Харчова добавка аспартам Е951
Информация - Химия
Другие материалы по предмету Химия
?росполука (жовтого кольору).
В другiй стадii продукти нiтрування реагують iз iдким натром або гiдроксидом амонiю з утворенням натрiСФвоi або амонiйноi солi, що маСФ жовто-помаранчеве забарвлення.
Ксантопротеiнову реакцiю, крiм бiлкiв, пептидiв i циклiчних амiнокислот, дають також багато простих ароматичних зСФднань (бензол, фенол i iн.).
Технiка виконання роботи: до 0,5 молярного розчину аспартаму додають 56 краплi концентрованоi азотноi кислоти. Обережно нагрiвають. При наявностi в розчинi циклiчних амiнокислот або бiлкiв, у яких присутнi цi амiнокислоти, зявляСФться жовте забарвлення за рахунок нiтрування бензольного кiльця.
Пiсля охолодження в пробiрку обережно (по стiнцi) доливають надлишок концентрованого розчину амiаку або iдкого натру рiдина приймаСФ помаранчевий або жовтий колiр.
3. Кiлькiсне визначення
1. Хроматографiчний метод.
Метод заснований на використаннi високоефективноi рiдинноi хроматографii (ВЕРХ). Метод СФ арбiтражним.
Обладнання i реактиви: високоефективний рiдкiсний хроматограф з програматором лiнiйного вимiру швидкостi потоку, обладнаний спектрофотометричний детектор з довжиною хвилi 210 нм; колонки хроматографiчнi; установка для вакуумноi фiльтрацii; мiкрошприцi хроматографiчнi; папiр фiльтрувальний; ваги лабораторнi; рН-метр; мiрнi колби; градуювальнi пiпетки; скляний рiдинний термометр; бiдистильована вода; ацетонiтрил; калiй фосфорнокислий однозамiшенний; бензоат натрiю; аспартам; ортофосфорна кислота.
Пiдготовка до випробування:
а). Приготування градуювального розчину аспартаму (550мг/дм3).
Наважку аспартаму масою 137,5мг переносять у мiрну колбу мiсткiстю 250см3, до половини заповнену бiдистильованою водою температурою 3035оС. Перемiшують до повного розчинення, потiм бiдистилятом доводять до мiтки.
б). Приготування градуювального розчину аспартаму (275мг/дм3).
Вiдмiряють пiпеткою 2см3 градуювального розчину аспартаму концентрацiСФю 550мг/дм3 переносять у мiрну колбу мiсткiстю 50см3i доводять до мiтки бiдистильованою водою, добре перемiшують.
в). Приготування градуювального розчину аспартаму (138мг/дм3).
Вiдмiряють пiпеткою 25см3 концентрацiСФю 550мг/дм3 переносять у мiрну колбу мiсткiстю 100см3 i доводять до мiтки бiдистильованою водою, добре перемiшують.
Приготування рухомоi фази:
1,73г. калiя фосфорнокислого однозамiшеного (КН2РО4) помiшують у мiрну колбу мiсткiстю 1000см3, розчиняють в бiдистильованiй водi, перемiшують до повного розчинення. Отриманий розчин ортофосфорноi кислоти (Н3РО4) доводять до мiтки рН 3,2 850см3 отриманого буферного розчину змiшують iз 150см3 ацетонiтрилу (С2Н3), попередньо вiдфiльтрував iх через фiльтрувальний папiр дiаметром пор 0,5 мкм.
Термiн придатностi рухливоi фази не бiльше 7 дiб.
Умови хроматографiчного аналiзу:
Колонка з фазою С 18,5 6мкм, 0,15 * 4,6мм.
Рухома фаза: 15% ацетонiтрилу, 85% 0,0125 М розчину КН2РО4, доведеного фосфорною кислотою до рН 3,2.
Швидкiсть потоку: лiнiйний градiент вiд 1,2см3/хв до 1,7см3/хв за 8хв.
Температура термостату 35оС.
Тиск на колонцi при швидкостi потоку 1,2см3/хв 120кг/см2 (тиск буде зростати по мiрi експлуатацii колонки).
Знаходження за поглинанням в УФ-областi спектру при довжинi хвилi 210нм 0,02од. адсорбцii на всю шкалу.
Обробка результатiв:
Масову долю аспартаму розраховують за формулою
де К поправочний коефiцiСФнт, установлюваний за загально прийнятими правилами для методу абсолютноi градуiровки;
S площина пiку дослiджуваного компоненту, вiдповiдна до певноi масовоi концентрацii компонента, мг;
V обСФм аналiзуСФмоi проби, дм3;
Розрахунки проводять до другого десятичного знаку.
За кiнцевий результат дослiдження приймають середнСФ арифметичне результатiв двох паралельних визначень.
2. Спектрофотометричний метод.
Метод заснований на визначенi аспартаму у безалкогольних напоях безпосередньо пiсля iх виготовлення за допомогою спектрофотометру. Цей метод метод не може бути використаний для напоiв, в склад яких входять амiнокислоти i речовини бiлковоi природи.
Обладнання i реактиви: спектрофотометр; колориметр фотоелектричний; ваги лабораторнi; аспартам; натрiй фосфорнокислий двузамiщений; калiй фосфорнокислий однозамiщений; нiнгiдрин (х.ч.); фруктоза (ч.д.а.); ректифiкований етиловий спирт; папiр фiльтрувальний; ваги лабораторнi; рН-метр; мiрнi колби; градуювальнi пiпетки; скляний рiдиний термометр; електроплитка побутова; водяна баня; механiчний годинник.
Приготування буферного розчину:
Наважку натрiю фосфорнокислого однозамiщеного (Na2HPO4 * 12H2O) масою 28,870г. переносять у мiрну колбу на 1000см3, розчиняють в дистильованiй водi, доводять до мiтки i перемiшують до повного розчинення.
Наважку калiю фосфорнокислого однозамiщеного (KH2PO4)3 масою 4,535г. переносять у мiрну колбу на 500см3, розчиняють в дистильованiй водi, доводять до мiтки i перемiшують до повного розчинення. В конiчнiй колбi змiшують 484,5см3 розчину Na2HPO4 i 15,5см3 розчину KH2PO4. При необхiдностi доводять рН буферноi сумiшi даними розчинами до (8,00,1) одиниць.
Приготування нiнгiдринового розчину:
Розчиняють в 500см3 буферного розчину 1,5г фруктози, пiсля чого розчиняють у ньому 2,5г нiнгiдрину.
Приготування базового розчину аспартаму:
20мг аспартаму розчиняють при перемiшуваннi i нагрiваннi до 5070см3 дистильованоi води. Розчин переливають у мiрну колбу мiсткiстю 100см3 i доводять до мiтки дистильов?/p>