Характер изменений нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови под влиянием терагерцовых волн на частотах оксида азота 150,176-150,664 ггц 03. 00. 13- физиология

Вид материала

Методы исследования
Результаты исследований и их обсуждение
3-я гр. - животные, облученные в течение 15 минут на фоне иммобилизационного стресса; 4-я гр.
МСИП NO 150,176-150,664 ГГц до действия стрессора
6. Антистрессорное действие терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц
Интактные животные
15 минут на фоне

Подобный материал:

1 2 3

Методы исследования

Состояние коагуляционного звена системы гемостаза исследовали с помощью серии тестов, выполненных на гемокоагулометре CGL 2110 «Solar» (Республика Беларусь, г. Минск) с использованием реактивов фирмы НПО “РЕНАМ” (г. Москва, Россия).

Основными исследованными показателями, характеризующими коагуляционное звено системы гемостаза у экспериментальных животных, являлись: активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ); протромбиновое время; международное нормализованное отношение (МНО); тромбиновое время; концентрация фибриногена; активность фактора XIII в плазме крови (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999). Антикоагулянтные свойства крови у экспериментальных животных исследовали путем определения активности естественного антикоагулянта антитромбина III и системы протеина С (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999). Состояние фибринолитической активности крови у экспериментальных животных оценивали путем определения Хагеман-зависимого фибринолиза; индуцированного стрептокиназой эуглобулинового фибринолиза; вычисления индекса резерва плазминогена (Баркаган З.С., Момот А.П., 1999); концентрации ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов РФМК-тестом (Елыкомов В.А., Момот А.П., 1987) и тестом склеивания стафилококков (Момот А.П., Лычев В.Г., 1988).

Определение концентрации кортикостерона в сыворотке крови у экспериментальных животных производили утром в одно и то же время методом конкурентного иммуноферментного анализа с применением моноклональных антител (Шаляпина В.Г., Нарбаев Б.Н., 1999).

Статистическая обработка полученных данных проводилась при помощи непараметрического метода U - критерия теста Mann-Whitney (пакет программ Statistica 6.0.).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Изменения коагуляционных и фибринолитических свойств крови у белых крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, и интактных животных под влиянием терагерцового облучения

У крыс-самцов и крыс-самок в фазе Dioestrus эстрального цикла, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, выявлены гиперкоагуляционные изменения в системе гемостаза, снижение антикоагулянтных свойств крови и угнетение фибринолиза. У крыс-самок в фазе Oestrus, подвергшихся острому иммобилизационному стрессу показатели, характеризующие коагуляционную, антикоагулянтную и фибринолитическую активность крови, выражены значительнее, чем у стрессированных самок в фазе Dioestrus. У крыс-самцов в условиях хронического стресса выявлены развитие коагулопатии потребления и активация фибринолитического процесса, обнаружено значительное количество ранних продуктов деградации фибриногена и растворимых фибрин-мономерных комплексов, характерных для внутрисосудистого тромбообразования.

Воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в непрерывном режиме в течение 30 минут на интактных животных не вызывает изменений в прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови крыс- самцов, о чем свидетельствует отсутствие статистически достоверных отличий между группами интактных и облученными животными.

2. Коагуляционные и фибринолитические свойства крови у крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса, и их изменения при непрерывном режиме облучения терагерцовыми волнами на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

Воздействие непрерывного ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 5 минут на животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, не вызывает изменений в свертывании крови и фибринолизе. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей коагуляционного потенциала, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

Анализ результатов исследования фибринолитической активности крови и её коагуляционных свойств у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса и подвергшихся воздействию ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут, показал частичное восстановление показателей антикоагулянтного (рис.1) фибринолитического потенциалов крови и течения всех фаз коагуляционного каскада. Однако при этом отмечалась нормализация протромбинового и тромбинового времени, эуглобулинового фибринолиза, индуцированного стрептокиназой, индекса резерва плазминогена, так как отсутствовало статистически достоверное различие в этих показателях по сравнению с данными группы контрольных животных.

При непрерывном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц наблюдалось полное восстановление измененных показателей гемокоагуляции, антикоагулянтной активности крови (рис.1) и фибринолиза, что подтверждалось отсутствием статистически достоверных их различий по сравнению с данными группы контроля.

Антитромбин III Протеин С

Рис. 1. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов

под воздействием непрерывного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ – волнами на

частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого стресса

Примечание: *- статистически достоверно, по сравнению с группой контроля; # - статистически достоверно по сравнению с группой животных, находящихся в состоянии

острого иммобилизационного стресса.

1-я гр. - интактные животные; 2-я гр.- животные в состоянии иммобилизационного стресса;

3-я гр. - животные, облученные в течение 15 минут на фоне иммобилизационного стресса;

4-я гр. - животные, облученные в течение 30 минут на фоне иммобилизационного стресса.

3. Влияние предварительного непрерывного терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии

острого иммобилизационного стресса

Предшествующее стрессу ТГЧ-облучение животных в течение 5 минут на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц приводит к менее выраженному нарушению функциональной активности коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, чем у животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса без предварительного непрерывного ТГЧ-облучения. Это выражается в статистически достоверном различии таких показателей коагуляционного каскада, как АЧТВ, тромбиновое время, Хагеман-зависимый эуглобулиновый фибринолиз, индекс резерва плазминогена. При этом не выявлено статистически значимых отличий в остальных показателях коагуляционного каскада, антикоагулянтной (рис. 2) и фибринолитической активности крови у животных, подвергнутых предварительному ТГЧ-облучению, по сравнению с группой стрессированных животных.

Антитромбин III Протеин С

Рис. 2. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного предварительного 5-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах

МСИП NO 150,176-150,664 ГГц до действия стрессора

Примечание: *- статистически достоверно по сравнению с группой контроля; 1-я гр. - интактные животные; 2-я гр. - животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3-я гр. - животные, облученные в течение 5 минут на фоне иммобилизационного стресса.

Предшествующее острому иммобилизационному стрессу у крыс-самцов воздействие ТГЧ-облучения на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15 минут полностью предотвращает развитие нарушений в системе коагуляционного звена гемостаза и фибринолитической активности крови животных, так как все показатели, характеризующие коагуляционный каскад, антикоагулянтную активность, фибринолитический потенциал крови у облученных животных статистически достоверно не отличались от показателей группы интактных животных.

Предварительное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут также полностью предотвращает развитие гиперкоагуляционных изменений при остром иммобилизационном стрессе, что подтверждается отсутствием статистически достоверных отличий между группами интактных животных и животных, подвергнутых ТГЧ-облучению на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 30 минут.

Сравнительный анализ предварительного и последующего режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, показал, что они неоднозначны. При 5-минутной временной экспозиции электромагнитных волн более эффективным является предварительное ТГЧ-облучение. Воздействие 15-минутного ТГЧ-облучения на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса приводит к частичному восстановлению нарушенной функциональной активности системы гемокоагуляции и фибринолитической активности крови, а предварительное ТГЧ-облучение полностью предотвращает развитие нарушений в системе коагуляционного гемостаза и фибринолиза.

Следовательно, предварительное ТГЧ-облучение на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц в течение 15-минут обладает более выраженным эффектом на внутрисосудистый компонент микроциркуляции по сравнению с таким же временным облучением на фоне развившегося острого иммобилизационного стресса.

Воздействие 30-минутной экспозиции электромагнитных волн ТГЧ- диапазона на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на животных с развившимся иммобилизационным стрессом приводит к полной нормализации показателей функциональной активности системы свертывания крови и фибринолиза, а предшествующее стрессу- полностью предотвращает развитие патологических изменений в механизмах гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Эффективность влияния обоих режимов ТГЧ-облучения на процессы гемокоагуляции и фибринолиза у экспериментальных животных одинакова, поскольку отсутствует статистически значимая разница в их показателях между группами облученных животных.

4. Воздействие дробного режима терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота на коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, находящихся в состоянии острого стресса

Облучение животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ-волнами в дробном режиме в течение 5 минут не вызывало изменений исследуемых показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных различий показателей прокоагулянтной, антикоагулянтной и фибринолитической активности крови облученных животных по сравнению с данными группы животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса.

При облучении животных, находящихся в состоянии острого иммобилизационного стресса, ТГЧ - волнами в дробном режиме в течение 15 и 30 минут не наблюдалось статистически достоверных различий всех изучаемых показателей системы свертывания крови и фибринолиза по сравнению с группой интактных животных, то есть происходило полное восстановление нарушенных прокоагулянтных, антикоагулянтных (рис. 3) и фибринолитических свойств крови.

Рис. 3. Изменения антикоагулянтной активности крови у крыс-самцов под воздействием дробного 15 - и 30-минутного облучения ТГЧ – волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц на фоне острого иммобилизационного стресса

Примечания: те же, что и к рис. 1.

Сравнительный анализ дробного и непрерывного режимов ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц, показал, что они неоднозначны. Так, при 5-минутном непрерывном режиме облучения животных на фоне стрессорного воздействия не наблюдалось восстанавливающего эффекта в отношении показателей, характеризующих коагуляционное звено системы гемостаза и фибринолиз. Дробный режим ТГЧ-облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц в течение 5 минут также не продемонстрировал нормализующего влияния на показатели системы свертывания крови и фибринолиза.

При 15-минутном ТГЧ-воздействии в непрерывном режиме наблюдалась частичная положительная динамика в отношении нарушенных показателей гемокоагуляции и фибринолитической активности крови. Дробный режим облучения в том же временном интервале показал полное восстановление нарушенных показателей коагуляционного звена системы гемостаза и фибринолиза, вызванных действием стрессорного фактора.

При облучении животных в течение 30 минут дробным режимом ТГЧ-волнами на частотах МСИП оксида азота на фоне действия стрессорного агента, выявлено полное восстановление нарушенных показателей фибринолитической активности крови и гемокоагуляции. Аналогичные результаты наблюдались и при непрерывном ТГЧ-излучении на фоне стресса в той же временной экспозиции.

5. Влияние терагерцового облучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на нарушенные коагуляционные и фибринолитические свойства крови крыс-самцов, вызванных хроническим стрессом

При ежедневном 30-минутном облучении животных, находящихся в состоянии хронического иммобилизационного стресса, ТГЧ-электромагнитным полем на частотах МСИП оксида азота наблюдалось полное восстановление измененных показателей системы свертывания крови, в том числе ее антикоагулянтной активности (рис.4) и фибринолиза. Это подтверждается отсутствием статистически достоверных различий исследованных показателей гемокоагуляции и фибринолиза по сравнению с данными группы контроля.

Рис. 4. Изменения антикоагулянтных свойств крови у крыс-самцов под воздействием непрерывного предварительного 30-минутного облучения ТГЧ - волнами на частотах МСИП NO 150,176-150,664 ГГц при хроническом стрессе

Примечание: *- статистически достоверно по сравнению с группой контроля; 1-я гр. - интактные животные; 2-я гр. - животные в состоянии иммобилизационного стресса; 3-я гр. - животные, предварительно облученные в течение 30 минут до действия стрессора.

6. Антистрессорное действие терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц

Для оценки антистрессорного действия терагерцового излучения на частотах МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц были проведены серии экспериментов, в которых оценивалась динамика концентрации гормона коры надпочечников - кортикостерона в условиях острого и хронического стресса до и после воздействия указанными электромагнитными волнами. В результате проведения экспериментов обнаружено, что концентрация кортикостерона у интактных животных составила 41,3 нмоль/л. У крыс, находящихся в состоянии острого и хронического иммобилизационного стресса, повышалась функциональная активность коры надпочечников. Это сопровождалось статистически достоверным по сравнению с группой контроля увеличением концентрации кортикостерона в сыворотке крови. Так, в условиях острого стресса она возрастала практически в 12 раз (до 493,5 нмоль/л), в условиях хронического стресса - в 7 раз (до 287,5 нмоль/л) (табл. 1).

Воздействие ТГЧ-излучения на частотах молекулярного спектра излучения и поглощения оксида азота в течение 15 минут вызывало снижение повышенной функциональной активности коры надпочечников, что выражалось в уменьшении уровня кортикостерона в сыворотке крови у животных, при остром стрессе - в 3,7 раз (до 132,3 нмоль/л), а при хроническом - в 1,8 раза (до 153,0 нмоль/л).

Таблица 1

Влияние 15-минутного непрерывного предварительного электромагнитного излучения терагерцового диапазона МСИП оксида азота 150,176-150,664 ГГц на концентрацию кортикостерона крови у крыс-самцов

Показатели	Интактные животные (n = 10)	Животные, находящиеся в состоянии		Предварительное облучение в течение 15 минут на фоне
Показатели	Интактные животные (n = 10)	острого стресса (n = 10)	хронического стресса (n = 10)	острого стресса (n=10)	хронического стресса (n=10)
Кортикостерон, нмоль/л	41,3 (35,0; 48,0)	493,5 (320; 680,0) P₁ =0,005	287,5 (45,0; 600,0) P₁ =0,021 P₂=0,173	132,3 (45,0; 210,0) P₁=0,045 Р₂=0,011	153,0 (35,0; 240,0) P₁=1,730 P₃=0,325

Blog