, и значительно меняется структура зараженности. Происходит элиминация биогельминтов и геогельминтов с закрытым типом развития и безусловное доминирование рабдиазид и стронгилоидов, которые как раз являются наиболее патогенными, то есть, паразитарная ситуация даже ухудшается. В связи с этим нами разработаны комплексные рекомендации «Меры профилактики паразитарных болезней рептилий», одобренные Секцией «Инвазионные болезни животных» РАСХН и внедренные в практику зоопарков. На основании анализа литературных данных, результатов клинических экспериментов и патоморфологической оценки секционного материала, нами впервые совместно с ООО «Агроветзащита» разработаны и внедрены 2 комплексных препарата для дегельминтизации рептилий: «Рептилайф-суспензия» и «Рептилайф-плюс», утвержденные Федеральной службой по ветеринарному и фитосанитарному надзору Минсельхоза России.