Geum.ru

Молекулярно-генетические механизмы активации тромбоцитов и чувствительности к антиагрегантным препаратам 14. 03. 10 клиническая лабораторная диагностика 03. 02. 07 генетика

Вид материалаАвтореферат
Практические рекомендации
Публикации по теме диссертационного исследования
Подобный материал:
1   2   3   4   5   6   7   8
ВЫВОДЫ:
  1. Выявлены следующие генетические факторы повышенного риска развития ССЗ: Leu33Pro GP IIIa, Thr145Met GP Ibα, C807T GP Ia и G36T P2Y12 у мужчин в возрасте до 45 лет и T13254C GP VI, Leu33Pro GP IIIa и G36T P2Y12 у пациентов обоего пола в возрасте старше 45 лет. Генетический вариант C18T P2Y12 оказался протективным в отношении развития инфаркта миокарда у мужчин моложе 45 лет.
  2. Генетические варианты рецепторов GP IIb-IIIa, P2Y12, GP VI и GP Ia-IIa определяют повышенную функциональную активность тромбоцитов у пациентов с ССЗ и доноров без тромбоэмболических и сердечно-сосудистых заболеваний в анамнезе.
  3. Количественные характеристики тромбоцитарных рецепторов GP IIb-IIIa, P2Y12 и P2Y1, такие как число рецепторов на поверхности клетки и уровень экспрессии соответствующих генов, коррелируют с показателями функциональной активности тромбоцитов и могут влиять на индивидуальную чувствительность к антиагрегантным препаратам – селективным блокаторам GP IIb-IIIa рецепторов, аспирину и ингибиторам АДФ-рецепторов, соответственно.
  4. Количество рецепторов GP IIb-IIIa на мембране тромбоцитов в большей степени определяет индивидуальную чувствительность к селективным блокаторам GP IIb-IIIa, тогда как мутация Leu33Pro GP IIIa может иметь значение при терапии препаратами антительной природы.
  5. Генетические варианты Leu33Pro GP IIIa, C18T P2Y12 и G6986A CYP3A5 модулируют индивидуальную чувствительность к антиагрегантной терапии клопидогрелом, в то время как генетические варианты T13254C GP VI и A-842G COX-1 влияют на индивидуальную чувствительность к аспирину.
  6. Разработанный новый метод на основе проточной цитометрии с использованием специфичных флуоресцентно-меченых антител позволяет оценивать функциональную активность тромбоцитов и эффективность антиагрегантной терапии клопидогрелом и аспирином. В качестве показателей активности тромбоцитов предложены расчетные параметры К1 и К2, которые характеризуют относительные изменения количества GP IIb-IIIa и Р-селектина на поверхности клетки в ходе активации.
  7. Сформулированный на основании проведенной работы алгоритм лабораторного молекулярно-генетического исследования больных с ССЗ позволяет определить индивидуальную чувствительность к антиагрегантным препаратам клопидогрелу и аспирину и осуществить патогенетически обоснованную терапию с позиций персонализированной медицины.

Практические рекомендации
    1. Для выявления генетических факторов высокого риска развития сердечно-сосудистых заболеваний и гиперагреации тромбоцитов показано тестирование следующих полиморфизмов – Leu33Pro GP IIIa, G36T P2Y12, С807Т GP Ia и Thr145Met GP Ibα у мужчин в возрасте до 45 лет, и Leu33Pro GP IIIa, G36T P2Y12 и Т13254С GP VI у лиц обоего пола старше 45 лет.
    2. Для оценки функциональной активности тромбоцитов и эффективности антиагрегантной терапии необходимо использовать несколько лабораторных методов, одним из которых является определение количества рецепторов GP IIb-IIIa и Р-селектина на поверхности тромбоцитов с помощью проточной цитометрии. В качестве показателей тромбоцитарной активности следует рассчитывать параметры К1 и К2, которые характеризуют относительные изменения количества GP IIb-IIIa и Р-селектина на поверхности клетки в ходе индуцированной активации с 10мкМ АДФ. При значении К1≤10 % и К2≤50% действие антиагрегантного препарата оценивается как эффективное, значения К1>10% и К2>50% считаются маркерами высокой реактивности тромбоцитов на фоне антиагрегантной терапии или неэффективности действия антиагрегантного препарата.
    3. В основе алгоритма обследования пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями, которым показан прием антиагрегантных препаратов, должен лежать комплексный подход, учитывающий генетические варианты G6986A CYP3A5 – цитохрома Р-450, метаболизирующего клопидогрел, C18T P2Y12 – АДФ-рецепторов P2Y12, являющихся «мишенью» для препарата, а также те генетические факторы, которые определяют гиперагрегацию тромбоцитов, и в первую очередь – Leu33Pro GP IIIa. Для определения индивидуальной чувствительности к аспирину необходимо проводить генотипирование T13254C GP VI и A-842G COX-1.

Публикации по теме диссертационного исследования

Статьи, опубликованные в журналах по перечню ВАК Минобрнауки РФ
  1. Sirotkina O.V. The combination of glycoprotein IIIa Pl(A) polymorphism with polymorphism of serotonin transporter as an independent strong risk factor for the occurrence of coronary thrombosis / Schwartz E., Demidova D., Sirotkina O., Kudinov S. // Molecular Genetics and Metabolism. – 2003. – V.79. – №3. – P.229-230.
  2. Сироткина О.В. Распределение аллельных вариантов генов, определяющих склонность к тромбофилии, у мужчин, перенесших инфаркт миокарда в молодом возрасте / Сироткина О.В., Шейдина А.М., Волкова М.В., Беркович О.А., Баженова Е.А., Черкашин Д.В., Бойцов С.А., Шляхто Е.В., Шварц Е.И. // Медицинский академический журнал. – 2004. – Т.4. - №1. – С.29-35.
  3. Сироткина О.В. Новая мутация гена GP IIIa в российской популяции - Leu40Arg, сцепленная с Leu33Pro / О.В. Сироткина, А.М. Шейдина, Т.В. Вавилова, Е.И. Шварц. // Генетика. – 2005. – Т.41. - №6. – С.683-687.
  4. Сироткина О.В. Участие гликопротеина IIb-IIIa в спонтанной агрегации тромбоцитов / О.В. Сироткина, А.М. Заботина, А.Е. Тараскина, Е.Б. Сиваченко, Е.Е. Зуева, М.И. Кадинская, Л.И Бурячковская, И.А Учитель, С.Г Хаспекова, Т.В. Вавилова, А.Л. Шварцман, А.В. Мазуров // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2007. – Т.143. - №4. – С.398-401.
  5. Sirotkina O.V. Effect of platelet glycoprotein IIb-IIIa number and glycoprotein IIIa Leu33Pro polymorphism on platelet aggregation and sensitivity to glycoprotein IIb-IIIa antagonists / O.V. Sirotkina, S.G. Khaspekova, A.M. Zabotina, Y.V. Shimanjva, A.V. Mazurov // Platelet. – 2007. – V.18. – №7. – P.506-514.
  6. Сироткина О.В. Генетические факторы риска развития инфаркта миокарда у мужчин молодого возраста в северо-западном регионе России / С.Н. Пчелина, О.В. Сироткина, А.М. Шейдина, А.Е. Тараскина, Т.И. Родыгина, Е.П. Демина, А.М. Заботина, М.И. Митупова, Е.А. Баженова, О.А. Беркович, Е.В. Шляхто, А.Л. Шварцман, Е.И. Шварц // Кардиология. – 2007. – Т.7. – С.29-34.
  7. Сироткина О.В. Вариации содержания гликопротеина IIb-IIIa (αIIb/β3 интегрина) у здоровых доноров. Влияние на агрегационную активность тромбоцитов и эффективность действия аспирина / С.Г. Хаспекова, О.В. Сироткина, Ю.В. Шиманова, А.В. Мазуров // Биомедицинская химия. – 2008. – Т.54. - №3. – С.361-371.
  8. Сироткина О.В. Эффективность антиагрегантной терапии клопидогрелом у пациентов, перенесших инфаркт миокарда с подъемом сегмента ST / О.В. Сироткина, Е.В. Богданова, Н.А. Боганькова, А.Н. Столярова, Т.В. Вавилова, С.А.Болдуева // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2009. – Т.8. – №1. – С.51-55.
  9. Сироткина О.В. Генетические варианты АДФ-рецептора тромбоцитов P2Y12, ассоциированные с изменением функциональной активности тромбоцитов и развитием сердечно-сосудистых заболеваний / О.В. Сироткина, А.М. Заботина, О.А. Беркович, Е.А. Баженова, Т.В. Вавилова, А.Л. Шварцман // Генетика. – 2009. – Т.45. – №.2. – С.247-253.
  10. Сироткина О.В. Факторы риска тромботических осложнений и прогноз у больных с хронической формой ишемической болезни сердца / Комаров А.Л., Шахматова О.О., Стамбольский Д.В., Ребриков Д.В., Кофиади И.А., Сироткина О.В., Деев А.Д., Панченко Е.П. // Кардиология. – 2009. – Т.11. – С.4-10.
  11. Сироткина О.В. Молекулярно-генетический анализ АДФ-рецепторов тромбоцитов у здоровых лиц и пациентов, принимающих клопидогрел / Сироткина О.В., Боганькова Н.А., Тараскина А.Е., Железняк Е.Л., Болдуева С.А., Вавилова Т.В. // Технологии живых систем. – 2009. – Т.8. – С.46-52.
  12. Сироткина О.В. Резистентность к клопидогрелу у больных с острым коронарным синдромом / Н.С. Фролова, Р.М. Шахнович, А.Б. Добровольский, О.В. Сироткина, М. Я. Руда // Терапевтический архив. – 2010. – Т.8. – С.14-19.
  13. Сироткина О.В. Иммунологические методы в оценке функциональной активности тромбоцитов у больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями / Сироткина О. В., Боганькова Н.А., Ласковец А.Б., Кухарчик Г.А., Гайковая Л.Б., Вавилова Т.В. // Медицинская иммунология. – 2010. – Т.12. – №3. – С.213-218.
  14. Сироткина О.В. Молекулярно-генетические механизмы активации тромбоцитов и чувствительности к антиагрегантным препаратам у больных сердечно-сосудистыми заболеваниями / О.В. Сироткина // Медико-биологические и социально-психологические проблемы безопасности в чрезвычайных ситуациях. – 2010. – Т.4. – №1. – С.69-76.
  15. Сироткина О.В. Резистентность к аспирину у больных с острым коронарным синдромом / Н.С. Фролова, Р.М. Шахнович, Е.М. Казначеева, О.В. Сироткина, А.Б. Добровольский // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2010. – Т.6. – С.40-46.

Патенты на изобретение
  1. Сироткина О.В. Способ оценки эффективности действия антиагрегантных препаратов на организм человека: Заявка на патент № 2010130629 (21.07.2010) / Сироткина О.В., Гайковая Л.Б., Вавилова Т.В., Кухарчик Г.А., Шабров А.В.

Учебно-методические пособия
  1. Сироткина О.В. Генетические факторы риска развития сердечно-сосудистых заболеваний: Пособие для врачей / С.Н. Пчелина, О.В. Сироткина, А.М. Шейдина, О.А. Беркович, Т.В. Вавилова, Е.В. Шляхто, М.В. Дубина. – Санкт-Петербург, 2006. – Изд. СПбГМУ им. акад. И.П.Павлова. – C.27.

Статьи в сборниках
  1. Сироткина О.В. Генетика тромбофильных состояний / Сироткина О.В., Шейдина А.М., Вавилова Т.В., Шварц Е.И. // В сб. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. – Вып. 6. – Новосибирск: Альфа Виста, 2004. – C.127-143.
  2. Сироткина О.В. Генетические факторы риска развития инфаркта миокарда у мужчин молодого возраста / Пчелина С.Н., Сироткина О.В., Шейдина А.М., Шварцман А.Л., Шварц Е.И. // В сб. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. – Вып. 6. – Новосибирск: Альфа Виста, 2004. – C.24-58.
  3. Сироткина О.В. Фармакогенетика антитромботических препаратов / О.В. Сироткина, А.Н. Столярова, А.С. Улитина, Т.В. Вавилова // В сб. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. – Вып. 9. – Новосибирск: Альфа Виста, 2006. – C.67-83
  4. Сироткина О.В. Генетические причины гиперагрегации тромбоцитов / О.В. Сироткина // В сб. Бреслеровские чтения. – 2007.- C.203-214.
  5. Сироткина О.В. Р2-рецепторы тромбоцитов / О.В. Сироткина, А.М. Заботина, Е.Л. Железняк, А.Н. Столярова, Т.В. Вавилова // В сб. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. – Вып. 12. – Новосибирск: Альфа Виста, 2008. – C.33-41.
  6. Сироткина О.В. Исследование функциональной активности тромбоцитов: история, современность, перспективы / О.В. Сироткина // Сб. науч. тр. Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике. – Вып. 15. – Новосибирск: АртЛайн, 2010. – C. 60-74.

Прочие научные публикации
  1. Сироткина О. В. Использование метода проточной цитометрии для определения количества гликопротеиновых рецепторов GP IIb/IIIa на поверхности тромбоцитов / Сиваченко Е.Б., Зуева Е.Е., Кадинская М.И., Заботина А.М., Тараскина А.Е., Сироткина О.В. // Клинико-лабораторный консилиум. – 2006. – Т.13. – С.28-34.
  2. Сироткина О. В. Молекулярно-генетические основы наследственных тромбофилий / О.В. Сироткина // Клинико-лабораторный консилиум. – 2006. – Т.13. – С.21-27.
  3. Сироткина О.В. Фармакогенетика антитромботических препаратов / Сироткина О.В., Вавилова Т.В. // Тромбоз, гемостаз и реология. – 2007. – Т.2. – С.3-15.
  4. Сироткина О.В. Фармакогенетическое исследование как основа для индивидуализированного подхода к лекарственной терапии / А.С. Улитина, О.В. Сироткина, С.Н. Пчелина, М.В. Дубина // Клинико-лабораторный консилиум. – 2009. – Т.3. – С.36-43.
  5. Сироткина О.В. Молекулярные дефекты гена рецептора тромбоцитов IIb/IIIa, ассоциированные с гиперагрегацией / Сироткина О.В., Шейдина А.М., Кадинская М.И., Вавилова Т.В., Шварц Е.И. // Фундаментальные исследования и прогресс в кардиологии: Сборник тезисов Конгресса ассоциации кардиологов стран СНГ. – Санкт-Петербург. – Научно-практический журнал «Кардиология СНГ». – 2003. – Т.1. – №1. – С.263.
  6. Сироткина О.В. Роль мутационных повреждений гена P2Y12, кодирующего АДФ-рецептор тромбоцитов, в патогенезе тромбофилических состояний / Сироткина О.В., Кудинов С.В., Топерверг О.Б., Вавилова Т.В., Шварц Е.И. // Современные достижения клинической генетики: Материалы Всероссийской научно-практической конференции, Москва. – Медицинская генетика. – 2003. – Т.2. – №10. – С.440.
  7. Сироткина О.В. Молекулярные дефекты гемостаза в развитии инфаркта миокарда в молодом возрасте / Шейдина А.М., Сироткина О.В., Родыгина Т.И., Демина Е.П., Беркович О.А., Шварц Е.И. // Современные достижения клинической генетики: Материалы Всероссийской научно-практической конференции. – Москва. – Медицинская генетика. – 2003. – Т.2. – №10. – С.447.
  8. Сироткина О.В. Поиск мутационных повреждений гена P2Y12, кодирующего АДФ-рецептор тромбоцитов / О.В. Сироткина, О.Б. Топерверг, А.М. Новикова, Т.В. Вавилова, С.Н. Пчелина, Е.И. Шварц // Фундаментальные науки – медицине: Материалы конференции. – Москва. – М.: Фирма «Слово», 2003. – 176с., C.23-25.
  9. Сироткина О.В. Новые структурные полиморфизмы гена P2Y12, кодирующего АДФ-рецептор тромбоцитов, и их функциональное значение / Новикова А.М., Сироткина О.В., Вавилова Т.В., Пчелина С.Н. // Биология-наука XXI века: Сборник тезисов 8-ой Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых. – Пущино. – 2004. – C.24.
  10. Sirotkina O. The new mutation in the GPIIIa gene associated with high platelet aggregation is found in Russia / Sirotkina O., Sheydina A., Vavilova T., Schwarzman A. // 18th International Congress on Thrombosis, Slovenia, Ljubljana. – Pathofysiology of Haemostasis and Thrombosis. – 2004. – Suppl. – P.OC080.
  11. Сироткина О.В. Новые структурные полиморфизмы кодирующей области гена АДФ-рецептора тромбоцитов P2Y12 / Новикова А.М., Сироткина О.В. // Молодые ученые – промышленности Северо-Западного региона: Материалы семинаров политехнического симпозиума. – СПб.: Изд-во Политехн. Ун-та, 2004. – 167с. – C.92-93.
  12. Сироткина О.В. Сочетанное носительство аллельных вариантов генов системы тромбообразования как фактор риска развития инфаркта миокарда у мужчин молодого возраста / Сироткина О.В., Баженова Е.А., Беркович О.А., Пчелина С.Н. // Российская кардиология: от центра к регионам: Материалы Российского национального конгресса кардиологов, Томск, Россия. – Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2004. – Прил. – C.447.
  13. Сироткина О.В. Генетические механизмы гиперагрегации тромбоцитов: аллельные варианты гена АДФ-рецептора P2Y12 / Новикова А.М., Сироткина О.В., Яшина Е.С., Кадинская М.И., Вавилова Т.В. // Клиническая гемостазиология и гемореология в сердечно-сосудистой хирургии: Материалы второй всероссийской научной конференции (с международной участием), Москва. – 2005. – C.250.
  14. Сироткина О.В. Фармакогенетические критерии селективного применения антитромботических препаратов варфарина и плавикса / Сироткина О.В., Новикова А.М., Улитина А.С., Кадинская М.И., Вавилова Т.В. // Материалы V съезда Российского общества медицинских генетиков, Уфа. - Медицинская генетика. – 2005. – Т.4. – №6. – С.267.
  15. Сироткина О.В. Новые SNPs гена АДФ-рецептора тромбоцитов P2Y12 и риск развития инфаркта миокарда / Новикова А.М., Сироткина О.В. // Биология-наука XXI века: Сборник тезисов 9-ой Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых. – Пущино. – 2005.
  16. Sirotkina O. The new single nucleotide polymorphisms of ADP receptor P2Y12 gene affected platelet aggregation and myocardial infarction development were found in Russia / Sirotkina O., Novikova A., Vavilova T. // Abstract of XX International Congress of the International Society on Thrombosis and Haemostasis, Sydney, Australia. - Journal of Thrombosis and Haemostasis. – 2005. – V.3. – Suppl.1. – P.P0980.
  17. Sirotkina O.V. New genetic risk factor for myocardial infarction development in patients with arterial hypertension / Novikova A.M., Sirotkina O.V. // International Congress “Hypertension – from Korotkov to present days”: Abstract book. – Saint-Petersburg, Russia. – 2005. – P.97-98.
  18. Sirotkina O.V. The analysis of the relationship between the combined risk of the cardiovascular disease development’s factors and the number of the genetic markers associated with the cardiovascular pathology in the healthy young men population / Chercashin D.V., Berkovitch O.A., Sirotkina O.V. // International Congress “Hypertension – from Korotkov to present days”: Abstract book. – Saint-Petersburg, Russia. – 2005. – P.25.
  19. Сироткина О.В. Вклад наследственных факторов в формирование наследственной предрасположенности к развитию сердечно-сосудистой патологии / Пчелина С.Н., Сироткина О.В., Шейдина А.М., Шварцман А.Л. // Перспективы российской кардиологии: Материалы Российского национального конгресса кардиологов, Москва. – Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2005. – Т.4. – №4. – С.270.
  20. Сироткина О.В. Изменение активности тромбоцитов у больных с различным генотипом Leu33Pro GP IIIa, принимающих плавикс после чрескожной ангиопластики коронарных артерий / Яшина Е.С., Новикова А.М., Кадинская М.И., Вавилова Т.В., Сироткина О.В. // Материалы Одиннадцатого Всероссийского съезда сердечно-сосудистых хирургов, Москва. - Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН. – 2005. – Т.6. – №5. – С.297.
  21. Sirotkina O.V. The Leu33Pro GP IIIa genetic variants and quantity of the GPIIb/IIIa receptors on platelet’s membrane are the factors influenced the platelet hyperaggregation / O.V. Sirotkina, A.M. Novikova, M.I. Kadinskaya, T.V. Vavilova, A.L. Schwarzman // Abstract of Eurepean Human Genetics Conference, Amsterdam, The Nederlands. - European Journal of Human Genetics. – 2006. – V.14. – Suppl.1. – C.258-259.
  22. Сироткина О.В. Взаимосвязь PlA1/A2 полиморфизма гликопротеина IIIa с агрегационной активностью тромбоцитов и чувствительностью к антагонистам гликопротеина IIb/IIIa / Сироткина О.В., Хаспекова С.Г., Заботина А.М., Мазуров А.В. // От диспансеризации к высоким технологиям: Материалы Российского национального конгресса кардиологов, Москва. – Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2006. – Т.5. – С.343.
  23. Сироткина О.В. Генетические факторы риска развития тромбозов и функциоанльная активность тромбоцитов у больных, принимающих плавикс и аспирин после чрескожных вмешательств на коронарных артериях / Яшина Е.С., Заботина А.М., Смурова Е.Л., Кадинская М.И., Азовцев Р.А., Вавилова Т.В., Сироткина О.В. // От диспансеризации к высоким технологиям: Материалы Российского национального конгресса кардиологов, Москва. – Кардиоваскулярная терапия и профилактика. – 2006. – Т.5. – С.383.
  24. Сироткина О.В. Аллельные варианты гена P2Y12 – распределение в двух возрастных группах популяции Северо-Запада России и патогенетическое действие / Смурова Е.Л., Новикова А.М., Тараскина А.Е., Сироткина О.В. // Биология – наука XXI века: Сборник тезисов 10-ой Пущинской школы-конференции молодых ученых. – Пущино. – 2006. – C.49.
  25. Sirotkina O.V. Variations of platelet glycoprotein IIb-IIIa quantity affects platelet aggregation and sensitivity to glycoprotein IIb-IIIa antagonists / A.V. Mazurov, S.G. Khaspekova, A.M. Zabotina, Y.V. Shimanova, O.V. Sirotkina // Abstracts XXIst Congress of the International Sosiety on Thrombosis and Haemostasis, Geneva, Switzerland. – Journal of Thrombosis and Haemostasis. – 2007. – V.5. – Suppl.2. – P.P-T-296.
  26. Sirotkina O.V. The GP IIb gene expression, Ile843Ser GP IIb gene polymorphism, glycoprotein IIb-IIIa number and platelet aggregation in healthy donors / O.V. Sirotkina, A.M. Zabotina, E.L. Zheleznjak, A.N. Stolyarova, T.V. Vavilova // Abstracts of Eurepean Human Genetics Conference, Nice, France. – European Journal of Human Genetics. – 2007. – V.15. – Suppl.1. – C.200.
  27. Сироткина О.В. Генетические особенности индивидуального ответа на антиагрегантную терапию аспирином / Столярова А.Н., Сироткина О.В. // Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины: Сборник тезисов к научно-практической конференции молодых ученых. – Санкт-Петербург. – 2007. – C.49-51.
  28. Сироткина О.В. Мутации коллагеновых рецепторов T13254C GPVI и C807T GPIa, количество гликопротеинов GPVI и GPIa-IIa на мембране тромбоцитов и их функциональная активность у здоровых доноров / Столярова А.Н., Сироткина О.В. // Молодые ученые – промышленности Северо-Западного региона: Материалы конференций Политехнического симпозиума 2007 года. – СПб.: Изд-во Политехн. Ун-та, 2007. – 198 с. – C.128-129.