Geum.ru

Российская академия наук Программа фундаментальных исследований Президиума ран фундаментальные науки – медицине

Вид материалаПрограмма

Содержание


Создание нового поколения антивирусных пептидных препаратов на основе глипролинов
1-бораадамантаны и 1-азаадамантаны – потенциальные средства лечения и профилактики гриппа человека и птиц
Подобный материал:
1   ...   35   36   37   38   39   40   41   42   ...   74

СОЗДАНИЕ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ АНТИВИРУСНЫХ ПЕПТИДНЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ГЛИПРОЛИНОВ




Н.Ф. Мясоедов1), Ф.И. Ершов2), М.В. Мезенцева2), И.М.Сургучева2), Л.А.Андреева1), В.Э. Щербенко2)

1)Институт молекулярной генетики РАН, Москва
2)ГУ научно-исследовательский институт эпидемиологии и
микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва


Изучение иммунотропных свойств новых отечественных лекарст-венных препаратов – глипролинов, синтезированных в Институте молекулярной генетики РАН, является крайне перспективным. Ранее, исследования, проведенные в рамках данного проекта, выявили наличие интерферон-индуцирующих, противовирусных и цитокин-модулирующих свойств у препарата Селанк и 10 пептидов семейства глипролинов и их фрагментов, которые обладают психо-, нейро- и иммунотропной активностями, а также проявляют выраженные антивирусные свойства в отношении возбудителей наиболее распространенных и плохо контролируемых вирусных инфекций: вируса гриппа типа А человека (штамм Н3N2) и птиц (штамм Н5N1), вируса простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2), цитомегаловируса, энцефаломиокардита (ЭМС) мышей.

Главной целью исследования являлось изучение механизмов, определяющих иммунотропные свойства 15 пептидов глипролинов и расширение их клинических показаний к применению. В исследованиях in vitro показано, что практически все изученные пептиды обладают выраженной противовирусной активностью.

Использование в работе широкого спектра клеточных линий и клеток крови, позволило определить механизмы действия пептидов на основные эффекторные клетки иммунной системы. В результате исследования выявлена способность препаратов коррегировать функциональный статус иммунокомпетентных клеток.

Сравнение эффективности пептидов с используемыми в медицинской практике антивирусными и иммуномодулирующими препаратами проведено в системах in vivo и in vitro. В отличие от большинства известных иммуномодулирующих и антивирусных средств, изучаемые пептиды не токсичны и обладают высокой эффективностью в малых дозах.

Иммунотропные свойства глипролинов оценены в экспериментах in vitro по их способности модулировать иммунный ответ в норме и при вирусных заболеваниях. Изучены изменения в экспрессии генов 11 цитокинов (ИФН-α, ИФН-γ, ИЛ-1β, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-18 ФНО-α) в клеточных культурах человека и животных и субпопуляций иммуноцитов клеток крови человека методом ОТ-ПЦР и ИФА. Введение изучаемых пептидов в клетки крови человека способствовало подавлению экспрессии генов ИФН-α, ИЛ-1β, ИЛ-4, ИЛ-6, ФНО-α и в то же время увеличению продукции мРНК ИФН-γ, ИЛ-2, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12. Исследование изменений экспрессии генов цитокинов под действием 15 пептидов глипролинов при энцефаломиокардите мышей показало, что 4 из них способствуют восстановлению цитокинового профиля клеток до нормальных значений. Именно эти препараты проявляли высокие антивирусные свойства, защищая 80–100 % животных от вируса.

Выявленное действие изучаемых пептидов позволило оценить их иммунокорригирующий и противовирусный эффект в отношении широкого спектра вирусных инфекций и предположить их иммуномодулирующие свойства при иммунодефицитах.


1-БОРААДАМАНТАНЫ И 1-АЗААДАМАНТАНЫ – ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ СРЕДСТВА ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ГРИППА ЧЕЛОВЕКА И ПТИЦ




Ю.Н. Бубнов1), М.Е. Гурский2), С.Г. Маркушин3), М.М. Зубаиров4), С.Ю. Ердяков2), Г.Д. Коломникова1), Н.Ю. Кузнецов1), Т.В. Потапова2)

1)Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН, Москва
2)Институт органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН, Москва
3)ГУ НИИ вакцин и сывороток РАМН, Москва
4)ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии РАСХН, Покров, Владимирская обл.


В результате биологических испытаний серии аминных и пиридиновых комплексов 1-бораадамантана и его алкилированных производных (имеющих скелетную структуру известных антивирусных препаратов типа ремантадина и впервые синтезированных нами), были выявлены два препарата-лидера БГ-122 и БГ-44, обладающие лечебным и профилактическим действием против различных штаммов гриппа домашней птицы и человека. На цыплятах, зараженных вирусом гриппа А подтипа H5N1, установлено, что эти препараты защищают 80–100 % поголовья, при 100 %-ной гибели в контроле (препараты даются с кормом – три дозы в сутки по 20 мг препарата на 1 кг массы тела птицы в течение 3–7 дней).

Существенным недостатком соединений ряда 1-бораадамантана является их плохая растворимость в воде и других полярных растворителях, что затрудняет контакт с вирусинфицированными клетками и снижает терапевтический эффект.



С целью получения более эффективных лекарственных форм нами проведен цикл работ по изучению противовирусного действия БГ-122 в составе липосом (изучение адсорбционных свойств БГ-122 на поверхности липосом, получение липосомных препаратов, содержащих заряженные и нейтральные липиды с включением борсодержащих препаратов, исследование взаимодействия липосомных препаратов с вирусинфицированными клетками и др.).

Другой подход к получению новых активных антивирусных препаратов, предпринятый нами, – синтез азааналогов 1-бораадамантанов (по разработанной нами методике). Структурно подобные адамантану, они имеют в скелете аминный атом азота, благодаря чему легко образуют растворимые в воде и других полярных растворителях соли (ср. с ремантадином). Предварительные опыты по исследованию вирус-статического действия этих соединений в отношении гриппа птиц, проведенные на 10-дневных куриных эмбрионах (КЭ), показали, что гидрохлорид 1-азаадамантана в дозе 250 мкг/КЭ предохраняет от гибели 10 % КЭ при 100%-ной гибели в контроле.

Работа выполнена при поддержке Программ Президиума РАН «Фундаментальные науки – медицине» (рук. акад. А.И.Григорьев) и «Разработка методов получения химических веществ и создание новых материалов» (рук. акад. В.А.Тартаковский), Программ ОХНМ-1 (рук. акад. О.М.Нефедов, ОХНМ-10 (рук. акад. Н.С.Зефиров) и РФФИ, грант № 05-03-33268.