Сердечная деятельность спортивных лошадей под влиянием тренинга 03. 00. 13 физиология

Вид материала

Автореферат

Содержание Козлов Сергей Анатольевич Общая характеристика работы Научная новизна. Научно-практическая значимость работы. Основные положения, выносимые на защиту Апробация работы. Объем и структура диссертации. Материал и методы исследований РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1 Изучение электрической активности миокарда у спортивных лошадей различных возрастных групп. 2.2Изучение электрической активности сердца у спортивных лошадей в зависимости от интенсивности тренинга Изменения ЭКГ при нерациональном (нефизиологическом) тренинге 2.3Исследование электролитного состава сыворотки крови у спортивных лошадей в зависимости от интенсивности тренинга. 2.4 Исследование показателей ПОЛ и АОЗ у лошадей в зависимости от интенсивности тренинга 2.5 Исследование ПОЛ и АОЗ у спортивных лошадей с признаками нарушения реполяризации миокарда. 2.6 Исследование вариабельности сердечного ритма у спортивных лошадей 2.7 Исследование влияния кормовой добавки «Янтарь» на ЭКГ-параметры и ПОЛ у спортивных лошадей 2.8 Изучение действия синтетического антиоксиданта «Эмицидина» на ЭКГ и ПОЛ у спортивных лошадей Практические предложения Список работ, опубликованных по теме диссертации

Подобный материал:

• Характер изменений нарушенных коагуляционных и фибринолитических свойств крови под, 413.35kb.
• Тема : Смятение умов, 42.95kb.
• Возрастная динамика и адаптационные изменения функционального состояния детей 5-14, 710.88kb.
• Магнитотерапия метод реабилитации спортивных лошадей 06. 02. 04 ветеринарная хирургия, 853.58kb.
• Взаимосвязь школы и семьи в профориентации, 27.08kb.
• Коц Я. М. Спортивная физиология. Учебник для институтов физической культуры, 4839.54kb.
• Т. В. Зайцева теория психологического тренинга, 1909.78kb.
• Методичка №46 : Физиология «жкт» Система пищеварения и обмена веществ, 6477.61kb.
• Характер изменения функционально активных участков и компактности политенных хромосом, 364.37kb.
• Ирина Геннадьевна «Развитие познавательного интереса учащихся на уроках математики», 142.37kb.

На правах рукописи


ШЕСТАКОВА АННА НИКОЛАЕВНА


Сердечная деятельность спортивных лошадей под влиянием тренинга


03.00.13 – физиология


АВТОРЕФЕРАТ


диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук


Москва - 2009

Работа выполнена в лаборатории сравнительной кардиологии Коми НЦ УрО РАН и ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия».


Научный руководитель:

доктор биологических наук, академик

Рощевский Михаил Павлович


Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор

Козлов Сергей Анатольевич

доктор биологических наук, профессор

Грушкин Александр Георгиевич


Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Российский государственный

аграрный заочный университет» (г. Москва)


Защита состоится «_18_»_ноября_____2009 г. в «12:30» часов на заседании диссертационного совета Д 220.042.04 при ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина» по адресу: 109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23, тел. 377-93-83.


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К. И. Скрябина».


Автореферат разослан «_9__»_октября___ 2009г.


Ученый секретарь

диссертационного совета В. Д. Фомина

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ


Актуальность темы. Современный конный спорт характеризуется значительным усложнением условий соревнований, изменением методов тренинга и увеличением объема и интенсивности тренировочных нагрузок (В.Н. Дорофеев, 1995). Недостаточная физическая подготовленность лошади приводит в процессе напряженной работы к быстрому утомлению, нарушению функции сердечно-сосудистой системы, развитию компенсаторной гипертрофии сердца (Е.В. Кульчитская, 1988; R.S.Rose, 1990; Ж.В.Вараксина, 2002; И.А.Никулин, 2007). При гипертрофии миокарда развивается резко возрастающая потребность в кровоснабжении мышцы сердца кислородом, что может привести к развитию гипоксии (Н.Д. Граевская, 1975; Е.И. Зенкович, 1993; М. Гони, 2001). Ряд авторов (Н.М. Григорьева, 1995; K.B.Storey, 1996; Ю.А. Владимиров, 2000; Ж.В. Вараксина, 2002; С.Н. Копылов, 2008) указывает на то, что при гипоксии возрастает активность перекисного окисления липидов, свободные радикалы при этом вызывают качественное изменение состава липидных фракций клеточных мембран. Изменения физических свойств мембран кардиомиоцитов приводят к нарушению процесса реполяризации, которая проявляется изменениями конечной части желудочкового комплекса на ЭКГ (В.В. Гутенев, 1988; И.Е. Иноземцева, 1989; В.Ф. Кузнецов, 1998; P.L.Evans, 1998; Ж.В. Вараксина, 2002). По данным отечественной и зарубежной литературы на сегодняшний момент недостаточно изучен вопрос, касающийся электрической активности сердца у лошадей в зависимости от интенсивности тренинга; не установлены критерии ЭКГ при чрезмерных физических нагрузках; недостаточно изучена вариабельность ритма сердца у спортивных лошадей по данным Холтеровского мониторирования ЭКГ. Требуют дополнительного изучения вопросы биохимического исследования крови, отражающего уровень свободно-радикального окисления у тренируемых животных. Есть также необходимость в изыскании новых способов коррекции нарушения процесса реполяризации и метаболизма миокарда у лошадей.

Цель и задачи исследований. Целью исследований является изучение влияния тренинга различной интенсивности на сердечную деятельность спортивных лошадей. Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Установить особенности ЭКГ у спортивных лошадей в зависимости от возраста и спортивного стажа, а также от интенсивности тренинга.
   
2. Выявить изменения ЭКГ-параметров у лошадей при нерациональном (нефизиологичном) тренинге.
   
3. Изучить электролитный состав крови у спортивных лошадей при тренинге различной интенсивности.
   
4. Определить уровень свободно-радикальных процессов, протекающих в организме лошадей, находящихся в тренинге.
   
5. Изучить вариабельность ритма сердца у лошадей разного возраста и у лошадей с различной степенью тренированности по данным временного и спектрального анализов, полученных при Холтеровском мониторировании ЭКГ.
   
6. Изучить влияние экзогенной янтарной кислоты, как регулятора энергетического обмена, антиоксиданта и адаптогена, на сердечную деятельность и перекисное окисление липидов при пероральном и парэнтеральном способах введения.
   

Научная новизна. Впервые были определены особенности ЭКГ у старых спортивных лошадей (старше 20 летнего возраста), многие годы находящихся в тренинге. Впервые определены показатели перекисного окисления липидов и общей антиокислительной защиты сыворотки крови, плазмы и эритроцитов у спортивных лошадей, находящихся в тренинге различной интенсивности.

Впервые для Холтеровского мониторирования ЭКГ у спортивных лошадей были изготовлены и применены электроды специальной конструкции: в виде шплинта и инъекционной иглы. Впервые исследованы параметры временного и спектрального анализов вариабельности ритма сердца у лошадей при тренинге различной интенсивности.

Впервые для метаболической коррекции нарушения процесса реполяризации и дистрофических изменений миокарда у спортивных лошадей применена кормовая добавка «Янтарь». Изучены изменения ЭКГ, перекисного окисления липидов и антиокислительной защиты на фоне применения кормовой добавки, содержащей янтарную кислоту.

Научно-практическая значимость работы. Использование на практике мониторирования ЭКГ у спортивных лошадей, как одного из методов скриниг-тестирования, открывает возможности физиологического контроля и раннего выявления состояний физического перенапряжения и других изменений, происходящих в миокарде под влиянием тренинга. Предложенная нами конструкция электродов для Холтеровского мониторирования ЭКГ позволит проводить исследование ЭКГ и вариабельности ритма сердца у спортивных лошадей во время тренировки.

Применение кормовых добавок с янтарной кислотой обеспечивает эффективную коррекцию нарушения процесса реполяризации, метаболических изменений сердечной мышцы у спортивных лошадей и обеспечивает стабильный антиоксидантный эффект.

Физиологический своевременный контроль за состоянием сердечной деятельности с помощью предложенных методов позволит сохранить хорошую работоспособность спортивных лошадей и результативность призовых выступлений.

Материалы диссертации используются при чтении лекций и проведении практических занятий со студентами биологического факультета и факультета ветеринарной медицины Вятской ГСХА по дисциплинам: «Физиология животных», «Клиническая диагностика», специализация «Болезни лошадей». Материалы диссертации внедрены в учебный процесс кафедры биохимии и физиологии и кафедры диагностики и терапии Нижегородской ГСХА; кафедры физиологии и зоогигиены Ижевской ГСХА; кафедры внутренних незаразных болезней Пермской ГСХА.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. У спортивных лошадей, к которым применяется тренинг высокой интенсивности, происходит достоверное увеличение амплитуды зубцов, сокращение продолжительности электрической систолы желудочков, урежение ЧСС в покое.

2. ЭКГ старых лошадей (старше 20 летнего возраста) с большим спортивным стажем имеет свои характерные особенности: снижение амплитуды всех зубцов, наличие двухфазного или отрицательного зубца Р, удлинение предсердно-желудочковой проводимости, неполная АВ-блокада II степени.

3. У 35 % спортивных лошадей в процессе тренинга, при несоответствии уровня физических нагрузок функциональным возможностям миокарда на ЭКГ отмечается нарушение процесса реполяризации и признаки гипоксии и дистрофии миокарда, характеризующиеся изменением конечной части желудочкового комплекса на ЭКГ.

4.Показатели перекисного окисления липидов и общей антиокислительной защиты у здоровых спортивных лошадей имеют колебания в связи с уровнем их тренированности. У лошадей с признаками нарушения процесса реполяризации на ЭКГ наблюдается увеличение значений ПОЛ в сыворотке, плазме и эритроцитах.

5.При исследовании вариабельности ритма сердца по данным временного и спектрального анализов у интенсивно тренируемых спортивных лошадей установлено повышение парасимпатических влияний на сердце на фоне уменьшения симпатического тонуса.

6. Под влиянием экзогенной янтарной кислоты, у лошадей с признаками нарушения реполяризации и дистрофических изменений миокарда, происходит нормализация конечной части желудочкового комплекса ЭКГ, снижение уровня перекисного окисления липидов и повышение общей антиокислительной активности сыворотки, плазмы и эритроцитов.


Апробация работы. Материалы диссертации доложены автором лично в виде устных докладов на: научной конференции «Аграрная наука Северо-Востока Европейской части России на рубеже тысячелетий – состояние и перспективы» (Киров, 2000).; VI симпозиуме по сравнительной электрокардиологии (Сыктывкар, 2004); IV Молодежной научной конференции «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике» (Сыктывкар, 2005); Всероссийской научно-практической конференции «Теоретические и практические вопросы ветеринарной медицины» (Киров, 2007).

Материалы представлены автором в виде стендовых докладов на: VI научно-практической конференции «Болезни лошадей: диагностика, профилактика, лечение» (Москва, 2005); VII Всероссийской научно-практической конференции «Ветеринарная медицина: современные проблемы и перспективы развития» (Саратов, 2007); 10 th International Congress of World Equine Veterinary Association ( Moscow, 2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 18 статей, из них три в ведущих рецензируемых ВАК изданиях (статьи подчеркнуты).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 122 машинописных страницах, состоит из введения, четырех глав (обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения результатов), выводов, практических предложений, приложений и списка литературы (199 источников, в том числе 50 иностранных), содержит 12 таблиц и 14 рисунков.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования, представленные в работе проводили в период с 2000 по 2007 год на спортивных лошадях, принадлежащих ГЗК «Кировская» с ипподромом, лаборатории коневодства ВГСХА и частным конно-спортивным клубам г. Кирова.

Исследованию ЭКГ всего было подвергнуто 130 лошадей, находящихся в тренинге и не имеющих в анамнезе воспалительных заболеваний миокарда. Из них ганноверской породы - 41 гол., тракененской - 25 гол., латвийской – 15 гол., других пород - 49 голов.

Возрастной состав исследованных животных был представлен лошадьми 2-3-х летнего возраста (n=36), 4-6- летнего (n=31), лошадьми 7-10- летнего (n=30), 11-18-летнего (n=18) и старше 20-летнего возраста (n=15). Исследуемые лошади находились в тренинге по классическим видам конного спорта: конкуру и выездке, также из них была выделена группа лошадей (n=15), имеющих спортивное прошлое, но на момент исследования используемых в прокате.

Исследования проводили в три этапа:

I этап - включал в себя электрокардиографическое исследование всего поголовья, изучение электролитного состава и биохимического исследования сыворотки крови. Кроме того, были определены показатели индуцированной биохемилюминесценции (БХЛ) сыворотки крови, плазмы и эритроцитов у лошадей, находящихся в тренинге, отражающие уровень перекисного окисления липидов и состояние антиокислительной системы (АОС).

Статическую ЭКГ регистрировали у всех животных (n=130) по методике сагиттальных туловищных отведений по М.П. Рощевскому (1958, в модификации 1965). Электрокардиографические исследования проводили многократно. ЭКГ регистрировали посредством трехканального электрокардиографа KARDIOVIT AT-1 (SHILLER, Швейцария) при скорости движения ленты 50мм/с и 25 мм/с и усилении 1мВ = 10 мм. Анализ ЭКГ проводили при помощи кардиологической линейки Rytmonorm с учетом скорости движения ленты. При анализе учитывали амплитуду (в мВ) и направленность зубцов ЭКГ, продолжительность интервалов в секундах по II отведению, расположение сегмента S-T относительно изоэлектрической линии и его форма, оценивали отношение электрической систолы к общей продолжительности сердечного цикла, определяли частоту сердечных сокращений (ЧСС).

Для изучения особенностей электрической активности миокарда у лошадей с разным спортивным стажем животные были разделены на группы. В первую группу входили лошади, проходившие первоначальную заездку - двух-трехлетнего возраста (n = 36), во вторую – лошади в начале спортивной карьеры - четырех-шестилетние (n = 31), в третью - лошади в период самых интенсивных нагрузок - семи-десятилетние (n = 30), в четвертую группу вошли животные, завершающие спортивную карьеру – одиннадцати-восемнадцатилетние (n=18) и пятую группу составили лошади старого возраста (старше 20 лет) со спортивным прошлым (n = 15).

Далее проводили исследование электролитного состава сыворотки крови с целью выявления его изменений в зависимости от интенсивности тренинга. В сыворотке определяли содержание ионизированного К⁺, Na⁺, Mg⁺ и общего Са.⁺ Кровь для определения электролитного состава брали из яремной вены утром натощак, до работы. Определение содержания ионов К⁺, Na⁺ и Mg⁺ в сыворотке проводили на приборе "Microlyte 3+2" фирмы "Коне". Общий Са⁺ определяли в сыворотке унифицированным колориметрическим методом при помощи набора реагентов для определения Са в сыворотке и плазме крови «Calcium FL-E» фирмы “Olvex Diagnosticum”.

Для оценки активности ПОЛ и АОЗ исследования проводили методом индуцирования биохемилюминесценции перекисью водорода с сульфатом железа на биохемилюминометре БХЛ-06М, (НПЦ "Биоавтоматика", Н.Новгород) с програмным обеспечением предназначеннным для чтения числовой информации с биохемилюминометра, статистической обработки числовых параметров, хранения на жестком диске компьютера в виде файлов данных.

Также было проведено определение первичных продуктов ПОЛ – ДК (диеновые конъюгаты), вторичных – ТК (триеновые конъюгаты) и конечных продуктов свободно-радикального окисления - МДА (малоновый диальдегид) и фермента, обеспечивающего антиокислительную защиту клеток - каталазы. Малоновый диальдегид исследовали в реакции с 2-тиобарбитуровой кислотой, диеновые и триеновые коньюгаты посредством спектрофотометрии, каталазу – в реакции с молибдатом аммония по Королюку М.А. (1988). Для определения показателей состояния системы ПОЛ и АОС у спортивных лошадей были сформированы две группы животных с различной степенью интенсивности тренинга (спортивные и прокатные) по 15 голов в каждой, в которые вошли клинически здоровые животные, не имеющие изменений ЭКГ.

II этап – изучение вариабельности ритма сердца по временному и спектральному анализам. С этой целью была усовершенствована методика Холтеровского мониторирования ЭКГ у лошадей. Для этого нами были изготовлены специальные электроды двух видов: в форме шплинта и иглы. Электроды изготавливались из проволоки для ортодонтических аппаратов ПОА-«Вега» (ТУ 9391-005-54275236-2004) диаметром 0,8 мм. С помощью аргонной сварки к электродам приваривали клеммы, к которым должны прикрепляться заклепки с проводами. Для Холтеровского мониторирования применялся трехканальный кассетный регистратор Astrocard (ЗАО «Медитек», Россия, 2001) с семипроводной версией, расшифровка данных проводилась на оборудовании Oxford Medilog Optima-2 (Великобритания).

Для Холтеровского мониторирования ЭКГ у лошадей электроды накладывались в следующем порядке :

• красный и синий – краниальная часть грудной кости
  
• белый и коричневый – основание холки
  
• черный и оранжевый – на белой линии живота
  
• зеленый – произвольно
  

Регистратор в футляре прочно прикрепляли к подпруге, электроды вводились подкожно. Холтеровское мониторирование ЭКГ проводили в покое, в деннике в утренние часы через два часа после кормления без присутствия человека. Запись велась в течение 45-60 мин, при этом учитывался период адаптации лошади в течение 10-15 мин. Исследованию подвергались лошади разного возраста: 2-3 летние; 7-10 летние; 20 летние с целью изучения возрастных изменений ВРС, а также лошади с хорошей спортивной подготовкой, активно участвующие в соревнованиях (n=10), и лошади, используемые в прокате (n=10).

III этап - изучение влияния экзогенной янтарной кислоты, вводимой пероральным и парэнтеральным путями на параметры ЭКГ, показатели ПОЛ и антиокислительной активности сыворотки, плазмы и эритроцитов у спортивных лошадей. По принципу аналогов были сформированы три группы лошадей: 1-я опытная (n=15) - (без изменений ЭКГ), 2-я опытная (n=15) - (с изменениями ЭКГ, характерными для нарушения реполяризации) и контрольная (n=15). Предварительно производился забор крови из яремной вены для определения исходного уровня показателей ПОЛ и АОС во всех группах. Затем лошадям двух опытных групп в течение 30 дней давали внутрь с кормом кормовую добавку «Янтарь» в дозе 150,0 г /гол 1 раз в день. По окончании опыта снова брали кровь для исследования состояния системы ПОЛ и АОС. Кроме того, после курса применения КД «Янтарь» снова был проведен мониторинг ЭКГ у подопытных животных. Для сравнения полученных результатов от применения кормовой добавки с известным антиоксидантом был проведен опыт с синтетическим антиоксидантом, содержащим янтарную кислоту – 2,5 % «Эмицидином», вводимым в 1-й опытной группе (n=5) внутривенно, а во 2-й опытной группе (n=5) подкожно в дозе 10,0/лошадь один раз в день в течение 10 дней. Животные в контрольной группе (n=5) препарат не получали.

Лабораторные исследования осуществляли на базе клинико-диагностической лаборатории Кировской областной больницы, лаборатории криоконсервирования Всероссийского научно-исследовательского института переливания крови, лаборатории Всероссийского научно-исследовательского института охотничьего хозяйства и звероводства им. Б.М. Житкова, в лаборатории кафедры терапии и клинической диагностики факультета ветеринарной медицины Вятской ГСХА.

Полученный цифровой материал обрабатывали на персональном компьютере с применением программы Excel 2003, а также программы ACD. Данные в работе представлены в виде среднего арифметического и стандартного отклонения. Достоверность различий между параметрами оценивали с помощью критерия Стьюдента. Данные считали достоверными при уровне значимости р0,05; р0,01; р0,001.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Изучение электрической активности миокарда у спортивных лошадей различных возрастных групп.

С целью выявления особенностей параметров ЭКГ у спортивных лошадей различных возрастных групп, следовательно, имеющих разный спортивный стаж, были проанализированы статические ЭКГ у 130 лошадей, находящихся в тренинге. У лошадей 2-3-х лет (начало тренинга) были отмечены низкие амплитуды зубцов Р, R и Т по сравнению со средними нормативными значениями. Так, амплитуда зубца Р у лошадей этой группы составляет 0,23 0,02 мВ (р0,05 по отношению к норме). Амплитуда зубца R также достоверно ниже средних нормативных показателей – 0,160,04 мВ (р0,001). Двухфазность зубца Т наблюдается у 70 % лошадей этой группы, причем положительная фаза зубца преобладает (+0,300,03мВ; -0,210,06мВ). Наличие отрицательной фазы зубца Т сопровождается смещением вниз сегмента S-T, но не более чем на 0,10,01 мВ. Продолжительность зубца Р составила в среднем 0,100,012 сек., интервала P-Q – 0,280,009 сек., желудочкового комплекса QRS – 0,070,06 сек., интервала Q-T – 0,460,05 сек. Данные параметры ЭКГ приближаются к средним нормативным значениям. ЧСС в данной группе животных несколько превышала допустимую норму – 48,0 3,04 уд./мин., СПП составил 20,51,09%, СПЖ – 34,21,21 %, ДСК – 0,76 0,09.

У лошадей 4-6 летнего возраста (активный общий тренинг и специализация по видам конного спорта) наблюдается увеличение амплитуды зубца R (0,310,08) по сравнению с лошадьми 2-3 летнего возраста (р0,05). У 80 % животных этой группы зубец Т инвертирован с преобладанием отрицательной фазы, которая составляет - 0,50,05 мВ. Интервал S-T у лошадей имеющих на ЭКГ двухфазный зубец Т смещен вниз от изолинии более чем на 0,20,03 мВ. Продолжительность зубца Р равнялась в среднем 0,080,008 сек., интервала P-Q – 0,280,019 сек., желудочкового комплекса QRS – 0,070,007 сек., интервала Q-T – 0,460,013 сек. Исследованные параметры ЭКГ приближаются к средним нормативным значениям. Что касается ЧСС, то в данной группе животных наблюдалась тенденция к снижению этого показателя – 43,4 2,48 уд./мин., а также отмечалось некоторое улучшение функциональных показателей: СПП составил 20,21,28 %, СПЖ – 34,01,24 %, ДСК – 0,86 0,082.

У лошадей 7-10 лет (активный тренинг и выступление на соревнованиях) на ЭКГ регистрируются зубцы: Р – 0,320,02 мВ (р0,05) и R - 0,610,10 мВ. Двухфазный зубец Т характерен для 60 % ЭКГ лошадей этой возрастной группы. У большинства животных положительная фаза зубца Т равна отрицательной фазе (0,400,09 мВ). Продолжительность зубца Р составила в среднем 0,090,006 сек., интервала P-Q – 0,310,014 сек., желудочкового комплекса QRS – 0,080,00 сек., интервала Q-T – 0,440,015 сек. ЭКГ лошадей в этом возрасте характеризуется удлинением интервалов на фоне урежения ЧСС – 38,0 2,13 уд./мин.. Систолический показатель предсердий в данной группе составил 21,71,25 %, СПЖ – 27,61,64 %, ДСК – 1,02 0,072.

У лошадей 11-18 летнего возраста (завершение спортивной карьеры) амплитуда всех зубцов ЭКГ была достоверно ниже, чем у 7-10 летних лошадей: зубец Р – 0,240,02 (р0,05), зубец R - 0,320,06 (р0,001), зубец S – 1,300,14. Зубец Т у 55,5% лошадей этой группы имеет отрицательную фазу, превышающую 0,2 мВ (в среднем 0,380,04 мВ). Смещение сегмента S-Т вниз более чем на 0,1 мВ наблюдается на ЭКГ с инвертированными зубцами Т. Продолжительность зубца Р была равна 0,100,013 сек., интервала P-Q – 0,280,019 сек., желудочкового комплекса QRS – 0,090,005 сек., интервала Q-T – 0,490,24 сек. Все временные характеристики ЭКГ у животных данной группы превышают средние нормативные значения. ЧСС, наоборот, еще более понизилась по сравнению с лошадьми более молодого возраста – 39,21,38 уд./мин. (р0,05), СПП составил 17,81,29 %, СПЖ – 29,61,4 %, ДСК – О,98 0,075.

Особое внимание в своих исследованиях мы уделили изучению особенности ЭКГ старых лошадей (старше 20 лет), имеющих спортивное прошлое: для ЭКГ лошадей этого возраста характерным является снижение амплитуды всех зубцов (р0,05). Так амплитуда предсердного зубца составляет 0,240,02, зубца R - 0,440,19. У 80 % животных этой группы зубец Т инвертирован, отрицательная фаза составляет - 0,280,08 мВ. Интервал S-T у лошадей имеющих на ЭКГ двухфазный зубец Т смещен вниз более чем на 0,20,03 мВ. У 60 % лошадей этой возрастной группы продолжительность зубца Р составила в среднем 0,140,008 сек., что значительно больше средних нормативных значений (на 50 %) (р0,01),отмечалось изменение полярности этого зубца: наличие двухфазного или отрицательного зубца Р во II сагиттальном отведении (р0,001). Продолжительность интервала P-Q составила 0,380,027 сек., желудочкового комплекса QRS – 0,080,006 сек., интервала Q-T – 0,460,019 сек. ЭКГ лошадей в этом возрасте характеризуется удлинением предсердно-желудочковой проводимости на фоне ЧСС, равной 40,4 1,7 уд./мин.. Систолический показатель предсердий в данной группе составил 23,01,16%, СПЖ – 30,51,32 %, ДСК – 0,960,128. У 80 % исследованных нами спортивных лошадей 20-23 летнего возраста, которые многие годы подвергались интенсивным физическим нагрузкам, регистрировались изменения в проводящей системы - неполная АВ-блокада II степени.

2.2Изучение электрической активности сердца у спортивных лошадей в зависимости от интенсивности тренинга

Для исследования электрической активности спортивного сердца нами были подобраны две группы здоровых лошадей в возрасте 7-10 лет. В первую подопытную группу (n=15) вошли спортивные лошади, к которым применялся интенсивный тренинг и которые активно и успешно выступали на конно-спортивных соревнованиях областного и федерального значения. Во вторую группу (n=15) были подобраны лошади спортивных пород, используемые только в прокате для обучения верховой езде новичков.

В ходе эксперимента было установлено, что амплитуда зубцов у интенсивно тренируемых лошадей (1-я группа) значительно выше, чем у нетренированных, особенно это касается зубцов R, S, T. Так, среднее значение амплитуды зубца R в I группе (интенсивный тренинг) составило 0,71  0,13 мВ, а во II группе (прокат) – 0,30 0,09 мВ (р0,05); зубца S в I группе составило 2,4  0,11 мВ, а во II группе – 1,3 0,08 мВ (р0,001); зубца Т – 1,1  0,06 мВ и 0,4  0,01 мВ соответственно (р0,001). Следовательно, амплитуда зубцов у спортивных лошадей с увеличением интенсивности тренинга значительно увеличивается: а именно – зубца R в 2,3 раза, зубца S в 1,8 раза, зубца T в 2,8 раза.

Что касается продолжительности интервалов, то здесь также четко прослеживается разница значений между животными опытных групп. Средняя продолжительность интервала Р-Q у лошадей I–ой опытной группы (тренированные) составила 0,3  0,03 сек., у животных II–ой группы (прокатные)– 0,24  0,02 сек., т.е на 25 % больше (р0,05). Продолжительность желудочкового комплекса QRS у лошадей I-ой группы была равна 0,06 0,007сек., а II–ой группы – 0,08  0,006 сек (р0,05). Средняя продолжительность интервала Q-Т у интенсивно тренируемых лошадей составляла 0,44 0,013 сек., а у прокатных – 0,52  0,015 сек (р0,001).

При анализе ЧСС в покое наблюдается значительное уменьшение показателей у хорошо тренированных животных (25,5  1,1 уд./мин) – в 1,9 раза (р0,001) по сравнению с прокатными лошадьми (48,2  3,4 уд./мин). Уменьшение ЧСС у спортивных лошадей является компенсаторно-приспособительной реакцией, позволяющей поддерживать величину сердечного выброса, и свидетельствует об относительном преобладании парасимпатической активности (ваготония).

Что касается функциональных характеристик работы сердца, то здесь наблюдалась следующая картина: СПП (систолический показатель предсердий) в I–ой группе равнялся 21,3  1,06 %, во II–ой группе – 20,2  1,10 %, СПЖ (систолический показатель желудочков) – 29,6  1,5 % и 41,0  1,32 % соответственно (р0,001), ДСК (диастоло-систолический коэффициент) – 1,02  0,125 и 0,65  0,05 соответственно (р0,05).

Изменения ЭКГ при нерациональном (нефизиологическом) тренинге

При нерациональном тренинге (слишком интенсивный, неадекватный к конкретному животному, несоответствующий физическому развитию лошади) у подопытных животных были установлены существенные изменений ЭКГ лошадей (n=10).

При конкуре и выездке тренинг лошадей связан с частыми задержками дыхания во время смены аллюров, что может вызвать повышение давления в малом круге кровообращения. У 21 % исследуемых лошадей в данной группе мы наблюдали ЭКГ-признаки гипертензии в малом круге: отклонение оси сердца вправо – SI SII SIII, перегрузку и гипертрофию правого предсердия. В результате того, что деполяризация возросшей массы правого предсердия требует большего времени, чем обычно - вследствие этого восходящее колено зубца Р записывается дольше – формируется остроконечный и высокий зубец – P-pulmonale, вместо двугорбого расщепленного. Кроме того, мы отмечали увеличение продолжительности интервала P-Q и инверсию сегмента S-T.

При исследовании лошадей, к которым применялся тренинг, не соответствующий их физическому состоянию мы отмечали наличие ЭКГ признаков, свидетельствующих об ишемических изменениях в миокарде (у 30 % животных). Наиболее часто (90%) у перетренированных лошадей при электрокардиографии отмечались признаки дистрофии миокарда: смещение сегмента S-T вверх от изолинии более, чем на 0,2 мВ и формирование его куполообразной формы. Дистрофические изменения неизбежно вызывают расстройство сократительной способности миокарда: на ЭКГ мы регистрировали удлинение Q-T больше, чем на 10 % от нормы, у 2 лошадей (20 %) отмечалась электрическая альтернация желудочковых комплексов.

2.3Исследование электролитного состава сыворотки крови у спортивных лошадей в зависимости от интенсивности тренинга.

У обследованных нами подопытных лошадей, которым применяли интенсивный тренинг, наблюдалась умеренная гиперкалиемия (5,89  0,03 ммоль/л), что на 21,2 % (р0,001) больше по сравнению с прокатными лошадьми (4,86 0,07 ммоль/л). Нормальное содержание калия в сыворотке здоровых лошадей составляет 3,39-4,83 ммоль/л. Содержание К⁺ в сыворотке спортивных лошадей превышает верхнюю границу нормы на 12,6% (умеренная гиперкалиемия). В обеих группах также можно отметить умеренную гиперкальцемию, которая более выражена в группе спортивных животных (р 0,05). У лошадей с гиперкалиемией на ЭКГ регистрировался высокий остроконечный зубец Т.

2.4 Исследование показателей ПОЛ и АОЗ у лошадей в зависимости от интенсивности тренинга

Нами было проведено определение показателей ПОЛ и АОЗ в сыворотке, плазме и эритроцитах крови лошадей (светосуммы - S, максимальной вспышки - I max, первичных продуктов - ДК, вторичных - ТК и конечных продуктов свободнорадикального окисления - МДА, а также фермента, обеспечивающего антиокислительную защиту клеток - каталазы).

Для исследования были подобраны две группы лошадей 7-10-летнего возраста, принадлежащих Кировскому ипподрому. В первую группу вошли спортивные лошади, показывающие хорошие результаты на спортивных соревнованиях и испытывающие значительные физические нагрузки (n =15). Вторую группу составили лошади, используемые в прокате, т.е нерегулярно тренируемые животные (n =15).

Показатель, определяющий скорость инициирования свободно радикального окисления - I_max был значительно повышен в группе спортивных лошадей по сравнению с прокатными (разница достоверна р0,05). Первичные продукты ПОЛ – ДК и ТК очень чувствительны к любым изменениям в составе компонентов окисления, концентрации его активаторов или ингибиторов. Они характеризуют интенсивность пероксидации свободных и мембраносвязанных липидов. В нашем опыте содержание триеновых конъюгатов достоверно было повышено у животных с хорошими спортивными данными в плазме и сыворотке (р0,05). Конечный продукт – МДА более устойчив в организме, по данному показателю судят об активности свободнорадикального окисления липидов, которая была довольна высока в группе спортивных лошадей, а именно на 26,5 % больше чем в группе прокатных лошадей (р0,05). Полученные данные свидетельствуют о том, что интенсивные физические нагрузки приводят к усилению процессов пероксидации липидов, т.е. оксидативному стрессу.

Что касается ферментативного звена АОА, то нами было установлено усиление активности каталазы в эритроцитах в группе хорошо тренированных животных (р0,001).

2.5 Исследование ПОЛ и АОЗ у спортивных лошадей с признаками нарушения реполяризации миокарда. Для опыта была подобрана группа, состоящая из 15 спортивных лошадей с изменениями электрокардиограммы. Анализ ЭКГ показал наличие характерных изменений кардиограммы, указывающих на нарушение реполяризации: начальная или полная инверсия зубца Т, конкордантное смещение S-T более чем на 0,2 мВ. В качестве контрольной использовалась группа хорошо тренированных здоровых лошадей.

Анализируя полученные данные, можно проследить четкую тенденцию к увеличению значений ПОЛ у спортивных лошадей с признаками нарушения реполяризации на ЭКГ, по сравнению со здоровыми животными. Особенно значительно у больных животных повышены такие показатели как: I max – (на 49,0 % в плазме, на 26,2 % в сыворотке и на 17,4 % в эритроцитах), S – (в плазме на 45,9 %, в сыворотке на 15,2 %, в эритроцитах на 22,1 %) и МДА (в плазме на 25,4 %, в сыворотке на 18,5 %). Остальные показатели свободнорадикального окисления также повышены по сравнению со здоровыми животными, но не столь значительно.

2.6 Исследование вариабельности сердечного ритма у спортивных лошадей

Целью нашего исследования являлось изучение особенности ВРС у лошадей разного возраста и при тренинге различной интенсивности по данным временного и спектрального анилизов.

Было исследовано три группы лошадей разного возраста, с разным спортивным стажем: начало заездки (2-3 г), наилучшая спортивная форма (7-10 л), прекращение спортивной карьеры (старше 20 лет).

Возрастные изменения временных показателей свидетельствуют о преобладании симпатического влияния у лошадей 2-3 летнего возраста и у старых животных (старше 20 лет) - уменьшение SDNN, SDNNi, SDANNi.

Что касается лошадей, находящихся в наилучшей физической форме (7-10 лет), то здесь наблюдается превалирование парасимпатического тонуса - увеличение rMSSD.

При анализе спектральных показателей ВРС было установлено, что у лошадей 2-3 летнего возраста достоверно уменьшается мощность колебаний сердечного ритма в VLF и LF областях спектра. В группе лошадей старше 20 лет достоверно снижалась мощность колебаний сердечного ритма во всех областях спектра. Что касается симпато-вагального индекса, то наблюдалось достоверное увеличение данного показателя у лошадей 2-3 летнего возраста и в большей степени у лошадей 20 летнего возраста по сравнению с животными 7-10 лет.

Таким образом, снижение показателей SDNN, SDNNi, SDANNi в сочетании с увеличением симпато-вагального индекса у старых лошадей свидетельствует о симпатикотонии у этих животных.

Результаты проведенного опыта указывают на то, что изменения вариабельности ритма сердца у хорошо тренированных спортивных лошадей характеризуются повышением парасимпатического тонуса (увеличение rMSSD) на фоне снижения симпатического влияния (увеличение SDNN, SDNNi, SDANNi).

2.7 Исследование влияния кормовой добавки «Янтарь» на ЭКГ-параметры и ПОЛ у спортивных лошадей

Кормовая добавка «Янтарь», применяемая в нашем опыте, является комбинированной БАД, содержание янтарной кислоты в ней составляет 5 %. В состав препарата введены также шроты ромашки, пустырника, бадана, солодки, содержащие биологически активные компоненты лекарственных растений.

Целью серии опытов являлось изучение влияния экзогенной янтарной кислоты на ЭКГ-показатели функционального состояния сердца у здоровых лошадей и у спортивных лошадей с признаками нарушения реполяризации миокарда. В опыте участвовали лошади ганноверской и тракененской пород, принадлежащих Кировскому ипподрому и лаборатории коневодства ВГСХА (n=45). По принципу аналогов были сформированы три группы лошадей: 1-я опытная (n=15) - (без изменений ЭКГ), 2-я опытная (n=15) - (с изменениями ЭКГ, характерными для нарушения реполяризации миокарда, и контрольная (n=15).

Кормовая добавка «Янтарь» (ТУ 9759-070-208854466-99, изготовитель–ООО «Натурфармацевтическая компания», г. Томск) вводилась лошадям внутрь с зерновым кормом ежедневно в течение 30 дней в дозе 150.0/гол. в сутки. В начале опыта было проведено электрокардиографическое исследование лошадей и исследование показателей ПОЛ и АОЗ в сыворотке, плазме и эритроцитах. Такие же исследования были проведены после курса применения кормовой добавки с янтарной кислотой.

Полученные результаты по ЭКГ после опыта оценивались следующим образом: ++++ (отличный результат) – произошла полная нормализация показателей ЭКГ и повышение переносимости физических нагрузок; +++ (хороший) наблюдалась положительная динамика показателей и повышение толерантности к нагрузке; + (удовлетворительный) выражено сохранение патологии ЭКГ, но отмечалось улучшение общего состояния.

У 60 % лошадей с ЭКГ-признаками нарушения реполяризации миокарда после курса КД «Янтарь» наблюдалась стабилизация конечной части желудочкового комплекса: сегмент S-T становился изоэлектричным, зубец Т - положительным, ритм – синусовым (++++). У 30 % исследуемых животных наблюдался хороший результат (+++) : отрицательная фаза зубца Т стала равна или меньше положительной фазы, наблюдалась тенденция уменьшения конкордантного смещения S-T. Только у 10 % лошадей отмечался незначительный эффект после применения янтарной кислоты (+): сохранялись гипоксические и ишемические изменения ЭКГ, но улучшалось общее состояние животного.

Нами также было проведено определение показателей ПОЛ в сыворотке, эритроцитах и плазме крови лошадей (светосуммы - S, максимальной вспышки - I max, первичных продуктов - ДК, вторичных - ТК и конечных продуктов свободно-радикального окисления - МДА) до и после курса применения кормовой добавки с янтарной кислотой, было установлено повышенное содержание в сыворотке и плазме крови продуктов свободнорадикального окисления у лошадей с нарушением реполяризации по сравнению со здоровыми лошадьми. Наиболее значимыми оказались следующие параметры: величина светосуммы превышала нормальные показатели на 40.7% (р 0,001), I max – на 49.3 % (р 0,001) и малоновый диальдегид – на 28.1 % (р 0,01) по отношению к здоровым животным.

После курса кормовой добавки с янтарной кислотой показатели пероксидации липидов у больных лошадей существенно понизились как в сыворотке, так и в эритроцитах: S - на 40,02 % в эритроцитах (р0,001) и 22,09 % в сыворотке (р0,05); Imax - на 15,8 % (р0,05) в эритроцитах и на 27,3 % (р0,001) в сыворотке, МДА – на 19.6 % (р0,05) в сыворотке по сравнению с исходными данными. Кроме того, нами было исследовано содержание в эритроцитах ферментативного звена антиокислительной защиты – каталазы. Исследования показали достоверное увеличение каталазы после курса применения янтарной кислоты с 12,390,28 до 14,650,3 мкат/л (р0,001).

2.8 Изучение действия синтетического антиоксиданта «Эмицидина» на ЭКГ и ПОЛ у спортивных лошадей

В нашем опыте мы проводили изучение действия 2,5 % р-ра эмицидина на процессы реполяризации, морфо-физиологические показатели крови и ПОЛ у спортивных лошадей. Для исследования была подобрана группа из десяти спортивных лошадей с выраженными изменениями ЭКГ, характерными для нарушения процесса реполяризации миокарда.

Подопытным животным 2,5 % р-р эмицидина вводили внутривенно по 10,0 мл 1 раз в день курсом 10 дней. После завершения курса монотерапии у лошадей была проведена контрольная электрокардиография и лабораторные исследования.

По данным ЭКГ у 83,3% лошадей после курса эмицидина наблюдалась стабилизация конечной части желудочкового комплекса: сегмент S-T становился изоэлектричным, зубец Т – положительным, т.е. исчезали признаки гипоксии и дистрофии миокарда и восстанавливался процесс реполяризации.

ВЫВОДЫ

1. У спортивных лошадей, к которым применяется тренинг высокой интенсивности, происходит достоверное увеличение амплитуды зубцов: зубца R в 2,3 раза, зубца S в 1,8 раза, зубца T в 2,8 раза по сравнению с прокатными лошадьми (р0,001). Временные характеристики ЭКГ отражают сокращение продолжительности электрической систолы желудочков: средняя продолжительность интервала Q-Т составляла 0,440,013 сек., по сравнению с прокатными – 0,52  0,015 сек (р0,001). При анализе ЧСС в покое наблюдается значительное уменьшение показателей у хорошо тренированных животных (25,5  1,1 уд./мин) – в 1,9 раза (р0,001) по сравнению с прокатными лошадьми (48,2  3,4 уд./мин).

2. Для ЭКГ лошадей старше 20-летнего возраста характерным является снижение амплитуды всех зубцов (р0,05), удлинение предсердно-желудочковой проводимости - продолжительность зубца Р больше средних нормативных значений на 50 % (р0,01), продолжительность интервала P-Q также достоверно отличается у лошадей этой группы: при норме 0,2  0,02 сек, продолжительность данного интервала составила 0,380,027 сек (р0,001). У 80 % исследованных нами спортивных лошадей этого возраста регистрировалась неполная АВ-блокада II степени; у 60 % отмечалось наличие двухфазного или отрицательного зубца Р по II сагиттальном отведении (р0,001); у 60 % - регистрировали наличие двухфазного зубца Т со смещением S-T от изолинии более, чем на о,2 мВ.

3. У 35 % спортивных лошадей в процессе тренинга, при несоответствии уровня физических нагрузок функциональным возможностям миокарда на ЭКГ отмечается нарушение процесса реполяризации и признаки гипоксии и дистрофии миокарда, характеризующиеся изменением конечной части желудочкового комплекса на ЭКГ. При нерациональном (нефизиологичном) тренинге происходит ряд изменений в сердечно-сосудистой системе: гипертензия в малом круге кровообращения (21%), ишемия (30%), дистрофия (90 %).

4.У спортивных лошадей, к которым применялся тренинг высокой интенсивности отмечается умеренная гиперкалиемия (5,89±0,03), что на 21,2% больше по сравнению с прокатными лошадьми (4,86±0,07) - р<0,001, регистрируемая на ЭКГ в виде «гиперкалиемических» зубцов Т.

5.Показатели перекисного окисления липидов и общей антиокислительной защиты у здоровых спортивных лошадей имеют колебания в связи с уровнем их тренированности. Показатель, определяющий скорость инициирования свободно радикального окисления - I_max достоверно повышен в группе спортивных лошадей по сравнению с прокатными (разница достоверна р0,05). Также отмечали повышение содержания триеновых конъюгатов в плазме и сыворотке (р0,05) и малонового диальдегида (р0,05) по сравнению с прокатными лошадьми. При тренинге высокой интенсивности выявляется повышение уровня перекисного окисления липидов и снижение антиокислительной активности сыворотки крови. У лошадей с признаками нарушения процесса реполяризации на ЭКГ установлено значительное увеличение значений ПОЛ по сравнению со здоровыми животными: I max – (на 49,0 % в плазме, на 26,2 % в сыворотке и на 17,4 % в эритроцитах); S – (в плазме на 45,9 %, в сыворотке на 15,2 %, в эритроцитах на 22,1 %) и МДА (в плазме на 25,4 %, в сыворотке на 18,5 %).

6. При исследовании вариабельности ритма сердца у спортивных лошадей установлено, что у интенсивно тренируемых животных достоверно увеличен показатель rMSSD (р<0,01), который характеризует повышение парасимпатических влияний на сердце на фоне достоверного снижения симпатического влияния (увеличение SDNN, SDNNi, SDANNi).

7. Под влиянием экзогенной янтарной кислоты, применяемой в виде КД «Янтарь» и 2,5% «Эмицидина» у перетренированных лошадей с признаками нарушения процесса реполяризации и дистрофии миокарда происходит нормализация конечной части желудочкового комплекса ЭКГ, что отражает восстановление процесса реполяризации. Применение кормовых добавок, содержащих янтарную кислоту, обеспечивает достоверное по сравнению с контролем снижение уровня перекисного окисления липидов и повышение общей антиокислительной активности сыворотки, плазмы и эритроцитов.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. В систему физиологического контроля за спортивными лошадьми, находящимися в тренинге, кроме статической электрокардиографии необходимо включать функциональные электрокардиографические исследования с использованием Холтеровского мониторирования ЭКГ, проводить оценку вариабельности ритма сердца, исследовать электролитный состав крови и определять уровень перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы организма лошади.
   
2. Для методики Холтеровского мониторирования ЭКГ рекомендуем использовать предложенную нами кострукцию электродов в виде шплинта, позволяющую обеспечивать хороший контакт электрода с кожей и получать стабильную электрокардиографическую кривую.
   
3. Для метаболической коррекции нарушения процесса реполяризации и дистрофических изменений миокарда рекомендуем применять внутрь кормовую добавку «Янтарь» в дозе 150,0 /гол. в сутки один раз в день в течение 30 дней.
   

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Груданова А.Н. (Шестакова А.Н.). Изменения ЧСС и уровня калия в сыворотке крови у спортивных и рысистых лошадей при миокардиодистрофии /А.Н. Груданова, С.Н.Копылов, Ж.В. Вараксина// Мат.науч.конф. «Аграрная наука Северо-Востока Европейской части России на рубеже тысячелетий – состояние и перспективы».- Киров.-2000.-Т.4.-С.28-29.
   
2. Груданова А.Н. (Шестакова А.Н.). Изменения ЭКГ у спортивных и рысистых лошадей при миокардиодистрофии /А.Н. Груданова, С.Н.Копылов, Ж.В. Вараксина// Мат.науч.конф. «Аграрная наука Северо-Востока Европейской части России на рубеже тысячелетий – состояние и перспективы».- Киров.-2000.-Т.4.-С.29-30.
   
3. Шестакова А.Н. Клиническая оценка параметров ЭКГ и Холтеровского мониторирования для скрининг-тестирования сердечной патологии у лошадей старческого возраста/А.Н. Шестакова, С.Н. Копылов, М.П. Рощевский// Тезисы VI Симпозиума по сравнительной электрокардиологии.- Сыктывкар.- 2004.- С.81-82.
   
4. Шестакова А.Н. Изменение параметров ЭКГ и показателей перекисного окисления липидов под воздействием экзогенной янтарной кислоты у спортивных лошадей /А.Н. Шестакова, С.Н. Копылов, Н.Ю. Зыкова//Тезисы IV Молодежной научной конференции «Физиология человека и животных: от эксперимента к клинической практике».-Сыктывкар.-2005.-С.57-59.
   
5. Шестакова А.Н. Сравнительная оценка параметров Холтеровского мониторирования ЭКГ, полученных при скрининг-тестировании сердечной патологии лошадей разного возраста/А.Н. Шестакова, С.Н. Копылов, Н.Ю. Зыкова//Материалы Междунар. науч.-практ.конф. «Повышение эффективности лечения и профилактики акушерско-гинекологических заболеваний и биотехники размножения».- Киров.-2005.- С.162-163.
   
6. Шестакова А.Н. Перекисное окисление липидов у спортивных лошадей в норме и при кардиопатиях /А.Н.Шестакова, С.Н. Копылов, О.В. Карпова// Материалы VI науч.-практ. конф. «Болезни лошадей: диагностика, профилактика и лечение».- Москва.- 2005.- С.72-74.
   
7. Шестакова А.Н. Особенности электрической активности сердца у спортивных лошадей /А.Н. Шестакова //Научн. труды I Съезда физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека».- Т.1.-М: Медицина-Здоровье.- 2005.- С.85-86.
   
8. Шестакова А.Н. Практическое использование Холтеровского мониторирования ЭКГ в спортивном коневодстве/ А.Н.Шестакова, С.Н. Копылов//Материалы Всероссийской науч.-прак. Конференции «Современные проблемы ветеринарной медицины».- Киров.-2006.-С.72-77.
   
9. Шестакова А.Н. Электрическая активность сердца у спортивных лошадей в зависимости от тренинга/ А.Н.Шестакова // Материалы Всероссийской науч.-практ. конф. «Теоретические и практические вопросы ветеринарной медицины».- Киров.-2007.-С.132-134.
   
10. Шестакова А.Н. Применение Холтеровского мониторирования ЭКГ для диагностики кардиопатий у спортивных лошадей /А.Н.Шестакова //Материалы VII Всероссийской науч.-практ. конфер. «Ветеринарная медицина: современные проблемы и перспективы развития».- Саратов.- 2007.- С.412-417.
    
11. Шестакова А.Н. Изменения ЭКГ у коров и спортивных лошадей при применении кормовой добавки «Янтарь» /А.Н.Шестакова, С.Н. Копылов//Ветеринария.-2007.-№5.-С.44-47.
    
12. Shestakova A.N. Influence of different intensity training to electrical activity of heart in sport horses /Тhe Materials of 10 th International Congress of World Equine Veterinary Association, Moscow, 2008.- Р.685-687.
    
13. Шестакова А.Н. Холтеровское мониторирование ЭКГ и анализ ВРС у крупного рогатого скота и лошадей /А.Н. Шестакова, С.Н. Копылов, Л.В. Пилип// Материалы Всероссийской науч.-прак. конф. «Достижения ветеринарной науки и практики».- Киров.-2008.- С.82-84.
    
14. Шестакова А.Н. Применение синтетического антиоксиданта «Эмицидина» при кардиопатиях у спортивных лошадей /А.Н. Шестакова, С.Н. Копылов, А.О. Новоселов //Материалы Всероссийской науч.-прак. конф. «Достижения ветеринарной науки и практики».- Киров.-2008.- С.182-186.
    
15. Шестакова А.Н. Перекисное окисление липидов у спортивных лошадей /А.Н. Шестакова, С.Н. Копылов//Сибирский вестник сельскохозяйственной науки.-2008.-№6.-С.82-86.
    
16. Шестакова А.Н. Вариабельность ритма сердца у спортивных лошадей /А.Н. Шестакова//Матер. Междунар. научно-практич. конф. «Современные научные тенденции в животноводстве».- Киров.-2009.-С.297-299.
    
17. Шестакова А.Н. Влияние тренинга лошадей и молочной продуктивности коров на электрокардиографию животных/А.Н.Шестакова, С.Н.Копылов//Сибирский вестник сельскохозяйственной науки.-2009.-№ 5.-С.82-86.
    
18. Шестакова А.Н. Возможности применения Холтеровского мониторирования ЭКГ в спортивном коневодстве /А.Н.Шестакова// Материалы Х науч.-практ. конф. «Болезни лошадей: диагностика, профилактика и лечение».- Москва.- 2009.- С.61-64.