Грибковые заболевания кожи
Методическое пособие - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие методички по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
? возбудителя (мицелия или псевдомицелия) является важным свидетельством наличия кандидоза. Количество дрожжевых клеток в каждом поле зрения (в среднем) служит ориентиром при подготовке серийных разведений для количественного посева на плотные питательные среды: единичные клетки в поле зрения при большом увеличении микроскопа (X 400) свидетельствуют об их содержании порядка десятков тысяч в 1 мл исследуемого материала.
Разведения патологического материала, содержащего нормальную микрофлору (мокрота, фекалии, моча, желчь и т.д.), готовят в жидком сусле или жидкой среде Сабуро и высевают определенное количество (0,1-0,2 мл) на аналогичные плотные среды. Для подавления роста контаминирующих бактерий в среды добавляют антибиотики чаще всего пенициллин и стрептомицин - по 50-100 ед/мл среды или 0,05 % хлорамфеникола.
Видовое определение выделенных культур является важнейшим критерием диагностики и имеет комплексный характер, включающий изучение внешнего вида колонии, ферментативной активности и ассимиляционной способности штамма, типа фила-ментации, а также характера роста в жидкой питательной среде (наличие поверхностной пленки, поднимающееся по стенке пробирки над поверхностью среды кольцо и т. д.).
Из-за резкого преобладания С. albicans у больных и миконоси-телей у выросшей культуры, прежде всего, выявляют наличие характерного морфологического признака этого вида - хламидоспоры. С этой целью производят прерывистый штриховой посев на рисовый агар, часть посева покрывают фламбированным покровным стеклом. Посевы инкубируют при 37С или при 22С. Подавляющее большинство штаммов С. albicans образуют хламидоспо-ры через 12-24 ч, реже - через 48 ч. Выявление хламидоспор позволяет идентифицировать культуру как С. albicans и не проводить дальнейших исследований.
Культуры, у которых хламидоспоры выявить не удалось, исследуют по комплексу признаков. Ферментативную активность определяют На обычных средах "пестрого ряда" или в дрожжевом аутолиза-те, в которых концентрация углеводов должна составлять 2 %.
В последнее десятилетие разработан ряд автоматизированных систем для видовой идентификации грибов рода Candida, в основу которых положено определение ассимиляционной способности изучаемых культур. Каждая лунка содержит определенный источник питания, посевы инкубируют при 30С в течение 24 ч. Помутнение среды свидетельствует об ассимиляции данного источника питания, регистрация результатов производится фотометрически. При помощи компьютера по нумерационно-кодовому принципу осуществляют видовое определение штамма.
Серологические исследования. Реакцию агглютинации (РА) широко использовали в диагностике кандидоза до 60-х годов. Она отличается простотой постановки, возможностью применения в качестве антигена аутоштамма. Денатурация гриба достигается предварительным прогреванием при 70С в течение 1 часа или формалином (0,5 %, 12 часов).
Высокую диагностическую значимость имеет реакция непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ), для постановки которой в качестве антигена используют 1-2-х суточную культуру аутоштамма, а антител -сыворотку больного. У практически здоровых лиц титры антител в РНИФ варьируют от 0 до 1:40, причем у большинства они не выходят за пределы 1:10-1:20. Диагностически значимыми являются титры 1:80 и более. При поверхностном кандидозе титры антител в РНИФ не превышают 1:160, при хроническом кожно-слизистом кандидозе, особенно в случаях гранулематозного поражения, они составляют от 1:160 до 1:1280, при инвазии желудочно-кишечного тракта, легких, мочевыводящей системы и сепсисе -1:160-1:320, при кандидозном эндокардите-до 1:1280.
В диагностике кандидоза также используется реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с применением в качестве диагностикума эритроцитов, сенсибилизированных экстрактом разрушенных клеток гриба. Положительная РНГА выявлена у 75 % лиц из контрольной группы при среднем титре 1:16с разбросом от 0 до 1:32. При обследовании 36 больных висцеральным кандидозом титры антител в РНГА составляли 1:320-1:640; по другим данным, средний титр равнялся 1:256 с разбросом от 1:64 до 1:512. При локальных поражениях слизистых (например, при кандидозном вагините) отмечены более низкие титры антител: при среднем значении 1:77 разброс составил 1:4-1:256.
Значительно большую ценность, чем титрование антител, имеет определение в сыворотке циркулирующих кандидозных антигенов, особенно соматических. Для этих целей используют иммунохимические и иммунорадиометрическне методы, позволяющие выявлять доли нанограмма грибкового антигена. Проблема осложняется возможностью наличия в сыворотке циркулирующих иммунных комплексов, в которых антигенные детерминанты блокированы антителами. В случае с полисахарндными антигенами такие иммунные комплексы предложено разрушать кратковременным кипячением. При диссеминированном кандидозе маннан удается выявлять у 60-70 % больных.
Серологические реакции должны сочетать несколько видов исследований с использованием антигенов гомологичного вида. Увеличение титров антител свидетельствует об активности кандидозного процесса.
ЛЕЧЕНИЕ
Характер терапии при кандидозе зависит от формы заболевания и его патогенеза. При поверхностных поражениях кожи и слизистых оболочек используют антисептики (раствор буры, краска Кастелляни). Некоторые формы поверхностных кандидозов (например, межпальцевая дрожжевая эрозия кистей) излечивают после устранения факторов, благоприятствующих их развитию (мацерация эпидермиса водой, действие кислот и щел