Geum.ru
Темы диссертаций по экономике » Статистика

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ МАТОЧНЫХ ТРУБ СВИНОМАТКИ И КОРОВЫ В ТЕЧЕНИЕ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА тема диссертации по экономике, полный текст автореферата



Автореферат



Ученая степень кандидат биологических наук
Автор Тойво, Арвович Сууроя
Место защиты Тарту
Год 1973
Шифр ВАК РФ 08.00.11

Автореферат диссертации по теме "МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ МАТОЧНЫХ ТРУБ СВИНОМАТКИ И КОРОВЫ В ТЕЧЕНИЕ ЭСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА"

, АКАДЕМИЯ, НАУК ЭСТОНСКОЙ ССР ^

Л ..".>- Совет по биологическим наукам V : .

<з$ Ч , . - ; ^ правах рукописи ;

' ТОЙВО АРВОВИЧ СУУРОЯ ,

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ Ъ ' ИССЛЕДОВАНИЯ ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ : ОБОЛОЧКИ МАТОЧНЫХТРУБ '' . СВИНОМАТКИ И КОРОВЫ В ТЕЧЕНИЕ. ЗСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА

..(03.00.11 эмбриология и гисголэгия) , ' . - Х Х

АВТОРЕФЕРАТ : ; 7

диссертации на соискание ученой степени -.кандидата биологических наук ,

'ТАРТУ 4973

АКАДЕМИЯ НАУК ЭСТОНСКОЙ ССР Coser по биологическим наукам

На правах гукописи

ТОЙВО АРВОВИЧ СУУРОЯ

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И ЦИТОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЭПИТЕЛИЯ СЛИЗИСТОЙ

ОБОЛОЧКИ МАТОЧНЫХ ТРУБ СВИНОМАТКИ И КОРОВЫ В ТЕЧЕНИЕ ЗСТРАЛЬНОГО ЦИКЛА

(03.00.il,Ч ембрислэп-я и гистюгия)

АВТОРЕФЕРАТ дисоерггации на соискание ученой степени кандидата биологических: наук

j Лагзс - ' - .'-^-^,

^ЗДгйС

ТАРТУ 1973

Работа выпонена на кафедре аватонкн и гистологии Эстонской сельскохозяйственной академик.

Научный руководитель: засл. деятель науки Эст. ССР, доктор ветеринарных наук* профессор Ю.Т. ТЕХВЕР.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских; наук К-И. ПЫЛЬДВЕРЕ кандидат биологических наук Ю.К. КЯРНЕР

Ведущее предприятие: Прибатийская научно-исследовательская ветеринарная лаборатория.

Автореферат разослан * " .1973 г.

Защита диссертации состоится " " 1973 г.

в часов на заседании Совета по биологическим наукам Академии наук Эстонской ССР, г. Тарту, ул. Крейцвальди, I.

С диссертацией можно ознакомится в библиотеке Института зоологии и ботаники Академии наук Эстонской ССР (г. Тарту, ул. Ванецубне, 21).

Отзывы (в двух экземплярах) просим направлять по адресу: 200 103, г. Талин, ул. Козту, Б, Академия наук Эстонской ССР, Совет по биологическим наукам.

Ученый секретарь Совета / Э. ИАРМАСТО /

Табл. I, Реснитчатые и секреторные клетки эпителия маточной трубы коровы в период от 4 до 6 дней после лоявления охоты. Электрон ограмм а. Ув. 9500

п Ч просвет маточкой трубы, рк Ч реснитчатые клет кк, ск Ч секреторные клетки.

Табл. П. Надъядерная часть реснитчатой клетки эпителия маточной трубы коровы в период от 4 до б дней после появления охоты. Эле ктро го г р а м м а. Ув. 25000 X'

бт Ч баэалыюе тельце, кр Ч корень реснички, м Ч митохондрш. мв Ч микроворсинка, р Ч ресничка, цр Ч цитоплазм этическая сеть, яд ~ ядро.

Табл. Ш. Апикальные части секреторных клеток эпителия на точной трубы коровы во время охоты. Стрекой обозначено выведение секреторного материала из клетки в просвет трубы. Электронограмма, Ув,

22000 Х-

рс Ч рибосомы, сг Ч секреторная гранула. Остальные обозначения те же, что и на рис. 1 и 2.

Табл. IV. Падъядерные части секреторных клеток эпителия маточной трубы свиноматки в период от 2 до 3 дней после исчезновения признаков охоты. Электроиограмма. Ув, 26000 Х-

мвт Ч мульти везикулярное тельце, мл Ч межклеточное пространство. Остальные обозначения те же, что н на рис. 1, 2 и 3.

Табл. V. Апикальная часть секреторной клетки эпителия маточной трубы коровы в период от 10 до 16 дней после появления охоты. Электронограмма. Ув. 25000 Х-

ш Ч электрон!гоплотнис шипнки на мнкроворсинках. Остальные обозначения те же, что н на рнс, I, 2, 3 и 4.

Табл. VI. Базальная клетка эпителия маточной трубы свиноматки. Электронограмма. Ув. 18000Х-бм Ч базальная мембрана, л к Ч ламелезлый комплекс. Остальные обозначения те же, что и на рнс. (, 2, 3, 4 н 5.

Согласно современному представленню роль маточних труб в процессе оплодотворения не мохет быть сведена одно лишь в простону транспорту яйца от яичника в матку; многочисленные работы последних лет убедительно подчеркивапт их активное соучастие в процессах оплодотворения и раннего эмбриогенеза. От биологического состояния маточных труб во многом зависят как успешное оплодотворение, так и перенос оплодотворенных яиц - зигот в катку.

Кроме того, маточные трубы как .часть ленского полового тракта, участвуют и в обеспечении оптимальных условий для жизни вводимых свда во время осеменения мужских половых клеток и содействуют их передвижении по направлению к месту оплодотворения. По всей вероятности, маточным трубам свойственна и некоторая всасывапдая способность - иначе трудно объяснить передачу жетому телу информации о завершении или несостоянин процесса оплодотворения: в случае оплодотворения яйца или яиц жетое тело или тела продожает свое существование и функционирование, а в противоположном случае подвергаются скорому обратному развитию.

Отсода понятен тот интерес, который представляют вопросы, связанные с морфологией и физиологией маточных труб млекопитающих. При этом изучение названных вопросов имеет кроме теоретического и важное практическое значение. Так по данным М.Н. Побединского /1949/, A.A. Иваного /i960/ и К.Н. Сызгановой /i960/, бесплодие, вызванное или связанное с явной патологией маточных труб, достаточно велико, достигая у хеящш 70-85?. Что касается животных, то по данным Глу-ховсхого и др. Д958/, у них вышеуказанный процент колеблется от 26 до 35. Х.В. Кюбар /1972/, изучая причины вибракованая коров из молочного стада в некоторых районах Эстонской ССР, обнаружил у 39^ выбракованных из-за бесплодия ко-

ров патологические изменения в паточных трубах. Однако, как считает Б.П. Хватов Д960, 1962/, даже такие значительные цифры ве могут претендовать еще на абсолютную поноту, так как везавершенное оплодотворение и гибель зигот в маточных трубах случаются значительно чаще, нежели это обычно допускается.

В настоящее время в литературе имеется довольно иного работ, касащихся анатомии, гистологии и физиологии маточных труб шекопитаицих животных к человека. При этом в большинстве работ по гистомэрфологии маточных труб главным объектом : исследования служит эго эпителиальная выстика. Это и впоне понятно, так как из-за непосредственного влияния на содержимое труб, а в связи с этим и на протекагщие там процессы оплодотворения и раннего эмбриогенеза, эпителиальная выстика является важнейшим структурным компонентом тубарной слизистой оболочки. Но несмотря на множество работ, ко ряду принципиальных положений, касащихся, например, секреторной деятельности, а также и классификации, взаимопревращения и локализации клеточных элементов эпителия, взгляда рода авторов расходятся или нуждаются в уточнении. Кроме того, многие работы по морфологии эпителия маточных труб, проведены на уровне техники и знаний первой половины текущего столетия и поэтому во многом уже не согласуются с новыми представлениями о строении и деятельности клеток, которые образовались в течение двух последках десятилетий благодаря их многостороннему изучению биохимическими, цитохимическими, алектронноиикроскопкческныи и другими новейшими методами.

До настоящего времени струетурные изменения эпителиальных клеток маточных труб в течение астрального цикла в разных отделах органа изучены также сравнительно поверхностно /преимущественно на уровне световой микроскопии/.

Учитывая вышесказанное, в настоящей работе поставлены еледуицие основные задачи:

X. Изучать динамику тощины эпителиального слоя слизистой

оболочки маточных труб половозрелых свиноматок и воров в

разных частях органа в течение астрального цикла.

2. Изучать эдестрокномикросхоихчееки ультраструктуру эпитеж-

альних клеток слизистой оболочки разных отделов паточных труб половозрелых свиноматок и коров в течение разных периодов астрального цикла, уделял при этом особое внимание на динамику секреторного процесса тубарного эпителия и связанные с 8тим изменения тонкой структуры эпителиальных клеток.

3. При помощи некоторых цитохимических методов /ПАС - реакция, окраска алыщаиовыы синим, идентификация различных групп нукополсахаридов применением жесткого метилирования и окраски азуром I при различных значениях pH, флуорохроия-рование акридиновым оранжевым/ сравнительно изучать содержание и динамику гликогена, кукополисахаридов и РНК в эпителиальных клетках слизистой оболочки разных отделов маточных труб половозрелых свиноматок и коров в течение астрального цикла.

Стараясь применять комплексно электронномикроскопичес-кие и цитохимические методы исследования эпителия маточных труб, часть из материала цитохимических исследований бралась паралельно со взятием материала для электронномнкроскопи-ческих исследований, т.е. из одних и тех же участков одних и тех хе маточных труб. И хотя электронномикроскопические и цитохимические методы изучения эпителия маточных труб свиноматки и коровы в настоящей работе изложены в виде отдельных частей, при интерпретации результатов цитохимических исследований учитываются и результаты алектронномикроскопических исследований.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

Для изучения динамики изменений тощины эпителиального слоя слизистой оболочки маточных труб свиноматки и норовы в разных частях органа в течение астрального цикла, из ворон-кн, ампулы и перешейка /из середины воронки, из ампулы на расстоянии примерно I - 1,5 см от места перехода воронки в ампулу, из самой середины маточной трубы, из перешейка на

посередв между серединой и трубно-мат очным соединением и из. конца переиейка на расстоянии примерно I - 1,5 сы от места перехода трубы в верхушку маточного роге в сторону воровки/ паточных труб 30 свиноматок и 30 коров были взяты сегменты органа длиною примерно в 0*9 см, из которых после заливки в парафин изготовлялись срезы тощиной 5-6 мкы, которые окрашивались по Ван Гизону.

Измерение тоцини эпителия производилось при помощи окулярного микрометра на 4-х местах каждого поперечного микросреза /на 2-х местах мекду складками и на 2-х местах на боковых поверхностях складок/. Из полученных таким образом четырех величин выводилось арифметическое среднее. Кроме средней толеины эпителия в каждом микросреэе выводилось также его максимальное к минимальное значение. С целью получения более достоверных результатов для измерения выбирались строго поперечные разрезы эпителия.

Материал для исследования ультраструктуры тубарного эпителия был взят при хирургическом удалении /путем лапаро-томии/ маточных труб 15 клинически здоровых свиноматок и 15 клинически здоровых коров с точно установленной фазой астрального цикла. После удаления маточных труб кусочки для исследования были взяты из слизистой оболочки воронки, ампулы к перешейка органа.Измельченные кусочки слизистой фиксировали в холодном забуференном осмиевом фиксаторе Кофильда и обезвоживали в растворах эталона возраставдей концентрации. В абсолютном спирте проводилось их тотальное контрастирование фосфорновольфрамовой кислотой. Кусочки материала заключались в смесь метакрилатов или в аральдит* Ультратонкие срезы готовили на ультрамикротоме ХКВ 4800. После допонительного контрастирования цитратом свинца шш уранилацетатом срезы исследовались в электронном микроскопе УЭКВ - 100 А.

Объектом цитохимических исследований служили маточные трубы от 30 свиноматок и 30 коров* У всех исследованных животных учитывалась фаза астрального цикла.

Для изготовления поперечных мнкросреэов маточной трубы, из воронки, ампулы и переаейка /из тех же'мест.как при изучении динамики изменений тощины и ультраструктури эпителия слизистой труб/ были взяты сегменты органа длиною при-

мерно 0,5 см, из которых после соответствующей фиксации и заливки в парафин иэготовлядись парафиновые срезы тощиной 5 мкк.

Для выявления гликогена и нукополисахаридов фиксация материала осуществлялась в фиксаторе Россиана в течение 12 часов. Заливка в парафин. Окраска методом Шифф-йодная кислота /НАС/ по Пак Манус-Хочккссу. Ферментативный контроль проводися обработкой срезов диастазов. Кислые ыукополисахариды выявлялись окраской а дыша новыл синим по Ноури / йот? ,1960/.

В качестве аналитических процедур для идентификации различных групп мукополисахаридов использовались жесткое метилирование и окраска аэуром I при различных значениях рН по схеме М.Г. Шубича и др. /1965/.

Материал для выявления рибонуклеиновой кислоты фиксировася в холодном фиксаторе Карнуа. Заливка в парафин. Флуорохромирование акридиновым оранжевым по Агтя-Ьгоаг /1956/ и БсЪиштеИваег и др. /1957/. Окрашенные срезы заключались в сахарный сироп /Шалунович, 1959/.

Ферментативный контроль проводися рибояуклеазой и тес-тикучрной гиалуронидаэой. Для идентификации РНК от кислых сульфомукополисахаридов проводилось еле контрольное флуорохронирование при рН=2,0.

Флуорохромкрованвые препараты исследовались и фотографировались на шинесцентном микроскопе ЫЛ-4. Для возбуждения яшинееценции применялись ртутяо-квардевая лампа высокого давления ДГШ-250 и светофильтр ФС 1-6. В качестве запирающего светофильтра использовася фильтр 1С-18 + ХС-19.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Динамика изменений толиины эпителиального слон слизистой оболочки в разных частях маточных труб свиноматки и коровы в течение астрального цикла

В течение астрального цикла тощина эпителиального покрова слизистой труб у обоих изученных видов животных варьи-

рует в широких пределах: у коровы от 16,8 до 39,2 мкм и у свиноматки от 14,0 до 36,4 мкм.

Б разных частях паточных труб толаина эпителия неодинаковая. Как у свиноматки, так и у коровы наибодьиую тощину эпителий имеет ъ середине маточной трубы. От середины в сторону как брхшшого, так и паточного отверстия трубы тощина эпителия постепенно уменьшается. Наименьвую тощину у обоих изученных видов животных эпителия имеет в конце перешейка.

В течение астрального цикла тощина эпителиального покрова слизистой труб у обоих изученных видов животных варьирует в широких пределах: у коровы от 16,8 до 39,2 мкы н у свиноматки от 14^0 до 36,4 мкм. Максимальная тощина эпителия у обоих изученных видов животных отмечается во время охоты и в первые дни постэструса в средней части органа. С 4-го по 6-ой день цикла тощина эпителия во всех частях трубы резко снижается, достигая своего минимального значения ня 10-13-й день астрального цикла. Начиная примерно с 15 - 16-го дня цикла, тощина эпителия во всех частях трубы вновь начинает увеличиваться и в предтечке /18-20 дней после появления охоты/ только немного уступает тощине эпителия в период охоты.

- Наибольшие колебания в тощине эпителиального слоя слизистой оболочки в течение астрального цикла /разница между средними величинами максимальной и минимальной тощины эпителия /у обоих изученных видов животных отмечались в середине маточной трубы /у свиноматки - 11,4 мкы и у коровы - 7,7 мкм/, а наименьшие - в конце перешейка органа /у свиноматки - 5,8 ивм и у коровы - 5,5 мкм/.

Ультраствтктура тубарного эпителия свиноматки и коровы в разные периоды астрального цикла

Во всех отделах /воронка, ампула, перешеек/, в течение всего эстрального цикла в тубарном эпителии встречаются реснитчатые и секреторные клетки (табл. I), количественное соотнопение которых в разных частях труб расходится. При этом начальные отделы маточных труб /воронка и римыкащее

к ней начале ампулы /у обоих изученных видов животных выстланы почти исключительно мерцательным эпителием. Начиная с второй трети ампула г эпителии трубы как свиноматки, так и коровы количество секреторных клеток постепенно нарастает. Остальные отделы ампулы и следующий за ампулой перешеек выстланы преимущественно секреторными клетками* Так, у свиноматки среднее соотношение реснитчатых и секреторных клеток на расстоянии примерно, 2,5 см от места перехода воронки в ампулу 1,6:1, в самой середине трубы 1:2,В, и в конце перерейка 1:2,1. У коровы соответствующие соотношения были: 1,4:1, 1:2,1 и 1:1,9. Укаванные количественные соотношения реснитчатых и секреторных клеток в течение астрального цикла не изменяются.

Реснитчатые клетки.Свободная поверхность реснитчатых клеток покрыта одновременно как ресничками так и микровор-синкаыи (табл. П). Структура ресничек у свиноматки и коровы одинаковая: на протяжении покрытого обычной трехслойной клеточной мембраной стержня реснички наблюдаются II фибрил. 9 иа них, расположенные по периферии реснички, парные /состоят из двух, тесно прилегающих друг к другу субфибрил/, а 2 центральные фибрилы одинарные. Периферические фибрилы ресничек непосредственно переходят в аналогичные 9 фибрил внутринитоплазматического базальвого тельца. Последние располагается в подмембранной цитоплазме и имеют, как правило, луковицеобразную форму. От базальньк телец в цитоплазму реснитчатых клеток углубляются два, а иногда и несколько^,поперечнополосатых и продольноисчерченных корневых нитей с периодом чередования светлых и темных полос примерно 600-700А.

Кикровор'синки располагаются более тесно на периферии, нежели в центральной части клеточной поверхности, имея'" обычно пальцеобразную форму.

Ядра реснитчатых клеток у свиноматки л коровы обычно располагаются в центре, реже в апикальной части клетки. Они округлые, или слегка овальные, с плотным мекозернистым матриксоы и, как правило, с одним ядрышком.

Митохондрии распределены в цитоплазме неравномерно Ч их больше в надьядерной части, особенно вблизи змелезного комплекса. Они преимущественно палочковидной формы, с плот-

кым мекозернистым матриксом.

Цктоплавматнческая'сеть слабо развита: ока состоит как иэ меких пуеырьков диаметром 0,1-0,3 мкм, днффувво рассеянных по всей цитоплазме, так и иэ отдельных паралельных цистерн гранулярного ретикулуиа. Значительная часть рибосом связана с мембранами эргастоплазматического комплекса, однако в цитоплазме реснитчатых клеток всегда обнаруживаются и свободные рибосомы.

Ламелезный комплекс реснитчатых клеток свиноматки и коровы имеет, как правило, надъядерное расположение и состоит из нескольких рядов плотно лежацих уплаченных цистерн и меких /диаметром в 200 - 600 Я/ гладкостедных пузырьчатых элементов.

В вадъядерной цитоплазме довольно часто наблюдается мультивезикулярные тельиа, фагосомы и лизосоыы, которые, как правило, окружены множеством митохондриев.

В околоядерноЯ области реснитчатых клеток воронки и амйу-лы часто наблюдаются малоконтрастные, почти бесструктурные зоны растворенного гликогена.

Ультраструктура реснитчатых клеток тубарного эпителия свиноматки и коровы в разных отделах органа в общем одинаковая. Только среди обыкновенных реснитчатых клеток воронки и ампулы в послетечковом периоде на 2-3 день после появления охоты/ иногда можно наблюдать своеобразные "светлые" реснитчатые клетки, которые выделяются среди обыкновенных реснитчатых клеток прежде всего малой плотностью своей цитоплазмы, округлыми, бедными хроматином ядрами и немногочисленными округлыми или овальными, часто с закуомаированвыи матриксом, и редкимл, с короткими кркстаня митохондриями. Встречаются ж "светлые" клетки с очень редким реснитчатым покровом.

На основе вышеописанных структурных особенностей можно предполагать, что "светлые" клетки представляют собой дегенерирующие реснитчатые клетки. Кроме того, хак у свиноматки, так и у коровы реснитчатые клетки воронки и начальной части ампулы, по сравнению с реснитчатыми клетками клетками других отделов органа, имеют несколько более высокий и густой реснитчатый аппарат.

Изменения в ультраструктуре реснитчатых клеток в течение астрального цикла незначительные: только непосредственно перед течкой, во время последней и в течение 2-3 дней после исчезновение признаков охоты, отмечается некоторое увеличение числа митохондриев в йадъядерной цитоплазме клеток, а также набухание и просветление матрикса последних. В то же время в апикальной цитоплазме, особенно вблизи свободной клеточной поверхности, отмечается появление большого количества маленьких /диаметром 100-300 ни/, по всей'вероятности, пиноцитоз-пых пузырьков.

Секреторные клетки.

Секреторные клетки наблюдаются во всех частях маточных труб свиноматки и коровы, хотя чаще всего они встречаются в . эпителии средней част* перешейка, где на одну реснитчатую клетку приходится по два или более секреторных клеток.

Свободная поверхность секреторных клеток куполообразно простирается в просвет органа. Выпуклая поверхность секреторных клеток покрыта лишь микроворсивками разной формы и величины* Свободная поверхность клеточной мембраны как на микроворсинах, так и между ними у обоих изученных видов животных покрыта шипиками, состоящими из мекозернистого электронно-плотного материала. Ядра секреторных клеток обычно неправильной форьш, с неровной поверхность и часто дольчатые. Располагаются они, как правило, баэальнее от центра клетки. В отношении ядер реснитчатых клеток, ядра секреторных клеток всегда располагаются на более глубоком уровне.

Ультраструктура секреторных клеток эпителии маточных труб свиноматки к коровы значительно изменяется в течение -астрального цикла. При этом каждому периоду цикла соответствует и своя субммкроскопическая архитектоника секреторных клеток. Изменения ультраструктуры отдельных органел секреторных клеток в течение эстрального цикла взаимосвязаны, и среди них наиболее выраженными являются перестройки ламелез-ного комплекса и гранулярного ретикудума- Так, в проэструсе /период от 18 до 20 дней после появления охоты/, который характеризуется началом интенсивного образования секрета в цистернах цитоплазматической сети секреторных клеток, с

последующим формированием характерных секреторных гранул ъ ланелегнои комплексе, цитоплааматнческая сеть секреторных клеток состоит ие пузырьковидных сферических элементов, иею-щих на срезах вид округлых или овальных вакуолей, а также на неправильной фор! и неравномерно расширенных цистерн. У свиноматки цитоплааматическая сеть иногда организована в виде регулярно расположенных паралельных канальцев, узкие /200-600 А/ щелевидные просветы которых периодически образуют локальные расширения, а также и в виде сложных сферических образований, которые на поперечных срезах выглядят как системы, состояв из концентрически ориентированных и паралельных друг другу осмиофильных, покрытых рибосомами мембран. Как первые, так и вторые в секреторных клетках свиноматки всегда располагаются в их подьядерной области* Поверхность мембран цитоплаэматической сети как свиноматки, так и коровы в вышеозначенный период астрального цикла покрыта рибосомами. Свободные рибосомы встречаются лишь эпизодически. Исключение составляет пограничная зона между канальцами гранулярного репкулума и ламелеэнын комплексом, в которой почти всегда встречаются свободные рибосомы, чаще в форме полисом. Цистерны шероховатой аятолазматической сети запонены злектронноплотным материалом в виде прерывистой, нехной сети. Из-за более тесного расположения или конденсации этого материала, электронная плотность содержимого малых цистерн больше, чем больших.

Ламелезный комплекс секреторных клеток, который, как правило, располагается в надьядерной части клеток /чаце всего непосредственно над ядром/, запоняя почти всю ладъядер-ную часть и образуя "выросты" в периферические апикальные участки клетки, .в проэструсе ва среаах представлен в виде перерезанных в равных плоскостях сообщающихся агранулярных трубочек и периферически расположенных пувырьков разного диаметра /от 150 до 2000 Я/.

Оформление гранул секрета осуществляется главным обравом в периферических участках ламелеаного комплекса, т.е. в пограничной зоне между его гладкостенными структурами и прилегающими снаружи канальцами гранулярного ретивулума. Формирующиеся в цистернах ламелеаного комплекса секреторный про-

дукт имеет ярко выраженные видовые особенности. Так, у свиноматки он представлен в виде мекозернистого электронно-плотного материала, в у коровы имеет вид тонких осииофильных фибрил. Первичная конденсация выяеописанных электронноплотдых веществ в цистернах ламелезного комплекса постепенно возрастает. Образование каждой гранулы завершается отпгнуро-ваниеы от лакелеэного комплекса. По иере выхода гранул из песта юс образования, они перетерпевают допонительные изменения: увеличиваются в диаметре, приобретают характерную сферическую или овальную конфигурацию, а главное, в них возрастает плотность мекозернистого /у свиноматки/ или фибрилярного /у коровы/ материала. Поступающие из ламелезного комплекса в апикальную цитоплазму секреторные гранулы приобретают у свиноматки хсрояо заметвус трехслойную мембрану. У коровы мембрана секреторных гранул не так ярко выражена. Снабженные мембраной секреторные гранулы как у свиноматки, так и у коровы имеют на срезах округлую или овальную форму. У свиноматки матрикс секреторных гранул состоит из мекозернистого електронноплотного материала (табл. 1У). Размеры секреторных гранул свиноматки варьируют в поперечнике от 0,3 до 0,8 мкм и по длине - от 0,4 до 1,0 мкм. У коровы секреторные гранулы состоят из концентрически или продольно расположенных электроннеплотных фибрил и напоминают своим узором картину дактилограмм (табл. 1). Как у коровы, так и у свиноматки отдельные гранулы отличаются своей злектроиноплот-ностыо. Размеры секреторных гранул коровы варьируют в поперечнике.от 0,3 до 1,0 мкм, по длине - от 0,3 до 1,5 мкм.

Китохондрии секреторных клеток в период от 18 до 20 дней после появления охоты распределены в цитоплазме неравномерно, вх больше в околордерной области, особенно вблизи ламелезного комплекса. Они преимущественно палочковидной формы, с мекозернистым матриксом средней электронной плотности и в большинстве случаев с паралельными кристами. Часто можно наблюдать очень тесные контакты мит.охондриев с элементами цитоплазматической сети. Такие нйтохокдрии являютср обычно аабухшйми, их матрикс более светлым и кристы мекими.

Период охоты характеризуется накоплением большого количества секреторных гранул в апикальных частях секреторных

клеток (табл. Ш) и продожающимся ростом объема гранулярного ретикулума: канальцы цитоплааматического ретикулума фраг-меитированы на равные но форме к размеру участки, расположенные в цитоплазме между секреторными гранулами. Подъядер-ные части секреторных клеток как свиноматки, так и коровы в названный период астрального цикла почти поностью запонены неравномерно расширенными обширными цистернами цитоплаз-матической сети, в промежутках которой островками сохраняется цитоплазма. Расширенные цистерны запонены нежным злект-ронноплотным сетчатым материалом. Часть из рибосом по-прежнему связана с мембранами цитоплазматической сети, а часть располагается свободно.в цитоплазме. В гипертрофированном ламелезвои комплексе продожается образование секреторных гранул. Митохондрия в большинстве овальные или округлые, часто сильно набухшие, диаметром иногда до 1,0 мки. Кристы митохондриев* редкие, имеют разную длину и направление. Патрике светлый и содержит кроме мекозернистого материала иногда и рыхлую прерывистую сеть нежных фибрил. Как и в предыдущем периоде, наблюдаются очень тесные контакты митохондриев и элементов цитоплазматической сети.

В период охоты начинается и выведение секреторного материала из секреторных клеток в просвет трубы эккринным путем (табл. Ш).

В течение 2-го и 3-го дня после исчезновения признаков охоты в апикальных частях секреторных клеток наблюдаются многочисленные секреторные гранулы* Продожается выведение секреторного материала из клеток в просвет трубы. Ультраструктура клеточных органел такая же, как и во время охоты, но наряду с продожающимся образованием секреторных гранул в крупных пузырьках ламелезного комплекса, в меких пузырьках последнего наблюдается формирование мультивезику-лярных телец. Последние имеют форму овальных или округлых вакуолей, ограниченных резко выраженной мембраной и содержащих в гомогенном или зернистом натриксе меких /диаметр 150-400 К/ пузырьки. Мультивезикулярные тельца в секреторных клетках коровы о&чио округлой формы, диаметром 0,3 -- 0,6 мкм, запонены светлым субстратом и содержат на поперечном срезе в среднем 10 - 15 пузырьков. У свиноматки же

наблюдаются мультивеэикулярные тельца намного большего диаметра /0,6 - 1,0 мхм/, иатрикс которых состоит из мекозернистого электронноплотного материала* В поперечном разрезе в них содержится примерно 30-50 пузырьков.

Начиная примерно с 4-го дня после исчезновения признаков охоты в секреторных клетках как свиноматки, так и коровы заметно уменьсается количество секреторных гранул. Образование последних прекращается н в ламеялезном комплексе. К 6-му дню после исчезновения признаков охоты в апикальных частях секреторных клеток наблюдаются только единичные гранулы секрета.

В период от 4-го до 8-го дня после исчезновения признаков охоты в цитоплазме секреторных клеток повышается количество свободных рибосом. С прекращением секретообразования коррелируют и изменения в ультраструктуре клеточных оргавел: уменьшаются цистерны цитопла8матической сети; ламелезныИ комплекс становится мековезикулярным и свободным от гранул секрета; митохондрии приобретают палочковидную форму, их махрикс становится более плотным и расположение крист регулярным.

Апикальные части многих секреторных клеток в названный период астрального цикла балоно-или пальцеобразно далеко возвышаются в просвет маточной трубы. Из-за высокой выпуклости апикальной, а также из-за суженности остальной части, такие клетки в продольном разрезе имеют вальце- или штифто-образный вид. Начиная с 5-6-го дня после исчезновения признаков охоты в эпителии маточных труб обоих изученных видов животных появляются и выклинивающиеся секреторные клетки.

В период от 10 до 16 дня после появления охоты /особенно в период от 10-го по 13-й день цикла/ в эпителии маточных труб как свиноматки, так и коровы наблюдается множество палочковидных и выклинивающихся секреторных клеток. В это же время цитоплазма секреторных клеток свиноматки и коровы секреторных гранул на содержит. Не происходит их образования и в ламеялезном комплексе. Последний представлен преимущественно мекими пузырьками, единичными диктиосомами и крупными вакуолями. Цвтоплазматическая сеть состоит как из отдель-

ных неравномерно расширенных цистерн я маленьких /диаметром в среднем 0,2 - 0,6/ пузырьков, гак и паралельных канальцев гранулярного ретикулума. Значительная часть рибосом фиксирована на поверхности мембран цитоплазматяческой сети, однако в межканальцевой цитоплазме всегда наблюдаются и свободные рибосомы,

Митохондрии обычно палочковидные или овальные, с плотным зернистым матрмксоы и паралельными поперечными, пересекающими весь метрике кристами.

На свободной поверхности клеточной мембраны как на микроворсинках, так и между ними наблюдается большое количества /больше, чем в течение остальных фаз астрального цикла/ электронноплотных "шипиков" (табл. У).

Ультраструктура секторных клеток тубарного эпителия свиноматки и коровы в разных отделах органа одинаковая.

Бэзальные клетки

Кроме реснитчатых и секреторных клеток в эпителии маточных труб как свиноматки, так и коровы наблюдаются маленькие /диаметр 3-5 мкм/, располагающиеся рассеянно непосредственно над базальной мембраной, овальные или округлые клетки (табл. У1), ультраструктура которых у обоих изученных видов одинаковая. Сравнительно большие, округлые или овальные, часто с неровными очертаниями ядра базальных клеток расположены центрально и запонены плотным мекозернистом материалом. Находящийся в околоядеряой области ламелезный комплекс названных клеток представлен преимущественно мекими /диаметр в среднем ISO - 600 R/ пузырьками и единичными диктиосоиами. Митохондрии Завальных клеток располагаются преимущественно г области лаиелезного комплекса. На срезах они в большинстве округлые или овальные, с мекозернистым матриксом средней плотности и немногочисленными, неравномерно располагающимися кристами. Цитопзэматическая сеть базальных клеток состоит из многочисленных, разбросанных по всей цитоплазме маленьких /диаметр в среднем 0,03 -.0,2 мкм/ пузырьков и нескольких узких,- небольших цистерн. Большинство рибосом связано с мембранами цитоплазматической сети, однако в цитоплазме базальных клеток всегда можно наблюдать и множество свободных рибосом.

Базальте клетки наблюдаются г эпителии всех отделов маточных труб обоих изученных видов животных в течение всего астрального цикла. Их преимущественного накопления в какие-то участки тубарного эпителия, а также зависящих от фаз астрального цикла изменений в их ультраструктуре установить не удалось.

Некоторые цитохимические по -к а .т_е|дшимм аД,Р.,й.о,.У..Р.., элителир с р и -

номатки и коровы в разные пе-риоду астрального цикла

полученные нами данные свидетельствуют о том, что ряд цитохимических показателей /содержание и распределение гликогена, диастазорезистентного ПАС-положителького вещества, кислых мукопомсахаридов и РНК/ эпителия маточных труб свиноматки и коровы изменяется в течение астрального цикла. При этом отмечены существенные различи* в содержании и распределении названных веществ как в эпителии разных отделов маточных труб, так и в разных /реснитчатых и секреторных/ клетках тубарного эпителия. Кроме того отмечены и некоторые межвидовые различия в содержании и распределении вышеуказанных веществ в эпителиальных клетках маточных труб свиноматки и коровы.

Гликоген у свиноматки обнаружен только в реснитчатых клетках инфундибулярного и ампунрного отделов трубы. У коровы же гликоген содержится не только в эпителии инфундибулярного и ампунрного отделов, ко и в эпителии начала и середины перешейка трубы. Кроме того у коровы в отличие от свиноматки гликоген обнаруживается и в секреторных клетках гы-теуказанных отделов маточных труб. Как у свиноматки, так и у коровы наибольшее количество гликогена в течение астрального цикла наблюдается в реснитчатых клетках инфундибулярного отдела в период от 18 до 20 дней после появления охоты /т.е. в проэструсе/ и во время последней, У обоих наученных видов животных отмечено заметное убывание содержание гликогена /особенно чадьядерного/ в раннем послетечкояом периоде цикла. Начиная примерно с 5-6-го дня после исчезновения признаков охоты гликоген в реснитчатых клетках эпителия маточной трубы как свиноматки, так и коровы содержится в незначительном ко-

лячестве.

В отличие от реснитчатых клеток содержание гликогена в секреторных клетках маточной трубы коровы мало изменяется в течение разных фаз астрального никла /только непосредственно перед и во время охоты можно констатировать некоторое увеличение содержания гликогена в секреторных клетах/. Количество глихогена в секреторных клетках эпителия разных отделов маточной трубы коровы примерно одинаковое*

Диастазорезистеятное ПАС-положительное вешестуо было обнаружено в секреторных клетках эпителия всех отделов маточных труб свиноматки и коровы. При этом выявились отчетливые, зависящие от фаз астрального цикла различия в его содержании и распределении в эпителии разных сегментов маточных труб обоих изученных видов животных. Так, наибольшее содержание диастазореэистектного ПАС-положительного вещества в секреторных клетках как свиноматки* так и коровы отмечено во время охоты и в течение 2-3 дней после ее окончания. В названные периоды астрального цикла располагающаяся над ядрами секреторных клеток ПАС-положит ельн а я зернистость сливается у свободного конца клеток почти в сплошную массу секреторных зернышек. Наблюдается интенсивное выведение секреторного материала из апикальных выпуклых частей секреторных клеток в просвет трубы, где он дает интенсивную диаста-ворезистентнув ПАС-положительную окраску. В подъядерных частях секреторных клеток как свиноматки, так и коровы диаста-эорезистентный ПАС-положительный материал отсутствует.

Начинав примерно с 4-го дня после исчезновения признаков охоты в секреторных клетках эпителия маточной трубы свиноматки и коровы количество диастазорезистентного ПАС-подо-жительного вещества заметно уменьшается. В период от 8 до 10 дня лостэструса секреторные клетки инфундибулярного и ампуяярного отделов маточных труб обоих изученных видов животных диастазорезистентного ПАС-положительного материала не содержат* В эпителии середины органа и середины перешейка трубы в вышеуказанное время астрального цикла в апикальных частях секреторных клеток наблюдаются только отдельные диастазорезистентные ПАС-полояительные зернынжи /у коровы в несколько большем количестве нежели у свиноматки/.

С уменьшением содержания днаставоревистентного ПАС-положительного вещества в цитоплазме секреторных клеток эпителия наточкой трубы коррелирует и изменения в его содержании в просвете трубы.

В период от 10 до 16 дня после начала охоты диастазо-резистевтное ПАС-положательное вещество как в цитоплазме секреторных клеток, так и в просвете маточных труб свиноматки и коровы не обнаруживается.

Из разных отделов маточной трубы самое высокое содержание диастазоревистентвого ПАС-положятельного вещества как у свиноматки, так и у коровы обнаружено в эпителии начала и середины перевейка органа.

В цитоплазме реснитчатых клеток эпителия маточной трубы свиноматки и коровы ни в каком отделе органа и ни в одной периоде астрального цикла диастазорезистенткое ПАС-положительное вещество не наблюдается.

После жесткого метилирования интенсивность окраски диастазорезистентного ПАС-положительвого вещества как в секреторных клетках, так л в просвете маточной трубы коровы лишь незначительно уменьшается. При окрашивании азуром I содержимое секреторных клеток и просвета маточной трубы коровы дает отчетливую нетахромазию при рН=1,0-1,5. У свиноматки, в отличие от коровы, жесткое метилирование не изменяет интенсивности окраски диастазорезистентного ПАС-положительного содержимого секреторных клеток и просвета труби. Также не наблюдается метахроматическое окрашивание секреторного материала при окраске азуром I при рН>Ю,5-1,0 и при рН=1,5.

Кислые мукополисахавиды

При окраске альциановьш синим выявляются значительные различия в содержании кислых иукополисахаридов в секреторных клетках эпителия маточной трубы свиноматки и коровы. Так, у коровы альциановый синим интенсивно окрапивает секрет как в секреторных клетках, так и в просвете труб. У свиноматки же интенсивность окраски /т.е. содержание кислых иукополисахаридов/ секреторного материала в секреторных клетках и в просвете труб очень слабая.

Динамика внутриклеточной локализации и распределения

кислых мукополисахаридов в эпителии разных сегментов паточных труб свиноматки и коровы в течение астрального цикла аналогична с динамикой внутриклеточной локализации и распределения диастазорезистентного ПАС-положительного вещества. Так, наиболее интенсивно альциановый синий окрашивает секреторный материал в секреторных клетках эпителия середины трубы и середины перешейка органа во время охоты и непосредственно /в течение 2-3 дней/ после исчезновения признаков охоты. При этом, как ухе сказано, содержимое секреторных клеток свиноматки окрашивается во много раз слабее, чем содержимое секреторных клеток коровы.

В цитоплазме реснитчатых клеток эпителия маточной трубы свиноматки и коровы ни в каком сегменте трубы и ни в одном периоде астрального цикла кислые уукополисахариды альииано-вым синим не выявляются.

Рибонуклеиновая кислота /РНК/

Данные, полученные нами при люминесцентно-микроеконическом исследовании эпителиальных клеток маточных труб свиноматки и коровы, свидетельствуют о том, что содержание РНК в секреторных клетках обоих изученных видов животных изменяется в течение астрального цикла. Наиболее высокое содержание ГНК (т.е. наиболее интенсивная рибонуклеазолабильная красная люминесценция) при этом было обнаружено в цитоплазме секреторных клеток как свиноматки, так и коровы в период от 18 до 20 дня после появления охоты /т.е. в прозструсе/. В несколько меньшем количестве РНК содержалась в секреторных клетках во время и непосредственно /в течение 2-3 дней/ после охоты. Начиная примерно с 4-го дня после исчезновения признаков охоты интенсивность красной люминесценции цитоплазмы секреторных клеток обоих изученных видов животных значительно уменьшается. В период от 10 до 16 дня после начала охоты в цитоплазме секреторных клеток всех отделов маточной трубы свиноматки и коровы наблюдается только очень слабая диффузная красная люминесценция. Начиная примерно с 16-го дня астрального цикла интенсивность красной рибонуклеазолабильной люминесценции цитоплазмы секреторных клеток обоих изученных видов животных снова увеличивается.

Что касается содержания ИИ в секреторных клетках раэ-

них отделов маточных труб свиноматки н коровы, то, судя по ннтенсквнбсти красной рибонуклеазолабильяоЙ люминесценции, оно более высокое в эпителии конца ампулярной части к в эпителии первой половины перешеечной части органа.

В реснитчатых клетках эпителия всех отделов маточной трубы обоих изученных видов животных рибонуклеазолабильная , красная шинесценцня /РНК/ распределяется диффузно по всей цитоплазме. В разные периоды астрального цикла заметных различий в интенсивности красной люминесценции цитоплазмы реснитчатых клеток нам установить не удалось. Также не удалось выявить различий в содержании РНК в реснитчатых клетках разных отделов труб.

Отчетливых межвидовых различий в содержании РНК в эпителиальных клетках маточной трубы свиноматки и коровы наш установить не удалось.

ОБСУЖДЕНИЕ Сравнивая полученные результаты измерения тощины эпителиального слоя слизистой оболочки маточной трубы свиноматки и коровы в разных частях органа в течение астрального цикла с аналогичными данными других авторов, можно констатировать как некоторое сходство, так и различие в них. Так, в отличие от bombard и соавт. /1950/, мы отметили наибольшую тощину эпителия маточной трубы коровы не в ампулярной отделе органа, а в середине маточной трубы, т.е. примерно на месте перехода ампулы в перевеек. В середине перешейка, по нашим данным, средняя тощина эпителия также только немного уступала средней тощине эпителия в середине трубы и превышала среднюю тощину эпителия начала ампулы. ' В отношении изменений тощины эпителиального слоя ма-

точных труб свиноматки и коровы в течение астрального цикла ваши результаты в обцем сходятся с данными ряда других авторов / Адйегзеп , 1928; Lombard и соавт., 1950; ковгк и

Herman , 1950; вйstall , 1966; Г.И. Хетагурбва, 1968/, потоке как и мы, отметили наибольшую токину зпителия непосредственно во время охоты и в первые дни после течки.

Полученные нами данные свидетельствуют, что ультраструктура реснитчатых и секреторных клеток тубарного эпителия

свиноматки и коровы одинаковая и сходна с ультраструктурой реснитчатых клеток у описанных в литературе ранее животных /крыса,кролик, овца/ я человека. Незначительные изменения в ультраструктуре реснитчатых клеток свиноматки и коровы непосредственно перед и во время, а также в течение двух-трех дней после течки, заключается преимущественно в некотором увеличения числа митоховдриев в надьядерной части клеток и в набухании и просветлении ыатрикса последних, а также в появлении в апикальной цитоплазме /особенно вблизи свободной клеточной поверхности/ большого количества маленьких /диаметром 100 - 300 ни/ пузырьков.

Возможно, что вышеописанная реакция митохондркев отчасти связана со значительными энергетическими затратами реснитчатых клеток в связи с увеличением скорости биения их ресничек во время течки и непосредственно после овуляции / Вогедл и др., 1957/. Появление в апикальной цитоплазме реснитчатых клеток большого количества маленьких пузырьков непосредственно перед, во время и после овуляции в эпителии маточных труб женщины описывают и Ргей^оззоп н в^огк-тап Д962/, оценивая это как признак повышения пиноци-тозной активности названных клеток.

В отличие от реснитчатых клеток ультраструктура секреторных клеток как свиноматки, так и коровы значительно изменяется в течение астрального цикла. При этом каждому периоду астрального цикла соответствует и своя субмикроскопическая архитектоника секреторных клеток. Изменения ультраструктуры отцеяшых органел секреторных клеток в течение астрального цикла взаимосвязаны, и среди них наиболее выраженным является перестройка ламелеэного комплекса и гранулярного ретикулуиа. Так, в про&струсе/период от 18 до 20 дня после появления охоты/, когда в секреторных клетках наблюдается интенсивное образование секреторного материала, вся цитоплазма клеток, исключая зону ламелезного комплекса, пронизана неравномерно расширенными цистернами и канальцами цитоплазматической сети. Во время охоты рост объема гранулярного ретикулуиа продожается. Из приведенного можно сделать вывод, что в указанные периода астрального цикла в секреторных клетках эпителия маточных труб свиноматки и

корова происходит интенсивный и быстрый бековый синтез, так как, согласно литературный данный интенсивность и скорость синтеза бекового материала находятся в пряной корреляции от суммарной площади мембран гранулярного ретикулуиа / Сах-1е11 , 196^; Ьвваоп и Ьвваоп , 1965; Войткевич и Дедов, ' 196? и 1971; Питерманн, 1967/. Об интенсивном бековой бин-

тезе в секреторных клетках во время проэструса и эструса

свидетельствует к тот факт, что в названное время большинство рибосом связано с мембранами цитоплазматической сети, а по данным авторадиографических исследований Питермаяна /1967/ связанные с мембранами цитоплазматической сети рибосомы участвуют в синтезе бекового материала во много рав активнее, чем свободные рибосомы.

Хотя процесс образования и формирования секрета и связанные с этим изменения в ультра структуре цитоплазматяческой сети и ламелевяого комплекса секреторных клеток у обоих изученных видов животных в общем сходны, то по своей внутренней организация секреторные гранулы свивоыатки /зернистые/ и коровы /фибрилярные/ все-таки резко отличаются. Следует предполагать, что различное субмияросколическое строение секреторных гранул свиноматки и коровы связано с их разным химическим составом. На намих электронограммах видно, что кроме различной внутренней организации, секреторные гранулы коровы отличаются от таких же свиноматки и большей осмиофи-лией своего содержимого. Учитывая, что осмиофилия на электронограммах всегда определяется присутствием липоидвых веществ, можно предполагать, что' кроме других возможных химических особенностей, содержимое секреторных гранул коровы отличается от содержимого секреторных гранул свиноматки и ' больпим содержанием липоидных веществ.

Расположение митсхоидриев в период активной секреции преимущественно в околоядерной области /особенно вбши вакуолей ламелевяого комплекса/, а тахже в тесных контактах с расширенными цистернами пмтоплавматической сети, очевидно, связано с обеспечением значительных энергетических затрат в процессе секретообразовакия. Ивменения в ультраструктуре митохоидриев секреторных клеток у обоих изученных видов коррелируют с интенсивностью секретообравования: в пе-

риод активной секреторной деятельности в секреторных клетках как свиноматки, так и коровы происходит набухание мито-хондриев и изменение формы и расположения кх крист, а также просветление матрихса мжтохондриев.

С прекращением секретообразования коррелирует и изменения в ультраструктуре клеточных органел секреторных клеток: уменьшаются цистерны цитоплазиатическоН сети; ламелез-ный комплекс становится мековеэнкулярным и свободным от гранул секрета; митохондрии приобретают палочковидную форму, их иатрнкс становится более плотным и расположение крист более регулярным.

Что касается нультивезикулярных телец, то в настоящее время их значение в клеточных процессах еще поностью не выявлено. Имеющиеся в литературе данное свидетельствуют о том, что в них, как и в лизосоиах питохимически обнаружены и идентифицированы основные ферменты, обладающие логическими свойствами избирательно в отношении многих компонентов клетки / Da Duve и Wattiauoc , 1966/. Показано также, что ферменты, синтезируемые рибосомами, транспортируются ло каналышм цитоплазматической сети в ламелезный комплекс, где они "разливаются" в пузырьки, которые впоследствии со-бнракЯся в мультивезикулярные тельца / Goldfischer и др., 1964/. А.А. Войткевич и И.И. Дедов /1971/ предполагают, что в железистых клетках мультивезикулярные тельца способствуют освобождению секрета и переходу клетки в фазу восстановления, т.е. как бы "расчищают путь" к вступлению в следующий секреторный цикл. Возможно, что и в секреторных клетках маточной трубы они выпоняют подобную функцию, особенно если учитывать, что они появляются в период прекращения секретообразования и перемещаются в участки скопления секреторных гранул.

Поданным Dubreuil /1946/, Vok&er и Vanderbeken Д960/, Adams /I960/ и Wolf /I960/, кроме секреторной функции секреторные клетки маточной трубы человека и млекопитающих животных имеют и резорбтивну функцию, которая, по мнению Вольфа, выпоняется главным образом при помощи микроворсикок. Резорбтиваую функцию, по всей вероятности, выпоняют и секреторные клетки маточных труб свиноматки и

коровы, так как их свободные поверхности тохе покрыты пик-роворсинками равно!) формы и величины,

Учитывая многочисленные литературные данные о количест венном и качественном изменениях состава секретов, циркуляру ющкх(на поверхности) эпителий слизистой оболочки маточной трубы в течение астрального цикла /Bishop , 1956 и 1957; Olds и Van Samarle , 1957; Mastroiannl И др., X96I; Haieл , 1963; Bamner и Williams , 1964 и 1965; Perkins и др.,1965; Bestall, 1966; Restan и Wales , 1966; В.Г. Семаков и И.И. Соколовская, I966j Iritanl и Van Demerit , 1969Carlson. И др., 1970; Black и др., 1970 и др./, можно предполагать, что путем своей резорбтивной функции секреторные клетки могут сигнализировать отдаленным органам о происходящей овуляции я оплодотворении яйца /еще до его расположения в матке/, а также и качественно и количественно направлять свою собственную секрецию таким образом, чтобы обеспечить наиболее благоприятные условия для оплодотворения яйца и дробления зиготы.

Что касается значения електроняоплотных "ишиков" ка свободной поверхности клеточной мембраны, то по всей вероят ности, и они связаны с выпонением резорбтивной функции секреторных клеток и их значение при зтом следует прежде всего усматривать в увеличении общей поверхности клетки, как этого требует основное условие резорбтивной поверхности

Наши электронномикроскопические наблюдения не согласуются с данными Schaffer , 1908; Могеащс , 1913; Westman , 1916; W-erlco , 1954; Чхартиивили, 1955 и Schuitlca , 1963, говорящими в пользу теории о возможном превращении реснитчатых клеток в секреторные и наоборот. Как в маточных тубах свиноматки, так и коровы нам ни в одном случае не удалось наметить переходных-форм между реснитчатыми и секреторными клетками, т.е. реснитчатых клеток с секреторными гранулами и секреторных клеток с ресничками. Что касается "светлых" реснитчатых клеток, то, по всей вероятности, последние представляют собой дегенерирущие реснитчатые клетки, на что указывают и особенности их ультраструктури: бедные хроматином ядра, вакуолизация цитоплазмы, деструктивные

изменения митохондриев, редкий реснитчатый покров. Штифто-видные клетхи же представляют собой секреторные клетки, так как в их цитоплазме почти всегда можно наблюдать одиночные секреторные гранулы. Возможно, что они являются определенной функциональной фазой секреторных клеток, в то время как выклинивающиеся иэ состава эпителия клетки, по всей вероятности, представляют собой окончившие свою секреторную деятельность секреторные клетки.

Встречаюииеся в эпителии маточной трубы баэальные клетки по мнению ряда авторов/В.А. Королев, 1964; Mauerstein и Woodruff , 1967/, являются камбиальными элементами секре- . торных "и реснитчатых клеток. Доказательством этого Королев считает возрастание числа базальных клеток во всех отделах трубного эпителия во время максимального наличия выклинивающихся клеток, a PauersteiXL и Woodruff , описанное многими авторами почти поное отсутствие митозов в эпителии маточной трубы и отмеченную ими большую, чем у других эпителиальных клеток метаболистическую активность базальных клеток, а также увеличение количества последних в эпителии труб с признаками хронического сальпингита.

Ультраструктура баэальных клеток эпителия маточной трубы сивноматки и коровы также характеризуется усиленной метаболистической активностью на что указывают: сравнительно большие ядра с плотным мекозернистым матриксом и неровной ядерной оболочкой, организация цитоплазиатической сети в виде пузырьковидных элементов и множество свободных рибосом.

Сопоставляя результаты наших исследований с литературными данными цитохимического исследования эпителия маточных труб человека и ряда млекопитающих животных, можно констатировать определенное сходство полученных результатов. Так, ваши исследования подтверждают данные как о наличии гликогена в реснитчатых клетках эпителия маточной трубы / Iwata , 1929; Joel , 1939; Fawcett и wislocid , В.А. Королев, 1961; Ю.Ф. Хамнаева, 1969/, так и о циклических изменениях его содержания и распределения в цитоплазме названных клеток в течение эстрального иди менструального цикла / tfeeth и Herma , 1952; Fxedxicsson , 1959/. Подобно Фредриксону мы

обнаружил* максимальное содержание гликогена г реснитчатых клетках эпителия маточных труб непосредственно перед овуляцией. Наши данные подтверждают также отмеченное Фредриксоном заметное убывание содержания гликогена /особенно надъядер-иого/ в реснитчатых клетках в течение ранней лютеиновой фавы цикла. Поэтому мы считаем весьма правдоподобным и предположение Фредриксова о том, что вышеуказанное явление связано с увеличением скорости биения ресничек во время и непосредственно после овуляции /Воге11и др., 1957/. Учитывая тот знакомый факт, что включения гликогена в клетках играют важную энергетическую роль, а также то, что во фракциях ресничек, изолированных центрифугированием из клеточных гомоге-ватов, биохимически обнаружено высокое содержание мкозино-подобного бедке и АТФ, можно предполагать, что значительные количества гликогена в реснитчатых клетках маточной трубы предназначены прежде всего для обеспечения энергетических затрат цилиокинетического процесса. Подтверждением этого служат и изменения в содержании и распределении гликогена в реснитчатых клетках эпителия маточных труб свиноматки к коровы в течение астрального цикла.

Содержание наибольшего количества гликогена в эпителии инфундибулярного и ампулярного отделов объясняется прежде всего доминированием реснитчатых клеток над секреторными в эпителии названных отделов трубы. Утверждение Ю.Ф. Хамвае-вой /1969/ о накбольвеы содержании гликогена в эпителии средней части маточной трубы как вашши, так и данными некоторых других авторов /Ргеагозвап , 1959; Б.А. Королев, 1961/ не подтверждается*

Содержание гликогена в секреторшх клетках эпителия маточвых труб коровы уже ранее описано ЫсБапе1 и др. /1968/. Кроме того содержание гликогена в секреторных клетках трубного эпителия человека описывают Гасе1гЬ и Л1е1ос)с1 /1951/ и Ргеамоэеоп /1959/, хотя последний обнаружил его там в заметном количестве только во время беремевности. Функциональное значение гликогена в секреторных клетках маточной трубы коровы трудно объяснить, возможно, что он выпоняет трофическую функцию.

Наблюдаемые в некоторых случаях в просвете маточной"

трубы /как свиноматки так и коровы/ зерныяки гликогена, по всей вероятности, представляют собой вызванные химической фиксацией диффузионные артефакты, так как в замороженных срезах из свежезамороженной маточной трубы нам гликогена в просвете трубы обнаружить не удалось.

Сравнивая полученные нами результаты о содержании и распределении диастазорезистентного ПАС-положительного материала в равных отделах маточной трубы свиноматки и коровы в течение астрального цикла с литературными данными, можно констатировать сходство полученных результатов. Так, на-аеЗс /1955/ и Restall /1966/ у овцы, ГгеЗг1сззоп /1959/ у человека, В.А. Королев /1961/ у крольчихи, человека и свиноматки, также обнаружили максимальное содержание диастазорезистентного ПАС-положительного вещества в секреторных клетках вышеуказанных животных в период зструса, а у человека во время и непосредственно после овуляции. Большинство из названных авторов / втеаз^озеоп, Королев, шаек /, а также и ВгопаеШ. и др. /1963/ отмечают преимущественное содержание ПАС-поло-нительного вещества в эпителии начала и середины истмуса.

Изменения внутриклеточной локализации диастазореэистент-ных ПАС-положительных зернышек в секреторных клетках маточной трубы свиноматки и коровы в течение эстрального цикла совпадают с циклическими изменениями в локализации электронномик-роскопически обнаруживаемых секреторных гранул. На основании этого кожно сказать, что цитоплазматическими включениями, дающими интенсивную диастазорезистенткую ПАС-поло*ительную окраску, являются секреторные гранулы.

Примененные нами методы дифференциального гистохимического анализа полисахаридов выявили отчетливые различия в химическом составе диастазорезистентного ПАС-положительного вещества /т.е. секреторных гранул/ секреторных клеток свиноматки и коровы. Так, интенсивность окраски диастазорезистентного ПАС-положительного вещества как в секреторных клетках, так и в просвете маточной трубы коровы лишь незначительно уменьшается после жесткого метилирования. При окрашивании в растворах азура I при разных значениях рН содержимое секте-торных клеток и просвета маточной трубы коровы дает отчетливую метахромазию при рН л 1,0-1,5.

На основании вышесказанного можно полагать, что в секрете секреторных клеток маточной трубы коровы присутствуют в значительном количестве кислые сульфатированные мукопо-нсахариды. Наличие больиого количества кислых мукопокса-харидов в секреторных клетках эпителия маточной трубы коровы подтверждает и интенсивное окрашивание их надгядерной цитоплазмы альциановым синим. Что касается незначительного уменьшения интенсивности диастазорезнстентной ПАС-положительной окраски после жесткого метилирования, то возможно, что изъятая действием жесткого метилирования часть ПАС-по-ложятельной окраски содержимого секреторных клеток маточных труб коровы связана с присутствием сиаломуцинов в секрете названных клеток.

У свиноматки, в отличие от коровы, жесткое метилирование не изменяет интенсивности ПйС-положительной окраски содержимого секреторных клеток и просвета трубы. У названного животного также не наблюдается метахроматического окрашивания секреторного материала при окраске азуром I при значениях рН 0,5, 1,0 и 1,5. При окраске альциановым синим кислые мукопопсахариды в секреторных клетках и в просвете маточной трубы свиноматки обнаруживаются только в очень незначительном количестве.

Учитывая вышесказанное мукополисахарида содержащиеся в секреторных клетках маточной трубы свиноматки можно отнести преимущественно к нейтральным мукополисахаридам. Относительно слабая окраска секреторного материала в секреторных клетках свиноматки альциановым синим, по всей вероятности, обусловлена содержанием в них некоторого количества кислых несульфатирбваяных мукополисахаридов.

Впоне вероятно, что секреторные гранулы секреторных клеток маточной трубы коровы и свиноматки не состоят лишь из мукополисахаридов, а представляют собой химически сложный беково-углеводный комплекс. Свидетельством этого служит как субмикроскопическая организация названных клеток, так и литературные данные о химическом составе секрета маточных труб /В.А. Королев, 1961; Вгопде^тЫ , 1963^оЬ-щ-Ыса , 1963; МсЕап1е1 и др., 1968/.

Наблюдаемое эдектронкомикроскопическя сложное субмик-

роскопическое строение секреторных гранул, формирующихся в ланелеаном комплексе секреторных клеток свиноматки и коровы, является не только результатом конденсации и полимеризации бекового материала, но и результатом его комплексирова-ния с углеводными компонентами. Последние, как показали каши исследования, по своему химическому составу у обоих изученных видов животных различные. Возможно, что разным химическим составом углеводных компонентов, которые прибавляются в ламелезном комплексе к бековом компонентам сехрета, отчасти объясняется и разная субмивроскопич ее кая организация секреторных гранул у свиноматки /зернистые/ и коровы /фибрилярные/.

Как злектронномикросколически, так и цитсхимически нам не удалось обнаружить признаков секреции в реснитчатых клетках маточных труб свиноматки и норовы.

Как показали наши данные, а также и данные других авторов /найеЬ:, 1955; АЪаа11а , 1968/, содержание РНК в секреторных клетках эпителия маточной трубы претерпевает изменения в течение астрального цикла, которые тесно связаны с циклическими изменениями интенсивности бекового синтеза в секреторных клетках маточных труб. Подтверждением этому служат как многочисленные литературные данные цитохимических и авторадяографическнх исследований / особенно работы Т. Касперссона и X. Браше /убедительно показывающие, что между содержанием РНК и интенсивностью бекового синтеза в клетках существует тесная связь , так и результаты наших электрониомикроскопических исследований. Так, в проэструсе, когда в цитоплазме секреторных клеток свиноматки и коровы наблюдается наибольшее содержание РНК, их ультраструктура также свидетельствует об интенсивном бековом синтезе /вся цитоплазма клеток, исключая зону ламелезного комплекса, пронизана неравномерно расширенными цистернами и канальцами гранулярной цитоплазматической сети/.

Уменьшение содержания РНК в цитоплазме секреторных клеток паточных труб во время охоты и непосредственно после ее'исчезновения, а также и изменения локализации РНК, происходящие в секреторных клетках в выаеуказанное врем? астрального цикла, вероятно, связано с постепенным израсходованием

РНК вследствие интенсивного бекового синтеза. Интересно отметить, что во время охоты, а также к непосредственно после ее окончания, когда подьядерные части секреторных клеток почти поностью запонены неравномерно расаиренньши обширными цистернами цитоплазматической сети и часть рибосом "освобождается" от мембран гранулярного ретикудума, там отсутствует и красная рибонуклеаэолабильвая люминесценция. Возможно, что зто явление /нарастающая дезинтеграция системы гранулярного ретикулума л "освобождение" рибосом во время накопления большого количества секреторных гранул в апикальных частях секреторных клеток/ также связано с подавлением бекового синтеза из-за израсходования РНК в процессе секретообраэования.

Содержание РНК в реснитчатах клетках эпителия маточной трубы'свинонатки и коровы, как показывают результаты наших исследований, значительно ниже, нежели в секреторных клетках во время интенсивного бекового синтеза. В отличие от секреторных клеток, нам также не удалось установить заметных различий в содержании РНК в реснитчатых клетках эпителия маточной трубы свиноматки и коровы в течение разных фаз эстрального цикла. В этом отношении результаты наших исследований совпадают с данными НсЬап1е1 и др. /1968/, которые в реснитчатых клетках маточных труб овариоэктомированных коров отметили более низкое содержание РНК, нежели в секреторных.

Сравнительно низкое содержание РНК в реснитчатых клетках эпителия маточной трубы можно объяснить отсутствием в них с екретообразования. Из многочисленных литературных данных цитохимических и авторадиографических исследований известно, что цитоплазма клеток, активно сннтезирукцнх белок, содержит РНК в высокой концентрации. Но как показывают результаты злехтронномикросконческях исследовании /как наши, так и ряда других авторов/, ультраструктура реснитчатых клеток эпителия маточной трубы не характеризуется признаками, которые свидетельствовали бы об интенсивном бековом синтезе. В течение эстрального цикла в субмикроскопической архитектонике реснитчатых клеток маточных труб свиноматки

и коровы нам также ие удалось обнаружить изменений, которые могли бы свидетельствовать об изменениях в интенсивности бекового синтеза /изменения суммарной площади, мембран гранулярного ретикулума и связи рибосом с мембранами цитоплазма-тической сети/ и связанных с последними колебаниях содержания ТНК в них.

Учитывая сказанное, а также приведенные в литературе данные э ле ктровкоиякроскопическях и питохииичес ких исследований эпителия маточных труб человека и ряда млекопитающих животных, можно прийти к выводу, что реснитчатые и секреторные клетки являются самостоятельными клеточными типами, которые регенерируют независимо друг от друга и что их камбиальными елементами, по всей вероятности, являются базаль-ные клетки. Вышеприведенное подтверждают и полученные нами данные о количественном соотношении секреторных и реснитчатых клеток в разных отделах маточных труб свиноматки и коро-которое в течение астрального цикла не изменяется.

В заключение можно сказать, что данные, полученные нами при сравнительном исследовании эпителиального покрова разных частей маточных труб половозрелых свиноматок и коров в течение разных периодов астрального цикла, свидетельствует об изменениях, происходящих в течение цикла как в общей тощине эпителия слизистой оболочки, так и в ультраструктуре и в некоторых цитохимических показателях ее разных клеточных типов. Ввиду совпадения вышеуказанных изменений во времени с наличием половых /овариальных/ гормонов в крови достоверно, что они регулируются кроме невральных факторов и посредством овариальных гормонов и направлены на создание наиболее благоприятных условий для оплодотворения яйцеклетки и первых этапов развития оплодотворенного яйца. Об этом прежде всего свидетельствует наиболее активная секреторная деятельность секреторных клеток трубного эпителия в периоды, соответствующие овуляции и миграции оплодотворенного яйца.

Многообразие функции маточных труб требует безусловно и большей или меньшей специализации и дифференцировки их разных отделов. В соответствии с этим изменяются и морфологические и цитохимические показатели эпителиального покрова

разных отделов маточных труб.

1. Тощина эпителиального слоя слизистой оболочки ма-точивх труб обоих наученных видов животных варьирует у коровы от 16,8 до 39,2 мкм и у свиноматки от 14-,О до 36,4 мкм Причем, в равных частях трубы тощина эпителия неодинаковая Как у свиноматки, так и у коровы наибольиую среднюю тощину эпителий имеет в середине трубы /у свиноматки в среднем 25,3 тем и у коровы 28,8 мкм/. В течение астрального никла максимальная тощина эпителиального слоя у обоих изученных видов отмечается во время охоты и в первые дни после течки в средней части трубы /у коровы соответственно 32,2 .и 31,1 икм, и у свиноматки 29,8 и 29,3 мкм/. Иинимальвого значения тощина эпителия во всех частях органа достигает на 10-13-й дни эстрального цикла. Наибольшие колебания в тощине эпителиального слоя слизистой в течение эстрального цикла у обоих видов отмечаются в середине органа.

2. Во всех отделах /воронка, ампула, перешеек/, в течение всего эстрального цикла в тубарном эпителии встречают ся секреторные и реснитчатые клетки, количественное соотношение которых в разных частях труб расходится* Так, у свиноматки среднее соотношение реснитчатых и секреторных клеток на расстоянии примерно 2,5 см от места перехода воронки в ампулу 1,6 : I; в самой середине трубы I : 2,8, и в конце перешейка I : 2,1. У коровы соответствующие соотношения были: 1,4 : I, I : 2,1 и I : 1,9. Указанные количественные соотношения реснитчатых и секреторных клеток в течение эстрального цикла не изменятся*

3. Ультраструктура реснитчатых клеток тубарного эпителия свиноматки и коровы примерно одинаковая И сходна с ультраструктурой реснитчатых клеток у описанных в литературе ранее животных и человека* Изменения в ультраструктуре реснитчатых клеток в течение эстрального цикла незначительные и заключаются преимущественно в некотором увеличении числа митохондриев и в набухании и просветлении матржкеа

последних совместно с появлением большого количества линопи тозных пузырьков в апикальной цитоплазме клеток во время эструса и в раннем постэструсе, что совпадает с усиленной активностью реснитчатого движения в названных фазах цикла.

4. Ультраструктура секреторных клеток как свиноматки, так и коровы значительно изменяется в течение астрального цикла. При этом каждому периоду астрального цикла соответствует и своя субыинроскопическая архитектоника секреторных клеток. Изменения ультраструктуры отдельных органел секреторных клеток в течение цикла взаимосвязаны, и среди них наиболее выраженными являются перестройки ламелезного яомл лекса и гранулярного дит оплазиатического ретикулука.

5. Процесс образования и выведения секрета и связанные с этим изменения в ультраструктуре органел секреторных клеток у обоих изученных видов похожие, однако по своей внутренней организации секреторные гранулы свиноматки /зернистые/ и коровы /фибрилярные/ резко отличаются.

6. По своему химическому составу секрет секреторных клеток свиноматки и коровы специфичен в видовом отношении и представляет собой сложный углеводно-бековый комплекс с высоки содержанием полисахаридов. При этом в секрете секреторных клеток маточной трубы коровы присутствуют в значительной количестве кислые сульфатированные мукопонсвхари-ды, а у свиноматки - преимущественно нейтральные мукополи-сахариды.

7. Наибольшая секреторная активность у обоих изученных видов животных наблюдается во время эструса и в ранней постэструсе. Экструзия секрета из секреторных клеток происходит экринным путем.

6. Кроме реснитчатых и секреторных клеток в эпителии маточных труб свиноматки и коровы наблюдаются баэальиые клетки, ультраструктура которых /сравнительно больше ядра с плотным мелькозернистым ыатриксоы и неровной ядерной оболочкой, организация цитйплазматической сети в виде пузырь-

К08ВДКЫХ элементов и множество свободных рибосом/ свидетельствует об их усиленной метабояистичаской активности.

9. Гликоген обнаруживается у свиноматки в реснитчатых клетках икфувдибулярного и ампулярного отделов трубы, а у коровы кроме того и в реснитчатых клетках перешеечной части органа. В отличие от свиноматки у коровы гликоген обнаружен и б секреторных клетках всех трех отделов. Наибольшее количество гликогена в течение астрального цикла у обоих изученных видов животных содержится в реснитчатых клетках квфунди-булярного отдела в период проэструса и эструса. В течение ранней лютеиновой фазы цикла как у свиноматки, так и у коровы происходи заметное убывание содержания гликогена в реснитчатых клетках.

10. Содержание РНК в секреторных клетках эпителия маточных труб свиноматки и коровы изменяется в течение астрального цикла. Наиболее высокое содержание РНК в цитоплазме секреторных клеток обнаружено во время проэструса. Содер жание РНК в реснитчатых клетках эпителия маточных труб значительно ниже, чем в секреторных. В отличие от секреторных, заметных различий в содержании РНК в реснитчатых клетках в течение разных фаз астрального цикла не происходит.

11. Результаты собственных электронномикроскопических и цитохимических наблюдений, сопоставленные с исследованиями других авторов, позволяют заключить, что реснитчатые и секреторные клетки являются самостоятельными клеточными типами, которые возобновляются независимо друг от друга и что их камбиальными элементами являются базальные клетки.

Работа, опубликованные по теме диссертации:

1. Ультраструктура реснитчатых и секреторних клеток эпителия 'латочных труб свиноматки и коровы в разные периоды астрального цикла. Сборник научно - технической информации. Ветеринария XI. Талин, 1972, стр. $0-75 Сна ест. яз.).

2. Ультраструктура и некоторые цитохимические показатели ту-барного эпителия. Тезисы докладов всесоюзной конференции по анатомии, гистологии и эмбриологии сельскохозяйственных животных, II. М., 1972, стр. 36-37.

Основные положения работы доложены:

1. на научной конференции анатомов, гистологов и эмбриологов Эстонии, Латвии и Литвы, Тарту, 1969 г.

2. на всесоюзной конференции по анатомии, гистологии и эмбриологии сельскохозяйственных животных, Москва, 1972 г.

3. на совещании Тартуского отделения всесоюзного общества анатомов, гистологов и эмбриологов, Тарту, 1972 г.

У'1 :

л . . I

- Г ' 1

1 . '' * I

. - -"<

"';1 - 1

: ^ \ -1 . '.": V " г.' -

;'-> Акадввя ввуя Эстонской ССР 'Д

. Совет, по бжжггаевпк ваткам V-: :"." ; - г ' '.' 200103, ЭСС, г. Такт, ул. Косту, 6

' . ;; ...-J = -. ' , Toteo Ареевач СУУРОЙ 1 '

гЧ* ' морижтнискиви'шпашЯвгам.юмщювАнт апишия-

-, , СЖЭЙСТОЙ ОЕОСЯКИ МШЧНШ ТНГБ СЁИЕЮМНЯЙ и КОРОШ , Л ' ; В ТЕЧБНИВ ЭСТРАШОГО ПИКЛА Х 4 , ! ' ' На росном яэнке

: , ' Псшиеаяо к печате Х6/ 1ЭТЗ. Ь^мвга 0z84/I6,

, - V Пвч.л. 2,25+6 вкл. Уч.-печ.л. 2,1+6 вкл. Уч.-нзд.л. 2,1+6 вкл.

: Тираж 250. Эаждй * II < рогапркат ЭС1А, ЭССР, г. Тарту, ул. РяЛа, 12.

. Беопавтяо .. " .< .

. ( / .

Похожие диссертации