Выделение чистых культур дрожжевых грибов из шишек хмеля
Дипломная работа - Биология
Другие дипломы по предмету Биология
тными свойствами дает возможность эффективнее использовать их деятельность экономичнее перерабатывать сырье, получать высокий выход и надлежащее качество продукции.
Идентификация определение систематического положения микроорганизмов, выделенных в чистые культуры. Для установления семейства, рода, вида, к которому принадлежат выделенные в чистые культуры дрожжей, необходимо изучить их морфологические, культуральные и физиологические признаки.
Морфологические признаки изучаются под микроскопом в препаратах живых и мертвых микроорганизмов.
Культуральные признаки устанавливаются по характеру роста культуры изучаемого микроорганизма на плотных и жидких питательных средах.
Физиологические признаки, обусловленные наличием ферментов в клетках, устанавливаются при посеве в специальные среды, в состав которых входят те вещества, воздействие на которые выявляется у изучаемого микроба.
Каждый новый штамм микроорганизмов должен быть охарактеризован для получения полных данных о свойствах чистой культуры данного микроорганизма.
Результатом идентификации обычно является отождествление выделенного микроорганизма с каким-нибудь видом или отнесение его к определённому роду.
Полученные данные используют для составления паспорта промышленных штаммов, а так же для их идентификации.
Проведя исследования важнейших морфологических, физиологических и культуральных признаков, устанавливают видовое название микроорганизма по определителю (ключу). Для каждой группы микроорганизмов (бактерии, дрожжи, грибы) существуют свои определители, составленные с учетом специфических особенностей данной группы.
При описании колоний, выросших на поверхности среды отмечают:
- форму, профиль и цвет- невооружённым глазом;
- край- при малом увеличении микроскопа (объектив 8*);
- консистенцию - прикосновение петли к колонии;
- величину линейкой ( колонии точечные менее 1мм в диаметре, мелкие 1-2 мм, крупные 3-4 мм и более).
Морфологические свойства изучаемых штаммов микроорганизмов. n=5
Таблица 2.
№ штаммаМорфологические свойства.ФормаРазмеры, мкмНаличие спорПочкованиеПодвижность1Клетки круглые и овальные.60,4++?
В результате полученных данных установлено, что размер дрожжевых клеток 6 мкм.
На плотных питательных средах изучают характер колоний. Поскольку колония образуется в результате размножения клеток, её строение зависит от особенностей размножения микробов данного вида и, следовательно, каждому виду присущи характерные признаки.
Культуральные свойства исследуемых штаммов дрожжей n=5
Таблица 3
№ колонийКультуральные свойстваРазмерПрофильФормаЦветКрайКонсистенцияструктура1Точечный.Выпуклый.Округлая.Белый.Гладкий.Мягкая.Зернистая.
Физиолого-биохимические свойства изучаемых штаммов
В связи с тем, что 5 исследуемых штаммов по культуральным свойствам были идентичными, для дальнейшего изучения взяли один из них штамм №5. Для определения вида была проведена идентификация по приложению №2.6
Физиолого-биохимические свойства изучаемого штамма Таблица 4
Показатели№ пробы12345Рост на среде Сабуро при температуре
20 оС
36 оС
45 оС
+
+
?
+
+
?
+
+
?
+
+
?
+
+
?Рост на среде Пивное сусло-агар.
20 оС
36 оС
45 оС+
+
?+
+
?+
+
?+
+
?+
+
?Рост на среде Рисовая Левиной.
20 оС
36 оС
45 оС+
+
?+
+
?+
+
?+
+
?+
+
?Образование СО2 из глюкозы+++++Нагревание в течение 30 мин при температуре 60 С?????Сбраживание углеводов:
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Мальтоза
Сахароза
Лактоза
Галактоза
Декстрин
Раффиноза
У выделенных штаммов микроорганизмов, рост наблюдается при температуре от 19 ? 36 С. Оптимальной для культивирования штамма является температура от 30 ? 35С. При культивировании на рисовой среде Левиной, испытуемого штамма дрожжей наблюдается спорообразование. Образование СО2 из глюкозы наблюдается в аэробных условиях. Выделенный штамм сбраживает следующие углеводы: мальтоза, сахароза, лактоза, декстрин; галактоза, раффиноза ? частично.
Культуральные свойства Saccharomyces
Клетки круглые и овальные, иногда удлиненные. Вегетативное размножение многосторонним почкованием. Может быть примитивный псевдомицелий, истинного мицелия нет. Колонии обычно пастообразные. На жидких средах при продолжительном культивировании может образовываться пленка, но она не бывает сухой порошковидной или всползающей. Аски образуются преимущественно из вегетативных диплоидных клеток без непосредственно предшествующей конъюгации. При созревании спор сумки не вскрываются. Аскоспоры круглые или слабоовальные, беiветные, гладкие, 1 4 в аске. Все виды активно сбраживают сахара и не используют нитраты. Лактозу и высшие парафины не ассимилируют. Дрожжи этого рода с давних времен распространены в кустарном виноделии и широко используются в разных отраслях бродильной промышленности, в связи с чем они более всех других дрожжей изучены в разных аспектах. Их систематика, однако, постоянно пересматривается. Центральный вид Saccharomyces cerevisiae Hansen известен в десятках синонимов, которые в настоящее время рассматриваются как про?/p>