«Московский зоопарк»
| Вид материала | Автореферат |
- Отчёт муниципального автономного учреждения культуры «пермский зоопарк», 621.28kb.
- Отчёт муниципального автономного учреждения культуры «пермский зоопарк», 628.32kb.
- Отчёт муниципального учреждения культуры «пермский зоопарк», 664.01kb.
- 10 июня 1792 в Париже был создан первый в мире публичный зоопарк, 107.06kb.
- Ялтинский зоопарк "Сказка" открылся в 1995 году и за это время его посетило уже более, 79.87kb.
- Тематическое планирование курса биологии (2часа в неделю, 68 часов) 7 кл на 2011-2012, 142.22kb.
- Широко раскроем ротик, 25.97kb.
- Концепция развития государственного учреждения республиканский зоопарк "Орто-Дойду", 295.52kb.
- «московские каникулы» Для организованных детских групп Москва Кремль – Красная площадь, 257.02kb.
- Московский Центр непрерывного математического образования, 51.2kb.
Нормальные гематологические показатели, установленные для зеленых игуан (N=164)
Биохимическое исследование крови. Нами оценено влияние артефактов на результаты анализа. Выяснено, что при добавлении гепарина происходит диагностически значимое снижение уровня общего кальция (до 0,4-1,0 ммоль/л, р<0,05). На основании сравнительного анализа нами рекомендуется использовать сыворотку при определении показателей, характеризующих состояние почек (кальций, фосфор, общий белок, мочевая кислота), гепаринизированную кровь при определении параметров, характеризующих состояние печени (аминотрансферазы, ЛДГ, КФК, ГГТ) и ЭДТА при проведении электрофореза. Определение основных биохимических показателей крови рептилий проводили по стандартным методикам. Результаты исследования сыворотки крови зеленых игуан приведены в таблице 2.
Таблица 2.
Нормальные биохимические показатели крови игуан (N= 232)
-
Натрий (ммоль/л)
154,8±6,4
Калий (ммоль/л)
3,4±0,9
Хлор (ммоль/л)
124±4
Кальций (мг/дл)
(ммоль/л)
10,2±1,7
2,6±0,8
Фосфор (мг/дл)
(ммоль/л)
6,5±1,8
2,1±0,6
Мочевая кислота (мг/дл)
(ммоль/л)
1,9±1,3
109±80
Креатинин (мг/дл)
(мкмоль/л)
0,17±0,07
16±7
Азот мочевины, BUN (мг/дл)
(ммоль/л)
3,42±3,12
2,6±2,4
Глюкоза (мг/дл)
(ммль/л)
181±38
9,8±1,9
Общий белок (г/дл)
4,9±1,7
Альбумины (г/дл)
2,6±0,8
Глобулины (г/дл)
4,3±1,1
А/Г-индекс
0,7±0,2
Холестерол (мг/дл)
(моль/л)
145±49
3,7±1,2
Триглицериды (ммоль/л)
1,4±0,4
ЛДГ (ЕД/л)
906±894
АлАТ (ЕД/л)
18±13
АсАТ (ЕД/л)
29±24
ГГТ (ЕД/л)
10,2±7,9
ЩФ (ЕД/л)
101±79
КФК (ЕД/л)
661±573
Т3 (пкг/дл)
48±6
Т4 (мкг/дл)
2,1±0,2
Исследование костного мозга. Результаты наших исследований показывают, что у крокодилов и крупных (более 1,5 кг) ящериц оптимальным методом получения костного мозга является интрамедуллярная аспирация большеберцовой кости, у черепах – эксцизия губчатой кости панциря в области шейных пластин пластрона, у змей и ящериц – эксцизия реберных костей или остистых отростков позвонков. Нами описана техника приготовления цитологических и гистологических препаратов и охарактеризована патоморфологическая картина при регенеративных и токсических реакциях, при инфекционном воспалении.
2.2.1.4 Инструментальные методы диагностики.
Рентгенография. На основании полученных данных для съемки ящериц среднего размера (толщина тела 4-6 см) рекомендован режим: 50 кВ и 6-8 мА/сек, с добавлением 2 кВ на 1 см увеличения толщины тела. Для мелких рептилий наилучшие результаты дает маммографическая съемка. Обзорные рентгенограммы всех рептилий, кроме черепах, следует выполнять в дорзо-вентральной и боковой проекции. Для черепах необходимо также использовать кранио-каудальную проекцию. Для контрастной рентгенографии ЖКТ мы рекомендуем вводить в кардию желудка зондом 30% бария сульфат на крахмальном растворе или 50% водный раствор йогексола в объеме 10 мл/кг. Среднее время контрастирования проксимальной ободочной кишки составляет у игуан и сухопутных черепах 36-48 ч.
На основании результатов клинических экспериментов, при контрастной рентгенографии почек мы рекомендуем вводить болюсно 76% урографин, ящерицам в вентральную вену хвоста в дозе 1000 мг/кг, черепахам – в дорзальную вену хвоста в дозе 500 мг/кг. При этом почки визуализируются в течение 60 сек. По данным анализа 108 рентгенограмм нами описана нормальная рентгеноанатомия зеленых игуан, на основании которой рекомендуется интерпретировать результаты рентгенографии скелета, грудной клетки, брюшного отдела полости тела, таза ящериц.
Ультрасонография. На основании анализа 417 ультрасонограмм разных видов рептилий нами рекомендована техника проведения УЗИ животным разного размера и получены данные об эхогенности, размерах, конфигурации и состоянии миокарда, аорты, печени, желчного пузыря, желудка, яичников, мочевого пузыря и почек рептилий. Для исследования почек разработана оригинальная методика сканирования.
Эндоскопия. На основании результатов 83 эндоскопических исследований, проведенных 14 видам ящериц, змей и черепах, выявлены оптимальные технические характеристики фибро- и ригидных эндоскопов при их использовании для рептилий. Рекомендуются анестезиологическое пособие и доступы при проведении обзорной целиоскопии и визуализации отдельных органов брюшной полости. Впервые разработана методика гастродуоденоскопии и фиброколоноскопии растительноядных ящериц, имеющих значительные анатомо-физиологические особенности ЖКТ. Описана эндоскопическая картина при геморрагиях, эрозии, язвах, новообразованиях, воспалительных изменениях, стенозах.
Электрокардиография. Результаты проведенных нами исследований показали, что имеются особенности при снятии ЭКГ у змей, а также у ящериц с краниальным и каудальным положением сердца. Поэтому рекомендованы модификации отведений с основания шеи, подмышечной впадины, грудной клетки, и оригинальная методика пищеводного отведения при использовании ЭКГ для мониторинга анестезии. Оцениваются общие особенности ЭКГ рептилий и изменения при гипоксии миокарда, кардиосклерозе.
2.2.2 Незаразные болезни.
Сравнительно-морфологический анализ собственного серийного материала и сопоставление с некоторыми ранее обоснованными нозологическими формами заболеваний рептилий (Frye, 1976, 1991, 2000; Ippen et al., 1985; Zwart, 1992, 2004 и др.) позволили выделить, охарактеризовать и классифицировать следующие 58 нозологических форм заболеваний (табл. 3).
В комплексе заболеваний опорно-двигательного аппарата нами выделены такие новые нозологические формы, как оссифицирующий спондилит и идиопатическая фиброзная остеодисплазия игуан. Первое заболевание характеризуется пролиферацией суставного хряща и эпифизарного кортекса позвонков в поясничном и крестцовом отделах, особенно выраженной в области поперечно-реберных отростков и головок реберных костей (рис.1). Клинические и макроскопические изменения при остеодисплазии игуан напоминают состояние клинически развернутой фиброзной остеодистрофии, однако отличаются выраженностью симптомов, отсутствием реакции на кальций-заместительную терапию и экзогенное введение витамина Д3, а также рентгенологически, так как изменения затрагивают исключительно челюстные кости и не выявляются в области трубчатых костей и таза. Гистологически ткань в основном состоит из фибро-остеоидного матрикса с фибробластами, фиброцитами и различным количеством коллагеновых волокон (рис.2).
Таблица 3. Основные нозологические формы незаразных болезней рептилий
| Система органов | Нозологические формы | Основные звенья патогенеза |
| Кожа | Дисэкдис, ожоговые поражения, неспецифические дерматиты | Гиперкератоз, сквамозная метаплазия, эритема, геморрагии, внутрисосудистый тромбоз, воспаление, метастатическая минерализация, аккумуляция цероида, некроз, склероз |
| Опорно-двигатель ный ппарат | Гипертрофическая остеопатия, остеопетроз, болезнь Педжета, остеоартрит, остеохондрит, фиброзная остеодисплазия, оссифицирующий спондилит | Воспаление, реактивный экзостоз и хондрогенез, фиброзная дистрофия, нарушение кортико-медуллярной резорбции, аутоиммунные процессы |
| Респираторная система | Аспирационная пневмония, бронхопневмония, хроническая гранулематозная пневмония, специфические пневмонии, pneumonia verminosa | Воспаление, межуточный отек, обструкция бронхов |
| Сердечно-сосудистая система | Миокардит, инфекционный эндокардит | Воспаление, склероз, метастатическая минерализация |
| Желудочно-кишечный тракт | Стоматит, эзофагит, гастрит, атрофический гастрит, пролиферативный гастрит, энтериты, колит, псевдомембранозный колит, идиопатический илеус игуан, клоацит | Воспаление, стресс-индуцированная атрофия, кальций-зависимые крампи, внутрисосудистый тромбоз |
| Пищеварительные железы | Гепатит, гепатоклеточный липидоз, вакуольная (гидропическая) дистрофия печени, холангит, желчекаменная болезнь, панкреатит, сахарный диабет | Обменные нарушения, холестаз, воспаление, некроз и фиброз |
| Половая система | Фолликулярный стаз, постовуляторная дистоция, пиосальпингит, острое спонтанное кровотечение яичников, желточный целомит | Нарушение баланса ФСГ, ЛГ и эстрогенов, воспаление, метастатическая минерализация |
| Выделительная система | Интерстициальный нефрит, гломерулонефрит, пиелонефрит, нефрокальциноз, первичная подагра почек, уролитиаз | Гиперурикемия, гиперфосфатемия, вторичный гиперпаратиреоидизм, кальцифилактическая минерализация, воспаление, тубулярный некроз, снижение СКФ, десквамация тубулярного эпителия |
| Метаболические болезни | Гипо- и гипервитаминозы, микроэлементозы, ВПГ (рахит, остеомаляция), остеоренальный синдром, известковая подагра, висцеральная, суставная и почечная подагра, амилоидоз | Вторичный гиперпаратиреоидизм, фиброзная остеодистрофия, метастатическая минерализация, гиперфосфатемия, гиперурикемия |
| Рис.1 Оссифицирующий спондилит у варана | Рис.2. Фиброзная остеодисплазия у игуаны (гематоксилин-эозин ×100) |
В исследованных нами случаях выделялись две характерные гистопатологические особенности: высокая активность остеокластов с высоким митотическим индексом и заметная пролиферация фибробластов, что отличает эту картину от фиброзной дисплазии млекопитающих и человека. В некоторых участках картина может напоминать саркомоподобную опухоль, но отличается от нее неинвазивным характером роста. Для лечения нами разработана операция остеотомии с пластикой нижней челюсти.
Установлено, что в комплексе заболеваний печени особое место занимает гепатоклеточный липидоз - одна из самых распространенных болезней у рептилий в неволе (Frye, 1981; Will, 1975; Zwart, 1985). Прижизненные исследования патологического процесса при гепатоклеточном липидозе включали копроскопию, цитологическое исследование асцитной жидкости, общеклиническое и биохимическое исследование крови, рентгенографию в боковой проекции, ультрасонографию, эксцизионную биопсию с нижнего края правой доли печени, которую проводили с помощью ригидного эндоскопа по методу Hernandez-Divers, Cooper (2001). Умеренные изменения, характерные для этого заболевания, мы регистрировали не менее чем у 60% павших рептилий. Исходя из данных анамнеза, основными факторами, вызывающими аккумуляцию жира у рептилий, являются следующие:
1) рацион с высоким содержанием жиров, который приводит к увеличенному накоплению жира в депо (в основном в целомических и перикардиальном жировых телах) и печени;
2) гиподинамия, обычная в неволе у рептилий;
3) отсутствие овуляции у взрослых самок, что на фоне вителлогенеза приводит к аккумуляции жиров;
4) скрытые инфекции или хронические интоксикации, вызывающие нарушение транспорта липидов из печени или синтеза транспортных белков.
При копроскопии выявлялись многочисленные жировые капли, желто-зеленое окрашивание уратов, атипичная структура бактериальных комменсалов (преобладание подвижных палочек, протея, капсулообразующих бактерий), иногда многочисленные трофозоиты и цисты протозойных паразитов. При выраженных гепатопатиях обычно аспирировался бесклеточный целомический транссудат кирпично-красного или желтовато-зеленого цвета с низкой плотностью. В ОКА крови при хронической печеночной недостаточности и дегидратации характерно повышение гематокрита, анемия (гемолитическая, со слабым регенеративным ответом), умеренный лейкоцитоз (до 10-12 тыс./мкл) с относительным моноцитозом. При остром воспалении и некрозе печени характерен высокий лейкоцитоз (12-20 тыс./мкл) с абсолютной гетеро- и азурофилией. В биохимическом профиле может повышаться уровень нескольких внутриклеточных ферментов, таких как АсАТ (до 107±57 ЕД/л), АлАТ (до 69±19 ЕД/л), ГГТ (до 1,2±0,4 ЕД/л), ЛДГ (более 2000 ЕД/л). Использованная нами впервые для рептилий ультрасонография оказалась чувствительным методом, позволяющим определить размеры, форму и эхогенность печени: при гепатоклеточном липидозе рептилий характерна генерализованная гиперэхогенная ультрасонограмма.
Результаты проведенных гистопатологических исследований показывают, что печеночные дольки можно обнаружить только у нескольких видов ящериц, у большинства дольчатая структура заменяется печеночными пластинками, организованными в ветвящиеся тяжи, обычно шириной в две клетки. Между этими тяжами расположены сосудистые полости, выстланные эндотелием, с хаотично расположенными купферовскими клетками. Желчные протоки проходят в соединительнотканных септах. Общая характерная черта исследованных образцов печени рептилий – значительное количество гранул меланина, хаотично разбросанных в паренхиме и упакованных в плотные образования, не имеющие оформленной морфологической структуры. Наличие крупных жировых включений, а главное, одновременное присутствие нормальных и измененных клеток свидетельствует о жировых изменениях. При гепатоклеточном липидозе характерна диффузная мелкозернистая инфильтрация гепатоцитов, после чего поражаются купферовские клетки, и жир аккумулируется в виде макровезикул, вызывающих изменение структуры гепатоцитов (рис.3). При заболеваниях иной этиологии характерна воспалительная инфильтрация и гиперплазия купферовских клеток.
В комплексе заболеваний репродуктивной системы рассматривается фолликулярный стаз, имеющий большое значение в ветеринарии рептилий и зарегистрированный нами не менее чем у 17% самок некоторых видов ящериц и черепах. В этиопатогенезе ведущую роль играет индивидуальное нарушение баланса ФСГ, ЛГ и эстрогенов у одиночно содержащихся самок. При этом не происходит ни овуляции, ни атрезии фолликулов. Заболевание лечится только хирургически, для чего требуется дифференцировать это состояние от нормальной беременности. Разработанный нами диагностический протокол базируется в основном на данных биохимического исследования крови и ультрасонографии. Ниже (табл. 4) приводятся данные о биохимическом профиле 36 самок игуан с диагностированным фолликулярным стазом. В процессе вителлогенеза происходят значительное повышение уровней некоторых биохимических параметров, которые, за исключением уровней кальция и органофосфата, снижаются после овуляции. Уровень последних должен снижаться непосредственно перед откладкой яиц.
Таблица 4.
Биохимический профиль игуан в состоянии фолликулярного стаза (N=36, p<0,05)
| Показатель | Норма | Патология |
| Гематокритное число (%) | 30,5±6,44 | 46±11 |
| Общее количество лейкоцитов (х 103/мкл) | 7,7±3,2 | 11±2 |
| Общий белок (г/дл) | 4,9±1,7 | 6,6±1,2 |
| Альбумины (г/дл) | 2,6±0,8 | 3,4±0,7 |
| Холестерол (ммоль/л) | 3,7±1,2 | 15,1±7,8 |
| Триглицериды (ммоль/л) | 1,4±0,4 | 12,3±7,2 |
| КФК (ЕД/л) | 661±573 | 2325±1125 |
| АСТ (ЕД/л) | 29±24 | 65±44 |
| Кальций (ммоль/л) | 2,6±0,8 | 5,1±1,9 |
| Фосфор (ммоль/л) | 2,1±0,6 | 3,6±1,2 |
Результаты ультрасонографического мониторинга половой системы самок игуан показывают, что на ранних стадиях вителлогенеза фолликулы ровной округлой формы, размером 12-20 мм, равномерно гипоэхогенны и не имеют гиперэхогенных оболочек. Овуляция происходит при размерах яиц около 30 мм. После овуляции яйца на ранних стадиях не отличимы от предовуляторных фолликулов. Затем содержимое яйца становится из равномерно гипоэхогенного более гетерогенным, с выраженной дорзальной полостью, и появляется гиперэхогенная скорлупа, на поздних стадиях двухслойная (рис.4).
| рис.3 Хамелеон: крупнокапельная жировая дистрофия печени (гематоксилин-эозин ×100) | рис.4 Игуана: овулировавшие яйца, последний триместр беременности. |
Содержимое фолликулов может становиться гетерогенным и при конденсации желтка в случае фолликулярного стаза, но при этом они уменьшаются в размерах и обычно уплотняются, что можно определить при пальпации. При атрезии вначале в центре фолликулов появляются гиперэхогенные зоны, затем границы фолликулов становятся нечеткими, и появляются эхонегативные полости диаметром менее 20 мм.
Заболевания почек занимают важное место в структуре заболеваемости рептилий. Остеоренальный синдром регистрируется не менее, чем у 27% обследованных черепах, особенно в послезимовочный период (Васильев Д.Б., 1999) и не менее, чем у 22% игуан в возрасте 3,5-6,0 лет. Патогенез при заболеваниях почек рептилий сложный и многозвеньевой. Здесь одновременно происходят такие патологические процессы, как десквамация тубулярного эпителия, минерализация базальных мембран аретриол и почечных канальцев, стаз уратов в собирательных трубках, их аккумуляция на базальных мембранах тубулярного эпителия, вздутие и разрыв гломерул, фиброзные и склеротические изменения в интерстициальной ткани и т.п. На основании преимущественных изменений на конечной стадии процесса можно выделить такие нозологии, как нефрокальциноз, тубулонекроз, первичную подагру почек и другие формы нефропатий. Эти процессы отражены на схеме (рис. 5).
Наши данные указывают на то, что для разных видов рептилий характерны свои формы нефропатий. У среднеазиатских черепах в патогенезе доминируют подагрические процессы (гиперурикемическая нефропатия), связанные с дегидратацией в зимние месяцы, когда секреция мочевой кислоты продолжается при сильно сниженной перфузии почек и почти полной остановке клубочковой фильтрации воротной системой почек. Это приводит к закупорке канальцев и разрыву гломерул. Патоморфологическая картина характеризуется наличием уратов в расширенных канальцах, формированием подагрических тофов звездчатой формы в интерстиции, вздутием и разрывом гломерул, очаговым или диффузным склерозом. В моче у таких черепах, которую получали катетером из мочевого пузыря, практически отсутствовал кристаллический преципитат. В дальнейшем с развитием остеоренального синдрома нарастали процессы деминерализации кости и метастатическая минерализация мягких тканей. Поэтому в патогенезе заболевания начинали вторично преобладать процессы минерализации базальных мембран тубулоцитов и эндотелиоцитов, вплоть до зрелой картины нефрокальциноза.
Как показали наши исследования, у игуан, в отличие от других позвоночных и даже от большинства рептилий, метастатическая минерализация встречается при гиповитаминозе Д, а не при гипервитаминозе. Эти данные хорошо согласуются с понятием о кальцифилаксии по Selye (1963). В развитии кальцифилаксии участвуют два фактора – сенсибилизирующий и разрешающий. Одним из самых сильных сенсибилизирующих факторов является паратгормон (ПТГ). У игуан метаболизм ПТГ легко нарушается, поскольку гормон не инактивируется лизосомальными ферментами, и при избыточном синтезе этот фактор долго циркулирует в крови. Разрешающими агентами могут быть соли металлов, органические соединения, травмы и т.д. Такая теория объясняет феномен кальцификации при гиповитаминозе Д, распространенность этой патологии среди животных, у которых отсутствуют для этого местные (дистрофия, некроз, склероз) или общие (гиперкальциемия) предпосылки. Игуаны не страдают от дегидратации в такой степени, как черепахи, и не столь чувствительны к избытку мочевой кислоты, как крокодилы (в норме аммониотелики, выделяющие аммиак). Поэтому для них менее характерны подагрические изменения, и тубулопатии в основном связаны с кальцификацией мембран. В целом, у игуан гистопатологическое исследование чаще всего выявляет (в порядке частоты встречаемости) тубулоинтерстициальный нефроз, интерстициальный нефрит с активным воспалением, гломерулонефрит, тубулярный некроз, метастатическую минерализацию, подагрические тофы и фиброз. Таким образом, можно выделить несколько основных типов развития нефропатий у рептилий:
- инфекционное воспаление на фоне пиелонефрита или почечного инсульта с исходом в интерстициальный нефрит и острую почечную недостаточность (ОПН);
- гиперурикемическая нефропатия в связи с хроническим обезвоживанием, приводящая к тубулярному некрозу, тубулоинтерстициальному нефрозу и висцеральной подагре с исходом в ОПН или хроническую почечную недостаточность (ХПН);
- кальцифилаксия на фоне хронического гиперпаратиреоидизма, приводящая к минерализации мембран почечных канальцев или базальных мембран эндотелия почечных клубочков с исходом в тубулоинтерстициальный нефроз, реже в гломерулонефрит и ХПН;
- индуцированные формы нефропатий, вызываемые ятрогенно при неправильном дозировании нефротоксических препаратов, витамина Д или при кормлении высокобелковыми рационами с исходом в ОПН, реже в ХПН.
Среди метаболических болезней рептилий безусловно доминируют нарушения минерального обмена, особенно характерные для молодняка (в легкой форме встречаются у 70% водных черепах, 90% сухопутных и 32% игуан). В комплексе болезней, связанных с нарушением минерального обмена, нами выделен ряд нозологий, объединенных основным этиопатогенетическим механизмом вторичного гиперпаратиреоидизма, пищевого (ВПГ) или почечного (остеоренальный синдром, ОС). К ним относятся рахит, остеомаляция и ОС sensu stricto. Остеопенические формы ВПГ, встречающиеся у черепах и безосновательно называемые в зарубежной литературе остеопорозом, не имеют отношения к этому заболеванию. В связи со сходством клинических и макроскопических изменений при этих заболеваниях у рептилий, возникла необходимость разработки дифференциально-диагностического протокола, т.к. терапия при этих заболеваниях кардинально отличается. Ниже на основании анализа данных анамнеза, клинических, биохимических и патоморфологических исследований приводится дифференциальный диагноз при этих заболеваниях (табл. 5).